[Prototype ABL2] OOO기관 연구시설의 생물안전관리 지침

※“OOO기관 연구시설의 생물안전관리 지침”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

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OOO기관 연구시설의 생물안전관리 지침

OOOO년  O월

기 관 명

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	“OOO기관 연구시설의 생물안전관리 지침” 제정

목   차

OOO기관의 상황에 따라서 “생물안전관리지침” 적용범위 설정 및 목차 구성

[Prototype ABL2] 제  장  생물안전관리지침 개요

1.	목적 및 적용범위

1.1	목적

※“생물안전관리지침 개요”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

OOO기관 생물안전 연구시설 내에서의 생물안전성을 확보할 수 있는 절차 및 세부사항을 정함으로서, 시험연구책임자, 시험연구종사자 또는 유지보수 관계자가 지침에 따라 주어진 업무를 수행하게 한다. 또한 연구시설에서 다루게 되는 감염성 병원체의 전파 확산에 따른 생물학적 위험발생을 예방하고 연구시설의 안전한 관리 운영체계를 마련하여, 시험연구종사자 및 해당 병원체의 외부 유출 등에 의한 2차 감염으로부터 지역사회의 생물안전을 확보하기 위한 모든 활동을 문서화함으로써 연구시설의 생물안전 운영과 관리의 신뢰성을 확보한다.

1.2	적용범위

본 생물안전관리지침은 OOO기관 생물안전연구시설의 생물안전관리에 대하여 적용한다.

평면도

[ OOO기관 생물안전 연구시설 평면도 ]

2.	법규, 규정, 지침 및 참고

생물안전에 해당하는 법률은 크게 「감염병의 예방 및 관리에 관한 법률」, 「생명공학육성법」에 따른 「유전자재조합실험지침」과 「유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률」로 구분된다. 그리고 연구실에서 취급하는 생물요소(인체감염 병원체/일반 생물체/동물병원체 등)에 따라 적용되는 법률이 다르다는 점을 고려해야 한다.

생물안전 연구시설 운영은 국내 생물안전 관련 법, 규정 및 지침 등을 준수하여 제·개정되고 시행되어야 한다. 필요한 경우 국외 생물안전 관련 가이드를 참조할 수 있지만, 국내 규정을 우선 적용토록 한다. 생물안전 연구시설 내에서 취급하는 병원체 및 시설 운영에 대한 법적 사항뿐만 아니라, 시험연구종사자의 안전보호 및 안전에 대한 권리, 화재 및 지역사회의 환경 영향과 같은 일반적인 보건안전에 대한 사항도 포함하여 연구시설 운영 및 바이오리스크 관리시스템을 구축하여야 한다.	생물안전 연구시설 운영에 적용되는 규정 및 지침 등은 다음과 같다.

2.1	법규

1)	유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률 (약칭: 유전자변형생물체법), 동법시	행령,	동법시행규칙, 동법통합고시

2)	감염병의 예방 및 관리에 관한 법률 (약칭: 감염병예방법), 동법시행령, 동법시행규칙

3)	생명공학육성법, 동법시행령

4)	화학무기ㆍ생물무기의 금지와 특정화학물질ㆍ생물작용제 등의 제조ㆍ수출입 규제 등	에 관한 법률 (약칭: 생화학무기법)

5)	폐기물관리법, 동법시행령 및 동법시행규칙

6)	기타 해당 법규 (해당시)

2.2	규정 및 지침

1)	감염성물질 안전수송 지침 (2015) 질병관리본부

2)	고위험병원체 안전관리지침 (질병관리본부 제2015-93호)

3)	실험실안전 및 생물안전 관리 등에 관한 규정 (질병관리본부예규 제286호)

4)	유전자재조합실험지침 (보건복지부고시 제2014-201호)

5)	실험실생물안전지침 (2015) 질병관리본부

6)	생물안전 3등급 연구시설 안전관리 지침 (2014) 질병관리본부

7)	기타 해당 규정 및 지침 (해당시)

2.3	참고

1)	기관생물안전위원회 구성·운영 안내 (2014) 질병관리본부

2)	고위험병원체생물안전정보집 (2013) 질병관리본부

3)	고위험병원체 취급 및 보존 안전관리 가이드 (2015) 질병관리본부

4)	동물이용 생물안전3등급 연구시설 설치·운영 해설서 (2013) 질병관리본부

5)	병원체생물안전정보집 [제3,4위험군] (2014) 질병관리본부

6)	보건복지부 소관 유전자변형생물체 안전관리 가이드 (2014) 질병관리본부

7)	생물안전 3ㆍ4등급 연구시설 검증기술서 (2014) 질병관리본부

8)	생물안전3등급 연구시설 설치운영 해설서 (2014) 질병관리본부

9)  실험실안전사고대응매뉴얼 (2014) 질병관리본부

10) 유전자변형생물체 위해성 평가 심사 가이드 (2014) 질병관리본부

11)	NIH(2002) Guidelines for Research involving Recombinant DNA Molecules

12)	WHO(2004) Laboratory Biosafety Manual

13)	Canada(2004) Laboratory Biosafety Guideline

14)	WHO(2006) Bio-risk Management: Laboratory Bio-security Guidance

15)	CWA 15793(2008) Laboratory Bio-risk Managements Standard

16)	CDC/NIH(2009) Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories

17)	기타 해당 참고 (해당시)

3.	용어의 정의 (해당 법규, 규정, 지침, 참고 등에 따른 정의)

3.1	감염병의 예방 및 관리에 관한 법률

3.1.1	감염병

제1군감염병, 제2군감염병, 제3군감염병, 제4군감염병, 제5군감염병, 지정감염병, 세계보건기구 감시대상 감염병, 생물테러감염병, 성매개감염병, 인수(人獸)공통감염병 및 의료관련감염병을 말한다.

3.1.2	제1군감염병

마시는 물 또는 식품을 매개로 발생하고 집단 발생의 우려가 커서 발생 또는 유행 즉시 방역대책을 수립하여야 하는 다음 각 목의 감염병을 말한다.

1) 콜레라, 2) 장티푸스, 3)	파라티푸스,	4) 세균성이질, 5) 장출혈성대장균감염증,

6) A형간염

3.1.3	제2군감염병

예방접종을 통하여 예방 및 관리가 가능하여 국가예방접종사업의 대상이 되는 다음 각 목의 감염병을 말한다.

1) 디프테리아, 2) 백일해(百日咳), 3) 파상풍(破傷風), 4) 홍역(紅疫),

5) 유행성이하선염(流行性耳下腺炎), 6) 풍진(風疹), 7) 폴리오, 8) B형간염,

9) 일본뇌염, 10) 수두(水痘), 11) b형헤모필루스인플루엔자, 12) 폐렴구균

3.1.4	제3군감염병

간헐적으로 유행할 가능성이 있어 계속 그 발생을 감시하고 방역대책의 수립이 필요한 다음 각 목의 감염병을 말한다.

1) 말라리아, 2) 결핵(結核), 3) 한센병, 4) 성홍열(猩紅熱),

5) 수막구균성수막염(髓膜球菌性髓膜炎), 6) 레지오넬라증, 7) 비브리오패혈증,

8) 발진티푸스, 9) 발진열(發疹熱), 10) 쯔쯔가무시증, 11) 렙토스피라증,

12) 브루셀라증, 13) 탄저(炭疽), 14) 공수병(恐水病),

15) 신증후군출혈열(腎症侯群出血熱), 16) 인플루엔자,

17) 후천성면역결핍증(AIDS), 18) 매독(梅毒)

19) 크로이츠펠트-야콥병(CJD) 및 변종크로이츠펠트-야콥병(vCJD)

3.1.5	제4군감염병

국내에서 새롭게 발생하였거나 발생할 우려가 있는 감염병 또는 국내 유입이 우려되는 해외 유행 감염병으로서 다음 각 목의 감염병을 말한다. 다만, 갑작스러운 국내 유입 또는 유행이 예견되어 긴급히 예방·관리가 필요하여 보건복지부장관이 지정하는 감염병을 포함한다.

1) 페스트, 2) 황열, 3) 뎅기열, 4) 바이러스성 출혈열, 5) 두창,	6) 보툴리눔독소증,

7) 중증 급성호흡기 증후군(SARS),	8) 동물인플루엔자 인체감염증, 9) 신종인플루엔자,

10) 야토병, 11) 큐열(Q熱),	12) 웨스트나일열, 13) 신종감염병증후군, 14) 라임병,

15) 진드기매개뇌염, 16) 유비저(類鼻疽), 17) 치쿤구니야열,

18) 중증열성혈소판감소증후군(SFTS), 19) 중동 호흡기 증후군(MERS)

3.1.6	제5군감염병

기생충에 감염되어 발생하는 감염병으로서 정기적인 조사를 통한 감시가 필요하여 보건복지부령으로 정하는 감염병을 말한다. 다만, 갑작스러운 국내 유입 또는 유행이 예견되어 긴급히 예방·관리가 필요하여 보건복지부장관이 지정하는 감염병을 포함한다.

3.1.7	지정감염병

제1군감염병부터 제5군감염병까지의 감염병 외에 유행 여부를 조사하기 위하여 감시활동이 필요하여 보건복지부장관이 지정하는 감염병을 말한다.

3.1.8	세계보건기구 감시대상 감염병

세계보건기구가 국제공중보건의 비상사태에 대비하기 위하여 감시대상으로 정한 질환으로서 보건복지부장관이 고시하는 감염병을 말한다.

3.1.9	생물테러감염병

고의 또는 테러 등을 목적으로 이용된 병원체에 의하여 발생된 감염병 중 보건복지부장관이 고시하는 감염병을 말한다.

3.1.10	인수공통감염병

동물과 사람 간에 서로 전파되는 병원체에 의하여 발생되는 감염병 중 보건복지부장관이 고시하는 감염병을 말한다.

3.1.10	고위험병원체

생물테러의 목적으로 이용되거나 사고 등에 의하여 외부에 유출될 경우 국민 건강에 심각한 위험을 초래할 수 있는 감염병병원체로서 보건복지부령으로 정하는 것을 말한다.

3.1.11	관리대상 해외 신종감염병

기존 감염병의 변이 및 변종 또는 기존에 알려지지 아니한 새로운 병원체에 의해 발생하여 국제적으로 보건문제를 야기하고 국내 유입에 대비하여야 하는 감염병으로서 보건복지부장관이 지정하는 것을 말한다.

3.2	유전자변형생물체의 국가간 이동등에 관한 법률

3.2.1	생물체

유전물질을 전달 또는 복제할 수 있는 생물학적 존재(생식능력이 없는 생물체, 바이러스 및 바이로이드를 포함한다)를 말한다.

3.2.2	유전자변형생물체

법 제2조제2호에 정의된 바와 같이 다음 각 목의 현대생명공학기술을 이용하여 새롭게 조합된 유전물질을 포함하고 있는 생물체(동물, 식물, 곤충, 미생물 등)를 말한다.

1)	인위적으로 유전자를 재조합하거나 유전자를 구성하는 핵산을 세포 또는 세포 내	소기관으로 직접 주입하는 기술

2)	분류학에 의한 과(科)의 범위를 넘는 세포융합으로서 자연상태의 생리적 증식이나	재조합이 아니고 전통적인 교배나 선발에서 사용되지 아니하는 기술

3.2.3	시험·연구용 유전자변형생물체

시험·연구용으로 사용하기 위하여 연구시설에서 이용되는 유전자변형생물체를 말한다.

3.2.4	연구시설

유전자변형생물체 개발과 실험을 위하여 유전자변형생물체가 인체 및 외부환경에 미칠 수 있는 영향을 효과적으로 제어·조절할 수 있도록 마련된 시설, 장치 또는 여타 물리적 구조물을 말하며 신고 또는 승인 신청 시의 신청 단위가 된다.

3.3	화학무기·생물무기의 금지와 특정화학물질·생물작용제 등의 제조·수출입 규제 등에 관한 법률

3.3.1	생물작용제

자연적으로 존재하거나 유전자를 변형하여 만들어져 인간이나 동식물에 사망, 고사(枯死), 질병, 일시적 무능화나 영구적 상해를 일으키는 미생물 또는 바이러스로서 대통령령으로 정하는 물질을 말한다.

3.3.2	독소

생물체가 만드는 물질 중 인간이나 동식물에 사망, 고사, 질병, 일시적 무능화나 영구적 상해를 일으키는 것으로서 대통령령으로 정하는 물질을 말한다.

3.3.3	제조

다음 각 목의 어느 하나에 해당하는 것을 말한다.

1)	화학물질을 그 사용 목적에 따라 화학반응시킴으로써 다른 화학물질을 생성(일시적	생성을 포함한다)하는 것

2)	생물작용제 또는 독소를 배양·추출·합성하거나 독소를 생성하는 생물체 또는 생물작	용제의 유전자를 변형하는 것

3.4	폐기물관리법

3.4.1	폐기물

쓰레기, 연소재(燃燒滓), 오니(汚泥), 폐유(廢油), 폐산(廢酸), 폐알칼리 및 동물의 사체(死體) 등으로서 사람의 생활이나 사업활동에 필요하지 아니하게 된 물질을 말한다.

3.4.2	지정폐기물

사업장폐기물 중 폐유·폐산 등 주변 환경을 오염시킬 수 있거나 의료폐기물(醫療廢棄物) 등 인체에 위해(危害)를 줄 수 있는 해로운 물질로서 대통령령으로 정하는 폐기물을 말한다.

3.4.2	의료폐기물

보건·의료기관, 동물병원, 시험·검사기관 등에서 배출되는 폐기물 중 인체에 감염 등 위해를 줄 우려가 있는 폐기물과 인체 조직 등 적출물(摘出物), 실험 동물의 사체 등 보건·환경보호상 특별한 관리가 필요하다고 인정되는 폐기물로서 대통령령으로 정하는 폐기물을 말한다.

3.4.3	의료폐기물 전용용기

의료폐기물로 인한 감염 등의 위해 방지를 위하여 의료폐기물을 넣어 수집·운반 또는 보관에 사용하는 용기를 말한다.

3.4.4	처리

폐기물의 수집, 운반, 보관, 재활용, 처분을 말한다.

3.5	유전자재조합실험지침

3.5.1	생물안전

잠재적으로 인체 위해 가능성이 있는 생물체 또는 생물재해로부터 실험자 및 국민의 건강을 보호하기 위한 지식과 기술, 그리고 장비 및 시설을 적절히 사용하도록 하는 조치를 말한다.

3.5.2	유전자재조합분자

어떤 세포 내에서 복제 가능한 DNA(벡터)와 이종의 DNA를 효소 등을 이용하여 시험관 안에서 결합시켜 제작한 DNA를 말한다.

3.5.3	유전자재조합실험

유전자재조합분자를 세포에 도입하여 이종의 DNA를 복제하는 실험과 유전자재조합분자가 도입된 세포를 이용하는 실험, 또는 벡터를 이용하지 않으면서 이종의 DNA를 직접 세포에 주입하여 복제하는 실험을 말한다.

3.5.4	숙주

유전자재조합실험에서 유전자재조합분자가 도입되는 세포를 말한다.

3.5.5	벡터

유전자재조합실험에서 숙주에 이종의 DNA를 운반하는 DNA를 말한다.

3.5.6	공여체

벡터에 삽입하려고 하는 DNA 또는 직접 주입하고자 하는 DNA가 유래된 생물체를 말한다. RNA를 주형으로 합성된 DNA를 벡터에 삽입할 경우에는 RNA를 제공하는 생물체를 포함한다.

3.5.7	숙주-벡터계

숙주와 벡터의 조합을 말한다.

3.5.8	대량배양실험

유전자재조합실험 중 10리터 이상의 배양용량 규모로 실시하는 실험을 말한다.

3.5.9	동물을 이용하는 실험

유전자변형동물을 개발하거나 이를 이용하는 실험 및 기타 유전자재조합분자 또는 유전자변형생물체를 동물에 도입하는 실험을 말한다.

3.5.10	실험실

유전자재조합실험을 실시하는 방을 말한다.

3.5.11	실험구역

출입을 관리하기 위한 전실에 의해 다른 구역으로부터 격리된 실험실, 복도 등으로 구성되는 구역을 말한다.

3.5.13	연구시설

전실을 포함한 실험구역으로서 안전관리의 단위가 되는 구역 또는 건물을 말하며 신고 또는 허가 신청시의 신청단위이다.

3.5.14	생물안전작업대

병원체 등 감염성 물질을 다루는 실험실에서 취급 물질, 실험자의 안전 및 환경을 보호하기 위하여 사용되는 기본적인 안전 장비이며, 장비 내 유입 및 배출공기의 형태와 속도에 따라 클래스 Ⅰ, 클래스 Ⅱ 및 클래스 Ⅲ로 분류된다. 클래스 Ⅰ 및 클래스 Ⅱ 생물안전작업대는 주로 일반 미생물실험과 제2위험군 또는 제3위험군에 해당하는 미생물 실험에 사용되며, 보통 유입공기 속도가 0.38-0.5m/sec로 이는 작업자의 보호뿐만 아니라 취급 병원체가 주변 환경으로 노출될 수 있는 위험을 감소시키는데 적합하다. 클래스 Ⅲ 생물안전작업대는 물리적으로 작업대 내부와 외부를 완전히 구분하고 내부로 유입 또는 배출되는 공기를 헤파 필터 처리함으로써 감염성 물질 및 작업자에 대한 생물안전 확보가 가장 뛰어나므로 가장 높은 안전수준을 요구하는 병원체 취급 실험에 사용된다.

3.6	고위험병원체 안전관리지침

3.6.1	검사

검체 또는 의심되는 미생물에 대하여 분류학적으로 이를 확인하거나 세부적인 특성을 규명하기 위해 수행하는 실험, 분석 및 연구행위를 말한다.

3.6.2	보존

취급기관이 고위험병원체를 유지, 보관하는 일련의 과정을 말한다.

3.6.3	폐기

고위험병원체의 생물학적 활성을 완전히 제거시킨 후 안전하게 처리하는 것을 말한다.

3.6.4	검체

고위험병원체의 검사 및 연구를 목적으로 수집된 사람과 동･식물 등의 분비물, 혈액, 조직 또는 조직액과 관련 식품, 물, 토양 등을 말한다.

3.6.5	고위험병원체

생물테러의 목적으로 이용되거나 사고 등에 의하여 외부에 유출될 경우 국민 건강에 심각한 위험을 초래할 수 있는 감염병병원체를 말하며, 고위험병원체의 종류 및 위험군은 법 시행규칙 제5조 별표 1을 따른다.

3.6.6	고위험병원체 취급기관

법 제23조제1항에 의거하여 고위험병원체를 검사, 보존, 관리 및 이동하려는 기관을 말한다.

3.6.7	실험실

고위험병원체를 검사하거나 연구수행을 위해 지정된 연구시설 내 공간을 말한다.

3.6.8	고위험병원체 취급시설

고위험병원체를 취급, 보존 및 관리를 위하여 사용되는 실험실을 포함하는 실험구역으로써 안전관리의 단위가 되는 구역 또는 건물을 말한다.

3.6.9	생물안전

고위험병원체에 의한 불의의 노출 또는 사고 등 위해를 제거하거나 방어할 수 있는 적절한 지식, 기술 및 절차 등을 포함하는 조치를 말한다.

3.6.10	생물보안

고위험병원체의 유실, 도난, 오용, 전용, 무단 접근 또는 고의적 무단 방출을 방지하기 위한 보안, 통제, 책임 등을 포함하는 조치를 말한다.

3.6.11	사고

연구시설 내에서 감염 등 손해를 발생시키는 불의의 노출 또는 상황을 말한다.

3.6.12	고위험병원체 전담관리자

고위험병원체의 안전관리를 위하여 취급기관의 장이 임명한 자로서 안전교육, 점검, 사고 대처, 법률 이행 등 고위험병원체 안전관리를 전담하여 수행하는 관리책임자를 말한다.

3.6.13	봉인

장기간(1년이상) 사용계획이 없는 보존용 고위험병원체의 안전관리를 위하여 적절한 시건장치 또는 봉인지 등을 이용하여 고위험병원체의 불출을 막는 조치를 말한다.

3.7	기관생물안전위원회 구성·운영 안내(질병관리본부)

3.7.1	연구시설

전실(前室)을 포함한 실험구역으로 안전관리 단위가 되는 구역 또는 건물로서, 신고 또는 허가 신청시의 신청단위를 말한다.

3.7.2	연구기관

연구시설을 운영하는 법인 등 민간조직 및 공공조직을 말한다.

3.7.3	기관장

연구기관의 책임자로,「유전자재조합실험지침」제19조의 시험․연구기관장을 말한다.

3.7.4	기관생물안전위원회

기관장을 보좌하는 생물안전 관련사항의 자문기구로, 약어인 'IBC'(Institutional Biosafety Committee)로 표기한다.

3.7.5	생물안전관리책임자

기관장을 보좌하는 생물안전 관련사항의 이행책임자로, 약어인 'IBO'(Institutional Biosafety Officer)로 표기한다. 미국 등 해외의 경우 BSO(BioSafety Officer)로 표기하기도 한다.

3.7.6	생물안전관리자

IBO를 보좌하는 행정 및 실무담당자를 말한다.

3.7.7	기관신고실험

기관장에 사전신고를 하고, 사전에 신고․허가받은 연구시설에서 수행되어야 하는「유전자재조합실험지침」제10조의 실험을 말한다.

3.7.8	기관승인실험

기관장의 사전승인을 얻어, 사전에 신고․허가받은 연구시설에서 수행되어야 하는「유전자재조합실험지침」제9조의 실험을 말한다.

3.7.9	국가승인실험

『유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률』통합고시 제9-11조에 따라 질병관리본부장의 사전승인을 얻어, 사전에 신고․허가받은 연구시설에서 수행되어야 하는 실험을 말한다. 염기서열 분석을 목적으로 하는 유전자변형실험은 제외된다.

3.7.10	국민보건상 국가관리가 필요한 병원성미생물

『유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률』통합고시 별표 2-3(참고 3)에 지정된 병원성미생물을 말한다. 해당 병원성미생물이나 유전자를 이용하는 실험은 국가승인실험이 된다.

3.8	기타

3.8.1	검교정

밀폐시설의 완전성을 확인하기 위한 계측장비의 성능(예. 장비의 계측 값)과 표준기준(standard)과의 상호관계를 확인하는 작업

3.8.2	검증

규정에 따른 또는 객관적 증거 제시를 통하여 밀폐연구시설 및 관련 설비의 완전성이 충족됨을 확인하는 작업

3.8.3	독소

소량 또는 통상의 양으로도 인간, 동물, 식물에 부정적 영향(adverse effect)을 유발할 수 있는 생물학적시스템에 의해 생산된 물질 (독소로 오염되어있는 소재와 물질 등을 포함할 수 있음)

3.8.4	사건

사람 및 환경에 위해를 일으킬 수 있는 잠재력을 가진 상황(event)

3.8.5	사고(Accidence)

사람 및 환경에 위해를 초래한 사건(incident)

3.8.6	생물보안(Biosecurity)

생물작용제 또는 독소 등 생물학적 위해요소의 유실, 도난, 오용, 전용, 무단 접근 또는 고의적인 방출을 막기 위한 보안, 통제, 책임을 포함하는 개념이며, 본 지침에서는 연구실에서의 보안으로 한정

3.8.7	생물안전

병원체, 독소 등 생물학적 위해인자에 의한 노출 또는 사고에 의한 방출(release)을 막을 수 있는 밀폐 원칙, 기술 및 방법을 포함하는 포괄적 개념이며, 본 지침에서는 연구실에서의 생물안전으로 한정

잠재적으로 인체 위해 가능성이 있는 생물체 또는 생물재해로부터 실험자 및 국민의 건강을 보호하기 위한 지식과 기술, 그리고 장비 및 시설을 적절히 사용하도록 하는 조치를 말한다.

3.8.8	생물위해인자

사람 및 환경에 부정적 영향(adverse effect)을 유발할 수 있는 미생물을 포함한 생물체 및 독소(병원체 및 독소로 오염된 소재, 물질 포함)

3.8.9	손해

사람 및 환경, 재산에 미치는 부정적 영향

3.8.10	재해

동물실험으로 인한 사람과 동물의 감염, 전염병 발생, 유해물질 노출 및 환경오염 등을 말한다.

3.8.11	바이오리스크관리(Bio-risk Management)

생물학적 위해인자의 비의도적, 의도적 노출의 발생가능성을 통제하기 위하여 수행하는 일련의 모든 조치

3.8.12	작업장

기관의 통제에 따라 작업과 연관된 행위가 수행되는 물리적인 장소

3.8.13	위해성평가

과학적 근거를 바탕으로 위험요소(hazard)로 인한 부정적인 결과와 위해 및 그 발생 가능성을 평가하는 절차로서 기존 통제의 적합성을 고려하고 위해가 수용 가능한지에 대한 여부를 결정하는 과정

3.8.14	표준미생물작업기술

에어로졸, 비말, 그리고 사고에 의한 접종(accidental inoculation)으로 병원체, 독소 등 생물위해인자에 노출되는 것을 방지하거나 최소화하기 위해 적용되는 기본적인 실험실 작업 방법

3.8.15	표준운영절차서 (Standard operating procedure, SOP)

연구시설 내에서 수행되는 통상적 또는 반복되는 활동에 대하여 적합한 행위 또는 조치 과정 및 방법을 기록한 지시서 또는 설명서

3.8.16	바이오리스크 평가

생물위해요소에 대하여 기존에 취한 통제의 적절성을 평가하고 발생한 바이오리스크가 연구기관 내에서 수용가능한지에 대한 여부를 검토하는 절차

3.8.17	바이오리스크 통제 (Bio-risk control)

바이오리스크 관리를 위한 결정사항들을 실천하고 이행하는 조치이며, 시행 여부에 대한 모니터링, 재평가를 포함

3.8.18	바이오리스크 관리시스템 (Bio-risk management system)

바이오리스크 정책을 개발하고 목표를 설정하여 실행토록 하는 연구기관 내 바이오리스크 관리를 담당하는 해당조직의 경영체계

3.8.19	현장점검

측량(measurement), 시험(testing) 또는 측정(gauging)에 따른 관측과 판단에 따른 적합성 평가

3.8.20	부적합성

연구시설 설비 및 장비, 연구자 작업 기준, 실행, 절차 등에 대한 법적 요구조건을 충족하지 못하여 발생하는 차이

3.8.21	시정 조치

감지된 부적합성 또는 기타 사람 및 환경에 부정적 영향을 유발할 수 있는 상황의 원인을 제거하기 위한 조치 (재발을 방지하기 위한 조치)

3.8.22	예방조치

잠재적인 부적합성 또는 사람과 환경에 부정적인 영향을 유발할 수 있는 상황의 원인을 제거하기 위한 조치 (발생을 방지하기 위한 조치)

3.8.23	지역사회

연구시설 내 작업 활동으로 인하여 잠재적으로 영향을 받을 수 있는 기관이 위치한 행정구역

3.8.24	안전

연구시설 내 수용 불가능한 위해가 없음

4.	실험물질의 분류

4.1	유전자변형생물체(LMO)

현대생명공학기술을 이용하여 새롭게 조합된 유전물질을 포함하고 있는 생물체

4.2	고위험병원체

「감염병예방법」에 의거하여 “생물테러의 목적으로 이용되거나 사고 등에 의하여 외부에 유출 될 경우국민 건강에 심각한 위험을 초래할 수 있는 감염병병원체”로서 보건복지부령에 의해 35종의 병원체가 지정

4.3	인체감염병원체

제1군감염병, 제2군감염병, 제3군감염병, 제4군감염병, 제5군감염병, 지정감염병, 세계보건기구 감시대상 감염병, 생물테러감염병, 성매개감염병, 인수(人獸)공통감염병 및 의료관련감염병에 관련된 병원체

4.4	생물작용제

자연적으로 존재하거나 유전자를 변형하여 만들어져 인간이나 동식물에 사망, 고사(枯死), 질병, 일시적 무능화나 영구적 상해를 일으키는 미생물 또는 바이러스

4.5	독소

생물체가 만드는 물질 중 인간이나 동식물에 사망, 고사, 질병, 일시적 무능화나 영구적 상해를 일으키는 것

4.6	법률에 따른 관리 대상 병원체 분류 (실험실생물안전지침 2015, 질병관리본부)

4.6.1	세균 (15종)

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	탄저균(Bacillus anthracis)	○	○	○	BL3c
2	브루셀라 아보투스(Brucella abortus)	○	×	×
3	양 브루셀라균(Brucella melitensis)	○	○	○	BL3
4	브루셀라 수이스(Brucella suis)	○	○	×	BL3
5	클라미디아 프시타키(Chlamydia psittaci)	○	○	×	BL3
6	보툴리눔균(Clostridium botulinum)	○	○	○	BL2c
7	야토균(Francisella tularensis)	○	○	○	BL3c
8	비저균(Burkholderia mallei)	○	○	○	BL3
9	멜리오이도시스균(Burkholderia pseudomallei)	○	○	○	BL3
10	장티푸스균(Salmonella Typhi)	○	×	×
11	시가이질균(Shigella dysenteriae)	○	○ (Type 1)	×	BL2
12	콜레라균(Vibrio cholerae)	○	○ (O1, O139)	○	BL2
13	페스트균(Yersinia pestis)	○	○	○	BL3c
14	웰치균, 엡사일런 독소를 생산하는 2형 (Clostridium perfringens, epsilon toxin producing types)	○	×	×
15	장관 출혈성 대장균, 혈청형 O157과 기타 베로톡신 생산 균주 (Enterohaemorrhagic Escherichia coli, serotype O157 and other verotoxin producing serotypes)	○	×	×

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	안데스 바이러스(Andes virus)	○	×	×
2	차파레 바이러스(Chapare virus)	○	×	×
3	치쿤군야 바이러스(Chikungunya virus)	○	×	×
4	초클로 바이러스(Choclo virus)	○	×	×
5	크리미안-콩고 출혈열 바이러스(Crimean-Congo haemorrhagic fever virus)	○	○	○	BL4
6	뎅기열 바이러스(Dengue fever virus)	○	×	×
7	도브라바-베오그라드 바이러스(Dobrava-Belgrade virus)	○	×	×
8	서울바이러스(Seoul virus)	○	×	×
9	신 놈브레 바이러스(Sin nombre virus)	○	×	×
10	동부 마 뇌염 바이러스(Eastern equine encephalitis virus)	○	○	○	BL2
11	서부 마 뇌염 바이러스(Western equine encephalitis virus)	○	○	×	BL2
12	베네주엘라 마 뇌염 바이러스(Venezuelan equine encephalitis virus)	○	○	○	BL3
13	에볼라 바이러스(Ebola virus)	○	○	○	BL4c
14	한탄 바이러스(Hantaan virus)	○	×	×
15	헨드라 바이러스(Hendra virus (Equine morbillivirus))	○	○	○	BL4
16	일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus)	○	×	×
17	구아나리토 바이러스(Guanarito virus)_베네주엘라형 출혈열 바이러스	○	○	○	BL4
18	후닌 출혈열 바이러스(Junin virus)_아르헨티나형 출혈열 바이러스	○	○	○	BL4
19	마추포 바이러스(Machupo virus)_볼리비아형 출혈열 바이러스	○	○	○	BL4
20	사비아 바이러스(Sabia virus)_브라질형 출혈열 바이러스	○	○	○	BL4
21	플렉살 바이러스(Flexal virus)_남아메리카 출혈열 바이러스	×	○	○	BL4
22	라구나 네그라 바이러스(Laguna Negra virus)	○	×	×
23	라사(열) 바이러스(Lassa(fever) virus)	○	○	○	BL4c
24	루우핑 일 바이러스(Louping ill virus)	○	×	×
25	루요 바이러스(Lujo virus)	○	×	×
26	림프구성 맥락수막염 바이러스(Lymphocytic choriomeningitis virus)	○	×	×
27	마버그 바이러스(Marburg virus)	○	○	○	BL4c
28	원숭이 폭스 바이러스(Monkey pox virus)	○	○	○	BL3
29	머레이 계곡 뇌염 바이러스(Murray Valley encephalitis virus)	○	×	×
30	니파 바이러스(Nipah virus)	○	○	○	BL4
31	오로푸체 바이러스(Oropouche virus)	○	×	×
32	포와센 바이러스(Powassan virus)	○	×	×
33	리프트 계곡열 바이러스(Rift Valley fever virus)	○	○	○	BL3
34	라치오 바이러스(Rocio virus)	○	×	×
35	세인트 루이스 뇌염 바이러스(St Louis encephalitis virus)	○	×	×
36	참진드기 매개뇌염 바이러스(Tick-borne encephalitis virus)	○	○	○	BL3
37	캬사늘 숲 바이러스(Kyasanur Forest virus)	○	○	○	BL3
38	옴스크 출혈열 바이러스(Omsk haemorrhagic fever virus)	○	○	○	BL3
39	두창 바이러스(Variola virus)	○	○	○	BL4c
40	소두창 바이러스(Variola minor virus, Alastrim)	×	○	×	BL3
41	황열 바이러스(Yellow fever virus)	○	○	×	BL3
42	헤르페스 B 바이러스(Cercopitjecine herpesvirus 1, Herpes B virus)	×	○	×	BL3
43	조류 인플루엔자 인체감염증 바이러스(H5N1, H7N7, H7N9)	○	○ (인체유래)	○	BL3
44	고위험 인플루엔자 바이러스(1918 influenza virus의 8개 병원성 유전자 중 하나 이상의 유전자를 포함하는 influenza virus)	○	○	○	BL3
45	중증급성호흡기증후군 코로나 바이러스(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus, SARS)	○	○	○	BL3
46	중동 호흡기 증후군 코로나 바이러스(Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus, MERS-CoV)	×	○	×	BL3
47	전염성 해면상 뇌병증 병원체(Transmission of spongiform encephalopathy agent: BSE, vCJD prion)	○	○	○	BL3

4.6.2	바이러스 및 프리온(47종)

4.6.3	리케치아 (4종)

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	큐열균(Coxiella burnetii)	○	○	○	BL3
2	바토넬라 퀸타나(Bartonella quintana) : 로찰리마에 퀸타나(Rochalimaea quintana), 리케치아 퀸타나 (Rickettsia quintana)	○	×	×
3	발진티푸스균(Rickettsia prowazekii)	○	○	○	BL3
4	홍반열 리케치아균(Rickettsia rickettsii)	○	○	○	BL3

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	콕시디오이데스 이미티스(Coccidioides immitis)	○	○	×	BL3
2	콕시디오이데스 포사다시(Coccidioides posadasii)	○	○	×	BL3

4.6.4	진균 (2종)

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	보툴리눔 독소(Botulinum toxin)	○	×	○
2	웰치균 독소(Clostridium perfringens toxin)	○	×	○
3	코노 독소(Conotoxin)	○	×	○
4	리신(Ricin)	○	×	×
5	삭시 독소(Saxitoxin)	○	×	×
6	시가 독소(Shiga toxin)	○	×	○
7	포도상구균 장독소(Staphylococcus aureus toxin)	○	×	○
8	복어독(Tetrodotoxin)	○	×	○
9	베로톡신과 시가와 같은 리보솜 불활성 단백질 (Verotoxin and shiga-like ribosome inactivating protein)	○	×	○
10	마이크로시스틴(시안지노신)(Microcystin(Cyanginosin))	○	×	○
11	아플라톡신(Aflatoxin)	○	×	○
12	아브린(Abrin)	○	×	○
13	콜레라 독소(Cholera toxin)	○	×	×
14	Diacetoxyscirpenol toxin	○	×	○
15	T-2 toxin	○	×	○
16	H-2 toxin	○	×	×
17	모데신 독소(Modeccin)	○	×	×
18	볼켄신 독소(Volkensin)	○	×	○
19	Viscum album Lectin 1 (Viscumin)	○	×	×

4.6.5	독소 (19종)

a：「대외무역법」 제26조에 따른 「전략물자 수출입고시」(산업통상자원부고시 제2011-276호)

제20조~23조에 의한 수출통제 대상 병원체 및 독소

b：「화학․생물무기의 금지 및 특정화학물질․생물작용제 등의 제조․수출입규제 등에 관한 법률」	제12조에 의한 수입통제 대상 병원체

c： 생물테러병원체

* BL：biosafety level(생물안전등급)

4.7	기타

추가 실험물질이 있는 경우, 기타에 기술

5.	위험군의 분류

5.1	위험군 분류

실험실의 체계적인 위해성 평가 능력을 확보하는 것이 필요하다. 실험실 생물안전을 위해서는 취급하는 미생물 및 감염성 물질 등이 갖는 위해 정도에 따라 등급을 정하고 실험내용에 따라 생물안전수준과 연관 지어 판단하는 것이 필요하다. 수행하고자 하는 실험에 대한 적절한 생물안전수준을 결정하기 위해 고려해야 할 사항은 취급하는 미생물 및 감염성물질 등에 의해 발생할 수 있는 잠재적 위해성이다. 숙주 및 공여체의 위험군 분류는 인체에 미치는 위해 정도에 따라 다음의 네가지 위험군으로 분류한다.

1)	제1위험군 : 건강한 성인에게는 질병을 일으키지 않는 것으로 알려진 생물체

2)	제2위험군 : 사람에게 감염되었을 경우 증세가 심각하지 않고 예방 또는 치료가 비	교적 용이한 질병을 일으킬 수 있는 생물체

3)	제3위험군 : 사람에게 감염되었을 경우 증세가 심각하거나 치명적일 수도 있으나	예방 또는 치료가 가능한 질병을 일으킬 수 있는 생물체

4)	제4위험군 : 사람에게 감염되었을 경우 증세가 매우 심각하거나 치명적이며 예방	또는 치료가 어려운 질병을 일으킬 수 있는 생물체

[생물체의 위험군 결정 요소]            [생물체의 위험군 분류 기준]

5.2	위험군별 해당 생물체 목록

생물체의 위험군 분류 시 주요 고려사항은 다음 각 호와 같다.

1)	해당 생물체의 병원성

2)	해당 생물체의 전파방식 및 숙주범위

3)	해당 생물체로 인한 질병에 대한 효과적인 예방 및 치료 조치

4)	인체에 대한 감염량 등 기타 요인

유전재조합실험지침 [별표2] 생물체의 위험군 분류(제5조 제1항 관련)

1. 세균의 위험군 분류

(1) 제4위험군

해당 세균 없음

(2) 제3위험군

Bacillus	B. anthracis
Bartonella	B. bacilliformis
Brucella	B. abortus
	B. canis
	B. melitensis
	B. ovis
	B. suis
Burkholderia	B. mallei (구)Pseudomonas mallei
	B. pseudomallei
Coxiella	C. burnetii
Francisella	F. tularensis
Mycobacterium	M. africanum
	M. bovis (BCG주 제외)
	M. tuberculosis
Orientia	O. tsutsugamushi (구)Rickettsia tsutsugamushi
Pasteurella	P. multocida type B
Rickettsia	R. akari
	R. australis
	R. canada
	R. conorii
	R. japonica
	R. montana
	R. parkeri
	R. prowazekii
	R. rhipicephali
	R. rickettsii
	R. siberica
	R. typhi (구)Rickettsia mooseri
Yersinia	Y. pestis

Acinetobacter	A. baumannii (구)Acinetobacter calcoaceticus
Actinobacillus	전종
Actinomyces	A. bovis
	A. israelli
	A. naeslundii
	A. pyogenes (구)Corynebacterium pyogenes
Aeromonas	A. hydrophila
	A. punctata
Amycolata	A. autotrophica (구)Nocardia autotrophica
Archanobacterium	A. haemolyticum (구)Corynebacterium haemolyticum
Arizona	A. hinshawii (구)Salmonella arizona
Bacillus	B. cereus
Bartonella	B. henselae
	B. quintana (구)Rochalimaea quintana
	B. vinsonii (구)Rochalimaea vinsonii
Bordetella	B. pertussis
	B. parapertussis
Borrelia	B. recurrentis
	B. burgdorferi
Burkholderia	(구)Pseudomonas; B. mallei, B. pseudomalei는 제외
Calymmatobacterium	C. granulomatis
Campylobacter	C. coli
	C. fetus
	C. jejuni
Chlamydia	C. psittaci
	C. trachomatis
	C. pneumoniae
Clostridium	C. botulinum
	C. chauvoei
	C. difficile
	C. haemolyticum
	C. histolyticum
	C. novyi
	C. perfringens
	C. septicum
	C. tetani
Corynebacterium		C. bovis
		C. jeikeium
		C. diphtheriae
		C. pseudotuberculosis
		C. renale
		C. ulcerans
Dermatophilus		D. congolensis
Edwardsiella		E. tarda
Erysipelothrix		E. rhusiopathiae
Escherichia		E. coli (장관 병원성 전종)
Fusobacterium		F. necrophorum (구)Sphaerophorus necrophorus, Fusiformis necrophorus
Haemophilus		H. ducreyi
		H. influenzae
Helicobacter		H. pylori
Klebsiella		전종
Legionella		전종
Leptospira		L. interrogans (전혈청형)
Listeria		L. monocytogenes
Moraxella		전종
Mycobacterium	M. avium complex
	M. asiaticum
	M. bovis (BCG 주)
	M. chelonei
	M. fortuitum
	M. kansasii
	M. leprae
	M. malmoense
	M. marinum
	M. paratuberculosis
	M. scrofulaceum
	M. simiae
	M. szulgai
	M. ulcerans
	M. xenopi
Mycoplasma	전종
Neisseria	N. gonorrhoeae
	N. meningitidis
Nocardia	N. asteroides
	N. brasiliensis
	N. farnicica
	N. otitidiscaviarum
	N. transvalensis
Pasteurella	P. haemolytica
	P. multocida (Pasteurella multocida type b 제외)
	P. pneumotropica
Plesiomonas	P. shigelloides
Pseudomonas	P. aeruginosa
Rhodococcus	R. equi (구)Corynebacterium equi
Salmonella	전종 및 전혈청형
Shigella		S. dysenteriae
		S. boydii
		S. flexneri
		S. sonnei
Staphylococcus		S. aureus
Streptobacillus		S. moniliformis
Streptococcus		S. agalactia
		S. pneumoniae
		S. pyogenes
Treponema		T. carateum
		T. pallidum
		T. pertenue
Vibrio		V. cholerae
		V. parahemolyticus
		V. vulnificus
Yersinia		Y. enterocolitica
		Y. pseudotuberculosis

(3) 제2위험군

(4) 제1위험군

(2) 및 (3)에 해당되지 않는 종. 다만, 종명까지 동정되어 있지 않고 인체병원성 여부가 밝혀지지 않은 것은 제외한다.

2. 바이러스의 위험군 분류

(1) 제4위험군

Arenaviridae	Guanarito virus Junin virus Lassa virus Machupo virus Sabia virus South American haemorrohagic fever virus
Bunyaviridae	Crimean-Congo hemorrhagic fever virus
Filoviridae	Ebola virus
	Marburg virus
Flaviviridae	Omsk hemorrhagic fever virus Central European encephalitis virus Hanzalova virus Hypr virus Kumlinge virus Kyasanur Forest disease virus Russian spring-summer encephalitis viruses
Herpesviridae	Herpesvirus simiae(Herpesvirus B or Monkey B virus Cercopithecine herpesvirus[CHV-1], B virus)
Paramyxoviridae	Equine morbillivirus(Hendra virus) Hendra-like virus Nipah virus
Poxviridae	Variola virus
현재까지 규명되지 않은 출혈열 바이러스의 원인 바이러스

(2) 제3위험군

Arenaviridae	Lymphocytic choriomeningitis virus(LCM)(neurotropic strain) Mopeia virus
Bunyaviridae	Estero Real virus Shokwe virus Fort Sherman virus Akabane virus Germiston virus Kairi virus Oropouche virus Rift Valley fever virus Thiafora virus Dugbe virus Nairobi sheep disease virus Hantaan virus Sin nombre virus
Coronaviridae	SARS-CoV (Severe Acute Respiratory Syndrome)
Flaviviridae	Cacipacore virus Gadgets Gully virus Israel turky meningitis virus Kedougou virus Koutango virus Louping ill virus Meaban virus Murray Valley encephalitis virus Negishi virus Powassan virus Rocio virus Sal Vieja virus San Perlita virus Saumarez Reef virus Sepik naranjal virus Spondweni virus St. Louis encephalitis virus Tick-borne encephalitis virus Wesselsbron virus West nile virus Yaounde virus Yellow fever virus
Orthomyxoviridae	Avian influenza virus affecting human
Poxvviridae	Monkeypox virus
Prions	Transmissible spongiform encephalopathies(TSEs) agent [Creutzfeldt-Jacob disease and kuru, Bovine spongiform enephalopathy(BSE) and other related animal TSEs]
Retroviridae	Human immunodeficiency virus(HIV) types 1 and 2 Human T cell lymphotropic virus (HTLV) types 1 and 2 Simian immunodeficiency virus (SIV)
Rhabdoviridae	Vesicular stomatitis virus Rabies virus(wild strain)
Togaviridae	Semliki Forest virus Venezuelan equine encephalomyelitis virus

(3) 제2위험군

Adenoviridae	Human adenovirus
Arenaviridae	Junin virus candid #1 vaccine strain Lymphocytic choriomeningitis virus (LCM) (non-neurotropic strains) Tacaribe virus complex
Bunyaviridae	Bunyamwera virus Puumala virus Seoul virus Rift Valley fever virus vaccine strain MP-12 그 외 3군 및 4군에서 제외된 전종
Caliciviridae	Norovirus
	Sapovirus
Coronaviridae	Coronavirus
Flaviviridae	Dengue virus serotypes 1, 2, 3 and 4 Japanese encephalitis virus Yellow fever virus vaccine strain 17D Hepatitis C virus(HCV) 그 외 3군 및 4군에서 제외된 전종
Hepadnaviridae	Hepatitis B virus (HBV) Hepatitis D (delta) virus (HDV)
Herpesviridae	Epstein Barr virus Human cytomegalovirus Herpes simplex virus 1 and 2(HSV1 and 2) human herpesvirus types 3, 4, 5, 6 and 7 Varicella zoster virus
Orthomyxoviridae	Influenza viruses types A, B and C 기타 벼룩매개 orthomyxoviruses를 포함한 전종
Papovaviridae	모든 human papilloma viruses
Paramyxoviridae	Human parainfluenza viruses types 1, 2, 3 and 4 Human respiratory syncytial virus Measles virus Mumps virus Newcastle disease virus
Parvoviridae	Human parvovirus (B19)
Piconaviridae	Hepatitis A virus (HAV) Human echoviruses Human coxsackieviruses types A and B Human rhinoviruses Polioviruses, all types, wild and attenuated
Poxviridae	Monkeypox virus, Alastrim, Smallpox, Whitepox를 포함한 일부 제한된 Poxviruses를 제외한 전종
Reovirudae	Coltivirus, human Rotavirus, Orbivirus를 포함한 전종
Rhabdoviridae	Rabies virus
Rhabdoviridae	VSV-Indiana, San Juan, Glasgow를 포함한 Vesicular stomatitis virus 중 실험실에 적응된 바이러스주
Togaviridae	Rubella virus Chikungunya virus 131/25 vaccine strain Eastern equine encephalomyelitis viruses O'nyong-nyong virus Ross river virus Bebaru virus Sindbis virus Venezuelan equine encephalomyeitis vaccine strain TC-83 Western equine encephalomyelitis viruses
Unclassified	Hepatitis E virus(HEV)

(4) 제1위험군

(1), (2) 및 (3)에 해당되지 않는 바이러스. 다만, 종명까지 동정되어 있지 않고 인체병원성 여부가 밝혀지지 않은 것은 제외한다.

3. 진균의 위험군 분류

(1) 제4위험군

해당 진균 없음

(2) 제3위험군

Blastomyces(Ajellomyces)	B. dermatitidis
Coccidioides	C. immitis
Histoplasma	H. capsulatum var H. capsulatum
Histoplasma	H. capsulatum var H. duboisii

(3) 제2위험군

Acremonium	A. spp
Aspergillus	A. spp.
Arthroderma(Trichophyton)	A. simii(some strains)
Blastomyces(Ajellomyces)	B. dermatitidis
Candida	C. spp
Cladosporium	C. bantianum
Cladosporium(Xylohypha)	C. trichoides
Cryptococcus	C. neoformans var C. gattii
Cryptococcus	C. neoformans var C. neoformans
Dactylaria(Ochroconis)	D. gallopava
Emmonsia	E. parva E. parva var E. crescens
Epidermophyton	E. spp.
Exophiala(Wangiella)	E. dermatitidis
Fonsecaea	F. pedrosol F. compacta
Fusarium	F. moniliforme F. solani
Madurella	M. grisea M. mycetomati
Microsporum	M. spp.
Neotestudina	N. rosatii
Paecilomyces	P. spp
Paracoccidioides	P. brasiliensis
Penicillium	P. marneffei
Pneumocystis	P. carinii
Sporothrix	S. schenckii
Trichophyton	T. spp

(4) 제1위험군

(2) 및 (3)에 해당되지 않는 종. 다만, 종명까지 동정되어 있지 않고 인체병원성 여부가 밝혀지지 않은 것은 제외한다.

4. 기생충의 위험군 분류

(1) 제4위험군

해당 기생충 없음

(2) 제3위험군

해당 기생충 없음

(3) 제2위험군

조중류 (Cestode)
Cysticercus	C. cellulosae (유구낭미충)
Echinococcus	E. granulosus (단방조충)
	E. multilocularis (다방조충)
	E. vogeli (포겔다방조충)
Hymenolepis	H. diminuta (쥐조충)
	H. nana (왜소조충)
Taenia	T. solium (유구조충)
	T. saginata (무구조충)
	T. asiatica (아시아조충)
선충류 (Nematode)
Ancylostoma	A. ceylanicum (실론구충)
	A. duodenale (두비니구충)
Ascaris	A. lumbricoides (회충)
	A. suum (돼지회충)
Brugia	B. malayi (말레이사상충)
	B. timori (티몰사상충)
Enterobius	E. vermicularis (요충)
Loa	L. loa (로아사상충)
Necator	N. americanus (아메리카구충)
Onchocerca	O. volvulus (회선사상충)
Strongyloides	S. stercoralis (분선충주혈흡충증)
Trichinella	T. spiralis (선모충)
Wuchereria	W. bancrofti (반크롭프트사상충)
흡중류 (Trematode)
Clonorchis		sinensis(간흡충)
Echinostoma		E. hortense(호르텐스극구흡충)
Fasciola		F. hepatica (간질)
		F. gigantica (거대간질)
Gymnophalloides		G. seoi (참굴큰입흡충)
Heterophyes	H. nocens (유해이형흡충)
Metagonimus	M. yokogawai (장흡충)
Paragonimus	P. westermani (폐흡충)
Pygidiopsis	P. summa (표주박이형흡충)
Schistosoma	S. haematobium (방광주혈흡충)
	S. intercalatum (장간막주혈흡충)
	S. japonicum (일본주혈흡충)
	S. mansoni (만손주혈흡충)
	S. mekongi (메콩주혈흡충)
원충류 (Protozoa)
Babesia	B. bovis (쇠바베스열원충)
	B. divergens (분기바베스열원충)
Babesia	B. microti (쥐바베스열원충)
Cryptosporidium	C. parvum (작은와포자충)
Entamoeba	E. coli (대장아메바)
	E. gingivalis (잇몸아메바)
	E. hartmanni (작은아메바)
	E. histolytica (이질아메바)
Giardia	G. lamblia (람블편모충)
Iodoamoeba	I. butschlii (요드아메바)
Isospora	I. belli (사람등포자충)
	I. hominis (맹장포자충)
Leishmania	L. aethiopica (이디오피아리슈만편모충)
	L. braziliensis (피하리슈만편모충)
	L. donovani (내장리슈만편모충)
	L. major (큰리슈만편모충)
	L. mexicana (멕시코리슈만편모충)
	L. peruvania (페루리슈만편모충)
	L. tropica (피부리슈만편모충)
Microsporidium	(미포자충류)
Naegleria	N. fowleri (파울러자유아메바)
Plasmodium		P. cynomolgi (유인원원충)
		P. falciparum (열대열원충)
		P. malariae (사일열원충)
		P. ovale (난형열원충)
		P. vivax (삼일열원충)
Sarcocystis		S. lindemanni (린데만근육포자충)
		S. suihominis (돼지근육포자충)
Toxocara		T. canis (개회충)
Toxoplasma		T. gondii (톡소포자충)
Trichomonas		T. hominis (장세모편모충)
		T. tenax (구강편모충)
		T. vaginalis (질편모충)
Trypanosoma		T. brucei (브르스파동편모충)
		T. cruzi (크르스파동편모충)
		T. gambiense (감비아파동편모충)
		T. rangeli (랑겔파동편모충)
		T. rhodesiense (로데시아파동편모충)

(4) 제1위험군

(3)에 해당되지 않는 기생충. 다만, 종명까지 동정되어 있지 않고 인체병원성 여부가 밝혀지지 않은 것은 제외한다.

5.3	물리적밀폐

5.3.1	물리적 밀폐

실험의 생물안전 확보를 위한 연구시설의 공학적, 기술적 설치 및 관리·운영을 말한다.

5.3.2	일반적인 생물안전 밀폐연구시설 등급은 다음의 네가지로 분류한다.

1)	생물안전 1등급(Biosafety Level 1, BL1) : 제1위험군 취급시 요구되는 연구시설로	“연구시설의 설치․운영기준” (유전자변형생물체법 통합고시 [별표 9-1] (제9-2조제2	항제1호관련))의 안전관리등급 1의 설치·운영기준을 준수해야 한다.

2)	생물안전 2등급(Biosafety Level 2, BL2) : 제2위험군 취급시 요구되는 연구시설로	“연구시설의 설치․운영기준” (유전자변형생물체법 통합고시 [별표 9-1] (제9-2조	제2	항제1호관련)) 안전관리등급 2의 설치·운영기준을 준수해야 한다.

3)	생물안전 3등급(Biosafety Level 3, BL3) : 제3위험군 취급시 요구되는 연구시설로	“연구시설의 설치․운영기준” (유전자변형생물체법 통합고시 [별표 9-1] (제9-2조	제2	항제1호관련))의 안전관리등급 3의 설치·운영기준을 준수해야 한다.

4)	생물안전 4등급(Biosafety Level 4, BL4) : 제4위험군 취급시 요구되는 연구시설로	“연구시설의 설치․운영기준” (유전자변형생물체법 통합고시 [별표 9-1] (제9-2조	제2	항제1호관련))의 안전관리등급 4의 설치·운영기준을 준수해야 한다.

5.3.3	대량배양실험

대량배양실험을 위한 연구시설 등급은 대량배양 1등급(LSBL1), 대량배양 2등급(LSBL2) 및 대량배양 3등급(LSBL3), 대량배양 4등급(LSBL4)으로 분류하며, 등급별 연구시설의 설치·운영기준은 “대량배양 연구시설의 설치․운영기준” (유전자변형생물체법 통합고시 [별표 9-2] (제9-2조	제2항제2호관련))와 같다.

5.3.4	동물이용실험

동물을 이용하는 실험을 위한 연구시설 등급은 동물 1등급(ABL1), 동물 2등급(ABL2), 동물 3등급(ABL3) 및 동물 4등급(ABL4)으로 분류하며, 등급별 연구시설의 설치·운영기준은 “동물[곤충 포함] 이용 연구시설의 설치․운영기준” (유전자변형생물체법 통합고시 [별표 9-3] (제9-2조제2항제3호관련))와 같다.

5.3.5	곤충이용실험

곤충을 이용하는 실험을 위한 연구시설 등급은 생물안전1등급, 생물안전2등급, 생물안전 3등급 및 생물안전4등급으로 분류하며, 등급별 연구시설의 설치·운영기준은 “동물[곤충 포함] 이용 연구시설의 설치․운영기준” (유전자변형생물체법 통합고시 [별표 9-3] (제9-2조제2항제3호관련))와 같다.

5.4	생물학적밀폐

5.4.1	생물학적 밀폐

유전자변형생물체의 환경 내 전파·확산 방지 및 실험의 안전 확보를 위하여 특수한 배양조건 이외에는 생존하기 어려운 숙주와 실험용 숙주 이외의 생물체로는 전달성이 매우 낮은 벡터를 조합시킨 숙주-벡터계를 이용하는 조치를 말한다.

유전자재조합실험지침 [별표 7] 인정 숙주-벡터계(제7조 제2항 관련)

1. 자연 조건에서의 생존력이 낮은 숙주와 숙주 의존성이 높은 벡터를 조합시켜 이용함으로써 환경으로의 전파 및 확산 가능성이 낮거나 유전학적, 생리학적 및 생태학적 특성에 기초하여 사람에게 안전성이 높다고 인정되는 숙주-벡터계

가. Escherichia coli K12  또는 Escherichia coli B 숙주-벡터계 : 숙주는 항상 Escherichia coli K12, Escherichia coli B 또는 이들의 유도체로서 접합 능력이 있는 플라스미드를 포함하지 않고 형질도입 능력이 있는 박테리아파지를 갖고 있지 않으며 벡터는 비접합성 플라스미드 또는 박테리오파지 및 유도체인 숙주-벡터계

나. Bacillus subtilis 또는 Bacillus licheniformis 숙주-벡터계 : 고초균인 Bacillus subtilis 또는 licheniformis의 유도체로서 영양 요구성 돌연변이 또는 포자형성이 10-7 미만으로 일어나는 균주를 숙주로 하고 접합에 의한 전달성을 갖지 않는 플라스미드 또는 박테리오파지를 벡터로 하는 숙주-벡터계

다. Saccaromyces cerevisiae 숙주-벡터계 : 효모인 Saccharomyces cerevisiae를 숙주로 하며 S. cerevisiae의 플라스미드, 미토콘드리아 또는 이들의 유도체를 벡터로 사용하는 숙주-벡터계

라. Pseudomonas putida 숙주-벡터계 : Pseudonomas putida strain KT2440과 플라스미드 pKT262, pKT263, pKT264를 사용하는 숙주-벡터계

마. Streptomyces 숙주-벡터계 : Streptomyces coelicolor, S. lividans, S. parvulus, S. griseus strain과 인정된 벡터인 Streptomyces 플라스미드 SCP2, SLP1.2, pIJ101, actinophage phi C31과 이들의 유도체를 사용하는 숙주-벡터계

바. Neurospora crassa 숙주-벡터계 : 공기 중 산포를 방지하기 위하여 변형된 Neurospora crassa를 숙주로 하고 이들의 유도체를 벡터로 사용하는 숙주-벡터계

사. Agrobacterium tumefaciens 숙주-벡터계 : Agrobacterium tumefaciens를 숙주로 사용하여 non-tumorigenic disarmed Ti 플라스미드를 벡터로 사용하는 숙주-벡터계

2. 유전적 소실 등으로 인하여 특수한 배양조건 이외에는 생존율이 매우 낮은 숙주와 숙주 의존성이 특히 높은 벡터를 조합한 경우로서 환경으로의 전파 및 확산이 방지된다는 것이 확인된 숙주-벡터계

가. Escherichia coli K12 숙주-벡터계 : 다른 생물체로의 유전자재조합분자의 전달성 또는 숙주의 생존율이 10-8 미만으로 일어나는 숙주-벡터계

숙주	벡터
Escherichia coli K12 strain chi 1776	pSC101, pMB9, pBR313, pDH24, pBR322, pBR325, pBR327, pGL101, pHBl Escherichia coli / S. cerevisiae hybrid plasmid : YIp1, YEp2, YEp4, YIp5, YEp6, YRp7, YEp20, YEp21, YEp24, YIp25, YIp26, YIp27, YIp28, YIp29, YIp30, YIp31, YIp32, YIp33
DP50supF Escherichia coli K12 DP50supF DP50 또는 DP50supF DP50 또는 DP50supF DP50 또는 DP50supF DP50supF DP50 또는 DP50supF DP50 또는 DP50supF	λgt WES λB λgt ZJ vir λB λgt ALO․ λB Charon 3A Charon 4A Charon 16A Charon 21A Charon 23A Charon 24A

비고 : Escherichia coli K12 strain chi 2447, chi 2281은 DP50 또는 DP50supF 균주와의 사용이 허용된 람다 벡터와 함께 사용이 가능하다.

나. Saccharomyces cerevisiae 숙주-벡터계

숙주	벡터
ste-VC9이 불활성화된 변이주(불임종) Saccharomyces cerevisiae SHY1, SHY2, SHY3, SHY4	YIp1, YEp2, YEp4, YIp5, YEp6, YRp7, YEp20, YEp21, YEp24, YIp25, YIp26, YIp27, YIp28, YIp29, YIp30, YIp31, YIp32, YIp33

다. Bacillus subtilis 숙주-벡터계

숙주	벡터
포자를 생성할 수 없는 변이주 Bacillus subtilis ASB 298	pUB110, pC194, pS194, pSA2100, pE194, pT127, pUB112, pC221, pC223, pAB124

5.4.2	생물학적 안전성이 높다고 인정되는 숙주-벡터계는 유전자재조합실험지침 별표 7과 같다.

6.	실험의 분류

6.1	국가승인실험

국가승인실험은 「유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률」 제22조의2,  동법 시행령 제23조의6, 제23조의7, 동법 시행규칙 제14조의5, 제14조의6, 동법 통합고시 제9장제2절에 따라 질병관리본부장의 사전승인을 받아야 한다.

6.1.1	국가승인 대상 실험 범주

다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 경우에는 질병관리본부장의 승인을 받아야 한다. 다만, 염기서열 분석을 목적으로 유전자변형생물체를 개발하거나 실험하는 경우에는 그러하지 아니한다.

1)	종명까지 명시되어 있지 아니하고 인체병원성 여부가 밝혀지지 아니한 미생물을	이용하는 경우

2)	척추동물에 대하여 몸무게 1kg당 50% 치사독소량이 100ng 미만인 단백성 독소를	생산할 능력을 가진 유전자를 이용하는 경우

①	보툴리눔 독소(A, B, C, D, E, F형), ②	파상풍 독소, ③	이질 신경독소,

④	디프테리아 독소, ⑤	기타 척추동물에 대하여 몸무게 1㎏당 50% 치사 독소량	이 100ng 미만의 수치를 갖는 것으로 알려진 독소

3)	자연적으로 발생하지 아니하는 방식으로 생물체에 약제내성 유전자를 의도적으로	전달하도록 하는 경우. 다만, 아래에 해당하는 약제내성 유전자의 경우를 제외한다.

①	Ampicillin, chloramphenicol, hygromycin, kanamycin, streptomycin 또는 tetrac	ycline 내성유전자(부표에 의한 인정 숙주-벡터계를 이용한 유전자변형미생물의	수입 또는 개발·실험인 경우에 한한다)

* “인정 숙주-벡터계”라 함은 생물학적으로 안전성이 높다고 인정되는 숙주와	벡터의 조합을 말한다.

②	Kanamycin, neomycin 내성 유전자(npt II) 또는 hygromycin 내성 유전자(hph)	(해당 약제내성 유전자를 선발표지유전자로 포함한 유전자변형식물의 수입 또	는 개발·실험인 경우에 한한다)

③	Kanamycin, neomycin, puromycin,  ampicillin,  hygromycin, tetracycline, spect	inomycin, streptomycin, zeocin, 또는 blasticidin 내성 유전자(해당 약제내성 유	전자를 선발표지유전자로 포함한 유전자변형 설치류(마우스, 랫트)의 수입 또는	개발‧실험인 경우에 한한다)

[부표]

인정 숙주-벡터계

1. 자연 조건에서의 생존력이 낮은 숙주와 숙주 의존성이 높은 벡터를 조합시켜 이용함으로써 환경으로의 전파 및 확산 가능성이 낮거나 유전학적, 생리학적 및 생태학적 특성에 기초하여 사람에게 안전성이 높다고 인정되는 숙주-벡터계

가. Escherichia coli K12  또는 Escherichia coli B 숙주-벡터계 : 숙주는 항상 Escherichia coli K12, Escherichia coli B 또는 이들의 유도체로서 접합 능력이 있는 플라스미드를 포함하지 않고 형질도입 능력이 있는 박테리아파아지를 갖고 있지 않으며 벡터는 비접합성 플라스미드 또는 박테리오파아지 및 유도체인 숙주-벡터계

나. Bacillus subtilis 또는 Bacillus licheniformis 숙주-벡터계 : 고초균인 Bacillus subtilis 또는 licheniformis의 유도체로서 영양 요구성 돌연변이 또는 포자형성이 10-7 미만으로 일어나는 균주를 숙주로 하고 접합에 의한 전달성을 갖지 않는 플라스미드 또는 박테리오파지를 벡터로 하는 숙주-벡터계

다. Saccaromyces cerevisiae 숙주-벡터계 : 효모인 Saccharomyces cerevisiae를 숙주로 하며 S. cerevisiae의 플라스미드, 미토콘드리아 또는 이들의 유도체를 벡터로 사용하는 숙주-벡터계

라. Pseudomonas putida 숙주-벡터계 : Pseudonomas putida strain KT2440과 플라스미드 pKT262, pKT263, pKT264를 사용하는 숙주-벡터계

마. Streptomyces 숙주-벡터계 : Streptomyces coelicolor, S. lividans, S. parvulus, S. griseus strain과 인정된 벡터인 Streptomyces 플라스미드 SCP2, SLP1.2, pIJ101, actinophage phi C31과 이들의 유도체를 사용하는 숙주-벡터계

바. Neurospora crassa 숙주-벡터계 : 공기 중 산포를 방지하기 위하여 변형된 Neurospora crassa를 숙주로 하고 이들의 유도체를 벡터로 사용하는 숙주-벡터계

사. Agrobacterium tumefaciens 숙주-벡터계 : Agrobacterium tumefaciens를 숙주로 사용하여 non-tumorigenic disarmed Ti 플라스미드를 벡터로 사용하는 숙주-벡터계

2. 유전적 소실 등으로 인하여 특수한 배양조건 이외에는 생존율이 매우 낮은 숙주와 숙주 의존성이 특히 높은 벡터를 조합한 경우로서 환경으로의 전파 및 확산이 방지된다는 것이 확인된 숙주-벡터계

가. Escherichia coli K12 숙주-벡터계 : 다른 생물체로의 유전자재조합분자의 전달성 또는 숙주의 생존율이 10-8 미만으로 일어나는 숙주-벡터계

숙 주	벡 터
Escherichia coli K12 strain chi 1776	pSC101, pMB9, pBR313, pDH24, pBR322, pBR325, pBR327, pGL101, pHBl Escherichia coli / S. cerevisiae hybrid plasmid : YIp1, YEp2, YEp4, YIp5, YEp6, YRp7, YEp20, YEp21, YEp24, YIp25, YIp26, YIp27, YIp28, YIp29, YIp30, YIp31, YIp32, YIp33
DP50supF Escherichia coli K12 DP50supF DP50 또는 DP50supF DP50 또는 DP50supF DP50 또는 DP50supF DP50supF DP50 또는 DP50supF DP50 또는 DP50supF	λgt WES λB λgt ZJ vir λB λgt ALO․ λB Charon 3A Charon 4A Charon 16A Charon 21A Charon 23A Charon 24A

비고 : Escherichia coli K12 strain chi 2447, chi 2281은 DP50 또는 DP50supF 균주와의 사용이 허용된 람다 벡터와 함께 사용이 가능하다.

나. Saccharomyces cerevisiae 숙주-벡터계

숙 주	벡 터
ste-VC9이 불활성화된 변이주 (불임종) Saccharomyces cerevisiae SHY1, SHY2, SHY3, SHY4	YIp1, YEp2, YEp4, YIp5, YEp6, YRp7, YEp20, YEp21, YEp24, YIp25, YIp26, YIp27, YIp28, YIp29, YIp30, YIp31, YIp32, YIp33

다. Bacillus subtilis 숙주-벡터계

숙 주	벡 터
포자를 생성할 수 없는 변이주 Bacillus subtilis ASB 298	pUB110, pC194, pS194, pSA2100, pE194, pT127, pUB112, pC221, pC223, pAB124

4)	국민보건 상 국가관리가 필요한 병원성미생물의 유전자를 직접 이용하거나 해당	병원미생물의 유전자를 합성하여 이용하는 경우

1. 세균 및 진균

가. 페스트균(Yersinia pestis)

나. 탄저균(Bacillus anthracis)

다. 브루셀라균(Brucella melitensis, Brucella suis)

라. 비저균(Burkholderia mallei)

마. 멜리오이도시스균(Burkholderia pseudomallei)

바. 보툴리눔균(Clostridium botulinum)

사. 이질균 (Shigella dysenteriae Type 1)

아. 클라미디아 프시타키(Chlamydia psittaci)

자. 큐열균(Coxiella burnetii)

차. 야토균(Francisella tularensis)

카. 발진티푸스균(Rickettsia prowazekii)

타. 홍반열 리케치아균(Rickettsia rickettsii)

파. 콕시디오이데스균(Coccidioides immitis, Coccidioides posadasii)

하. 콜레라균(Vibrio cholerae O1ㆍO139)

2. 바이러스 및 프리온

가. 헤르페스 B 바이러스(Cercopithecine herpesvirus 1, Herpes B virus)

나. 크리미안 콩고 출혈열 바이러스(Crimean-Congo haemorrhagic fever virus)

다. 이스턴 이콰인 뇌염 바이러스(Eastern Equine Encephalitis virus)

라. 에볼라 바이러스(Ebola virus)

마. 헨드라 바이러스(Hendra viruses)

바. 라싸 바이러스(Lassa virus)

사. 마버그 바이러스(Marbug virus)

아. 원숭이폭스 바이러스(Monkeypox virus)

자. 니파 바이러스(Nipah viruse)

차. 리프트 벨리열 바이러스(Rift Valley fever virus)

카. 남아메리카 출혈열 바이러스(South American haemorrhagic fever; Flexal,  Guanarito, Junin, machupo, Sabia)

타. 황열 바이러스 (Yellow fever virus)

파. 서부 마 뇌염 바이러스 (Western equine encephalitis virus)

하. 진드기 매개뇌염 바이러스(Tick-borne encephalitis complex virus; Central European Tick-born encephalitis virus, Far Eastern Tick-born encephalitis virus, Siberian Tick-born encephalitis virus, Kyasanur Forest disease virus, Omsk haemorrhagic fever virus)

거. 두창 바이러스(Variola virus)

너. 소두창 바이러스(Variola minor virus, Alastrim)

더. 베네주엘라 이콰인 뇌염 바이러스(Venezuelan Equine Encephalitis virus)

러. 중증 급성호흡기 증후군 코로나 바이러스

머. 조류 인플루엔자 인체감염증 바이러스(혈청형 H5N1, H7N7, H7N9)

버. 고위험 인플루엔자 바이러스(1918 influenza virus의 8개 병원성 유전자중 하나 이상의 유전자를 포함하는 influenza virus)

서. 전염성 해면상 뇌병증 병원체(Transmission of spongiform encephalopathy agent; Bovine spongiform encephalopathy prion, variant Creutzfeldt-Jakob disease prion)

3. 그 밖에 보건복지부장관이 외부에 유출될 경우 공중보건상 위해 우려가 큰 세균, 진균, 바이러스 또는 프리온으로서 긴급한 관리가 필요하다고 인정하여 지정ㆍ공고하는 병원체

6.1.2	국가승인 절차

유전자변형생물체의 개발·실험 승인을 받으려는 경우, “유전자변형생물체 개발·실험 승인신청서”(유전자변형생물체법 시행규칙 별지 제31호서식)에 다음 각 호의	서류 1부 및 전자문서 1부를 첨부하여 질병관리본부장에게 제출한다.

1)	“시험·연구용 유전자변형생물체 사용계획서”(유전자변형생물체 통합고시 별지 제2-3	호서식) 단, 국가연구개발사업의 연구개발계획서로 대체할 수 있다.

1. 유전자변형생물체의 용도에 관한 자료

가. 개발․실험의 배경 및 목적

나. 주요 용도

다. 사용이 승인된 국가 및 승인 용도

2. 유전자변형생물체에 관한 자료

가. 명칭

나. 도입유전자에 의하여 부여된 특성

다. 숙주 또는 근연종과의 생물학적 특성의 차이점

라. 병원성, 독소 생산성, 알레르기 유발성 및 기타 유해 생리활성물질 생산가능성

마. 유전자변형생물체 내 도입유전자의 위치 및 복제 수

바. 유전자변형에 사용된 벡터의 특성 및 존재여부

사. 유전자변형생물체 및 도입유전자의 검출 및 확인방법

3. 숙주에 관한 자료

가. 명칭, 유래 및 분류학적 특성

나. 개발․실험하고자 하는 유전자변형생물체와 유사한 용도의 유전자변형생물체의 숙주로 이용된 사례

다. 숙주 및 근연종에서의 독소 생산성, 알레르기 유발성 및 기타 유해 생리활성물질 생산성 여부

라. 미생물인 경우, 병원성 존재 여부 및 알려진 병원체와의 관련성

4. 공여체에 관한 자료

가. 명칭, 유래 및 분류학적 특성

나. 개발․실험하고자 하는 유전자변형생물체와 유사한 용도의 유전자변형생물체의 공여체로 이용된 사례

다. 공여체 및 근연종에서의 독소생산성, 알레르기 유발성 및 기타 유해 생리활성물질 생산성 여부

라. 미생물인 경우, 병원성 존재 여부 및 알려진 병원체와의 관련성

5. 유전자재조합 특성에 관한 자료

가. 유전자변형에 사용된 현대생명공학기술 상세 실험방법

나. 벡터에 관한 자료

(1) 명칭, 기능 및 유래된 생물체

(2) 구성요소 및 도입유전자를 포함한 지도

(3) 병원성, 독소 등 위해염기서열의 존재여부

(4) 다른 생물체로의 전달 가능성 및 숙주 범위

(5) 선발표지유전자

다. 도입유전자에 관한 자료

(1) 도입유전자의 기능 및 특성

(가) 병원성, 독성 등 위해 발현 가능성

(나) 독소 생산성 및 독력, 생산 독소의 생물학적 및 생화학적 특성

(다) 약제 내성 발현성 및 교차 내성 등 특성

(라) 병원성 및 병독성, 감염대상 범위의 변이성 등 생물학적 특성

(2) 도입유전자의 크기, 명칭 및 염기서열(위해염기서열의 존재여부 포함)

(3) 조절인자 및 유전자 기능에 영향을 주는 기타 인자

6. 안전관리에 관한 자료

가. 신청과제에 대한 기관 생물안전위원회의 생물안전심사 결과자료

나. 유전자변형생물체 취급․보관 안전관리에 관한 자료

(1) 개발 및 실험과정의 위해성평가 자료

(2) 연구시설 설치․운영 현황 (연구시설 신고 및 허가 자료 포함)

(3) 개발 및 실험의 안전관리수칙 및 응급조치사항 포함

(4) 유전자변형생물체 보관․ 표시 및 폐기 방법

(5) 개발 및 실험 관여 전문인력 현황

(6) 실험에 의한 부산물 안전성(해당되는 경우)

다. 유전자변형미생물의 동․식물 접종에 관한 자료(해당되는 경우)

(1) 접종 대상 동․식물의 명칭 및 생물학적 특성

(2) 실험내용 및 폐기 방법

(3) 관련 연구시설 안전관리등급 및 시설 안전관리사항

2)	개발·실험의 위해성평가자료

3)	위해성평가자료는 기재된 순서에 따라 자료별 색인번호 및 쪽을 표시하여야 하	고, 요약보고서가 외국어일 때에는 원문과 번역문을 각각 첨부하여야 하며, 다음	의 어느 하나에 해당하여야 한다.

①	전문학술지에 게재된 자료

②	우수실험실관리기준(GLP)에 의하여 시험한 자료

③	대학 또는 연구기관 등 국내외 전문기관에서 시험한 것으로 기관의 장이 발급	하고 그 내용(이 경우 연구기관의 시험시설 개요, 주요설비, 연구 인력의 구성,	시험자의 연구경력 등이 기재되어야 함)을 검토하여 타당하다고 인정할 수 있	는 자료

6.1.3	변경 신고 절차

경미한 사항을 변경하려는 경우에는 변경신고하여야 한다.

1)	신청인의 사업장 주소, 연락처

2)	연구책임자의 성명, 주소, 연락처

3)	생물안전관리책임자의 성명, 주소, 연락처

승인받은 사항을 변경하려는 경우에는 “유전자변형생물체 개발실험 승인사항 변경신청서”(유전자변형생물체법 시행규칙 별지 제33호서식)에 다음 각 호의 서류를 첨부하여 승인기관의 장에게 제출하여야 한다.

1)	“유전자변형생물체 개발실험 승인서”

2)	변경내용을 증명하는 서류

6.1.4	변경 승인 절차

유전자변형생물체의 개발·실험 승인을 받은 후, 다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 사항을 변경하려는 경우에는 변경승인을 받아야 한다.

1)	공여체, 도입유전자, 숙주, 유전자 도입방법을 변경하거나 추가하려는 경우

2)	실험범위, 실험절차, 연구시설, 연구활동종사자 등 승인된 실험의 위해성에 영향을	미치는 주요사항을 변경하려 할 경우

3)	승인된 실험과정에서 비의도적으로 생산된 LMO를 승인된 실험범위 내에서 이용하	려 할 경우

승인받은 사항을 변경하려는 경우에는 “유전자변형생물체 개발실험 승인사항 변경신청서”(유전자변형생물체법 시행규칙 별지 제33호서식)에 다음 각 호의 서류를 첨부하여 승인기관의 장에게 제출하여야 한다.

1)	“유전자변형생물체 개발실험 승인서”

2)	변경내용을 증명하는 서류

6.2	기관승인실험

6.2.1	기관승인실험대상

시험·연구기관장의 사전승인을 얻어야 하는 실험으로 해당 실험은 다음 각 호와 같다.

1)	제2위험군 이상의 생물체를 숙주-벡터계 또는 DNA 공여체로 이용하는 실험(감염	병예방법 시행규칙 별표 1의 고위험병원체를 제외한다)

감염병예방법 시행규칙 [별표 1] 고위험병원체의 종류(제5조 관련)

1. 세균 및 진균

가. 페스트균(Yersinia pestis)

나. 탄저균(Bacillus anthracis). 다만, 탄저균 중 탄저균 스턴(Bacillus anthracis Sterne)은 제외한다.

다. 브루셀라균(Brucella melitensis, Brucella suis)

라. 비저균(Burkholderia mallei)

마. 멜리오이도시스균(Burkholderia pseudomallei)

바. 보툴리눔균(Clostridium botulinum)

사. 이질균 (Shigella dysenteriae type 1)

아. 클라미디아 시타시(Chlamydia psittaci)

자. 큐열균(Coxiella burnetii)

차. 야토균(Francisella tularensis)

카. 발진티푸스균(Rickettsia prowazekii)

타. 홍반열 리케치아균(Rickettsia rickettsii)

파. 콕시디오이데스균(Coccidioides immitis, Coccidioides posadasii)

하. 콜레라균(Vibrio cholerae O1ㆍO139)

2. 바이러스 및 프리온

가. 헤르페스 B 바이러스(Cercopithecine herpesvirus 1, Herpes B virus)

나. 크리미안 콩고 출혈열 바이러스(Crimean-Congo haemorrhagic fever virus)

다. 이스턴 이콰인 뇌염 바이러스(Eastern equine encephalitis virus)

라. 에볼라 바이러스(Ebola virus)

마. 헨드라 바이러스(Hendra virus)

바. 라싸 바이러스(Lassa virus)

사. 마버그 바이러스(Marbug virus)

아. 원숭이폭스 바이러스(Monkeypox virus)

자. 니파 바이러스(Nipah virus)

차. 리프트 벨리열 바이러스(Rift Valley fever virus)

카. 남아메리카 출혈열 바이러스(South American haemorrhagic fever; Flexal,  Guanarito, Junin,  Machupo, Sabia)

타. 황열 바이러스 (Yellow fever virus)

파. 서부 마 뇌염 바이러스 (Western equine encephalitis virus)

하. 진드기 매개뇌염 바이러스(Tick-borne encephalitis complex virus; Central European tick-borne encephalitis virus, Far Eastern tick-borne encephalitis virus, Siberian tick-borne encephalitis virus, Kyasanur Forest disease virus, Omsk haemorrhagic fever virus)

거. 두창 바이러스(Variola virus)

너. 소두창 바이러스(Variola minor virus, Alastrim)

더. 베네주엘라 이콰인 뇌염 바이러스(Venezuelan equine encephalitis virus)

러. 중증 급성호흡기 증후군 코로나 바이러스(SARS-CoV)

머. 조류 인플루엔자 인체감염증 바이러스(인체 유래 H5N1, H7N7, H7N9). 다만, 해당 바이러스 중 세계보건기구가 백신 후보로 인정하는 바이러스(백신 후보주) 제외한다.

버. 고위험 인플루엔자 바이러스(1918 influenza virus의 8개 병원성 유전자중 하나 이상의 유전자를 포함하는 influenza virus)

서. 전염성 해면상 뇌병증 병원체(Transmission of spongiform encephalopathy agent; Bovine spongiform encephalopathy prion, variant Creutzfeldt-Jakob disease prion)

어. 중동 호흡기 증후군 코로나 바이러스(MERS-CoV)

3. 그 밖에 보건복지부장관이 외부에 유출될 경우 공중보건상 위해 우려가 큰 세균, 진균, 바이러스 또는 프리온으로서 긴급한 관리가 필요하다고 인정하여 지정ㆍ공고하는 병원체

2)	대량배양을 포함하는 실험

3)	척추동물에 대하여 몸무게 1kg당 50% 치사독소량(LD50)이 0.1㎍ 이상 100㎍ 이하	인 단백성 독소를 생산할 수 있는 유전자를 이용하는 실험. 해당 단백성 독소는 별	표 8과 같다.

유전자재조합실험지침 [별표 8] 기관승인대상 단백성 독소(제9조 제1항 제3호 관련)

1. Abrin

2. Clostridium perfringens epsilon toxin

3. Conotoxins

4. Ricin

5. Saxitoxin

6. Shiga-like toxin

7. Shigatoxin

8. Staphylococcal enterotoxins

9. Tetrodotoxin

10. 기타 척추동물에 대하여 몸무게 1㎏당 50% 치사독소량이 0.1㎍ 이상 100㎍ 이하인 것으로 알려진 단백성 독소

6.2.2	기관승인실험신청

기관승인실험을 수행하고자 하는 시험연구책임자는 “유전자재조합실험승인신청서” (유전자재조합실험지침 별지 제1호서식)에 다음 각 호의 서류(전자문서를 포함한다)를 첨부하여 해당 시험연구기관장에게 제출해야 한다.

1)	위해성 평가서

2)	연구계획서

6.2.3	기관승인실험승인

시험연구기관장은 기관승인실험 승인신청이 있을 때에는 기관생물안전위원회의 의견을 들어 제출자료를 심사하고, 승인여부를 결정하여 “유전자재조합실험승인서” (유전자재조합실험지침 별지 제2호서식) 또는 유전자재조합실험불승인서를 시험연구책임자에게 교부해야 한다.

6.2.4	기관승인실험변경

기관실험승인을 받은 시험·연구책임자가 승인사항을 변경하고자 하는 경우에는 “유전자재조합실험승인사항변경승인신청서” (유전자재조합실험지침 별지 제3호서식)에 다음 각 호의 서류를 첨부하여 해당 시험·연구기관장에게 제출해야 한다. 이 경우 심사 및 결과통보는 제6.2.3항을 준용한다.

1)	유전자재조합실험승인서

2)	승인사항 변경에 따른 위해성 평가서

3)	변경된 연구계획서

6.3	기관신고실험

6.3.1	기관신고실험대상

기관신고실험은 시험·연구기관장에게 사전에 신고해야 하는 실험으로 해당 실험은 다음 각 호와 같다.

1)	제1위험군의 생물체를 숙주-벡터계 및 DNA 공여체로 이용하는 실험(제6.2항 기관	승인실험과 제6.4항 면제실험에 해당하지 않는 실험에 한한다)

2)	기타 기관생물안전위원회에서 신고대상으로 정한 실험

6.3.2	기관신고실험신고

기관신고실험을 수행하고자 하는 시험·연구책임자는 사전에 시험·연구기관장에게 “유전자재조합실험신고서” (별지 유전자재조합실험지침 제4호서식)에 연구계획서를 첨부하여 제출해야 한다.

6.4	면제실험

6.4.1	면제실험대상

면제실험은 국가승인 또는 기관승인·신고 없이 수행 가능한 실험으로 해당 실험은 유전자재조합지침 별표 9와 같다. 다만, 별표 9에 해당하면서 다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 실험은 면제실험 대상으로 하지 않는다.

1)	제3위험군 이상의 생물체를 이용하는 실험

2)	제6.2항 기관승인실험과 제6.3 기관신고실험

유전자재조합실험지침 [별표 9] 면제실험 범위(제11조 제1항 관련)

1. 다음 각 목에 해당하는 숙주-벡터계를 사용하고 제1위험군에 해당하는 생물체만을 공여체로 사용하는 실험

가. Escherichia coli K12 숙주-벡터계

나. Saccharomyces cerevisiae 숙주-벡터계

다. Bacillus subtilis(또는 licheniformis) 숙주-벡터계

2. 잘 알려진 생리적 기작에 의하여 자연 상태에서 DNA 교환이 일어나는 종의 DNA 절편으로 구성된 특이적 유전자재조합분자를 이용하는 실험. 해당 종의 그룹별 목록은 다음 각 목과 같다.

가. 그룹 1

Genus Citrobacter - Levinea 포함

Genus Enterobacter

Genus Erwinia

Genus Escherichia

Genus Klebsiella - oxytoca 포함

Genus Salmonella - Arizona 포함

Genus Shigella

Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas mendocina 및 Pseudomonas putida

Serratia marcescens

Yersinia enterocolitica

나. 그룹 2

Bacillus amyloliquefaciens

Bacillus aterrimus

Bacillus globigii

Bacillus licheniformis

Bacillus nato

Bacillus niger

Bacillus pumilus

Bacillus subtilis

다. 그룹 3

Streptomyces aureofaciens

Streptomyces coelicolor

Streptomyces rimosus

라. 그룹 4

Streptomyces cyaneus

Streptomyces griseus

Streptomyces venezuelae

마. 그룹 5

Streptococcus mutant(또는 Streptococcus lactis) DNA를 Streptococcus sanguis로 도입하는 경우

바. 그룹 6

Streptococcus faecalis

Streptococcus mutans

Streptococcus pneumoniae

Streptococcus pyogenes

Streptococcus sanguis

6.4.2	유의사항

면제실험을 수행하는 시험·연구책임자는 생물체의 위험군을 고려하여 적절한 밀폐등급 연구시설 내에서 실험을 수행해야 한다.

6.5	기타

기타 실험의 분류가 있는 경우 기타에 추가

7.	시설의 개요

7.1	생물안전 연구시설 구성

7.1.1	생물안전실험구역 (예시)

OOO 생물안전연구시설은 O층 밀폐구역에 생물안전 2등급 연구시설(BL2)으로 구성되고, 바닥은 에폭시로 처리되어 있다.

생물안전연구시설은 총 면적 OOO㎡ 으로 병원체를 실험하는 실험구역(OOOO 등), 동물실험구역 (OOOO 등), 개인보호구 착용 및 준비구역(OOOO 등) 기타 구역(OOOO 등)으로 구성되어 있다.

7.1.2	기타 구역 (예시)

OOO 생물안전연구시설의 O층에는 헤파필터층을 구성되어, O층 실험실의 유지보수를 수행할 수 있도록 구성되어 있다.	OOO 생물안전연구시설의 O층에 공조실 및 팬룸으로 구성되어 있으며, O층에는 폐수처리스템, PIT, 우수조, 기계실로 구성이 되어 있다.

평면도

[ OOO기관 생물안전 연구시설 평면도 ]

7.2	생물안전 연구시설 호실 및 실명 (예시)

호실	실명	구역	용도
201	시료처리실
202	연구실1
301	사육실1
302	사육실2

7.3	생물안전 연구시설 차압 계통도

밀폐구역 내 음압은 내부 방향으로 구역별 OOO(예:-10Pa)의 차압이 형성되도록 구성되었으며, 최대 음압구역의 경우, OOO(예:-70Pa)로 설정되었다.

차압계통도

[ OOO기관 생물안전 연구시설 차압계통도 ]

7.4	폐기물/폐수처리시설 구성 (예시) 해당시

(사체처리기, 폐수소독설비, EDS(Effluent Decontamination Systems) 등)

폐수킬링탱크는 지하O층 기계실에 위치하며,	EDS(Effluent Decontamination Systems)에 폐수를 유입시켜서, 생물학적 활성을 제거하고, 냉각기를 거쳐서 폐수탱크에 저장 후 위탁처리한다.

폐수물/폐수처리 계통도

[ OOO기관 생물안전 연구시설 폐기물/폐수처리 계통도 ]

7.5	고압가스시설 (해당시)

7.5.1	고압가스계통도

고압가스계통도

[ OOO기관생물안전 연구시설 고압가스계통도 ]

7.5.2	고압가스사용 구역

호실	실명	구역	사용 고압가스명

8.	빌트인 장비의 개요

8.1	빌트인 장비배치도

빌트인장비 배치도

[ OOO기관 생물안전 연구시설 빌트인장비 배치도 ]

8.2	빌트인장비 배치현황 (예시)

호실	실명	구역	빌트인장비명	수량
			(양문형)고압증기멸균기
			패스룸
			패스박스
			훈증챔버
			기밀문
			기타

9.	실험장비의 개요

9.1	실험장비배치도

실험장비장비 배치도

[ OOO기관 생물안전 연구시설 실험장비 배치도 ]

9.2	실험장비 배치현황	(예시)

호실	실명	구역	실험장비명	수량
			생물안전작업대
			인큐베이터
			CO2 인큐베이터
			배양기
			냉장/냉동고
			PCR
			원심분리기
			훈증멸균장비
			아이솔레이터
			사육장비 (소동물, 중동물, 대동물, 곤충 등)

호실	실명	구역	실험장비명	수량
			부검대
			균질화기
			진탕기
			초음파 파쇄기
			피펫 및 관련 장비
			기타

10.	통신장비의 개요 (권장)

10.1	통신장비배치도

통신장비 배치도

[ OOO기관 생물안전 연구시설 통신장비 배치도 ]

10.2	통신장비 배치현황 (예시)

호실	실명	구역	실험장비명	수량
			전화기/인터폰
			FAX
			LAN

11.	비상대응장비의 개요

11.1	비상대응장비 배치도

비상대응장비 배치도

[ OOO기관 생물안전 연구시설 비상대응장비 배치도 ]

11.2	비상대응장비 배치현황 (예시)

호실	실명	구역	실험장비명	수량
			비상샤워기
			(휴대용)아이샤워기
			손소독기
			소화기/소방관련 장비
			스필키트
			청소도구
			구급약
			기타 비상대응장비

12.	변경관리

다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 사항을 변경하는 경우, 지침 등은 개정될 수 있으며,	개정은 기관생물안전위원회의 심의를 거쳐서 OOO기관장이 승인한다.

1)	연구시설 출입자 교육 훈련에 관한 사항

2)	연구시설 운영 관리에 관한 사항

3)	연구시설 내 작업수행 표준운영 절차

4)	연구시설 출입연구자 건강관리 프로그램

5)	연구시설 내 빌트인 장비 변경

6)	연구시설 관리 및 시설 유지 변경

7)	연구시설 운영 목적 및 정책의 변경

8)	기타 연구시설 내 생물안전확보의 변경 등

[Prototype ABL2] 제  장  생물안전관리 조직

1.	역할, 책임 및 권한

1.1	OOO 기관장

※“생물안전관리 조직”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

시험·연구기관장은 기관 내에서 수행되는 유전자재조합실험의 생물안전에 대한 책임을 지며 다음 각 호의 사항을 준수해야 한다.

1)	기관생물안전위원회의 구성·운영 및 생물안전관리책임자의 임명

2)	자체 생물안전관리규정의 제·개정

3)	연구시설의 설치·운영에 대한 관리 및 감독

4)	기관 내에서 수행되는 유전자재조합실험에 대한 관리 및 감독

5)	시험·연구종사자에 대한 생물안전 교육·훈련 및 건강관리 실시

6)	기타 유전자재조합실험의 생물안전 확보에 관한 사항

7)	윤리적 문제발생의 사전방지에 필요한 조치 강구

1.2	기관생물안전위원회 (IBC)

1.2.1	기관생물안전위원회 구성 및 역할

기관생물안전위원회는 위원장 1인 및 생물안전관리책임자 1인을 포함한 5인 이상의 내·외부위원으로 구성하고 다음 각 호의 사항에 대하여 시험·연구기관장의 자문에 응한다.

1)	유전자재조합실험의 위해성평가 심사 및 승인에 관한 사항

2)	생물안전 교육·훈련 및 건강관리에 관한 사항

3)	생물안전관리규정의 제·개정에 관한 사항

4)	기타 기관 내 생물안전 확보에 관한 사항

기관생물안전위원회는 시험·연구책임자로 하여금 실험의 생물안전 확보에 관한 사항에 대하여 보고를 하게 할 수 있다.

1.2.2	심의사항

기관생물안전위원회에서 이루어지는 실험계획에 대한 생물안전의 심의는 유전자변형생물체법 통합고시 별표 9-7에서 규정하는 위해성 평가자료에 근거하여 진행된다. 해당 심사는 유전자변형생물체(LMO)의 개발 및 이용실험인 경우에 해당하나, 병원성 미생물을 취급하는 실험에 대해서 기관 결정에 따라 기관생물안전위원회의 심의 대상으로 고려할 것을 권장한다.

실험계획에 대한 기관생물안전위원회 심사는 지침에서 정의된 실험생물체의 위험군과 실험방법 등을 바탕으로, 해당 실험에 적합한 밀폐방법 및 수준을 결정한다. 실험의 종류는 위해수준에 따라 기관신고, 기관승인 그리고 국가승인으로 구별된다. 국가승인 실험은 유전자재조합실험지침 및 유전자변형생물체법 통합고시에 근거하여, 기관생물안전위원회의 기관승인을 얻은 후 질병관리본부에 승인을 신청하여야 한다.

국가승인 실험에 대한 심사는 총 3단계에 걸쳐 진행된다. 우선 실험시설의 설치에 대한 신고 및 허가 여부를 확인하고, 동물실험을 수행할 경우 동물실험윤리위원회(IACUC)로부터 시설 및 실험에 대하여 승인을 받았는지를 확인한 후, 시험·연구기관의 기관생물안전위원회 승인을 획득하였는지를 확인한다. 이후 실험자, 실험시설, 실험장비에 대한 안전성을 확인한 후 LMO 개발 및 이용 과정에 대한 안전성을 미생물학적 위해성평가의 원칙에 따라 단계적이며 복합적으로 평가한다.

기관생물안전위원회 위원은 위험요소의 특성에 따라 숙주가 LMO로 변화하고 취급되는 과정에서 발생할 수 있는 위해성을 단계적으로 판단하고, 최종적으로 유전자재조합실험의 상당하는 물리적 밀폐수준을 결정한 후 실험생물체의 특성에 따라 추가적인 밀폐조치가 필요한지 여부에 따라 상당하는 최종 밀폐수준을 결정한다.

기관생물안전위원회에서는 유전자재조합실험의 위해성평가 및 심사체계를 참고하여, 기관의 특성 및 상황에 맞는 심사를 진행할 수 있다.

[미생물학적 위해성평가 원칙에 따른 실험의 위해성평가항목]

1.3	동물실험윤리위원회 (IACUC)

1.3.1	동물실험윤리위원회 구성 및 역할

동물실험윤리위원회는 위원장을 포함하여 4인 이상 15인 이내의 위원으로 구성하고 다	음 각 호의 사항을 심의·의결한다.

1)	동물실험계획서의 적정성 검토 및 승인

2)	동물시설의 운영에 관한 사항

3)	생물학적 유해물질을 이용한 동물실험의 적정성에 관한 사항

4)	실험자나 실험동물기술자에 대한 교육에 관한 사항

5)	위원장 및 위원이 실험동물 사용 및 관리에 필요하다고 인정하는 사항

6)	기타 실험동물에 관한 법률에 명시된 사항은 기관 내 실험동물운영위원회 역할을	수행한다.

1.3.2	권한과 의무

동물실험윤리위원회는 다음 각 호의 사항에 대하여 지도·감독할 권한과 의무를 가진다.

1)	동물실험의 윤리적·과학적 타당성에 대한 심의 및 승인

2)	실험동물의 생산·도입·관리·실험 및 이용과 실험이 끝난 후 해당 실험동물의 처리에	관한 확인 및 평가

3)	실험동물실 종사자 및 연구자 등에 대한 교육훈련 등의 확인 및 평가

4)	실험동물실 운용 실태의 확인 및 평가

1.3.3	기타

기타 동물실험윤리위원회의 세부사항은 「OOO기관 동물실험윤리위원회 규정」에 따른다.

1.4	기타 위원회 (해당시)

1.4.1	기타 위원회 역할

OOO기관장은 생물안전 관리에 관한 중요사항을 심의 및 자문을 위해서 관련 위원회를 소집하거나 구성할 수 있다.

1.4.2	기타

위원회 규정의 세부사항은 OOO기관에서 정한 사항에 따른다.

1.5	생물안전관리부서 (해당시)

생물안전관리 전담부서는 OOO과로 한다.

생물안전 관리를 전담하며 기관생물안전관리자가 소속된 부서를 말한다.

1)	기관생물안전위원회의 운영관리

2)	기관 내 연구시설의 생물안전 실태점검에 관한 사항

3)	기관 생물안전 교육·훈련계획 수립에 관한 사항

4)	생물안전관리규정 및 시설안전관리규정의 제·개정(안) 작성에 관한 사항

5)	연구시설의 설치운영 신고, 허가 또는 변경 관련 업무처리

6)	연구시설 사용 신청서 접수 및 결과 통보

7)	연구시설 내 수행 실험에 대한 위해성 평가 검토

8)	실험실안전 및 생물안전 향상에 관한 사항

9)	실험실 안전사고 발생 시 원인조사 및 사후처리 및 대책 수립에 관한 사항

10)	연구시설ㆍ장비 관리 및 운영에 대한 제반 행정 사항

11)	연구시설ㆍ장비 관리 전문용역 관리 실무

12)	연구시설 정기․수시 생물안전 현장 점검

13)	연구시설 출입자 승인

14)	연구시설 설비ㆍ장비 이상 보고 시 종합 대비 및 대응

15)	「유전자변형생물체법」에 따른 연구시설 안전 운영ㆍ관리 및 관련 기록물 작성 및	보존

16)	기타 생물안전 확보에 필요한 사항 및 기관생물안전위원회 지시사항 이행

17)	실험실안전 및 생물안전 예산 확보·집행에 관한 사항

18)	실험실 안전관리 계획 수립에 관한 사항

1.6	연구시설의 설치운영 책임자의 책무

연구시설 설치운영 책임자는 「유전자변형생물체법」에 따라 연구시설의 신고ㆍ허가업무에 대한 최종 승인을 한다.

1.7	기관생물안전관리책임자

생물안전에 관련된 전반적인 사항에 대해 관리ㆍ감독하는 자를 말한다. 기관생물안전관리책임자는 다음 각 호의 사항에 관하여 OOO기관의 장을 보좌한다.

1)	기관생물안전위원회 운영에 관한 사항

2)	기관 내 생물안전 준수사항 이행 감독에 관한 사항

3)	기관 내 생물안전 교육·훈련 이행에 관한 사항

4)	실험실 생물안전 사고 조사 및 보고에 관한 사항

5)	생물안전에 관한 국내·외 정보수집 및 제공에 관한 사항

6)	기관 생물안전관리자 지정에 관한 사항

7)	기타 기관 내 생물안전 확보에 관한 사항

기관생물안전관리책임자는 기관 내 실험실에 대한 총괄적인 생물안전관리를 수행․감독하는 책임자로서, 기관의 특성에 따른 생물안전 프로그램을 구축하고 이를 이행하는 주체이다. 기관생물안전관리책임자는 기본적으로 기관생물안전위원회의 운영이 적절하도록 유지․관리하여야 하며, 실험실에서 마련된 위해성평가보고서 혹은 사전위해인자요인분석 보고서 등에 의해 확보된 자료를 바탕으로 기관 내 생물안전 관리계획을 수립하고 이행한다.

[기관 내 생물안전 위해관리 정보 흐름도]

1.8	기관생물안전관리자 (권장)

기관생물안전관리자는 생물안전관리책임자를 보좌하고 관련 행정 및 실무를 담당한다. 생물안전관리자는 기관의 규모와 특성을 고려하여 기관 단위, 부서 단위 또는 연구실 단위로 1인을 지정할 수 있으며, 그 역할은 아래와 같다.

1)	기관생물안전위원회 운영에 관한 사항

2)	기관 내 생물안전 준수사항 이행 감독에 관한 사항

3)	기관 내 생물안전 교육·훈련 이행에 관한 사항

4)	실험실 생물안전 사고 조사 및 보고에 관한 사항

5)	생물안전에 관한 국내·외 정보수집 및 제공에 관한 사항

6)	기타 기관 내 생물안전 확보에 관한 사항

1.9	시험연구책임자

시험·연구책임자는 생물안전관리규정을 숙지하고 생물안전사고의 발생을 방지하기 위한 지식 및 기술을 갖추어야 하며 다음 각 호의 임무를 수행해야 한다.

1)	해당 실험실의 안전현황, 유해인자별 위험분석, 안전ㆍ비상조치계획에 대한 사전유	해인자 위험분석

2)	해당 유전자재조합실험의 관리·감독

3)	시험·연구종사자에 대한 생물안전 교육·훈련

4)	유전자변형생물체의 취급관리에 관한 사항의 준수

5)	유전자변형생물체의 사용·폐기 등 관리에 대한 책임

6)	비상연락망 유지 및 보안강화

7)	안전사고 처리 및 보고 후 “사고보고서” 작성

8)	필요시 실험실 특성에 맞는 실험실안전 및 생물안전 수칙 작성 및 배치 등

9)	기타 해당 유전자재조합실험의 생물안전 확보에 관한 사항

연구과제를 계획하고 있는 과제책임자는, 유전자변형생물체법에 따라, 생물안전등급에 따른 연구시설 설치운영 등에 관한 사항을 사전에 검토할 수 있도록 연구과제제안서 등을  기관생물안전위원회 심사 안건을 위원회에 제출해야 하며 취급 생물체 특성에 따라 특별히 다루어야할 종사자의 안전, 위험 예방 및 대응방안, 신속보고체계 및 환경방출방지 등의 내용이 포함되어야 한다.

1.10	시험연구종사자

실험실에서 실험 활동에 종사하는 자를 말한다. 연구활동종사자는 다음 각 호의 사항을 이행하여 자신 및 주위 환경의 안전을 도모하여야 한다.

1)	실험실안전 및 생물안전 교육의 이수

2)	실험실 안전 수칙 및 사고 발생 시 대처요령 등 준수

3)	실험실안전 및 생물안전이 환경에 영향을 미칠 우려가 있을 경우 즉시 보고 및 조	치 강구

4)	사고나 상해 발생 시 즉시 보고

5)	자기 건강에 이상을 느낀 경우, 또는 중증 혹은 장기간의 병에 걸린 경우 시험연구	책임자 또는 기관장에게 보고

6)	기타  해당 실험의 위해성에 따른 실험실안전 및 생물안전 관리 절차 준수

1.11	의료관리자 (권장)

「의료법」에 따른 의사 및 간호사의 자격을 갖춘 자로 시험연구종사자 등의 의료 자문 등 보건에 관한 기술적인 사항에 관하여 지도·조언하는 업무를 수행하는 자를 말한다.

1)	실험실안전에 관련한 의료자문에 관한 사항

2)	응급사고 발생시 응급처치 및 자문에 관한 사항

기관 내 의료관리자를 둘 수 없을 경우, 지역사회 병․의원과 연계하여 필요시 자문을 제공할 수 있는 의료관계자를 선임하여 운영하는 것도 도움이 된다. 또한 생물안전 사고가 발생할 경우, 연계된 병․의원과의 합동비상대응훈련 등을 통하여 실질적인 대응능력 및 조치역량을 강화하는 프로그램의 운영을 권장한다. (기관의 상황에 따라 적용)

1.12	유지보수관계자

시설관리부서 및 유지보수 제반 기술을 갖춘 전문용역회사의 관계자들로서 다음의 업무를 상시 수행한다. (계약 사항에 따라서 수정)

1)	시설의 일정 압력 유지, 항온/항습, EFU, HVAC, 전기, Control system, 빌트인장비	등 시설ㆍ장비 전반에 대한 주 1회 이상 점검 실시

2)	연구시설의 기계설비, 전기설비, 통신설비, 소방설비, 폐수처리, 헤파필터 교체,	빌	트인 장비 및 시설검증에 관한 사항

3)	월 1회 이상 주요 점검사항에 대한 점검 및 설비 이상 등에 대한 보고

4)	월 1회 통합보고서 연구시설 관리부서로 제출

5)	설비 이상, 오작동 등에 대한 원인 조사, 보수 및 관련 보고서 제출

6)	기타 시설의 생물안전관리ㆍ점검과 관련된 사항

1.13	고위험병원체 전담관리자 (해당시)

고위험병원체의 안전관리를 위하여 안전교육, 점검, 사고대처, 법률이행 등 고위험병원체 안전관리 업무를 수행하는 자를 말한다.

1.14	실험동물관리자

“동물실험윤리위원회”에서 정한 ‘실험동물관리자’의 역할로 규정한다.

1.15	기타

기타 관리자 또는 담당자가 있을 경우 기술

2.	생물안전관리 책임자 및 관리자 지정

2.1	기관생물안전관리책임자

1)	「고등교육법」에 따른 대학 또는 이와 같은 수준 이상의 학교에서 생물학, 수의학, 의	학 등 보건 관련 학과에서 석사학위를 취득 한 후 생물안전관리자 교육을 8시간 이	상(3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20시간 이상) 이수한 사람

2)	「고등교육법」에 따른 전문대학 또는 이와 같은 수준 이상의 학교에서 생물학, 수의	학, 의학 등 보건 관련 학과를 졸업한 후 연구실 안전관리 업무에 2년 이상의 실무경	력이 있는 사람으로서 생물안전관리자 교육을 8시간 이상(3등급 연구시설 보유 기관	의 경우 20시간 이상) 이수한 사람

3)	「고등교육법」에 따른 전문대학 또는 이와 같은 수준 이상의 학교에서 이공계학과를	졸업한 후 연구실 안전관리 업무에 4년 이상의 실무경력이 있는 사람으로서 생물안	전관리자 교육을 8시간 이상(3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20시간 이상) 이수한	사람

[기관생물안전관리책임자의 임명 기준]

* 실무경력은 연구실 안전관리 업무에 한정함

학력	전공	학위	실무경력	생물안전교육
대학 이상	생물학, 수의학, 의학 등 보건 관련 학과	석사 이상	-	8시간 이상 이수 (3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20시간 이상 이수)
전문대학 이상		전문학사 이상	2년 이상
	이공계 학과	전문학사 이상	4년 이상

2.2	기관생물안전관리자 (권장)

1)	「국가기술자격법」에 따른 국가기술자격 중 안전관리분야 기사 이상의 자격을 취득한	사람으로서 생물안전관리자 교육을 8시간 이상(3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20	시간 이상) 이수한 사람

2)	「국가기술자격법」에 따른 국가기술자격 중 안전관리분야 산업기사 자격을 취득한 후	연구실 안전관리 업무에 1년 이상의 실무경력이 있는 사람으로서 생물안전관리자 교	육을 8시간 이상(3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20시간 이상) 이수한 사람

3)	엔지니어링산업진흥법에 따른 건축설비, 전기공사, 공조냉동, TAB 등 분야의 중급기	술자 이상의 자격을 보유한 자로서 생물안전관리자 교육을 8시간 이상(3등급 연구시	설 보유 기관의 경우 20시간 이상) 이수한 사람

4)	「고등교육법」에 따른 대학 또는 이와 같은 수준 이상의 학교에서 생물학, 수의학, 의	학 등 보건 관련 학과에서 석사학위를 취득 한 후 생물안전관리자 교육을 8시간 이	상(3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20시간 이상) 이수한 사람

5)	「고등교육법」에 따른 전문대학 또는 이와 같은 수준 이상의 학교에서 생물학, 수의	학, 의학 등 보건 관련 학과를 졸업한 후 연구실 안전관리 업무에 2년 이상의 실무경	력이 있는 사람으로서 생물안전관리자 교육을 8시간 이상(3등급 연구시설 보유 기관	의 경우 20시간 이상) 이수한 사람

6)	「고등교육법」에 따른 전문대학 또는 이와 같은 수준 이상의 학교를 졸업한 후 연구	실 안전관리 업무에 4년 이상의 실무경력이 있는 사람으로서 생물안전관리자 교육을	8시간 이상(3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20시간 이상) 이수한 사람

7)	「초ㆍ중등교육법」에 따른 고등기술학교 또는 이와 같은 수준 이상의 학교를 졸업하	고 연구실 안전관리 업무에 6년 이상의 실무경력이 있는 사람으로서 생물안전관리자	교육을 8시간 이상(3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20시간 이상) 이수한 사람

[기관생물안전관리자의 임명 기준]

* 실무경력은 연구실 안전관리 업무에 한정함

학력	국가자격증 혹은 기술자격증	실무경력	생물안전교육
생물안전관리책임자의 지정 기준에 해당하거나 다음의 자격요건을 충족한 사람
-	「국가기술자격법」의 안전관리분야 기사 이상	-	8시간 이상 이수 (3등급 연구시설 보유 기관의 경우 20시간 이상 이수)
-	「국가기술자격법」의 안전관리분야 산업기사	1년 이상
-	엔지니어링산업진흥법의 건축설비, 전기공사, 공조냉동, TAB 등 분야의 중급기술자 이상의 자격	-
고등기술학교	-	6년 이상

2.3	고위험병원체 전담관리자 (해당시)

OOO기관장은 고위험병원체의 취급․관리에 필요한 충분한 지식 및 기술을 갖춘 전담관리자를 임명하고 그 책임과 권한을 부여해아 한다. 고위험병원체 전담관리자 임명시 자격 권고기준은 다음과 같으며, 기관생물안전관리책임자는 고위험병원체 전담관리자가 겸임할 수 있다.

1)	「고등교육법」에 따른 전문대학 또는 이와 같은 수준 이상의 학교에서 생물 또는	보건 관련 학과를 졸업한 후 병원체 보존․관리 업무에 2년 이상의 실무경력이 있는	자

※ 생물 관련 학과 : 미생물학, 생명과(공)학, 생화학, 분자생물학, 유전공학 등

2)	「고등교육법」에 따른 전문대학 또는 이와 같은 수준 이상의 학교에서 이공계 학과	를 졸업한 후 병원체 보존․관리 업무에 4년 이상의 실무경력이 있는 자

※ 이공계 학과 : 식품영양학, 식품공학, 환경관리학, 유기화학 등

3)	「초․중등교육법」에 따른 고등기술학교 또는 이와 같은 수준 이상의 학교를 졸업하	고 병원체 보존․관리 업무에 6년 이상의 실무경력이 있는자

2.4	기타

기존 기관생물안전관리책임자와 기관생물안전관리자의 퇴직 및 인사이동 등으로 인하여 사전에 교육이수가 어렵다고 관계 중앙행정기관의 장이 인정하는 경우, 기관생물안전관리책임자 및 기관생물안전관리자의 교육이수를 6개월간 유예할 수 있음

3.	의료기관 및 의료관리자 지정

3.1	의료기관

연구활동종사자가 실험 중 감염 또는 부상을 당한 경우 즉시 실험책임자 및 의료관리자	에게 통보하고 통보 받은 연구책임자 또는 관리자는 실험자가 적절한 의료적 처치를 받	을 수 있도록 조치한다. 즉각적 의료적 처치가 가능하도록 의료관리자에게 긴급연락하고 의료기관으로 보낼 수 있도록 의료기관을 지정한다.

의료기관명	의료기관 주소	의료기관 연락처

기관생물안전책임자는 지정된 의료기관에 취급하는 병원체에 대한 정보를 제공하고, 지	속적으로 생물안전정보를 교류한다.

3.2	의료관리자 (권장)

감염 및 방출 등에 대비하여 OOO기관 내 의료관리자를 임명하고, OOO기관 내 생물안전과 관련하여 의료에 대한 자문 및 생물안전사고 발생시 이에 대한 초등 조치를 수행한다.

의료관리자 성명	연락처	자격사항

기관 내 의료관리자를 둘 수 없을 경우, 지역사회 병․의원과 연계하여 필요시 자문을 제공할 수 있는 의료관계자를 선임하여 운영하는 것도 도움이 된다. 또한 생물안전 사고가 발생할 경우, 연계된 병․의원과의 합동비상대응훈련 등을 통하여 실질적인 대응능력 및 조치역량을 강화하는 프로그램의 운영을 권장한다. (기관의 상황에 따라 적용)

4.	생물안전 조직도 및 업무분장

4.1	생물안전 조직도

생물안전 조직도

[OOO기관 생물안전 조직도]

담당업무	성명	소속	직위	연락처(내선)	핸드폰
기관장
설치운영책임자
기관생물안전 관리책임자
기관생물안전 관리자
시험연구책임자
연구활동종사자
의료관리자
고위험병원체 전담관리자
유지보수관리자
실험동물관리자

4.2	생물안전업무분장

번호	업무내용	업무수행
1	연구시설 사용 신청서 접수 및 결과 통보
2	연구시설 내 수행 실험에 대한 위해성 평가 검토
3	연구시설 사용자 교육 실시 및 사용자 관리ㆍ점검
4	연구시설 내 생물안전사고 발생 확인 및 대응 지원
5	연구시설ㆍ장비 관리 및 운영에 대한 제반 행정 사항
6	연구시설ㆍ장비 관리 전문용역 관리 실무
7	연구시설 정기․수시 생물안전 현장 점검
8	연구시설 출입자 승인
9	연구시설 설비ㆍ장비 이상 보고시 종합 대비 및 대응
10	「유전자변형법」 규정에 따른 연구시설 안전 운영ㆍ관리 및 관련 기록물 작성 및 보존
11	기타 생물안전 확보에 필요한 사항 및 생물안전위원회 지시사항 이행

4.3	유지보수 전문위탁기관 업무분장 (해당시)

성명	소속	직위	담당업무	연락처(내선)	핸드폰

4.4	시설/빌트인장비/실험장비 업체 연락처

장비명	소속	성명	직위	연락처(내선)	핸드폰

[Prototype ABL2] 제  장  연구시설 운영관리

1.	연구시설의 안전 운영 관리

※“연구시설 운영관리”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	연구시설의 설치 및 운영 기준

개발 또는 실험하는 유전자변형생물체의 위해성 및 개발·실험의 위험성을 평가하여, 연구	시설의 안전관리등급별 설치운영기준을 준수하여야 한다.

1)	일반적인 유전자변형실험: 「유전자변형생물체법 통합고시」별표 9-1

2)	대량배양(10리터 이상 배양용량)을 포함하는 유전자변형실험: 「유전자변형생물체법	통합고시」별표 9-2

3)	동물을 이용하는 유전자변형실험: 「유전자변형생물체법 통합고시」별표 9-3

2.	연구시설 사용 승인 절차

2.1	연구시설 사용 계획 심의

2.1.1	시험·연구책임자의 책무

시험·연구책임자는 「OOO기관 생물안전관리지침」 “제  장 생물안전관리지침 개요, 6. 실험의 분류”에 따라 심의를 신청한다.

2.1.2	기관생물안전위원회 심의

기관승인실험의 경우, 시험·연구책임자는 「유전자재조합실험지침」 별지 제1호서식의 “유전자재조합실험승인신청서” (또는 자체 기관양식)에 다음 각 호의 서류(전자문서를 포함한다)를 첨부하여 OOO기관장에게 제출해야 하고, 기관생물안전위원회의 심의를 받는다.

1)	위해성 평가서

2)	연구계획서

2.1.3	동물실험윤리위원회 심의

실험동물을 이용한 실험은 동물실험윤리위원회규정 및 기타 관련 지침에 따라 동물실험윤리위원회의 심의를 받는다.

2.1.4	연구시설 사용 일정

시험·연구책임자는 연구계획서에 사용하고자 하는 연구시설(실험실명, 실험장비 등)을 기입하여, 생물안전관리부서(또는 관련 담당자)가 연구시설 사용 일정을 조율할 수 있도록 한다.

2.2	심의 및 검토 사항

2.2.1	위원회 심의 사항

기관생물안전위원회규정 (및 동물실험윤리위원회규정)에 따라서 시험·연구책임자가 제출한 “유전자재조합실험승인신청서” (또는 자체 기관양식)를 심의 및 검토를 한다.

2.2.2	주요 고려 사항

1)	적정 밀폐이용 및 밀폐수준 결정 여부에 대한 확인, 검토

- 이용 생물체의 미생물학적 위험군 검토

- 독소 및 내성 유전자 사용 검토

- 생물체의 숙주 범위 또는 감수성 변화 여부 검토

- 유전자재조합으로 인한 생물체의 감수성 변화 여부 검토

- 배양규모 및 농도 검토

- 실험과정 중 발생 가능한 감염경고 및 감염량

- 실험동물 사용 유무 검토

- 환경에서의 유전자변형생물체 안정성(생존능력)검토

- 효과적인 폐기물 검토

2)	생물안전관리 및 실험의 표준작업절차 마련, 실행 여부 확인

3)	병원체 감염에 대한 효과적인 예방 및 치료의 유효성 여부 확인

4)	연구자의 생물안전 교육·훈련 및 전문성 여부 확인

5)	적절한 밀폐 시설의 보유 및 사용 여부

2.3	연구시설 사용 계획 심의 결과 통보

기관생물안전위원회 (및 동물실험윤리위원회)에서 승인여부를 결정하여 「유전자재조합실험지침」별지 제2호서식의 “유전자재조합실험승인서” (또는 자체 기관양식) 또는 유전자재조합실험불승인서를 시험·연구책임자에게 교부한다.

2.4	연구시설 사용신청

연구시설 사용 계획의 승인을 받은 시험연구책임자는 [서식  ] 연구시설 사용신청서(또는 자체 기관양식)를 생물안전관리부서 (또는 담당자)에게 제출하고, OOO기관장은 [서식  ] “연구시설 사용 승인서”(또는 자체 기관양식)를 시험연구책임자에게 교부한다.

3.	연구시설 출입자 관리

3.1	출입관리 개요

3.1.1	일반사항

1)	생물안전연구시설의 출입은 사전에 승인을 받은 자만이 출입을 할 수 있다.

2)	안전사고 등 실험실 내 예기치 못한 상황 발생 경우의 비상조치를 위하여, 가급적	2인 이상이 출입할 수 있도록 한다.

3)	실험실은 개인 단위로 출입해야 하며, 각 구역 이동시 출구와 입구의 문이 동시에	열려있지 않도록 한다.

4)	출입자는 [서식  ]“연구시설 출입대장” (또는 자체 기관양식)에 해당 사항을 기록하	여야 한다. (권장)

5)	출입자는 다음의 사항을 주의하여야 한다.

①	「OOO기관 생물안전관리지침」 “제  장 생물안전확보 및 보안 관리, 7. 생물보	안”을 준수한다.

②	연구시설의 내부에서 업무에 필요 없는 개인의 모든 소지품 (시계, 휴대전화,	라이터, 담배, 구두주걱, 머리빗, 손톱깎이 등 개인 물품)을 가지고 들	어갈 수	없다.

③	과도한 화장은 지워야 한다. 또한 가발을 착용할 수 없다.

④	손톱은 항상 짧게 하여야 한다.

⑤	개인보호구의 모자는 머리카락을 충분히 덮을 수 있게 착용하여야 한다.

⑥	생물안전연구시설에 들어가기 전 운동 등으로 땀을 흘렸다면 땀, 먼지 및 기타	오염원이 될 수 있는 것을 완전히 제거하고 들어가야 한다.

⑦	실험실 내에서 실험복 및 보호구를 벗지 않는다.

⑧	실험복 및 보호구를 다른 목적으로 사용하지 않는다.

3.1.2	출입 제한

1)	생물안전규정 위반에 따른 제한

기관생물안전관리책임자는 생물안전규정을 위반한 시험연구종사자 및 외부 작업종	사자에 대하여는 해당부서 시험연구책임자 또는 관계부서장에게 통보	후,	연구시	설 출입을 금지할 수 있다. 출입금지 기간은 사안별로 기관생물안전관리책임자가	결정한다.

2)	임신(가임기 등)에 따른 제한

기관생물안전관리책임자는 연구시설 출입연구자 중 임신(가임기)에 의하여 특정병	원체의 노출이 개인보건에 악영향을 줄 가능성이 있을 경우, 시험연구책임자와 협	의 후 출입을 제한 할 수 있다.

3)	연구시설의 주기적 검증, 소독 및 점검에 따른 제한

기관생물안전관리책임자는 연구시설에 대한 정기적 안전점검, 소독, 설비 검증을	위하여 일정기간 연구시설 출입을 제한할 수 있다. 이 경우, 기관생물안전관리책임	자는 이를 3개	월 전에 시험연구책임자와 사용부서에 통보하여 실행한다.

3.1.3	연구시설 사고에 따른 제한

1)	밀폐구역 내 병원체 유출 등 연구시설 내 생물안전사고의 경우 기관생물안전관리	책임자는 지체 없이 시험연구책임자 및 사용부서에 출입제한을 통보하고 안전점검,	소독	및 검증을 수행한다.

2)	연구시설이 하루에 2회 이상 정전이 될 경우, 기관생물안전관리책임자는 시험연구	책임자 및 사용부서에 출입 제한을 통보하고 해당 유지보수관계자에게 시설의 안	정적 운영	가능 여부를	확인한다.

3.2	내부연구자 출입 승인 절차

3.2.1	출입인가

생물안전연구시설에 출입하고자 하는 자는 [서식  ]“연구자 연구시설 출입신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

3.2.2	생물안전교육 이수 확인

기관생물안전관리책임자는 출입을 신청한 자가 해당 생물안전교육의 이수여부를 확인하고, 출입을 승인한다.

3.2.3	출입관리 (권장)

출입승인을 받아 연구시설에 출입하는 자는 매회 입실 전에 [서식  ] “연구시설 출입대장” (또는 자체 기관양식)에 기재하고 지정된 피복으로 갈아입은 다음 지정된 경로를 통하여 들어가야 하며, 퇴실 시에는 지정된 통로를 통하여 샤워 등 안전조치를 취하고 퇴실하여야 한다. 안경 등을 착용하였을 경우에는 안경 등에 대한 소독조치를 시행하여야 한다.

3.3	외부연구자 출입 승인 절차

3.3.1 출입인가

외부연구자의 연구시설 출입승인은 해당부서의 “연구시설 사용 승인 과제”와 관련이 있을 경우에만 가능하며, 이를 증명할 수 있는 문서(연구계획서, 관련 공문 등)를 함께 제출하여야 한다.

3.3.2	출입승인절차

출입 승인에 대한 모든 절차는 내부연구자 출입승인 절차와 동일하며, 기관생물안전관리책임자는 연구시설 출입 승인을 위하여 외부 연구자의 신원을 증명할 수 있는 서류(예: 재직증명서)를 확인하고 승인한다.

3.3.3	생물안전교육이수

1)	외부 연구자는 OOO기관에서 수행하는 연구시설 생물안전교육을 이수하여야 하며,	해당부서에서는 특정 병원체 취급 관리를 위한 교육 및 연구시설 출입 전에 정상	혈청을 채취하고, 정상혈청은 생물안전관리부서에서 별도 보관토록 한다.

2)	외부 연구자의 연구시설 출입은 승인서에 명시된 기한까지이며 변경사항이 있을	경우, 기관생물안전관리책임자에 보고 및 재승인을 받는다.

3)	외국인 연구자의 경우, 연구시설 사용을 위한 모든 절차는 국내 연구자와 동일하	다.

3.4	유지보수관계자 출입 승인 절차

3.4.1	출입인가

생물안전연구시설에 출입하고자 하는 유지보수관계자는 [서식  ] “비연구자 연구시설 출입신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

3.4.2	생물안전교육이수

1)	유지보수관계자는 OOO기관에서 수행하는 연구시설 생물안전교육을 이수하여야 하	며,	해당부서에서는 특정 병원체 취급 관리를 위한 교육 및 연구시설 출입 전에 정	상혈청을 채취하고, 정상혈청은 생물안전관리부서에서 별도 보관토록 한다.

2)	유지보수관계자의 연구시설 출입은 승인서에 명시된 기한까지이며 변경사항이 있	을 경우, 기관생물안전관리책임자에 보고 및 재승인을 받는다.

3.5	기타 외부출입 승인(견학 등) 절차

3.5.1	외부방문자는 연구시설 내에서 실험 수행, 장비 점검 등의 수행 목적이 아닌 연구시설에 대한 단순 관람, 견학 등의 목적으로 출입을 희망하는 자를 의미한다.

3.5.2	외부방문자의 연구시설 출입은 원칙적으로 허가되지 않는다. 다만, 그 필요성이 인정되는 경우, 아래의 절차를 따르고 반드시 시험연구종사자 또는 기관생물안전관리자와 함께 출입하여야 한다.

1)	해당부서는 [서식  ]“비연구자 연구시설 출입신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)	을 기관생물안전관리책임자에게 제출하고, 통제구역에 대한 외부방문자 출입 승인	절차를 수행한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 [서식  ]“비연구자 연구시설 출입신청서 및 승인서” (또는	자체 기관양식)을 확인하고, 연구시설 내 수행되는 실험, 시설 설비 현황 등을 고려	하여 외부방문자 출입을 허가한다.

3)	출입승인 외부방문자의 경우, 연구시설 내 주 출입구 이전의 ‘외부복도’, ‘실험실 관	찰구역’ 및 ‘세척실’을 견학할 수 있으며, 필요시 ‘기계실’ 및 ‘통제실’ 까지 포함될	수 있다.

4)	외부방문자의 경우 [서식  ]“외부방문자 출입자 대장”에 출입자명 등 출입사항을	기재토록 한다. (권장)

외부방문자 출입가능 구역 도면

[외부방문자 출입가능 구역 도면]

호실	실명	구역

호실	실명	구역

4.	물품 반(출)입 관리

4.1	물품의 반(출)입 승인

4.1.1	반(출)입인가

실험실내 물품을 반입과 반출하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

4.1.2	반(출)입절차

기관생물안전관리책임자의 승인을 받은 정해진 절차와 방법에 따라 물품을 반입 또는 반출할 수 있다.

4.2	병원체 및 시료의 반(출)입 승인

4.2.1	반(출)입인가

승인된 「연구계획서」에 명기된 병원체 및 시료만이 연구시설으로 반(출)입되며, 그 이외의 시료는 반(출)입이 금지된다. 시료를 반(출)입시켜야 할 경우, 시험연구책임자는 안전한 포장 및 이동방법 등을 확인하고, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

4.2.2	반(출)입절차

시료(병원체 등)를 담은 밀폐 컨테이너 포장 용기 외부 및 표면을 알코올로 소독하고 패스박스를 이용하여 패스박스 내 UV 램프 또는 필요시 H2O2 훈증으로 표면 소독 절차를 거친 후 반(출)입한다.

4.3	실험장비 반(출)입 승인

4.3.1	반(출)입인가

실험장비를 연구시설으로 반입 또는 연구시설 내 실험장비를 반출할 경우에는 [서식  ] “연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

4.3.2	반(출)입절차

실험장비는 사전 승인, 병원체의 비 오염화 또는 소독 등의 절차 없이 반(출)입시킬 수 없다. 연구시설 내 반입된 실험장비는 시험연구종자가 사용하기 전에 충분한 사전 지식을 숙지할 수 있도록 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자가 사전 교육을 실시한다.

5.	실험동물의 반입 관리

5.1	실험동물 반입 승인

실험수행을 위한 실험동물의 반입은 승인을 득하고 이루어져야하고, 연구시설 내에서 사육된 실험동물의 반출은 원칙적으로 금지된다.

실험실내 실험동물을 반입하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

6.	일과 후 연구시설관리

6.1	일과 후 실험실 운용

시험연구종사자는 일과시간 후(토·일요일과 공휴일을 포함한다)에도 실험실을 계속 사용하여	야 할 경우, [서식  ]“일과 후 연구시설 사용신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)를	제	출하고, 기관생물안전관리책임자는 검토 후 승인한다.

6.2	야간 연구시설 관리

1)	기관생물안전관리책임자는 근무시간 이외 야간의 연구시설 관리를 위한 비상근무	의 여부를 결정한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 야간 연구시설 관리를 위한 비상근무자를 지정한다.

6.3	휴무일 연구시설 관리

1)	토요일, 일요일 및 공휴일의 휴무일에는 연구시설 관리를 위한 비상근무를 원칙으	로 한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 연구시설의 사정에 따라 비상근무의 여부를 결정 및 비	상근무자를	지정한다.

3)	비상근무시간은 오전 O시부터 오후 O시까지 O시간 근무를 기본으로 하되 사정에	따라 근무시간의 변경이 가능하다.

4)	비상근무시간 이외의 야간의 연구시설 관리는 “5.2 야간 연구시설 관리”에 따른다.

[Prototype ABL2] 제  장  개인보호구 및 장비 표준작업절차

1.	개인보호구

※“개인보호구 및 장비 표준작업절차”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	개인보호구 개요

개인보호구(personal protective equipment, PPE)란 실험실에서 미생물을 취급하거나 유해 화학물질 등을 다루는 등의 발생 가능한 위해로부터 시험연구종사자의 안전을 지켜주는 가장 기본적인 장비이다. 병원체를 포함한 미생물을 취급하는 실험실에서는 적절한 실험복을 반드시 착용하고 실험방법에 따른 적절한 기타 보호구를 선택하여 사용해야 한다. 또한 사무실, 화장실 등의 일반구역 출입 및 실험실에서 퇴실할 경우 실험복 등을 벗고 손을 세척한다.

장 비	관련 위해 요소	특 성	비 고
실험복 (laboratory gown)	의복의 오염	○ 평상복 전체를 덮는 전신 실험복	실험 수행 시 항상 착용할 것
보호복 (protective clothing)	신체의 오염	○ 위해물질로부터 신체를 보호	위해등급별로 적절한 보호복을 착용할 것
플라스틱 앞치마 (Plastic apron)	의복의 오염	○ 방수기능
신발류 (Footwear)	충돌, 튀는 것 등	○ 앞이 막힌 것 ※ 덧신 : 방수기능이 있는 부츠형
고글 (Goggle)	〃	○ 일반 안경 위로 덮어 쓰거나 바로 쓰고 볼 수 있는 것 ○ 측면 보호
보안경 (Safety spectacle)	〃	○ 바로 쓰고 볼 수 있는 것 ○ 측면 보호
보안면 (Face shield)	〃	○ 얼굴 전체를 덮을 수 있는 것 ○ 탈 ․ 착용이 용이한 것
장갑 (Glove)	접촉, 찰과상, 절단 화상 등	○ 라텍스, 비닐 또는 나이트릴장갑 ○ 손 보호기능 ○ 내열성 특수 장갑 등	실험 수행 시 항상 착용할 것
호흡보호구 (Respirators)	에어로졸 흡입	○ 부위별 ：안면부 전체 또는 입․코를 덮는 것 (Full-face or half-face) ○ 일회용 또는 재사용 ：외과용 마스크 (Surgical Masks) - 일회용 필터 호흡보호구 (Disposable particulate respirator) - 재사용 필터 호흡보호구 (Replaceable particulate respirator) - 전동식 공기정화 호흡보호구 (Powered air-purifying respirator, PAPR)	○ 입자특성별 N(Non-oil aerosol), P 또는 R (Includes oil aerosol) ○필터 효율별 0.3㎛ 에어로졸 입자를 걸러내는 필터의 효율을 나타낸다. (42CFR84, USA) 95%：N95, P95, R95 99%：N99, P99. R99 99.97%：N100, P100 R100

1.2	개인보호구 착용 및 관리 기준

1)	개인보호구를 선택할 때에는 취급하는 미생물 및 위해물질의 감염경로 및 신체 노출	부위를 고려한다. (예. 흡입, 섭취, 주사 또는 주입, 흡수 등)

2)	개인보호구는 시험연구종사자가 항상 착용하기 쉬운 곳, 접근이 용이한 곳에 보관 및	관리하며 깨지거나 오염된 개인보호구는 반드시 폐기한다.

3)	시험연구책임자 및 기관생물안전관리책임자는 해당 연구실에서 진행하는 실험에 맞	는 개인보호구를 선택하고 올바른 사용 및 관리를 위해 시험연구종사자 등에게 교육	한다.

4)	개인보호구는 미생물 및 감염성물질을 취급하거나 실험을 수행하기 전에 착용하고	실험 종료 후 신속히 탈의한다.

5)	개인보호구를 착용한 상태로 일반구역(복도, 출입문 등)의 출입을 삼가고, 비 오염 물	품, 공용장비(실험에 사용하지 않은 원심분리기, 배양기 등)를 만지는 등의 행위로 오	염을 확산시키지 않는다.

1.3	실험복 (laboratory gown, lab coat)

1)	실험 수행 시, 실험복은 항상 착용해야 하며 계절에 상관없이 평상복을 모두 덮을 수	있는 긴 소매이어야 한다.

2)	실험복은 평상복과 구분하여 지정된 장소에 보관한다.

3)	실험복은 연구기관 내에서 직접 세탁 또는 위탁 세탁하여야 하며, 감염성물질에 오염	된 실험복을 개인 가정으로 반출하지 않는다.

4)	사무실, 화장실 등 일반구역에는 실험복을 탈의하고 출입한다.

5)	감염성물질, 미생물 등이 튀거나 묻은 경우 적절한 소독 또는 멸균법을 선택하여 불	활성화시켜 페기하거나 세탁하여 재사용한다.

1.4	보호복 (protective clothing) (해당시)

1)	보호복은 사용 목적, 환경 및 취급 물질 등에 따른 위험요소로부터 시험연구종사자	등을 보호할 수 있는 재질로 구성되어야 하며, 신체 치수에 맞는 크기로 머리부터 발	목까지 보호할 수 있어야 한다.

2)	보호복의 국제적 기준으로 가장 널리 적용되는 것은 유럽기준 EN340이다. 이 규정은	단독으로 사용되기 보다는 다른 여러 규정들과 함께 사용되며 보호복에 대하여 6가	지 유형으로 분류하고 있다. 보호복 유형별로 복합적으로 기능을 하고 있으므로, 작	업 조건에 맞는 것을 선택하여 착용한다.

구 분		특 성	규 정	표 시
Type 1	가스 차단 보호복 (gas tight suits)	주위 환경으로부터 완전 차단, 완전 밀폐	EN943-1
Type 2	비 기체 차단 보호복 (non-gas tight suits)	가스 이외의 유해인자의 유입 차단, 완전 밀폐는 되지 않음	EN943-1
Type 3	액상 차단 보호복 (liquid tight suits)	인체 위험이 높은 방향성 액상 화학물질 등에 대한 보호능	EN14605
Type 4	스프레이 차단 보호복 (spray tight suits)	보호복에 고일 정도로 분사되 응축 액상 물질에 대한 보호능	EN14605
Type 5	분진 차단 보호복 (dry particle tight suits)	유해 분진입자들로부터의 보호능	EN13982
Type 6	제한적 스프레이 차단 보호복 (limited Spray tight suits)	비 방향성 액상 화학물질의 분무에 대한 보호능	EN13034
/	정전기 방지	보호복의 정전기 발생방지 및 전자 분산 능력	EN1149
/	방사능 오염	방사능 입자에 대한 보호능	EN10703
/	항바이러스 보호력	바이러스, 박테리아, 체액 등과 같은 감염성물질에 대한 보호능	EN14126 ASTM1671

1.5	플라스틱 앞치마 (해당시)

혈액검체나 화학물질 취급 등 위험물 취급으로 인하여 위해도가 증가한 경우, 실험복이나 가운 위에 겹쳐 입을 수 있다. 동물 접종 실험이나 부검 등 위험성이 높은 작업시에는 착용하고, 일상적인 실험이나 동물실험 중에도 필요시 착용할 수 있다.

1.6	장갑(glove)

1)	실험을 수행할 경우 취급물질, 실험방법 등을 고려하여 적절한 장갑을  반드시 착용	한다.

2)	장갑은 실험방법, 위험요소, 취급물질 등을 고려하여 선택․착용한다. 라텍스 장갑의	경우, 파우더 성분이 피부 알레르기를 유발할 수 있으므로 파우더가 없는 제품으로	선택을 하거나 나이트릴 제품을 사용한다.

3)	장갑 착용 시, 실험복을 장갑 목 부분 아래로 넣어 틈이 생기지 않도록 한다. 특히,	감염성물질 및 고위험병원체 등 인체에 해를 줄 수 있는 물질을 다룰 때에는 추가로	덧소매를 착용하여 손목이나 팔 등의 피부가 직접 노출되는 것을 방지한다.

4)	장갑을 탈의할 때는 손목부분을 뒤집어서 손가락 방향으로 뒤집어서 빼내 감염성물	질이 직접 닿지 않았던 부분이 보이도록 벗는다.

* C(clean)：장갑 안쪽으로 감염성물질에 접촉되지 않은 깨끗한 부분.

* D(dirty)：장갑 바깥쪽으로 감염성물질을 직접 취급하거나 접촉가능성이 있는 오염	부분.

5)	에어로졸 발생 및 확산의 위험이 있을 수 있으므로, 장갑의 손가락 부분을 잡아 당	겨서 벗지 않는다.

1.7	호흡보호구(mask, respirators) (해당시)

1)	감염성이 있는 에어로졸의 흡입 가능성이 있거나 잠재적으로 오염된 공기에 노출될	수 있는 실험을 수행할 경우 호흡보호구를 착용한다.

2)	호흡보호구는 소재별, 기능별로 여러 종류가 있으므로 취급 병원체, 실험방법, 위험요	소 등에 따라 선택․착용한다. 착용자의 얼굴에 적합한 호흡보호구를 선택하고 올바른	착용방법을 숙지한다.

3)	착용 시에는 코, 입, 뺨 위로 잘 배치하여 호흡기를 덮도록 하고, 연결 끈은 귀 위와	뒷목으로 위치되게 묶고 코 부분의 철심을 눌러 코에 밀착시킨다.

4)	탈의 시, 뒷목 부분에 고정시킨 끈을 머리 뒤에서부터 앞으로 잡아 당겨서 얼굴 앞면	에서 끈을 빼고 잡은 후 왼손으로 잡고 오른 손으로 동일한 방법으로 나머지 끈을	얼굴 앞면으로 가져와 두 끈을 함께 잡아 벗는다.

5)	N, P, 또는 R 마스크 등의 필터-호흡보호구의 입자특성별 효율에 대해 미국연방규정	(42 CFR 84)에 명시된 기준은 다음과 같다.

필터-호흡보호구는 취급미생물 및 감염성물질의 특성을 고려하여 선택하고 착용 시	몸에 무리가 가지 않고 내쉬는 숨에 새는 곳이 없는 지 확인한다.

6)	재사용 필터-호흡보호구(replaceable particulate respirator) 또는 전동식 공기-정화 호	흡보호구(powered air-purifying respirator, PAPR)는 전지 충전 및 필터 교환, 장비	소독 등 철저한 점검과 관리가 필요하다.

7)	깨지거나, 균열이 있거나, 제대로 작동이 되지 않는 등 이상이 있는 경우 즉시 교체	착용하고, 이상 제품의 경우 철저한 소독 후 점검․수리하거나 즉시 폐기하도록 한다.

1.8	고글, 보안면(goggle, face-shield) (해당시)

1)	콘택트렌즈를 착용한 시험연구종사자가 감염성물질 등을 취급하거나 생물안전시설	내 밀	폐구역에 출입할 경우, 반드시 고글을 착용하도록 한다.

2)	고글, 보안면은 실험 수행 방법 및 취급 물질 등에 따른 위해성 평가를 실시하고 그	결과에 따라 착용한다.

3)	착용 시, 보호하고자 하는 안면 범위를 모두 덮을 수 있어야 한다. 탈의 시, 오염되지	않은 부분은 장갑을 끼지 않은 손으로 잡고 그대로 앞으로 빼서 탈의한다.

4)	고글, 보안면을 재사용할 경우 취급한 감염성물질 및 병원체에 가장 효과적인 소독제	를 선택하여 노출된 부분 등을 소독 또는 세척하여 보관한다.

1.9	보호덧신 (해당시)

보호덧신은 취급하는 병원체 및 실험종류에 따라서 재질을 선정 및 지정된 장소에 보관하며, 시험연구종사자는 출입관련 표준작업절차에 따라서 보호덧신을 착용 및 탈의한다.

1.10	두건 (해당시)

두건은 실험종류에 따라서 재질을 선정 및 지정된 장소에 보관하며, 시험연구종사자는 출입관련 표준작업절차에 따라서 두건을 착용 및 탈의한다.

1.11	토시 (해당시)

토시는 실험종류에 따라서 재질을 선정 및 지정된 장소에 보관하며, 시험연구종사자는 출입관련 표준작업절차에 따라서 두건을 착용 및 탈의한다.

1.12	기타 (해당시)

기타 보호구가 있는 경우 추가 기술

2.	생물안전작업대 (권장)

2.1	사용 시

1)	UV 램프를 끄고, 조명등을 켠다.

2)	생물안전작업대 앞면부의 그릴을 통한 공기 흡입을 막는 기타의 물체들을 치우고, 공	기흡입이 잘 이루어지는지를 점검한다.

3)	의자에 앉았을 때, 창을 통해 작업하기에 적당한 위치가 될 수 있도록 의자 높낮이를	조절한다.

4)	Blower motor를 켜고 5분 정도 에어커튼을 작동시켜 생물안전작업대 내부 공기를	정화시킨다.

5)	생물안전작업대 내부 표면은 70% 에탄올 등의 적절한 소독제에 적신 종이타월로 닦	아 소독한다.

6)	생물안전작업대 내에 실험기기의 수나 양을 최소화시키도록 하고, 실험 중 물품 등으	로 흡입용 그릴 위를 덮는 것을 피한다.

7)	오염된 물품들과 깨끗한 물품들을 구분하고, 실험은 비 오염물품이 있는 곳에서부터	오염된 물품이 있는 곳으로 수행한다.

8)	일반적인 미생물 실험 준수사항을 숙지하고 이행한다.

9)	생물안전작업대에서 물품을 빼거나 새로운 물품을 넣을 경우, 공기흐름에 주는 영향	을 최소화시킨다. 생물안전작업대 내에서 팔을 크고 빠르게 움직여서	는 안 되고 작	업 중인 연구활동종사자의 뒤로 빠르게 이동하는 행동은 피한다.

10)	Sonicator, blender, 원심분리기 등의 공기의 난기류 등을 발생시킬 수 있는 장비들을	사용할 경우, 흡입용 그릴로부터 12cm 이상 떨어진 곳에 두고 작동시킨다.

2.2	사용 종료 시

1)	잠재적으로 오염 또는 감염가능성이 있는 물품의 외부 표면은 소독 후에 생물안전작	업대 외부로 빼낸다.

2)	유리부분을 포함해서 앞면부와 생물안전작업대 내부 표면을 취급 병원체에 적합한	소독제로 소독한다.

3)	Blower motor를 10분 이상 추가 작동 시킨 후 끈다.

4)	조명등을 끈 후, UV램프를 작동시키고 다음 사용자를 위해 UV램프 작동시간을 볼	수 있도록 한다.

5)	장갑, 덧소매, 실험복 등을 벗고 손을 세척하거나 필요한 경우 소독한다.

2.3	사용기록 (권장)

생물안전작업대를 사용한 시험연구종사자는 [서식  ]“(장비명)사용대장”을 작성하고, 시험연구책임자는 사용내역을 확인한다.

2.4	유출사고 시

감염성 시료를 다루던 중 생물안전작업대 내에 쏟았을 경우 다루던 감염성 시료에 소독효과가 인정된 소독제를 사용하여 시료와 접촉하였거나 접촉이 의심되는 장소에 충분히 도포한 후 30분 이상 소독제에 의한 소독효과가 나타날 수 있도록 처리한 후 오염물을 제거한다. 상세 비상대응방법은 “제  장 비상사항관리”에 따른다.

3.	고압증기멸균기

멸균법 중 고압증기멸균기를 이용하는 습열멸균법은 실험실 등에서 널리 사용되는 멸균법으로, 취급하는 병원체에 따라 121℃에서 15~20분 또는 134℃에서 40분 이상 처리하는 방식이다. 정확하고 올바른 실험과 미생물 등을 포함한 감염성물질들을 취급하면서 발생하는 의료폐기물을 안전하게 처리하기 위해서 고압증기멸균기의 원리를 이해하고 올바르게 사용하는 것은 매우 중요하다. 또한 기관생물안전관리책임자 및 담당자들은 고압증기멸균기의 정상 작동에 대한 검증프로그램을 마련하여 정기적으로 관리하고 신규시험연구종사자에 대하여 관련 교육을 실시한다.

3.1	고려사항

고압증기멸균기의 올바른 사용을 위해 다음의 사항들을 고려한다.

1)	고압증기멸균기의 작동 여부를 확인하기 위한 화학적, 생물학적 지표인자(indicator)	사용

2)	멸균이 진행되는 동안, 내용물을 안전하게 담은 상태로 유지할 수 있는 적절한 용	기의 선택

3)	멸균을 실시할 때 마다 각 조건에 맞는 효과적인 멸균 시간 선택

4)	고압증기멸균기 사용일지의 작성 및 관리

5)	고압증기멸균기의 작동방법에 대한 교육 실시

고압증기멸균기의 올바른 사용을 위해서는 멸균을 실시하기 위한 포장부터 멸균 효과를 확인하는 단계까지 관리가 필요하다. 이러한 검증은 온도, 압력, 각 단계별 시간을 관찰하는 것 등이 포함될 수 있으며, 증기멸균기 근처에 사용일지를 마련하여 가동시간, 멸균 대상물, 멸균 시행자 등에 대해 기록하는 것은 멸균기 관리에 도움이 될 수 있다.

3.2	멸균 지표인자(indicator) (해당시)

3.2.1	화학적 지표인자(chemical indicator)

1)	화학적 색깔변화 지표인자(chemical color change indicator)

화학적 색깔변화지표인자는 일반적으로 고압증기멸균기가 작동하기 시작하여, 121℃	(250℉)의 적정온도에서 수 분간 노출이 되면 색깔이 변하게 된다. 이는 멸균기 내의	열 침투에 대해 빠른 시간 내에 시각적으로 관찰이 가능하게 하며 일반적으로 멸균	대상물의 중앙부위에 위치하도록 배치하여 사용한다. 그러나 대부분의 화학적 지표인	자는 멸균기의 온도가 121℃에 이르렀느냐를 확인시켜 줄 뿐, 멸균시간에 대한 측정	기능은 없다. 따라서 화학적 지표인자는 병원체들이 실제로 멸균시간 동안에 사멸되	었다는 것을 증명하지 못한다.

2)	테이프 지표인자(tape indicator)

테이프 지표인자는 열 감지능이 있는 화학적 지표인자가 종이테이프에 부착되어 있	다. 일반적으로 사용되는 것은 대각선 줄에 들어 있는 것도 있고 (멸균용 테이프) 또	는 “ Sterile ”이라는 글씨에 들어있는 것도 있다. 이것은 테이프가 고압증기멸균기 내	에서 멸균하기 위해 설정한 온도에 수 분간 노출이 되면 나타나게 된다. 그러나 테이	프 지표인자는 멸균기의 온도가 121℃에 이르렀느냐를 확인시켜 줄 뿐 병원체들이	실제로 멸균시간 동안에 사멸이 되었다는 것을 증명하지 못한다. 테이프 지표인자는	비 오염화를 시키는 모든 물건에 사용할 수 있다. 3~4개 정도의 줄이 있는 멸균테이	프를 고압증기멸균용 통, 봉투, 또는 개별 용기 등의 외부 표면에 부착하여 사용한다.

3.2.2	생물학적 지표인자 (biological indicator)

생물학적 지표인자는 고압증기멸균기의 미생물을 사멸시키는 기능이 적절한지를 가늠하기 위해서 고안된 것이다. 상용화된 생물학적 지표인자 중 대표적인 것은 Geobacillus stearothermophilus (ATCC #7953) 포자이며, 고압증기멸균기의 효능을 측정하기 위해 사용할 수 있다. 대부분의 생물학적 지표인자는 살아있는 spore strip이나 포자가 들어 있는 배지와 지표 염색약이 들어 있는 작은 유리앰풀로 되어 있다. 일반적으로 생물학적 지표인자는 고압증기멸균을 한 뒤에 멸균 물품으로부터 수거하여 56℃의 배양기에 넣고 3일간 배양하거나 제조회사의 설명서에 따라 배양한다. 그리고 멸균하지 않은 살아있는 대조군을 배양 후에 혼탁도 또는 지시약의 색깔 변화를 비교 ․ 측정하면 된다. 성공적으로 멸균이 된 경우, 시험용 vial에서는 포자의 증식 없이 깨끗하고 맑은 용액 상태로 지시약의 색깔 변화가 없고, vial의 용액이 혼탁하거나 색깔이 변했다면 용액 내 포자가 발아한 것으로, 고압증기멸균이 정상적으로 작동하지 않는다는 것을 의미한다.

3.3	주의사항

1)	정기적으로 고압증기멸균기의 부품, 상태 등이 멸균에 적합한지 점검한다. 멸균기 문	의 잠금 및 밀봉 상태, 기계 마모도 등은 사고위험이 될 수 있으므로 주기적으로 점	검한다.

2)	고압증기멸균기 내부의 유출수 배수구에 있는 불순물 등을 제거하고 이상이 있는 경	우, 유지보수관계자, 시설관계자 및 담당 기술자들에게 연락하고 수리가 완료되기 전	까지는 고압증기멸균기를 작동시키지 않는다.

3)	고압증기멸균기는 고온의 수증기를 이용하는 멸균방법으로 멸균을 실시하기 전, 멸균	기 내부의 물 상태를 항상 점검해야 하며, 절대로 건조한 상태로 멸균기를 가동해서	는 안 된다.

4)	뚜껑이나 마개 등으로 튜브 등 멸균용기를 꽉 막아 놓는 것은 피하도록 한다. 수증기	가 잘 침투하지 못 하고, 밀폐된 용기 내의 차가운 공기로 인해 멸균이 원활히 이루	어질 수 없다.

5)	멸균시간, 멸균온도 등은 대상품목의 성상, 농도, 양, 용기 재질, 오염정도 등에 따라	달라 질수 있으며, 이는 멸균 전에 시험연구책임자 또는 기관생물안전관리자와 상의	하여 결정한다.

6)	액체배지, 증류수 등 액상물질의 멸균 시에는 내용물이 배수구 등으로 유출되는 것을	방지하기 위해 스테인리스 용기 등에 넣어서 멸균한다.

3.4	사용 시

1)	멸균 대상물이 고압증기멸균에 적당한 것인지 확인하고, 알맞은 용기 및 포장재를 선	택하여 사용한다. 신문지, 종이 등으로 유리용기 등을 포장하는 것은 멸균기 오작동	의 원인이 될 수 있으므로, 외부 포장재로 사용하지 않는다.

2)	고압증기멸균기 내부의 물 상태를 확인하고, 부족한 경우 증류수 또는 깨끗한 물을	첨가한다.

3)	멸균 대상물 외부 중앙에 멸균테이프를 붙인다. 대상품목의 포장용기 및 멸균봉투 등	은 증기가 침투할 수 있을 정도로 묶거나 닫는다.

4)	고압증기멸균기 내부에 대상물을 적절히 배치하여 한 쪽으로 몰리거나 치우치지 않	게 골고루 적재한다.

5)	고압증기멸균기 문의 잠금장치 등을 이용하여 완전히 닫고, 가동시간, 온도, 압력 등	을 확인하	고 작동시킨다.

3.5	사용 종료 시

1)	내열성 장갑, 보안경, 고글 등의 필요한 개인보호구를 착용한다.

2)	멸균이 종료되면, 문을 열기 전에 압력이 O점에 간 것을 확인한다.

3)	천천히 잠금장치를 풀어 문을 열고 멸균기 내에 있는 수증기를 뺀다.

4)	고압증기멸균기에서 물품을 꺼내기 전에 10분 정도 냉각을 시키도록 한다. 고압증기	멸균기	문을 너무 빨리 열면 유리제품들은 깨질 수도 있고 피부에 화상을 입을 수	있다.

5)	건조가 필요한 물품의 경우, 건조기에 넣어 물기를 제거하여 멸균 후 오염을 방지한	다.

6)	혐기성균 배양액 등 멸균 시 악취가 발생할 수 있는 경우 고압증기멸균기용 탈취제	등을 사용하여 냄새 등의 발생을 최소화시킬 수 있으며 고압증기멸균기 내부를 주기	적으로	청소관리한다.

3.6	사용기록

고압증기멸균기를 사용한 작업자는 [서식  ]“고압증기멸균기 사용대장”을 작성하고, 시험연구책임자는 사용내역을 확인한다.

4.	패스박스 (권장)

4.1	시료, 물품 등 반입 시

1)	사용자는 [서식  ]“패스박스 사용대장”에서 사용대장에 반입 등에 관한 사항을 기록	한다.

2)	패스박스 내 UV 램프가 켜져 있을 경우, 패스박스 OPEN 및 패스박스 내로 시료,	물품 등의 반입은 금지되며, UV 램프가 꺼질 때까지 기다린다.

3)	패스박스 내 UV 램프가 꺼져 있을 경우, [서식  ]“패스박스 사용대장”을 확인하고,	패스박스를 열고 반입하고자 하는 물품 또는 시료를 넣은 후 문을 닫는다.

4)	패스박스 내 UV 램프는 패스박스 문이 닫힐 경우 자동으로 켜지며, 15분 동안 패	스박스 내 소독 절차가 수행된다.

5)	사용자는 밀폐구역내로 입실하여 밀폐구역 내부 복도에서 15분 이후에 패스박스를	열어 물품 또는 시료를 빼낸다.

6)	사용자는 패스박스 문을 완전히 닫고 패스박스 내 UV 램프가 켜짐을 확인한다.

7)	패스박스 문을 닫았음에도 UV 램프가 켜지지 않을 경우, 사용자는 밀폐구역 내 인	터폰을 통하여 기관시설관계자(또는 유지보수용역업체 관계자)에 연락한다.

8)	사용자는 시료 및 물품 등을 사용하고자 하는 밀폐구역으로 이동시킨다.

4.2	시료, 물품 등 반출 시

밀폐구역 실험실에서 취급된 시료에 대한 외부로의 반출은 원칙적으로 양문형고압증기멸균기를 통해 멸균하여 반출되지만, 부득이하게 패스박스를 통해 반출이 승인된 시료에 한하여 허용된다.

1)	병원체를 담은 3중 포장 밀폐 용기 외부 및 표면을 알코올로 소독하고, 밀폐	구역	내부복도 측에서 패스박스 문을 열고 시료를 넣는다 (이때 UV램프는 자동으로 켜	진다).

2)	사용자는 밀폐구역을 퇴실하고, 반출물품은 패스박스에서 UV램프로 15분 이상 소	독한다

3)	사용자는 패스박스 내 UV램프 소독 후 패스박스를 열어 시료를 꺼낸다.

4)	사용자는 패스박스 문을 닫는다. (반드시 패스박스 문이 완전히 닫혀있으며, UV등	이 켜짐을 확인한다).

7)	패스박스 문을 닫았음에도 UV 램프가 켜지지 않을 경우, 사용자는 기관시설관계자	(또는 유지보수용역업체 관계자)에 연락한다.

4.3	사용기록

패스박스 사용자는 [서식  ]“패스박스 사용대장”을 작성하고, 시험연구책임자는 사용내역을 확인한다.

5.	패스룸 (훈증챔버) (권장)

5.1	장비, 물품 등 반입 시

1)	사용자는 [서식  ]“패스룸 사용대장”에서 사용대장에 반입 등에 관한 사항을 기록	한다.

2)	패스룸 내 훈증소독 중인 경우, 패스룸 OPEN 및 패스룸 내로 장비, 물품 등의 반	입은 금지되며, 훈증소독이 끝날 때까지 기다린다.

3)	패스룸에서 훈증소독을 하지 않을 경우, [서식  ]“패스룸 사용대장”을 확인하고,	패스룸를 열고 반입하고자 하는 장비 또는 물품을 넣은 후 문을 닫는다.

4)	패스룸에 훈증소독을 실시한다. (훈증소독 시간은 O시간이 소요된다.)

5)	사용자는 밀폐구역내로 입실하여 밀폐구역 내부 복도에서 훈증소독이 종료 후에	패스룸을	열어 장비 또는 물품을 빼낸다.

6)	사용자는 패스박스 문을 완전히 닫는다.

7)	사용자는 장비 및 물품 등을 사용하고자 하는 밀폐구역으로 이동시킨다.

5.2	장비, 물품 등 반출 시

밀폐구역 실험실에서 취급된 시료에 대한 외부로의 반출은 원칙적으로 양문형고압증기멸균기를 통해 멸균하여 반출되지만, 부득이하게 패스룸을 통해 반출이 승인된 장비 및 물품에 한하여 허용된다.

1)	반출하고자 하는 장비 및 물품의 외부 및 표면을 알코올로 소독하고, 밀폐구역 내	부복도 측에서 패스룸 문을 열고 시료를 넣는다.

2)	사용자는 밀폐구역에서 퇴실하고, 패스룸에 설치된 훈증소독기를 가동하여, 패스룸	내부를 훈증소독 처리한다. (훈증소독 시간은 O시간이 소요된다.)

3)	사용자는 패스룸 내 훈증 소독 후,	패스룸을	열어 장비 또는 물품을 꺼내고, 패스	룸문을 닫는다.

5.3	사용기록

패스룸을 사용한 작업자는 [서식  ]“패스룸 사용대장”을 작성하고, 시험연구책임자는 사용내역을 확인한다.

6.	피펫 및 관련 장비 (해당시)

1)	실험실에서는 피펫이 자주 사용되며 입으로 피펫을 사용하지 말고 반드시 기계적 장	비를 사용하여 피펫 작업을 수행한다.

2)	사용하는 모든 피펫은 윗부분에 솜을 넣어 사용하는 액체가 역류하는 것을 방지해야	한다.

3)	사용 액체에 감염성 물질이 있을 경우 피펫을 이용한 반복적 혼합을 가능한 하지 않	는 것이 좋으며 부득이한 경우에도 심하게 피펫을 사용하여 혼합하지 않는다.

4)	일정양의 액체를 옮기는 작업을 할 경우에도 표기가 되어 있는 구간만 사용하고 피	펫안의 액체를 완전히 내보내지 않는 것이 좋다.

5)	사용이 끝난 피펫은 소독액이 들어있는 통에 완전히 잠기도록 하여 폐기토록하며 사	용되는 통은 견고하고 파손되지 않는 재질로 된 것을 사용한다.

7.	원심분리기, 균질화기, 진탕기 및 초음파 파쇄기 (해당시)

7.1	원심분리기

7.1.1	일반사항

사용설명서를 완전히 숙지한 후 사용하여야 하며, 장비는 사용자가 불편하지 않은 높이로 설치한다. 원심분리관 및 용기는 견고하고 두꺼운 재질로 제조된 것을 사용하며 원심분리할 때는 항상 뚜껑을 단단히 잠가야 한다. 버켓 채로 균형을 맞추어 사용하여야 하며, 동일한 무게의 버켓 내 원심관의 위치가 대각선방향으로 서로 대칭이 되도록 조정하여야 하고, 로터에 직접 넣을 경우 제조사에서 제공하는 지침에 따라 그 양을 조절한다. 사용하고자 하는 원심관이 홀수일 경우 증류수나 70% 알코올을 빈 원심분리관에 넣어 무게 조절용 원심분리관으로 사용한다.

7.1.2	병원체 또는 감염성 물질 사용

병원체 또는 감염성물질을 다룰 때에는 반드시 버켓에 뚜껑이 있는 장비를 사용하며 사용한 후에는 로터, 버켓 및 원심분리기 내부를 알코올 솜 등을 사용하여 오염을 제거하는 등 청소한다. 만일 감염성물질을 원심분리하는 동안 에어로졸 발생이 우려될 경우 생물안전작업대 안에서 실시하여야 하며, 원심분리가 끝난 후에도 작업대를 최소 10분간 가동시키며 작업대 내부를 소독하여야 한다. 버켓에 시료를 넣을 때와 꺼낼 때에는 반드시 생물안전작업대 안에서 수행한다.

7.1.3	사용기록

원심분리기를 사용한 시험연구종사자는 [서식  ]“(장비명) 사용대장”을 작성하고, 시험연구책임자는 사용내역을 확인한다.

7.2	균질화기, 진탕기 및 초음파 파쇄기

7.2.1	일반사항

실험실에서는 가정용으로 판매되는 균질화 장비를 사용하지 않으며, 실험 전 장비의 결함 여부나 사용되는 뚜껑, 용기 등에 찌그러진 곳이 있는지 항상 살펴봐야 하고, 개스킷의 장착여부도 반드시 확인한다.	균질화기, 진탕기 및 초음파 분쇄기 등의 장비 가동 시 용기 안에는 압력이 발생하며, 이에 따라 발생하는 내부의 에어로졸은 뚜껑과 용기 사이를 통해 외부로 누출될 수 있다. 특히, 파손 가능성, 감염성물질의 노출 및 작업자의 부상 가능성이 있는 유리로 제조된 용기보다는 플라스틱, polytetrafluoroethylene (PTEE)로 제작된 용기를 사용하는 것이 좋다. 장비를 사용할 경우 투명한 플라스틱 상자에 넣어 사용하거나 생물안전작업대 안에서 사용하는 것이 보다 안전하다. 사용이 끝난 후 용기는 반드시 생물안전작업대 안에서 개봉하며, 초음파 파쇄기를 사용할 경우 귀마개를 하는 것도 종사자 안전에 도움이 된다. 유리로 된 분쇄기(grinder)는 종사자가 실험 중 사용하는 장갑과 잘 붙으므로 플라스틱으로 된 분쇄기를 사용하는 것이 좋으며 조직분쇄기는 반드시 생물안전작업대에서 사용한다.

7.2.2	사용기록

해당장비를 사용한 시험연구종사자는 [서식  ]“(장비명) 사용대장”을 작성하고, 시험연구책임자는 사용내역을 확인한다.

8.	손 소독기

손을 소독하기 위해 적정 소독제(알코올 등)를 사용하여 장갑을 착용한 상태에서 손을 소독하도록 하며, 시험연구종사자는 다음의 사항에서 손소독을 수행한다.

1)	각 실험실에서 나올 때

2)	밀폐구역 내부복도에서 출갱의실로 나갈 때

3)	기타 손소독이 필요한 경우

손 소독기의 소독제가 없을 경우, 기관시설관계자	(또는 유지보수용역업체 관계자)에 연락한다.

9.	기타 장비 (해당시)

기타 보호구가 있는 경우 추가 기술

10.	장비 사용기록 대장 관리 (권장)

10.1	사용기록

장비 사용자는 해당장비의 사용대장에 관련사항을 기입하고, 시험연구책임자자는 사용내용을 확인한다.

10.2	장비 사용기록 대장 보관

기관생물안전관리책임자는 장비 사용기록 대장을 5년간 보관한다.

10.3	장비 사용기록 대장 위치

장비 사용기록 대장 위치

[장비 사용기록 대장 위치]

호실	실명	장비명
		생물안전작업대
		고압증기멸균기
		원심분리기

호실	실명	장비명
		패스박스
		패스룸
		초음파파쇄기

[Prototype ABL2] 제  장  실험실 표준작업절차

1.	실험실안전수칙

※“실험실 표준작업절차”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	생물안전사고의 주요원인

시험연구종사자의 실수, 익숙하지 못한 실험 기술, 장비의 잘못사용이 실험실 생물안전사고의 주요원인이다. 병원체를 직접 다루는 것뿐만 아니라 각종 사람 및 환경 유래 검체에 대한 생물학적 실험도 생물안전 확보의 주요 영역이다.

1.2	실험실 안전수칙 준수사항

1.2.1	안전수칙 숙지

실험을 실시하기 전에 필요한 안전작업 요령 및 사고 발생 시 응급조치 등을 충분히 숙지한다.

1)	실험을 수행하기 전에 취급할 미생물과 감염성물질, 실험방법, 개인보호구의 탈․착	용방법 등을 숙지하고, 감염성물질 등의 유출사고 및 감염사고 발생 시 응급조치	등에 대한 교육․훈련을 받아야 한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 시험연구종사자에게 생물안전교육을 정기적으로 실시하	고 필요한 경우 추가로 실시할 수 있으며, 관련 기록을 작성․보관한다.

3)	신규 시험연구종사자는 소속 기관 또는 전문교육기관에서 실시하는 신규자 대상	생물안전교육을 이수한다.

4)	모든 시험연구종사자는 생물안전 정기교육을 이수하여야 한다.

1.2.2	지정실험구역

취급하는 미생물 및 감염성물질 등의 위험도를 고려한 연구시설의 생물안전등급에 따라 지정된 실험구역에서 실험을 수행한다.

1)	취급하는 미생물, 독소 등의 특성, 실험방법 등을 고려하여 위해성 평가를 실시하	고 그 결과에 따라 적절한 물리적 밀폐가 가능한 실험구역을 지정 및 사용한다.

2)	동물실험은 동물실험실 및 지정된 구역에서만 수행한다.

1.2.3 출입통제

실험실의 주 출입문은 항상 닫아 두며 허가받지 않은 사람이 임의로 실험실에 출입하지 않도록 한다.

1)	실험실 주 출입문은 항상 닫아둔다. 출입문은 일반구역과 실험구역을 구분하는 중	요한 수단이고 실험실에서 발생 가능한 유출사고 및 에어로졸이 복도, 사무실 등의	일반구역으로 확산되는 것을 일차적으로 차단할 수 있다.

2)	외부인 (예. 관련 외부 업체 직원, 운반 회사, 기타 기관 소속이 아닌 일반인 등)이	실험실로 직접 출입하는 것은 금지하며, 출입이 필요한 경우 시험연구책임자 또는	생물안전관리부서의 승인을 받도록 한다.

1.2.4 개인보호구 착용

실험 수행 시, 실험복은 항상 착용하고 실험 위해도 등급에 따라 적합한 개인보호구를 선택하여 착용한다.

1)	개인보호구는 미생물 취급 실험 수행 시 항상 착용하고 올바른 탈․착용 방법을 숙	지한다.

2)	실험 수행 중 사무실로 들어 갈 경우, 착용했던 개인보호구는 탈의하고 손을 세척	한 후 입실한다.

3)	화장실, 도서실, 로비, 사무실 등의 일반구역 출입 시에는 실험복, 장갑 등 실험 중	에 착용한 개인보호구를 반드시 탈의한다.

4)	실험복은 평상복과 구분하여 별도의 장소에 보관․관리한다.

5)	귀마개, 보안면, 보안경 등 필요한 개인보호구는 실험 수행 방법 및 위해도 등급에	따라 시험연구책임자 및 생물안전관리책임자 등과 상의하여 착용하도록 한다.

(예. 초음파 분쇄 : 귀마개 착용, 콘택트렌즈 착용자 : 보안경 착용 등)

1.2.5	에어로졸 발생 최소화

모든 실험 조작은 가능한 에어로졸 발생을 최소화시키는 방법으로 실시하고 반드시 기계적 피펫팅을 한다.

1)	원심분리 또는 초음파 분쇄 시 에어로졸 발생을 줄일 수 있는 안전 원심 캡 등의	보호 장치를 사용한다.

2)	입으로 피펫을 사용하는 것은 절대 금한다.

1.2.6	생물안전작업대 사용

병원성 미생물을 포함한 감염성물질의 취급은 반드시 생물안전작업대와 같은 물리적 밀폐가 가능한 실험장비에서 수행한다.

1)	생물안전작업대는 취급 미생물 및 감염성물질 또는 수행 실험방법을 고려하여 실	시한 위해성 평가 결과를 토대로 알맞은 형태의 것을 선택하여 설치한다. 일반 미	생물실험 또는 취급 미생물의 위험군(risk group)이 2등급 이상인 경우, 생물안전작	업대 Class Ⅱ급 이상의 종류를 사용한다.

2)	생물안전작업대의 올바른 사용 및 관리방법, 일반 미생물 실험법 등을 숙지한다.

1.2.7	주사기 등 사용 (해당시)

주사기 등 날카로운 도구를 사용 취급하는 실험의 경우는 안전한 방법으로 사용하여야 한다. 주사기, 유리와 같이 뾰족하거나 날카로운 물체를 사용하는 것은 찔림, 베임 등으로 실험실 내 사고로 이어질 수 있으므로 사용을 최소화하여야 한다. 연구시설 내에서는 유리주사기 등 재사용이 가능한 주사기류는 사용하지 않아야 하며 주사침이 분리되는 주사기류의 사용도 최소한으로 억제한다. 일회용을 사용하며 주사침이 주사기 본체와 일체화된 주사기를 사용한다. 실험에 사용한 주사기는 재사용하지 않아야 한다. 사용을 마친 주사기는 주사침을 제거하고 전용용기에 넣어 멸균 등으로 생물안전연구시설 내에서 1차 오염을 제거한 후 의료폐기물로 구분하여 폐기한다.

1)	안전하고 효과적인 대체방법이 있다면, 주사기 등 날카로운 도구를 사용하지 않는	다.

2)	주사기 바늘에 캡(뚜껑)을 다시 씌우지 않는다.

3)	일회용 주사기의 바늘은 손으로 제거하지 않으며, 구부리는 행위 등 손으로 조작을	하지 않는다.

4)	일회용 주사기를 폐기할 때는 주사침 분리기가 장착된 손상성폐기물전용용기	(sharps container)를 사용한다.

5)	주사침 분리기가 장착되지 않은 손상성폐기물전용용기를 사용할 경우에는 주사기	로부터 주사 바늘을 손으로 제거하지 않고, 폐기물전용용기에 폐기 처리한다.

1.2.8 정리정돈 및 소독

실험이 끝난 후에는 생물안전작업대 및 실험대를 정리 ․ 소독하고 실험 중 오염사고가 발생한 경우, 즉시 관리자에게 보고하고 소독 등의 적절한 조치를 취한다.

1)	취급 미생물 및 감염성물질에 효과적인 화학(살균)소독제를 선택하여 실험 시작 전	과 후에 생물안전작업대 및 실험대를 소독한다.

2)	실험 중 유출사고 및 에어로졸이 발생한 경우, 즉시 이를 주변 시험연구종사 및 시	험연구책임자들에게 알려 지시에 따르고 생물학적 유출물 처리함(biological spill	kit) 등을 이용하여 소독 및 적합한 조치를 취한다.

1.2.9 손씻기 등

실험 종료 후, 그리고 실험실을 나올 때에는 반드시 손을 씻는다.

1)	실험구역에 손 세척대, 비누, 종이타월 등은 실험실 출입문 근처 등 사용이 용이한	구역에 설치하여 관리한다.

2)	퇴실 시 손과 신체 노출부위 등을 세척하고 필요한 경우 소독한다.

1.2.10	실험 외 행동 금지

지정된 실험구역에서는 음식섭취, 식품보존, 흡연, 화장 행위 등을 금한다.

1)	음식물의 저장 및 섭취 등은 사무실 등의 비 실험구역을 이용한다.

2)	콘택트렌즈를 착용한 경우, 실험실 내에서의 렌즈 세척, 보관 및 재착용 등은 금지	한다. 또한 콘택트렌즈를 착용하고 병원성 미생물, 감염성물질 등을 취급할 경우	고글, 보안면 등을 사용한다.

1.2.11	생물위해표시

병원성 미생물 및 감염성물질 등을 취급하거나 보관하는 장소(예. 생물안전작업대, 배양기, 보관용 냉장고, 냉동고 등)에는 생물위해표시(biohazard mark)를 붙인다.

1.2.12	시험·연구종사자는 시험연구책임자 및 기관생물안전관리책임자가 실험실 안전을 위하여 정하는 기타 사항들을 준수한다.

2.	검체취급방법 (해당시)

2.1	검체의 이동

2.1.1	검체의 OOO기관내 이동

OOO기관 내에서 병원성 미생물 및 감염성물질 등을 이동할 때에는 2중 밀폐포장하고 견고한 운반 용기에 담아 안전하게 운반한다.

1)	1차 용기는 뚜껑을 돌려 닫는 것으로 잘 깨지지 않는 재질로 밀폐능이 있어야 한	다.

2)	2차 용기는 1차 용기를 담을 수 있는 크기로 재질 및 특성은 1차 용기와 같다. 내	용물에 대해 표기하고, 2차 용기 표면을 소독하여 실험실 외부로 이동한다.

3)	이동 시, 뛰거나 던지는 등의 위험한 행위는 금하고, 내용물의 파손에 대비하여, 이	동용 트레이를 이용하여 안전하게 운반한다.

2.1.2	검체의 OOO기관 외부 반출

감염성물질의 안전수송방법은 [부록  ]“감염성물질 수송”에 따른다.

1)	카테고리 A에 해당되는 검체

「감염성물질 안전수송지침(질병관리본부)」에 따라 카테고리 A 수송 전용 용기를	사용하여 수송과정 중 사고가 발생하더라도 감염성	물질이 밖으로 유출되지 않도록	3중 포장한다. 감염성물질을 담은 1차용기 외부는 반드시 소독하고 감염물질의 관	련 정보 및 기록은 2차용기 외부에 둔다. 포장의 외부에 정확한 표기 및 표식 여부	를 확인하고 3차포장 외부에 “생물위해(Biological hazard)” 표식을 부착한다. 냉매	포장의 경우 2차용기 외부에 동봉하며 드라이아이스의 경우는 200kg이하로 한다.

2)	카테고리 B 항목에 해당되는 검체

「감염성물질 안전수송지침(질병관리본부)」에	따라 UN 포장기준 PI650을 준수한

3중 안전포장을 수행해야 한다. 1차용기와 2차 안전 수송용기는 누수방지용기로

수송과정에서 임의의 충격에 의한 파손을 막기 위해 견고한 용기(플라스틱용기 등)	사용과 수송 중 물리적 충격을 견딜 수 있는 내구성이 있는 3차 포장 용기를 사용	해야 한다.

<카테고리 A 감염성물질 포장 예시>      <카테고리 B 감염성물질 포장 예시>

2.2	검체 개봉

검체를 접수 받은 후 개봉하는 사람은 검체가 가지는 잠재적 위험성을 인식하고 있어야 하며 혹시 있을 수 있는 이동 중 발생한 내용물의 파손에 대비하여 교육을 받은 대로 안전하게 개봉해야 한다. 반드시 장갑, 마스크 등 개인보호장비를 착용하고 생물안전작업대에서 개봉하며 생물작업대 안에 소독제를 비치한다.

2.3	검체 분리

장갑 및 마스크 등 개인보호장비을 사용하고, 튀기거나 에어로졸이 발생하지 않도록 주의한다. 혈액이나 혈청에 대하여 주의를 기울여 분주 또는 실험을 하며 반드시 기계적 피펫장치를 사용한다. 사용된 피펫은 소독제에 담가 폐기하거나 멸균 후 세척 후 재사용한다. 응고된 혈액이 남아있는 튜브는 멸균 또는 소각한다.

2.4	검체의 저장 및 사용

1)	검체는 시험연구책임자의 감독 하에 “제  장 생물안전확보 및 보안관리”의 절차에	따라 시건장치가 달린 전용 저장 냉동고에 보관한다.

2)	검체를 이용하고자 하는 시험연구종사자는 시험연구책임자의 감독 하에 “제  장	생물안전확보 및 보안관리”의 절차에 따라 시건장치를 해제한 후, 생물안전작업대	로 운반하여 실험한다.

3.	청소 및 소독 절차 (해당시)

3.1	생물안전작업대에서 병원체 이동의 경우

1)	생물안전작업대 내에서 병원체가 포함한 시료는 용기 뚜껑을 닫아 밀폐시키고, 용	기 지지대에 안전하게 세운다.

2)	용기의 외부 표면을 소독제(알코올)를 묻힌 종이타월 등으로 소독하고, 2차 저장용	기에 담는다.

3)	생물안전작업대 내부에서 시험연구종사자의 손을 소독제(알코올)로 소독 후, 2차	저장용기를 지정저장장소에 보관하거나 폐기처리를 수행한다.

3.2	실험실 청소 및 소독

1)	실험실 청소 및 소독은 실험실을 사용하는	시험연구종사자에 의하여 실험이 수행	되는 기간 동안 수시 그리고 실험 완료 시점에 수행한다.

2)	실험실 전실에서 청소 및 소독 도구(소독액, 손걸레, 소독액 용기 등)를 준비한다.

3)	소독액은 사용병원체에 해당되는 비활성화 소독제를 선택하여 사용한다.

4)	준비된 소독액은 분무기 등을 이용하여 손걸레에 소독액을 묻혀 실험대, 출입문틀,	생물안전작업대 외부틀 등을 닦는다.

5)	실험실이 병원체에 의하여 현저히 오염이 되었다고 판단되는 경우, 시험연구종사자	는 기관생물안전관리책임자에 이를 보고하고, 기관생물안전관리책임자는 해당 실험	실에 대하여 소독(예. 과산화수소 훈중소독)을 유지보수관계자(또는 시설유지보수용	역업체)가 수행하도록 조치한다.

6)	시험연구종사자는 실험기간 동안 실험실 소독현황을 실험실 내부복도에 비치된

[서식  ]“소독기록대장”에 기재하고 기관생물안전관리책임자는 이를 확인한다.

3.3	사육실 및 부검실의 청소 및 소독

3.3.1	사육실 청소 및 소독

1)	사육실 청소 및 소독은 사육실을 사용하는	시험연구종사자에 의하여 실험동물이	사육되는 기간 동안 수시 그리고 동물사육 완료 시점에 수행한다.

2)	사육실 전실에서 청소 및 소독 도구(소독액, 손걸레, 소독액 용기 등)를 준비한다.

3)	소독액은 사용병원체에 해당되는 비활성화 소독제를 선택하여 사용한다.

4)	준비된 소독액은 분무기 등을 이용하여 손걸레에 소독액을 묻혀 실험대, 사육장비,	출입문틀, 생물안전작업대 외부틀 등을 닦는다.

5)	사육실이 병원체에 의하여 현저히 오염이 되었다고 판단되는 경우, 시험연구종사자	는 기관생물안전관리책임자에 이를 보고하고, 기관생물안전관리책임자는 해당 사육	실에 대하여 소독(예. 과산화수소 훈중소독)을 유지보수관계자(또는 시설유지보수용	역업체)가 수행하도록 조치한다.

6)	시험연구종사자는 실험기간 동안 사육실 소독현황을 사육실 내부복도에 비치된

[서식  ]“소독기록대장”에 기재하고 기관생물안전관리책임자는 이를 확인한다.

3.3.2	사육장비 청소 및 소독

사육장비의 매뉴얼에 따라서 청소 및 소독을 실시한다.

1)	동물실험이 종료되었을 경우 즉시 사육장비를 청소하여야 한다.

2)	사육장비 청소 시 사육장비 및 사육장비 내 사육장치 등의 날카로운 모서리에	주의하고, 장갑 등 착용하고 있는 개인보호구가 손상되지 않도록 주의하여야 한다.

3)	사육장비 및 사육실 내의 전기장치 부위를 제외하고 취급 병원체에 효과가 인정된	소독제 등을 도포하여 청소과정 중 발생할 수 있는 먼지가 억제될 수 있도록 사육	장비 및 사육실 내의 애벌소독을 실시한다.

4)	실험 종료 후 사육장비 내 깔짚, 분변, 남은 사료 등의 감염성 폐기물은 밀	봉 가능	한 폐기물용기 등에 넣고 취급 병원체에 효과가 인정되는 소독제를 폐기물이 담긴	밀봉 폐기물용기 등의 외부 전면에 도포하여 외부 소독을 실시한 후 고압멸균처리	기로 옮겨 생물학적 활성을 제거한 후 폐기하도록 한다. 이때 너무 많은 양의 폐기	물을 한꺼번에 담아 이동시키거나 고압멸균 처리에 폐기물의 내부까지 열전달이	어려워지지 않도록 주의하여야 한다.

5)	애벌 소독 후 분해 가능한 부품을 분해하여, 취급 병원체에 효과가 있는 소독제에	1시간 이상 담가 소독을 실시하고, 적절한 도구를 이용하여 세척한다.

6)	세척을 마친 후 하룻밤 정도 사육실 내를 건조시킨 후 훈증 소독 등 적절한 방법	을 사용하여 사육실 내를 소독한다. 이때 소독제가 사육장비 내부로 침투될 수 있	도록 사육장비의 각 부분별 잠금장치 및 외부 차단장치를 개방하여야 한다.

7)	시험연구종사자는 사육장비 소독 현황을 사육실 내부복도에 비치된 [서식  ]“소독	기록대장”에 기재하고 기관생물안전관리책임자는 이를 확인한다.

3.3.3	부검실 청소 및 소독

1)	부검실 청소 및 소독은 부검실을 사용하는	시험연구종사자에 의하여 부검 완료 시	점에 수행한다.

2)	전실에서 청소 및 소독 도구(소독액, 손걸레, 소독액 용기 등)를 준비한다.

3)	소독액은 사용병원체에 해당되는 비활성화 소독제를 선택하여 사용한다.

4)	준비된 소독액은 분무기 등을 이용하여 손걸레에 소독액을 묻혀 부검 후, 오염물을	소독하기 위하여 생물안전작업대(또는 부검대) 내외부 , 생물안전작업대(또는 부검	대) 주변바닥 등을 닦는다.

5)	부검실이 병원체에 의하여 현저히 오염이 되었다고 판단되는 경우, 시험연구종사자	는 기관생물안전관리책임자에 이를 보고하고, 기관생물안전관리책임자는 해당 부검	실에 대하여 소독(예. 과산화수소 훈중소독)을 유지보수관계자(또는 시설유지보수용	역업체)가 수행하도록 조치한다.

6)	시험연구종사자는 부검실 소독 현황을 부검실 내부복도에 비치된 [서식  ]“소독기	록대장”에 기재하고 기관생물안전관리책임자는 이를 확인한다.

3.4	실험구역 내 폐기물 이동의 경우

1)	실험 후 배출되는 병원체가 포함된 감염성폐기물은 실험실 구역에 위치한 폐기물	보관용기에 담는다.

2)	폐기물 보관용기는 수시로 폐기물 전용 봉투(또는 박	스)에 담고, 표면을 소독한 후	내부복도에 설치된 고압증기멸균기로 이동하여 멸균 처리 한다.

3)	고압증기멸균기가 운전되는 동안 밀폐구역 내에서의 폐기물의 임시보관은 지정된	장소에 둔다.

4)	병원체에 따라서는 별도의 표준작업절차에 따라 소독을 수행하고 멸균처리한다.

3.5	장비 반출입의 경우

1)	연구시설 내 장비의 반입은 패스룸을 통하여 반출입 한다.

2)	반출되는 장비는 패스룸 내 설치된 소독기(예: 과산화수소수 훈증소독기)를 이용하	여 장비 표면 및 내부를 소독하여 비오염화 한 후 반출 한다.

3)	장비 반입의 경우에 필요시 패스룸 내 설치된 소독기(예: 과산화수소수 훈증소독기)	를 이용하여 소독을 한다.

4)	장비의 소독은 유지보수관계자 또는 시설유지보수용역업체가 수행하도록 조치한다.

5)	사용 해당부서 담당자, 기관생물안전관리자 및 유지보수관계자(또는 시설유지보수	용역업체 관계자)가	함께 장비의 반출입 과정을 확인한다.

4.	폐기물 관리 (해당시)

연구시설 내에서 발생하는 의료폐기물의 안전한 처리를 위하여 「폐기물관리법」에서 정한 의료폐기물의 기준 및 방법에 의한다. 따라서 시험연구종사자는 「폐기물관리법」관련 규정을 충분히 숙지하고 처리절차를 준수하여 안전한 폐기물 처리를 위해 노력해야 한다.

4.1	폐기물 분류

4.1.1	폐기물 분류

실험실에서 발생하는 폐기물은 지정폐기물에 해당하며 그 중 감염성물질과 접촉․혼합되는 폐기물 등 실험에 사용되는 폐기물은 의료폐기물로 구분할 수 있다.  「폐기물관리법」에서 정하는 폐기물 분류는 다음과 같다.

4.2.2	의료폐기물

“의료폐기물”이란 보건·의료기관, 동물병원, 시험·검사기관 등에서 배출되는 폐기물 중 인체에 감염 등 위해를 줄 우려가 있는 폐기물과 인체 조직 등 적출물(摘出物), 실험동물의 사체 등, 보건 · 환경보호 상 특별한 관리가 필요하다고 인정되는 폐기물

4.2	의료폐기물 구분

의료폐기물은 크게 격리, 위해 및 일반 의료폐기물 3가지로 구분한다.

4.2.1	격리의료폐기물

「감염병법」법률 제2조제1항에 따른 감염병으로부터 타인을 보호하기 위하여 격리된 사람에 대한 의료행위에서 발생한 일체의 폐기물

4.2.2	위해의료폐기물

조직물류폐기물	인체 또는 동물의 조직·장기·기관·신체의 일부, 동물의 사체, 혈액·고름 및 혈액생성물(혈청, 혈장, 혈액제제)
병리계폐기물	시험·검사 등에 사용된 배양액, 배양용기, 보관균주, 폐시험관, 슬라이드, 커버글라스, 폐배지, 폐장갑
손상성폐기물	주사바늘, 봉합바늘, 수술용 칼날, 한방침, 치과용침, 파손된 유리재질의 시험기구
생물·화학폐기물	폐백신, 폐항암제, 폐화학치료제
혈액오염폐기물	폐혈액백, 혈액투석 시 사용된 폐기물, 그 밖에 혈액이 유출될 정도로 포함되어 있어 특별한 관리가 필요한 폐기물

4.2.3	일반의료폐기물

혈액·체액·분비물·배설물이 함유되어 있는 탈지면, 붕대, 거즈, 일회용 기저귀, 생리대, 일회용 주사기, 수액세트

4.3	전용용기의 사용 및 처리

의료폐기물 전용용기는 봉투형 용기 및 상자형 용기로 구분되며 봉투형 용기의 재질은 합성수지류이고 상자형 용기의 재질은 골판지류 또는 합성수지류이다. 전용용기는 환경부장관이 지정한 기관이나 단체가 환경부장관이 정하여 고시한 검사기준에 따라 검사한 전용용기만을 사용하여 처리하여야 한다. 또한, 용기 크기는 다양하므로 배출되는 폐기물의 양에 따라 선택하여 사용한다.

4.3.1	전용용기 표시사항

전용용기의 표시사항에 각 항목을 작성한다.

이 폐기물은 감염의 위험성이 있으므로 주의하여 취급하시기 바랍니다.
배출자		종류 및 성질과 상태
사용개시 연월일		수거자

1)	사용개시 연월일 : 의료폐기물을 전용용기에 최초로 넣은 날

2)	의료폐기물은 발생한 때부터 종류별로 구분하여 전용용기에 넣어 보관한다.

3)	사용 중인 모든 전용용기에 반드시 뚜껑을 장착하며 항상 닫아둔다. 또한, 주기적	으로 소독하여 사용한다.

4)	의료폐기물은 보관기간을 초과하여 보관하지 않는다.

4.3.2	전용용기 및 보관기간

폐기물별 지정 용기 및 보관기간에 대한 사항은 다음과 같다.

4.4	고상폐기물 처리 절차

1)	모든 폐기물은 지정 폐기물 처리 봉투(또는 용기)에 담고, 용기표면을 소독제(또는	70%알코올)로 소독한 후 폐기물 전용 보관함에 보관한다.

2)	유리제품 및 바늘 등의 날카로운 폐기물은 다른 폐기물로부터 분리하여 별도의 손	상성폐기물 전용 폐기함에 보관한다.

3)	보관된 폐기물은 멸균용 봉투에 담아 양문형고압멸균기에서 멸균한다.

①	멸균용 봉투 내 2/3만 폐기물을 담아 멸균한다.

②	멸균용 봉투 입구는 고무 밴드 등으로 느슨히 묶는다.

③	고압증기 멸균 확인용 테입을 봉투에 붙인 후 멸균한다.

4.5	실험동물 사체 처리 절차

4.5.1	처리기준

실험동물의 사체는 위해의료폐기물(조직물류폐기물)으로 처리한다.

4.5.2	폐기확인요청서 및 확인서

사체를 처리하는 경우, “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차에 따른다.

4.6	액상폐기물 처리 절차

1)	액상 폐기물은 고압증기 멸균 가능한 용기에 담고, 용기 표면을 알코올로 소독한	후 지정 장소에 보관한다.

2)	액상폐기물 처리시마다 적정 농도의 살균제를 액상폐기물 보관 컨테이너에 투입하	여 소독하고, 액상폐기물 용기통 내용물이 3/4 정도 일 때 고압증기멸균 처리한다.

3)	일회용 플라스틱 용기내의 배양액은 뚜껑을 완전히 닫은 후 멸균용 봉투(이중봉합	을 위해)내에 담고 고압 증기 멸균 전에 전용 멸균 용기에 넣는다.

4.7	배양물, 조직 체액 등 오염 폐기물 처리 절차

1)	감염된 동물의 체액 및 조직 등의 폐기물은 의료폐기물 전용용기(합성수지)에 보관	하며, 뚜껑을 닫아 누출의 위험성을 최소화 한다.

2)	적절한 소독액으로 1차 처리하여 생물학적 위험성을 감소시킨 후 전용용기	에 넣는	것을 권장한다.

3)	일반적으로 전용용기에 폐기물이 75~80 % 정도 들어있을 경우 폐기물처리를 하기	위해 멸균전실로 이동하여 처리한다. 그러나 감염성위험이 높은 폐기물이 발생한	경우, 전용용기에 소량만 들어 있어도 즉시 멸균처리 한다.

4)	폐기물은 생물학적 오염을 제거한 후 연구시설 밖으로 배출하며, 폐기물처리 기간	내에 처리되도록 해야 한다.

4.8	폐수 처리 절차

1)	밀폐구역 내(싱크대, 눈세척기, 샤워실, 멸균기 응축수)에서 발생된 폐수는 폐수처리	시스템에서 멸균 후 폐수저장탱크으로 보관된다.

2)	폐수저장탱크에 보관된 폐수가 2/3 이상 채워졌을 때 전문 폐기물수거업체를 통하	여 위탁 처리한다.

4.9	감염성 폐기물 불활화

4.9.1	불활화

감염위험이 있는 폐기물은 고압증기멸균 등 적절한 방법으로 불활화시킨 후 배출한다.

4.9.2	기록관리

폐기물을 불활화시키고, 불활화방법에 따라서 관련 대장(예: [서식 ]“고압증기멸균기 사용대장” 등)에 기록하고, 5년간 보관한다.

4.10	폐기물 에어로졸 발생 최소화

폐기물 처리 및 보관 중에는 감염성 에어로졸 발생 가능성이 항시 존재하므로 이에 대한 주의가 필요하다. 폐기물 보관 중에 에어로졸 발생을 억제할 수 있는 폐기물통에 뚜껑 등을 설치한다.

4.11	기타

4.11.1	화학폐기물

화학폐기물은 화학물질이 가지고 있던 인화성, 부식성, 독성 등의 특성을 유지하거나 합성 등으로	새로운 화학물질이 생성되어 유해·위험성이 실험 전의 화학물질보다 커질 수 있다. 따라서 발생된	폐기물은 그 성질 및 상태에 따라서 분리하여 수집한다. 고상/액상 폐기물로 구분, 유기계/무기계/산/알카리 등의 구분, 기타 성분에 따라서 폐기물을 구분하여 처리한다.

4.11.2	혼합화학폐기물

만약 불가피하게 혼합을 해야 하는 경우	반드시 확인하여 혼합이 가능한 물질인지 아닌지 확인한다. 혼합한 폐액은 과량으로 혼합된 물질을	기준으로 분류하고 혼합된 물질을 모두 폐기물스티커에 기록한다. 화학물질 보관하던 용기(유리병.	플라스틱병) 화학물질이 묻어 있는 장갑 및 기자재(초자류 등) 뿐만 아니라 실험기자재를 닦은 세척수도 화학폐기물로 처리한다.

5.	화학물질 안전관리 (해당시)

5.1	보관 및 취급

시험연구종사자는 화학물질을 보관, 취급할 때에는 다음 각 호의 사항을 준수하여야 한다.

1)	화학물질은 환기가 가능한 전용 시약장에 보관하며, 혼합 저장 시 위험한 물질들을	파악하여 성상별로 구분하여 보관할 것

2)	화학물질에 대한 실험은 흄후드 내에서 수행하며 흄후드는 화학물질의 저장 및 폐	기장소로 사용하지 않을 것

3)	실험종사자는 사용 전 반드시 물질안전보건자료(MSDS)를 토대로 화학물질의 특성,	유해성 등을 숙지할 것

4)	화학물질 목록표를 작성하여 비치하며 정기적으로 현황을 파악하여 재고량을 관리	할 것

5)	화학물질을 취급하고자 하는 자는 안전한 취급 및 사용에 관하여 충분히 교육을	받을 것

5.2	표지 부착

1)	생물안전관리부서(또는 관련 담당부서)는 화학물질을 저장 및 취급하는 장소에 시	험연구종사자나 방문자가 알 수 있도록 안전표지를 부착하여야 한다.

2)	생물안전관리부서(또는 관련 담당부서)는 화학물질의 용기에는 화학물질명, 유해위	험성, 응급조치요령, 공급자 정보 등의 내용을 포함한 라벨을 부착하여야 한다.

5.3	폐기처리

1)	시험연구종사자는 실험 후 발생하는 액체, 고체 등의 화학물질과 유효기간이 지나	거나 변색, 오염된 화학물질을 폐기 처리한다.

2)	시험연구종사자는 화학물질의 안전한 폐기처리를 위하여 화학물질의 특성, 유해성	등을 정확히 파악하여 처리한다.

6.	시약관리 (해당시)

6.1	표지부착

시험연구종사자는 시약 용기에는 식별이 용이하도록 표지를 부착하고 표지에는 시약의 명칭, 위해정도, 구입일(제조일자) 등 안전한 사용에 필요한 사항을 기재하여야 한다.

6.2	물질보건자료 비치

시험연구책임자는 실험실 내 각 화학약품의 유해·위험성·취급방법·응급처치요령 등을 설명해 주는 자료인 물질안전보건자료(MSDS)를 비치하여야 한다.

6.3	취급기준

시약의 운반, 저장, 사용, 폐기 등 세부 취급기준은 다음과 같다.

[시약 취급기준]

1. 표지기준

시약용기에는 독극성 물질, 인화성 물질, 반응성 및 부식성 물질 등 식별이 용이하도록 표    지를 부착하여야 하며, 다른 용기에 덜어서 임시로 사용하는 경우에도 시약의 명칭, 제조일     자, 위해정도 등을 표시하여 안전사고를 예방하여야 한다.

2. 운반기준

① 가벼운 시약은 두 손을 사용하여 운반하고, 무거운 경우에는 바퀴가 달린 카트 등의 운       반기구를 이용한다.

② 1ℓ 이상의 유리병 등을 운반할 때에는 고무로 된 운반용기나 양동이 등을 사용하여 병       이 깨지는 것을 최소화하여야 한다.

3. 저장기준

① 시약은 실험에 필요한 양만 실험대 위에 두어야 하며, 실험실에 대형용기의 시약을 두       어야 할 경우, 기관안전관리책임자(또는 시험연구책임자)가 지정하는 안전한 위치에 별       도  관리하여야 한다.

② 화학물질을 저장 및 보관 시 환기설비 및 낙하방지가드가 설치된 밀폐형 캐비닛에 저        장, 보관하여야 하며, 전체명칭, 위험주의 경고표지, 보관시약리스트를 시약장에 부착하       여야 한다.

③ 독성 약품은 반드시 시건장치가 있는 시약장에 보관하여야 한다.

④ 시약장 내 인화성 및 가연성 물질과 산화성 물질은 성상별 분리 보관하여야 한다.

⑤ 인화성 액체의 주변에는 가열기구나 전기 스파크 등이 발생하는 기기나 장비를 함께 비       치해서는 안 된다.

⑥ 액체는 눈높이 이상의 선반에 보관하여서는 안 되고, 유독성 시약과 일반시약은 분리        보관하여야 한다.

⑦ 에테르류의 용매는 용기를 개봉 후 6개월 이상 보관하지 않도록 하며, 용기 개봉 일자       를 반드시 별도로 기록하여 용기에 부착한다.

4. 사용기준

① 사용하기 전에 반드시 물질안전보건자료(MSDS)를 찾아 해당 시약에 대한 물리, 화           학적인 특성과 반응성 그리고 이의 독성에 관한 내용을 숙지하고, 착용해야 할 보호장       비, 비상시 응급처치 요령을 숙지하여야 한다.

② 인화성 물질을 취급할 때에는 소화기의 위치 및 사용법을 숙지한 후에 작업을 시작한        다.

③ 유독성 시약을 취급할 경우에는 반드시 보안경, 보호장갑 등 보호장비를 착용해야 하며,       눈, 얼굴, 피부 등 신체에 묻었을 경우에 곧바로 세척할 수 있도록 한다.

5. 폐기기준

① 산성 및 염기성 폐시약 수거용기, 산화제와 환원제 폐시약 수거용기는 실수 등으로 인       해 섞이지 않도록 따로 보관하여야 한다.

② 폐시약 및 세척액은 의료폐기물처리 기준에 따라 배출 처리하여야 한다.

7.	실험용 가스관리 (해당시)

7.1	실험용 가스관리

생물안전관리부서(또는 유지보수관계자)는 실험용 가스 용기에는 식별이 용이하도록 표지를 부착하고 표지에는 가스의 명칭, 위해정도(독극성, 인화성, 반응성 및 부식성), 입고일자 등 안전한 사용에 필요한 사항을 기재하여야 한다.

7.2	세부취급기준

실험용 가스의 운반, 저장, 사용 등 세부 취급기준은 다음과 같다.

[실험용 가스 취급기준]

1. 표지기준

가스용기에는 식별이 용이하도록 표지를 부착하여야 하며, 표지에는 가스의 명칭, 위해정도    (독극성, 이화성, 반응성 및 부식성), 입고일자를 포함한 정보 등을기록하여 안전사고를 예    방하여야 한다.

2. 운반기준

① 반드시 보호 캡을 씌운다.

② 떨어뜨리거나 충격을 주어서는 안 된다.

③ 가연성 가스와 독성가스는 함께 운반하여서는 안 된다.

④ 무거운 가스통은 반드시 바퀴가 달린 카트를 사용하여 운반한다.

3. 저장기준

① 용기 보관장소에는 그 출입구 및 외부에 식별이 용이하도록 「독성 또는 가연성」 표시       를 부착하여야 한다.

② 가스용기를 저장할 경우에는 그 저장소의 주위 2m 이내에는 화기 또는 발화성 인화성       물질을 두어서는 안 된다.

③ 가스용기는 충격으로 인한 밸브 등의 손상을 방지하기 위하여 안전한 장소를 선정하여       로프나 체인 등으로 벽면이나 기둥에 견고히 고정시킨다.

④ 가스용기는 온도 40℃ 이하에서 보관하여야 한다.

⑤ 독성 및 가연성 가스의 저장소에는 화기를 절대로 가까이 접근하지 못하도록 하고 「금       연」 「화기엄금」 「위험」등의 표시를 외부에서 보기 쉬운 곳에 부착한다.

⑥ 가연성 가스 저장소에는 소화기(분말소화기, 탄산가스소화기 등)를 비치한다.

⑦ 독성가스 저장소에는 흡수제, 중화제 및 독성가스에 적당한 방독마스크, 송풍마스크

또는 공기호흡기 등을 상시 준비하여 두어야 한다.

⑧ 통로는 배치면적의 20% 이상을 확보하여야 한다.

⑨ 충병과 공병의 구별을 명확하게 하여야 한다.

⑩ 가스용기를 보관 장소에 저장할 경우 가스누설이 없는 지를 사전에 확인하여야 한다.

4. 사용기준

① 가연성 가스를 사용하는 장소에는 반드시 유효한 소화기를 비치하여야 한다.

② 가연성 가스를 소비할 경우 감압 설비와 소비 설비간의 역화 방지 설비를 한다.

③ 가연성 가스, 독성가스를 취급하는 장소에서는 가스 지식을 잘 알고 취급에 대하여는        충분히 숙련된 사람이외에는 취급을 하지 않는다.

④ 독성가스를 사용할 경우에는 가스 누설에 대비하여 가스잠금장치를 설치하여야 한다.

⑤ 독성가스를 사용할 경우 그것에 적당한 방독 마스크 및 보안경 등의 장비를 착용하여야       한다.

⑥ 압력 조절기, 압력계, 유량계 등의 가스와 접촉하는 기구나 부품은 전용화하고 그 외

다른 가스와 병행 사용하여서는 안 된다.

⑦ 압력조절기를 부착할 때에는 취부구의 먼지 등을 깨끗하게 청소하고 난 뒤 부착한다.

⑧ 용기의 개폐는 압력조절기나 압력계의 정면에서 조작이 쉽도록 하여야 한다.

⑨ 밸브, 배관, 압력계 등의 부착위치의 누설여부를 점검한 후 작업에 임해야 한다.

⑩ 충병과 공병과는 충분한 간격을 두어 구분 보관하고 별도의 표시를 한다.

8.	방사성 실험장비관리 (해당시)

8.1	방사성 실험장비 관리

1)	시험연구책임자는 방사능물질 함유 장비 및 방사선 발생장치(이하 "방사성 실험장	비”라 한다) 사용에 자격이 있는 자를 별도로 지정하여 지정된 자 이외에는 임의로	사용할 수 없도록 하여야 한다.

2)	생물안전관리부서(또는 담당자)는 방사성 실험장비 사용에 따른 방사선 장해 등 위	험요소가 발생하지 않도록 안전사고 예방에 필요한 조치를 하여야 한다.

3)	방사성실험장비의 사용, 저장, 운반, 폐기 및 기타 취급상 필요한 기준은 「원자력	법」 및 「OOO기관 방사성동위원소 안전관리규정」(해당시)에 따른다.

[Prototype ABL2] 제  장  실험동물의 사용과 관리 (마우스)

1.	실험동물의 반입 관리

1.1	실험동물 반입 승인

※“실험동물의 사용과 관리(마우스)”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1.1	실험동물반입 신청

실험수행을 위한 실험동물의 반입은 승인을 득하고 이루어져야하고, 연구시설 내에서 사육된 실험동물의 반출은 원칙적으로 금지된다.

실험실내 실험동물을 반입하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

1.1.2	사육기간 확인

기관생물안전관리책임자는 사육기간과 해당 사육실의 사용현황을 확인하고 실험동물의 반입을 승인한다.

1.2	실험동물 검수 및 검역

1.2.1	실험동물 입수 준비

실험동물관리자와 시험연구종사자는 실험동물 입수 전에 검역실과 사육실의 수용규모 등의 확인, 시험계획서 확인, 사육기자재 등을 확인하고, 실험동물 입수를 준비한다.

1.2.2	실험동물 검수 (해당시)

1)	질병검사 성적서

-	실험동물관리자와 시험연구종사자는 입수동물에 대한 질병검사 성적서를 입수하	고,	이상이 없을 경우, 동물의 질병검사를 생략하고 동물의 검수검사를 실시한다.

-	입수동물의 질병검사 성적서가 없는 경우, 실험동물관리자와 시험연구책임자는	협의하여, 질병검사를 외부에 의뢰를 할 지 여부를 결정하고, 검역검사를 실시한	다.

2)	동물운송기록지

-	동물납품자로부터 동물수송 도중에 이상유무와 동물납품업체가 작성한 실험동물	공급표 또는 동물수송상자에 첨부된 명세서에 기재된 내용을 확인하고, [서식  ]	“동물운송기록지” (또는 자체 기관양식)를 작성한다.

3)	이상발견 시 조치

-	동물수송상자의 파손, 명세서와의 부적합, 동물의 일반상태, 외관의 이상 등을 발	견하였을 경우 발견자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	동물수송상자가 훼손되어 외부의 공기가 상자 내로 직접 노출되었을 경우, 사육	구역으로 반입을 금하고, 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	이상의 종류, 정도에 따라 시험연구종사자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기	관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

1.2.3	실험동물 검역 (해당시)

1)	반입된 동물수송상자를 검역실내에서 개봉하고, [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”	(또는 자체 기관양식)를 작성한다.

2)	검역실내에서 [부록  ]	“동물식별”(또는 자체 기관양식)에 따라서 동물예비번호를	부여하고, 입수된 동물의 체중을 측정하고, [서식  ]	“검역 및 군분리 무게 측정	기	록지”(또는	자체 기관양식)를 작성한다.

1.3	사육실 반입절차

1.3.1	사육실 반입 동선

“제  장 실험실 동선 및 절차”에 따라서 사육실로 실험동물을 반입한다.

1.3.2	실험동물반입 확인

실험동물의 반입이 완료된 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)에 따라 기관생물안전관리자가 실험동물반입 사항을 확인한다.

1.3.3	실험동물 순화 (해당시)

1)	순화기간 동안 실험동물을 사육환경에 적응시키고, 건강상태를 평가한다.

2)	시험연구종사자는 순화기간동안 [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”(또는 자체 기관양	식)를 작성한다.

1.4	LMO동물 반입기록

LMO동물이 반입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.	물품 반(출)입 관리

2.1	사육물품의 반(출)입 승인

2.1.1	반(출)입인가

동물실험실내 사육물품을 반입과 반출하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.1.2	반(출)입절차

기관생물안전관리책임자의 승인을 받은 정해진 절차와 방법에 따라 사육물품을 반입 또는 반출할 수 있다.

2.2	병원체 및 시료의 반(출)입 승인

2.2.1	반(출)입인가

승인된 「연구계획서」에 명기된 병원체 및 시료만이 연구시설으로 반(출)입되며, 그 이외의 시료는 반(출)입이 금지된다. 시료를 반(출)입시켜야 할 경우, 시험연구책임자는 안전한 포장 및 이동방법 등을 확인하고, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.2.2	반(출)입절차

시료(병원체 등)를 담은 밀폐 컨테이너 포장 용기 외부 및 표면을 알코올로 소독하고  반(출)입한다.

2.2.3	LMO병원체 경우

LMO병원체의 반(출)입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.3	실험장비 반(출)입 승인

2.3.1	반(출)입인가

실험장비를 연구시설으로 반입 또는 연구시설 내 실험장비를 반출할 경우에는 [서식  ] “연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.3.2	반(출)입절차

실험장비는 사전 승인, 병원체의 비 오염화 또는 소독 등의 절차 없이 반(출)입시킬 수 없다. 연구시설 내 반입된 실험장비는 시험연구종자가 사용하기 전에 충분한 사전 지식을 숙지할 수 있도록 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자가 사전교육을 실시한다.

3.	사육관리

3.1	사육실 환경조건

1)	온도 : 20~26℃

2)	습도 : 30~70%

3)	조명 : 150~300Lux (바닥에서 40~85cm 높이)

4)	소음 : 60 phone 이하

3.2	케이지 내 동물수용 밀도

동물명	무게(g)	바닥면적/마리 (cm2)	케이지높이 (cm)
마우스	< 10	38.7	12.7
	15까지	51.6	12.7
	25까지	77.4	12.7
	> 25	≥ 96.7	12.7

※ 출처: Guide for the care and use of Laboratory Animals (Eighth Edition), Institute for

Laboratory Animal Research

3.3	사육물품 교환주기

1)	ISO cage :	1회/2주

2)	음수병 :  1회/2주

3)	사료 : 실험과 사료 소모량에 따라 결정

4)	기타 : 실험에 따라서 결정

3.4	사료 및 깔짚 관리

1)	사료 및 깔짚 등은 사용량과 규모에 따라 보관조건과 공간을 정한다. 밀폐구역 외	부에 마련된 보관창고의 경우, 곤충 및 설치류 방제장치를 설치한다. 사료를 오랜	기간 동안 보관하는 경우에는 냉장설비를 갖춘 보관창고에 보관하고, 보관물품에	대한 유효기간을 확인하고 관리한다.

2)	마련된 저장공간에 보관되는 사료와 깔짚은 바닥에 직접 닿지 않도록 선반 또는	트레이에 보관한다.

3)	사용을 위해 보관하고 있는 사료와 깔짚은 유효기관과 보관방법을 확인하고 사용	한다.

3.5	일과 후 사육관리

3.5.1	일과 후 관리절차

“제  장 연구시설운영관리, 7. 일과 후 연구시설관리”에 따라서 일과 후 사육관리를 한다.

3.5.2	업무사항

실험동물의 사료와 음수공급, 실내 온도와 공조상태 점검을 주된 업무로 한다.

3.6	사육실 및 부검실의 청소 및 소독 관리

사육실 및 부검실의 청소 및 소독관리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 3. 청소 및 소독절차”를 따른다.

3.7	실험동물 탈출

3.7.1	실험동물 탈출 방지

사육실에는 실험동물 탈출의 가능성에 대비하여 트랩 또는 탈출방지턱을 설치한다.

3.7.2	탈출 시 포획

실험동물 접종 및 부검 시에는 2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험동물의 탈출에 대비하고, 포획망 등의 장비를 이용하여 탈출한 실험동물을 포획한다.

3.7.3	탈출 실험동물 처리

1)	탈출한 실험동물을 포획한 후, 시험연구종사자는 시험연구책임자와 기관생물안전관	리책임자에게 보고를 한다.

2)	시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물에 대한 처리사항을	결정한다.

3.7.4	사육실의 청소 및 소독

시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물의 사육실에 대한 청소 및 소독에 대한 사항을 결정한다.

3.8	빈사 사망 및 이상동물 취급 (해당시)

실험동물의 빈사 사망 및 이상동물 취급방법은 “[부록  ] 실험동물의 빈사 사망 및 이상	동물 취급방법”을 참조한다.

4.	개인보호구

4.1	개인보호구 관리

개인보호구는 “제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차”에 따라 관리한다.

4.2	개인보호구 구성

개인보호구를 선택할 때에는 취급하는 미생물 및 위해물질의 감염경로 및 신체 노출 부	위를 고려하여 착용한다. (예. 흡입, 섭취, 주사 또는 주입, 흡수 등)

1)	실험복

2)	1회용 상하일체형 보호복 :

보호복 기준 (EN14126, ASTM1671)

3)	전면 보호형 마스크 및 필터 : (해당시)

밀폐성, 견고성 및 투명성 등을 확보한 전면	보호형	마스크 및 NIOSH N100 기	준에 적합한 필터를 사용한다.

Filters at least 99.97% of airborne particles. Not resistant to oil. Natiotioal Institute for Occupational Safety and Health, USA

4)	고글

5)	보호 장갑 : Latex 혹은 Nitrile 재질의 1회용 실험용 장갑

6)	비침수성 보호덧신

7)	비침수성 장화

8)	상하일체형 보호복 착용시 소매와 밑단 부분은 보호 장갑과 보호덧신 바깥쪽으로	나오도록 착용하며 비침수성 테이프를 이용하여 완전히 밀착시켜 활동 중 신체가	노출되지 않도록 하여야 한다.

9)	시험연구종사자는 필요시 두건과 (비침수성)토시 등을 착용할 수 있다.

10)	시험연구종사자는 부검 및 기타 실험 중이나 실험 종료 후 사육실 및 실험장소의	청소 등 작업을 할 경우에는 비침수성 앞치마 착용과 1회용 실험장갑에 면장갑 덧	끼기 등 필요에 따라 적절한 개인보호구를 착용한다.

5.	실험동물 개체식별

5.1	실험동물 개체식별방법

실험동물의 개체식별방법은 “[부록  ] 동물식별”에 따르고, 케이지에는 “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”를 작성해서 부착한다.

5.2	LMO동물 식별

유전자변형동물의 경우, “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”에 유전자변형동물에 대한 정보	를 반드시 표기한다. 또한 유전자변형동물의 생후 72시간 내에 개체식별이 가능하도록	표식을 해야 하며, 경우에 따라 영구 개체식별법을 사용할 수 있으며, 다음의 관리대장을	작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

6.	실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법 (해당시)

실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법은 “[부록  ] 실험동물의 체중, 음수 및 사	료섭취량 측정방법”을 참조한다.

7.	동물실험 기구류 (해당시)

동물실험에 사용되는 기구류와 사용법은 “[부록  ] 동물실험 기구류”을 참조한다.

1)	주사기

2)	경구투여기구

3)	외과용 기구류

4)	동물 고정기구류

8.	마우스의 이송 및 보정 (해당시)

실험동물의 이송 및 보정방법은 “[부록  ] 실험동물의 이송 및 보정방법”을 참조한다.

9.	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리 (해당시)

9.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

9.2	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리

실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리는 “[부록  ] 실험물질의 투여방법 및 투여	후 실험동물관리”를 참조한다.

10.	실험동물의 채혈 방법 (해당시)

10.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

10.2	실험동물 채혈

실험동물의 채혈 방법은 “[부록  ] 실험동물 채혈”을 참조한다.

11.	실험동물의 안락사 방법

실험동물의 안락사 방법은 “[부록  ] 실험동물 안락사”를 참조한다.

12.	부검 (해당시)

12.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

12.2	실험동물 부검

실험동물의 부검은 “[부록  ] 실험동물의 부검”을 참조한다.

13.	시료채취요령 (해당시)

13.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

13.2	시료채취

실험동물의 시료채취는 “[부록  ] 실험동물의 시료채취방법”을 참조한다.

14.	검체의 취급 주의사항

감염성 시료를 다루는 경우 시험연구종사자는 검체가 갖는 잠재적 위험성을 인식해야 하	며 장갑 등의 개인보호구를 착용하고 생물안전작업대 안에 소독 또는 멸균제를 비치하	고	실험에 임하며 사용된 일회용 기구나 오염된 장갑은 생물재해 봉투에 버린다.

15.	실험동물 사체 및 폐기물 처리

실험동물 사체 및 폐기물 처리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 4. 폐기물 관리”에 따라 처리한다.

16.	비상사항 대응

비상사항 대응은 “제  장 비상사항 관리”에 따라 대응한다.

[Prototype ABL2] 제  장  실험동물의 사용과 관리 (랫트)

1.	실험동물의 반입 관리

1.1	실험동물 반입 승인

※“실험동물의 사용과 관리(랫트)”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1.1	실험동물반입 신청

실험수행을 위한 실험동물의 반입은 승인을 득하고 이루어져야하고, 연구시설 내에서 사육된 실험동물의 반출은 원칙적으로 금지된다.

실험실내 실험동물을 반입하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

1.1.2	사육기간 확인

기관생물안전관리책임자는 사육기간과 해당 사육실의 사용현황을 확인하고 실험동물의 반입을 승인한다.

1.2	실험동물 검수 및 검역

1.2.1	실험동물 입수 준비

실험동물관리자와 시험연구종사자는 실험동물 입수 전에 검역실과 사육실의 수용규모 등의 확인, 시험계획서 확인, 사육기자재 등을 확인하고, 실험동물 입수를 준비한다.

1.2.2	실험동물 검수 (해당시)

1)	질병검사 성적서

-	실험동물관리자와 시험연구종사자는 입수동물에 대한 질병검사 성적서를 입수하	고,	이상이 없을 경우, 동물의 질병검사를 생략하고 동물의 검수검사를 실시한다.

-	입수동물의 질병검사 성적서가 없는 경우, 실험동물관리자와 시험연구책임자는	협의하여, 질병검사를 외부에 의뢰를 할 지 여부를 결정하고, 검역검사를 실시한	다.

2)	동물운송기록지

-	동물납품자로부터 동물수송 도중에 이상유무와 동물납품업체가 작성한 실험동물	공급표 또는 동물수송상자에 첨부된 명세서에 기재된 내용을 확인하고, [서식  ]	“동물운송기록지” (또는 자체 기관양식)를 작성한다.

3)	이상발견 시 조치

-	동물수송상자의 파손, 명세서와의 부적합, 동물의 일반상태, 외관의 이상 등을 발	견하였을 경우 발견자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	동물수송상자가 훼손되어 외부의 공기가 상자 내로 직접 노출되었을 경우, 사육	구역으로 반입을 금하고, 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	이상의 종류, 정도에 따라 시험연구종사자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기	관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

1.2.3	실험동물 검역 (해당시)

1)	반입된 동물수송상자를 검역실내에서 개봉하고, [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”	(또는 자체 기관양식)를 작성한다.

2)	검역실내에서 [부록  ]	“동물식별”(또는 자체 기관양식)에 따라서 동물예비번호를	부여하고, 입수된 동물의 체중을 측정하고, [서식  ]	“검역 및 군분리 무게 측정	기	록지”(또는	자체 기관양식)를 작성한다.

1.3	사육실 반입절차

1.3.1	사육실 반입 동선

“제  장 실험실 동선 및 절차”에 따라서 사육실로 실험동물을 반입한다.

1.3.2	실험동물반입 확인

실험동물의 반입이 완료된 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)에 따라 기관생물안전관리자가 실험동물반입 사항을 확인한다.

1.3.3	실험동물 순화 (해당시)

1)	순화기간 동안 실험동물을 사육환경에 적응시키고, 건강상태를 평가한다.

2)	시험연구종사자는 순화기간동안 [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”(또는 자체 기관양	식)를 작성한다.

1.4	LMO동물 반입기록

LMO동물이 반입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.	물품 반(출)입 관리

2.1	사육물품의 반(출)입 승인

2.1.1	반(출)입인가

동물실험실내 사육물품을 반입과 반출하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.1.2	반(출)입절차

기관생물안전관리책임자의 승인을 받은 정해진 절차와 방법에 따라 사육물품을 반입 또는 반출할 수 있다.

2.2	병원체 및 시료의 반(출)입 승인

2.2.1	반(출)입인가

승인된 「연구계획서」에 명기된 병원체 및 시료만이 연구시설으로 반(출)입되며, 그 이외의 시료는 반(출)입이 금지된다. 시료를 반(출)입시켜야 할 경우, 시험연구책임자는 안전한 포장 및 이동방법 등을 확인하고, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.2.2	반(출)입절차

시료(병원체 등)를 담은 밀폐 컨테이너 포장 용기 외부 및 표면을 알코올로 소독하고  반(출)입한다.

2.2.3	LMO병원체 경우

LMO병원체의 반(출)입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.3	실험장비 반(출)입 승인

2.3.1	반(출)입인가

실험장비를 연구시설으로 반입 또는 연구시설 내 실험장비를 반출할 경우에는 [서식  ] “연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.3.2	반(출)입절차

실험장비는 사전 승인, 병원체의 비 오염화 또는 소독 등의 절차 없이 반(출)입시킬 수 없다. 연구시설 내 반입된 실험장비는 시험연구종자가 사용하기 전에 충분한 사전 지식을 숙지할 수 있도록 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자가 사전교육을 실시한다.

3.	사육관리

3.1	사육실 환경조건

1)	온도 : 20~26℃ (평균실온 ±1℃)

2)	습도 : 40~60% (50±5%)

3)	조명 : 150~300Lux (바닥에서 40~85cm 상부)

4)	소음 : 60 phone 이하

동물명	무게(g)	바닥면적/마리 (cm2)	케이지높이 (cm)
랫트	< 100	109.6	17.8
	200까지	148.35	17.8
	300까지	187.05	17.8
	400까지	258.0	17.8
	500까지	387.0	17.8
	> 500	≥ 451.5	17.8

3.2	케이지 내 동물수용 밀도

※ 출처: Guide for the care and use of Laboratory Animals (Eighth Edition), Institute for

Laboratory Animal Research

3.3	사육물품 교환주기

1)	ISO cage :	1회/2주

2)	음수병 :  1회/2주

3)	사료 : 실험과 사료 소모량에 따라 결정

4)	기타 : 실험에 따라서 결정

3.4	사료 및 깔짚 관리

1)	사료 및 깔짚 등은 사용량과 규모에 따라 보관조건과 공간을 정한다. 밀폐구역 외	부에 마련된 보관창고의 경우, 곤충 및 설치류 방제장치를 설치한다. 사료를 오랜	기간 동안 보관하는 경우에는 냉장설비를 갖춘 보관창고에 보관하고, 보관물품에	대한 유효기간을 확인하고 관리한다.

2)	마련된 저장공간에 보관되는 사료와 깔짚은 바닥에 직접 닿지 않도록 선반 또는	트레이에 보관한다.

3)	사용을 위해 보관하고 있는 사료와 깔짚은 유효기관과 보관방법을 확인하고 사용	한다.

3.5	일과 후 사육관리

3.5.1	일과 후 관리절차

“제  장 연구시설운영관리, 7. 일과 후 연구시설관리”에 따라서 일과 후 사육관리를 한다.

3.5.2	업무사항

실험동물의 사료와 음수공급, 실내 온도와 공조상태 점검을 주된 업무로 한다.

3.6	사육실 및 부검실의 청소 및 소독 관리

사육실 및 부검실의 청소 및 소독관리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 3. 청소 및 소독절차”를 따른다.

3.7	실험동물 탈출

3.7.1	실험동물 탈출 방지

사육실에는 실험동물 탈출의 가능성에 대비하여 트랩 또는 탈출방지턱을 설치한다.

3.7.2	탈출 시 포획

실험동물 접종 및 부검 시에는 2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험동물의 탈출에 대비하고, 포획망 등의 장비를 이용하여 탈출한 실험동물을 포획한다.

3.7.3	탈출 실험동물 처리

1)	탈출한 실험동물을 포획한 후, 시험연구종사자는 시험연구책임자와 기관생물안전관	리책임자에게 보고를 한다.

2)	시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물에 대한 처리사항을	결정한다.

3.7.4	사육실의 청소 및 소독

시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물의 사육실에 대한 청소 및 소독에 대한 사항을 결정한다.

3.8	빈사 사망 및 이상동물 취급 (해당시)

실험동물의 빈사 사망 및 이상동물 취급방법은 “[부록  ] 실험동물의 빈사 사망 및 이상	동물 취급방법”을 참조한다.

4.	개인보호구

4.1	개인보호구 관리

개인보호구는 “제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차”에 따라 관리한다.

4.2	개인보호구 구성

개인보호구를 선택할 때에는 취급하는 미생물 및 위해물질의 감염경로 및 신체 노출 부	위를 고려하여 착용한다. (예. 흡입, 섭취, 주사 또는 주입, 흡수 등)

1)	실험복

2)	1회용 상하일체형 보호복:

보호복 기준 (EN14126, ASTM1671)

3)	전면 보호형 마스크 및 필터 :

밀폐성, 견고성 및 투명성 등을 확보한 전면	보호형	마스크 및 NIOSH N100 기	준에 적합한 필터를 사용할 있다.

Filters at least 99.97% of airborne particles. Not resistant to oil. Natiotioal Institute for Occupational Safety and Health, USA

4)	고글

5)	보호 장갑 : Latex 혹은 Nitrile 재질의 1회용 실험용 장갑

6)	비침수성 보호덧신

7)	비침수성 장화

8)	상하일체형 보호복 착용시 소매와 밑단 부분은 보호 장갑과 보호덧신 바깥쪽으로	나오도록 착용하며 비침수성 테이프를 이용하여 완전히 밀착시켜 활동 중 신체가	노출되지 않도록 하여야 한다.

9)	시험연구종사자는 필요시 두건과 (비침수성)토시 등을 착용할 수 있다.

10)	시험연구종사자는 부검 및 기타 실험 중이나 실험 종료 후 사육실 및 실험장소의	청소 등 작업을 할 경우에는 비침수성 앞치마 착용과 1회용 실험장갑에 면장갑 덧	끼기 등 필요에 따라 적절한 개인보호구를 착용한다.

5.	실험동물 개체식별방법

5.1	실험동물 개체식별방법

실험동물의 개체식별방법은 “[부록  ] 동물식별”에 따르고, 케이지에는 “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”를 작성해서 부착한다.

5.2	LMO동물 식별

유전자변형동물의 경우, “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”에 유전자변형동물에 대한 정보	를 반드시 표기한다. 또한 유전자변형동물의 생후 72시간 내에 개체식별이 가능하도록	표식을 해야 하며, 경우에 따라 영구 개체식별법을 사용할 수 있으며, 다음의 관리대장을	작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

6.	실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법 (해당시)

실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법은 “[부록  ] 실험동물의 체중, 음수 및 사	료섭취량 측정방법”을 참조한다.

7.	동물실험 기구류 (해당시)

동물실험에 사용되는 기구류와 사용법은 “[부록  ] 동물실험 기구류”을 참조한다.

1)	주사기

2)	경구투여기구

3)	외과용 기구류

4)	동물 고정기구류

8.	랫트의 이송 및 보정 (해당시)

실험동물의 이송 및 보정방법은 “[부록  ] 실험동물의 이송 및 보정방법”을 참조한다.

9.	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리 (해당시)

9.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

9.2	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리

실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리는 “[부록  ] 실험물질의 투여방법 및 투여	후 실험동물관리”를 참조한다.

10.	실험동물의 채혈 방법 (해당시)

10.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

10.2	실험동물 채혈

실험동물의 채혈 방법은 “[부록  ] 실험동물 채혈”을 참조한다.

11.	실험동물의 안락사 방법

실험동물의 안락사 방법은 “[부록  ] 실험동물 안락사”를 참조한다.

12.	부검 (해당시)

12.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

12.2	실험동물 부검

실험동물의 부검은 “[부록  ] 실험동물의 부검”을 참조한다.

13.	시료채취요령 (해당시)

13.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

13.2	시료채취

실험동물의 시료채취는 “[부록  ] 실험동물의 시료채취방법”을 참조한다.

14.	검체의 취급 주의사항

감염성 시료를 다루는 경우 시험연구종사자는 검체가 갖는 잠재적 위험성을 인식해야 하	며 장갑 등의 개인보호구를 착용하고 생물안전작업대 안에 소독 또는 멸균제를 비치하	고	실험에 임하며 사용된 일회용 기구나 오염된 장갑은 생물재해 봉투에 버린다.

15.	실험동물 사체 및 폐기물 처리

실험동물 사체 및 폐기물 처리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 4. 폐기물 관리”에 따라 처리한다.

16.	비상사항 대응

비상사항 대응은 “제  장 비상사항 관리”에 따라 대응한다.

[Prototype ABL2] 제  장  실험동물의 사용과 관리 (닭)

1.	실험동물의 반입 관리

※“실험동물의 사용과 관리(닭)”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	실험동물 반입 승인

1.1.1	실험동물반입 신청

실험수행을 위한 실험동물의 반입은 승인을 득하고 이루어져야하고, 연구시설 내에서 사육된 실험동물의 반출은 원칙적으로 금지된다.

실험실내 실험동물을 반입하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

1.1.2	사육기간 확인

기관생물안전관리책임자는 사육기간과 해당 사육실의 사용현황을 확인하고 실험동물의 반입을 승인한다.

1.2	실험동물 검수 및 검역

1.2.1	실험동물 입수 준비

실험동물관리자와 시험연구종사자는 실험동물 입수 전에 검역실과 사육실의 수용규모 등의 확인, 시험계획서 확인, 사육기자재 등을 확인하고, 실험동물 입수를 준비한다.

1.2.2	실험동물 검수 (해당시)

1)	질병검사 성적서

-	실험동물관리자와 시험연구종사자는 입수동물에 대한 질병검사 성적서를 입수하	고,	이상이 없을 경우, 동물의 질병검사를 생략하고 동물의 검수검사를 실시한다.

-	입수동물의 질병검사 성적서가 없는 경우, 실험동물관리자와 시험연구책임자는	협의하여, 질병검사를 외부에 의뢰를 할 지 여부를 결정하고, 검역검사를 실시한	다.

2)	동물운송기록지

-	동물납품자로부터 동물수송 도중에 이상유무와 동물납품업체가 작성한 실험동물	공급표 또는 동물수송상자에 첨부된 명세서에 기재된 내용을 확인하고, [서식  ]	“동물운송기록지” (또는 자체 기관양식)를 작성한다.

3)	이상발견 시 조치

-	동물수송상자의 파손, 명세서와의 부적합, 동물의 일반상태, 외관의 이상 등을 발	견하였을 경우 발견자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	동물수송상자가 훼손되어 외부의 공기가 상자 내로 직접 노출되었을 경우, 사육	구역으로 반입을 금하고, 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	이상의 종류, 정도에 따라 시험연구종사자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기	관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

1.2.3	실험동물 검역 (해당시)

1)	반입된 동물수송상자를 검역실내에서 개봉하고, [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”	(또는 자체 기관양식)를 작성한다.

2)	검역실내에서 [부록  ]	“동물식별”(또는 자체 기관양식)에 따라서 동물예비번호를	부여하고, 입수된 동물의 체중을 측정하고, [서식  ]	“검역 및 군분리 무게 측정	기	록지”(또는	자체 기관양식)를 작성한다.

1.3	사육실 반입절차

1.3.1	사육실 반입 동선

“제  장 실험실 동선 및 절차”에 따라서 사육실로 실험동물을 반입한다.

1.3.2	실험동물반입 확인

실험동물의 반입이 완료된 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)에 따라 기관생물안전관리자가 실험동물반입 사항을 확인한다.

1.3.3	실험동물 순화 (해당시)

1)	순화기간 동안 실험동물을 사육환경에 적응시키고, 건강상태를 평가한다.

2)	시험연구종사자는 순화기간동안 [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”(또는 자체 기관양	식)를 작성한다.

1.4	LMO동물 반입기록

LMO동물이 반입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.	물품 반(출)입 관리

2.1	사육물품의 반(출)입 승인

2.1.1	반(출)입인가

동물실험실내 사육물품을 반입과 반출하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.1.2	반(출)입절차

기관생물안전관리책임자의 승인을 받은 정해진 절차와 방법에 따라 사육물품을 반입 또는 반출할 수 있다.

2.2	병원체 및 시료의 반(출)입 승인

2.2.1	반(출)입인가

승인된 「연구계획서」에 명기된 병원체 및 시료만이 연구시설으로 반(출)입되며, 그 이외의 시료는 반(출)입이 금지된다. 시료를 반(출)입시켜야 할 경우, 시험연구책임자는 안전한 포장 및 이동방법 등을 확인하고, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.2.2	반(출)입절차

시료(병원체 등)를 담은 밀폐 컨테이너 포장 용기 외부 및 표면을 알코올로 소독하고  반(출)입한다.

2.2.3	LMO병원체 경우

LMO병원체의 반(출)입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.3	실험장비 반(출)입 승인

2.3.1	반(출)입인가

실험장비를 연구시설으로 반입 또는 연구시설 내 실험장비를 반출할 경우에는 [서식  ] “연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.3.2	반(출)입절차

실험장비는 사전 승인, 병원체의 비 오염화 또는 소독 등의 절차 없이 반(출)입시킬 수 없다. 연구시설 내 반입된 실험장비는 시험연구종자가 사용하기 전에 충분한 사전 지식을 숙지할 수 있도록 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자가 사전교육을 실시한다.

3.	사육관리

3.1	사육실 환경조건

1)	온도 : 16~27℃

2)	습도 : 40~60%

3)	조명 : 150~300Lux (바닥에서 40~85cm 상부)

4)	소음 : 60 phone 이하

동물명	무게(kg)	바닥면적/마리 (m2)	케이지높이
닭	< 0.25	0.023	케이지의 높이는 다리로 바닥에 직립할 수 있어야 한다.
	0.5까지	0.046
	1.5까지	0.093
	3.0까지	0.186
	> 3.0	≥ 0.279

3.2	케이지 내 동물수용 밀도

※ 출처: Guide for the care and use of Laboratory Animals (Eighth Edition), Institute for

Laboratory Animal Research

3.3	사육물품 교환주기

1)	Isolator :

사육 중에는 Isolator 또는 내부 케이지를 교환하지 않는다. 실험 종료 후, 액상소독	액으로 Isolator 내부를 충분히 도포하여 1시간 이상 정치 후 세척과 건조한 후 훈	증소독하여 사용한다.

2)	음수 :

병아리는 급수병을 사용하고, 중간크기 이상의 닭은 자동급수장치를 이용한다.

3)	사료 :

실험과 사료 소모량에 따라 결정하고, 펠릿사료나 펠릿을 분쇄한 고형사료를 사용	하여, 가루사료로 인한 사육실이 오염되는 것을 방지한다.

4)	분변처리 :

분변판은 멸균재해봉투에 분변을 넣어 밀봉한 후 멸균처리를 하고, Isolator 내부의	잔여 분변 등은 Isolator에 장착된 장갑을 착용한 상태에서 분변판으로 최대한 수거	하고, 분변판은 멸균재해봉투에 모아서 멸균한다.

5)	분변판 :

사용한 분변판은 세척 후 건조하고, 고압증기멸균기로 멸균처리하여 반입한다.

6)	기타 :

실험에 따라서 기타 사항을 추가한다.

3.4	사료 관리

1)	사료 등은 사용량과 규모에 따라 보관조건과 공간을 정한다. 밀폐구역 외부에 마련	된 보관창고의 경우, 곤충 및 설치류 방제장치를 설치한다. 사료를 오랜기간 동안	보관하는 경우에는 냉장설비를 갖춘 보관창고에 보관하고, 보관물품에	대한 유효기	간을 확인하고 관리한다.

2)	마련된 저장공간에 보관되는 사료는 바닥에 직접 닿지 않도록 선반 또는 트레이에	보관한다.

3)	사용을 위해 보관하고 있는 사료는 유효기관과 보관방법을 확인하고 사용한다.

3.5	일과 후 사육관리

3.5.1	일과 후 관리절차

“제  장 연구시설운영관리, 7. 일과 후 연구시설관리”에 따라서 일과 후 사육관리를 한다.

3.5.2	업무사항

실험동물의 사료와 음수공급, 실내 온도와 공조상태 점검을 주된 업무로 한다.

3.6	사육실 및 부검실의 청소 및 소독 관리

사육실 및 부검실의 청소 및 소독관리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 3. 청소 및 소독절차”를 따른다.

3.7	실험동물 탈출

3.7.1	실험동물 탈출 방지

사육실에는 실험동물 탈출의 가능성에 대비하여 트랩 또는 탈출방지턱을 설치한다.

3.7.2	탈출 시 포획

실험동물 접종 및 부검 시에는 2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험동물의 탈출에 대비하고, 포획망 등의 장비를 이용하여 탈출한 실험동물을 포획한다.

3.7.3	탈출 실험동물 처리

1)	탈출한 실험동물을 포획한 후, 시험연구종사자는 시험연구책임자와 기관생물안전관	리책임자에게 보고를 한다.

2)	시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물에 대한 처리사항을	결정한다.

3.7.4	사육실의 청소 및 소독

시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물의 사육실에 대한 청소 및 소독에 대한 사항을 결정한다.

3.8	빈사 사망 및 이상동물 취급 (해당시)

실험동물의 빈사 사망 및 이상동물 취급방법은 “[부록  ] 실험동물의 빈사 사망 및 이상	동물 취급방법”을 참조한다.

4.	개인보호구

4.1	개인보호구 관리

개인보호구는 “제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차”에 따라 관리한다.

4.2	개인보호구 구성

개인보호구를 선택할 때에는 취급하는 미생물 및 위해물질의 감염경로 및 신체 노출 부	위를 고려하여 착용한다. (예. 흡입, 섭취, 주사 또는 주입, 흡수 등)

1)	실험복

2)	1회용 상하일체형 보호복 :

보호복 기준 (EN14126, ASTM1671)

3)	전면 보호형 마스크 및 필터 :

밀폐성, 견고성 및 투명성 등을 확보한 전면	보호형	마스크 및 NIOSH N100 기	준에 적합한 필터를 사용할 수 있다.

Filters at least 99.97% of airborne particles. Not resistant to oil. Natiotioal Institute for Occupational Safety and Health, USA

4)	고글

5)	보호 장갑 : Latex 혹은 Nitrile 재질의 1회용 실험용 장갑

6)	비침수성 보호덧신

7)	비침수성 장화

8)	상하일체형 보호복 착용시 소매와 밑단 부분은 보호 장갑과 보호덧신 바깥쪽으로	나오도록 착용하며 비침수성 테이프를 이용하여 완전히 밀착시켜 활동 중 신체가	노출되지 않도록 하여야 한다.

9)	시험연구종사자는 필요시 두건과 (비침수성)토시 등을 착용할 수 있다.

10)	시험연구종사자는 부검 및 기타 실험 중이나 실험 종료 후 사육실 및 실험장소의	청소 등 작업을 할 경우에는 비침수성 앞치마 착용과 1회용 실험장갑에 면장갑 덧	끼기 등 필요에 따라 적절한 개인보호구를 착용한다.

5.	실험동물 개체식별방법

5.1	실험동물 개체식별방법

실험동물의 개체식별방법은 “[부록  ] 동물식별”에 따르고, Isolator에는 “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”를 작성해서 부착한다.

5.2	LMO동물 식별

유전자변형동물의 경우, “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”에 유전자변형동물에 대한 정보	를 반드시 표기한다. 또한 유전자변형동물의 생후 72시간 내에 개체식별이 가능하도록	표식을 해야 하며, 경우에 따라 영구 개체식별법을 사용할 수 있으며, 다음의 관리대장을	작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

6.	실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법 (해당시)

실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법은 “[부록  ] 실험동물의 체중, 음수 및 사	료섭취량 측정방법”을 참조한다.

7.	동물실험 기구류 (해당시)

동물실험에 사용되는 기구류와 사용법은 “[부록  ] 동물실험 기구류”을 참조한다.

1)	주사기

2)	경구투여기구

3)	외과용 기구류

4)	동물 고정기구류

8.	닭의 이송 및 보정 (해당시)

실험동물의 이송 및 보정방법은 “[부록  ] 실험동물의 이송 및 보정방법”을 참조한다.

9.	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리

9.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

9.2	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리

실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리는 “[부록  ] 실험물질의 투여방법 및 투여	후 실험동물관리”를 참조한다.

10.	실험동물의 채혈 방법 (해당시)

10.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

10.2	실험동물 채혈

실험동물의 채혈 방법은 “[부록  ] 실험동물 채혈”을 참조한다.

11.	실험동물의 안락사 방법

실험동물의 안락사 방법은 “[부록  ] 실험동물 안락사”를 참조한다.

12.	부검 (해당시)

12.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

12.2	실험동물 부검

실험동물의 부검은 “[부록  ] 실험동물의 부검”을 참조한다.

13.	시료채취요령 (해당시)

13.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

13.2	시료채취

실험동물의 시료채취는 “[부록  ] 실험동물의 시료채취방법”을 참조한다.

14.	검체의 취급 주의사항

감염성 시료를 다루는 경우 시험연구종사자는 검체가 갖는 잠재적 위험성을 인식해야 하	며 장갑 등의 개인보호구를 착용하고 생물안전작업대 안에 소독 또는 멸균제를 비치하	고	실험에 임하며 사용된 일회용 기구나 오염된 장갑은 생물재해 봉투에 버린다.

15.	실험동물 사체 및 폐기물 처리

실험동물 사체 및 폐기물 처리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 4. 폐기물 관리”에 따라 처리한다.

16.	비상사항 대응

비상사항 대응은 “제  장 비상사항 관리”에 따라 대응한다.

[Prototype ABL2] 제  장  실험동물의 사용과 관리 (원숭이)

1.	실험동물의 반입 관리

1.1	실험동물 반입 승인

※“실험동물의 사용과 관리(원숭이)”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1.1	실험동물반입 신청

실험수행을 위한 실험동물의 반입은 승인을 득하고 이루어져야하고, 연구시설 내에서 사육된 실험동물의 반출은 원칙적으로 금지된다.

실험실내 실험동물을 반입하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

1.1.2	사육기간 확인

기관생물안전관리책임자는 사육기간과 해당 사육실의 사용현황을 확인하고 실험동물의 반입을 승인한다.

1.2	실험동물 검수 및 검역

1.2.1	실험동물 입수 준비

실험동물관리자와 시험연구종사자는 실험동물 입수 전에 검역실과 사육실의 수용규모 등의 확인, 시험계획서 확인, 사육기자재 등을 확인하고, 실험동물 입수를 준비한다.

1.2.2	실험동물 검수 (해당시)

1)	질병검사 성적서

-	실험동물관리자와 시험연구종사자는 입수동물에 대한 질병검사 성적서를 입수하	고,	이상이 없을 경우, 동물의 질병검사를 생략하고 동물의 검수검사를 실시한다.

-	입수동물의 질병검사 성적서가 없는 경우, 실험동물관리자와 시험연구책임자는	협의하여, 질병검사를 외부에 의뢰를 할 지 여부를 결정하고, 검역검사를 실시한	다.

2)	동물운송기록지

-	동물납품자로부터 동물수송 도중에 이상유무와 동물납품업체가 작성한 실험동물	공급표 또는 동물수송상자에 첨부된 명세서에 기재된 내용을 확인하고, [서식  ]	“동물운송기록지” (또는 자체 기관양식)를 작성한다.

3)	이상발견 시 조치

-	동물수송상자의 파손, 명세서와의 부적합, 동물의 일반상태, 외관의 이상 등을 발	견하였을 경우 발견자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	동물수송상자가 훼손되어 외부의 공기가 상자 내로 직접 노출되었을 경우, 사육	구역으로 반입을 금하고, 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	이상의 종류, 정도에 따라 시험연구종사자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기	관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

1.2.3	실험동물 검역 (해당시)

1)	반입된 동물을 검역실내에서 검역하고, [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”(또는 자체	기관양식)를 작성한다.

2)	검역실내에서 [부록  ]	“동물식별”(또는 자체 기관양식)에 따라서 동물예비번호를	부여하고, 입수된 동물의 체중을 측정하고, [서식  ]	“검역 및 군분리 무게 측정	기	록지”(또는	자체 기관양식)를 작성한다.

1.2.4	검역검사 항목 (해당시)

원숭이류는 각종 병원체에 자연감염되어 있을 가능성이 높기 때문에 사육실에 입수한 뒤, 주위의 동물이나 사람에게 감염원이 될 우려가 있다. 원산지에서 수입된 직후의 원숭이류는 수송스트레스, 환경, 환경, 사료의 변화 등에 따라 건강을 해치는 개체도 있다.

1)	일반임상검사

체중측정, 외모의 이상관찰, 분변의 성상, 치아의 돌출 및 마멸의 ㄱ머사, 구강내의	수포나 궤양의 유무 등을 검사한다.

2)	투베르쿨린반응검사

결핵검사로서 투베르쿨린액을 안검의 피내에 주사하여 24, 48, 72시간 후에 발적,	종창의 유무를 관찰하여 판정한다. 검역기간 중에는 2주 이상의 간격을 두고 3회	이상, 장기 사육할 때는 연간 몇 회 실시한다.

3)	배변검사

병원성 장내세균의 검사로서 분변 내의 특히 적리균, 살모넬라의 유무를 조사한다.	장기사육동물은 연간 3,4회 실시하여 양성 개체는 격리하고 치료한다.

4)	기생충검사

분변 내의 기생충란 검사, 원충 검사, 외부기생충 검사를 한다. 양성의 경우는 실험	의 영향도 고려하여 구충할 필요가 있다.

5)	그 외의 검사

필요에 따라 혈액검사나 바이러스 항체검사 등을 실시한다.

1.3	사육실 반입절차

1.3.1	사육실 반입 동선

“제  장 실험실 동선 및 절차”에 따라서 사육실로 실험동물을 반입한다.

1.3.2	실험동물반입 확인

실험동물의 반입이 완료된 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)에 따라 기관생물안전관리자가 실험동물반입 사항을 확인한다.

1.3.3	실험동물 순화 (해당시)

1)	순화기간 동안 실험동물을 사육환경에 적응시키고, 건강상태를 평가한다.

2)	시험연구종사자는 순화기간동안 [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”(또는 자체 기관양	식)를 작성한다.

1.4	LMO동물 반입기록

LMO동물이 반입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.	물품 반(출)입 관리

2.1	사육물품의 반(출)입 승인

2.1.1	반(출)입인가

동물실험실내 사육물품을 반입과 반출하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.1.2	반(출)입절차

기관생물안전관리책임자의 승인을 받은 정해진 절차와 방법에 따라 반입 또는 반출할 수 있다.

2.2	병원체 및 시료의 반(출)입 승인

2.2.1	반(출)입인가

승인된 「연구계획서」에 명기된 병원체 및 시료만이 연구시설으로 반(출)입되며, 그 이외의 시료는 반(출)입이 금지된다. 시료를 반(출)입시켜야 할 경우, 시험연구책임자는 안전한 포장 및 이동방법 등을 확인하고, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.2.2	반(출)입절차

시료(병원체 등)를 담은 밀폐 컨테이너 포장 용기 외부 및 표면을 알코올로 소독하고  반(출)입한다.

2.2.3	LMO병원체 경우

LMO병원체의 반(출)입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.3	실험장비 반(출)입 승인

2.3.1	반(출)입인가

실험장비를 연구시설으로 반입 또는 연구시설 내 실험장비를 반출할 경우에는 [서식  ] “연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.3.2	반(출)입절차

실험장비는 사전 승인, 병원체의 비 오염화 또는 소독 등의 절차 없이 반(출)입시킬 수 없다. 연구시설 내 반입된 실험장비는 시험연구종자가 사용하기 전에 충분한 사전 지식을 숙지할 수 있도록 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자가 사전교육을 실시한다.

3.	사육관리

3.1	사육실 환경조건

1)	온도 : 18~29℃

2)	습도 : 40~60%

3)	조명 : 150~300Lux (바닥에서 40~85cm 상부)

4)	소음 : 60 phone 이하

3.2	케이지 내 동물수용 밀도

원숭이(baboons포함)	무게(kg)	바닥면적/마리 (m2)	케이지높이 (cm)
그룹1	1.5까지	0.20	76.2
그룹2	3까지	0.28	76.2
그룹3	10까지	0.4	76.2
그룹4	15까지	0.56	81.3
그룹5	20까지	0.74	91.4
그룹6	25까지	0.93	116.8
그룹7	30까지	1.40	116.8
그룹8	> 30	≥ 2.32	152.4

※ 출처: Guide for the care and use of Laboratory Animals (Eighth Edition), Institute for

Laboratory Animal Research

3.3	사육물품 교환주기

1)	Isolator :

분사기로 물을 분사하여 Isolator 내부 및 급이통을 세척한다. 이때 원숭이에게 직	접적인 분사는 피한다. 배설물과 오물을 분변판으로 모아서 멸균재해봉투에 담는	다. 청소가 끝나면, Isolator 내부를 소독처리한다.

2)	음수 :

자동급수장치를 이용하여 음수를 공급한다.

3)	사료 :

원숭이 종과 체중에 따라서 칼로리를 계산하여, 사료와 과일 등을 오전과 오후에	한번씩 급이한다.

4)	분변처리 :

분변판은 멸균재해봉투에 분변을 넣어 밀봉한 후 멸균처리를 하고, Isolator 내부의	잔여 분변 등은 Isolator에 장착된 장갑을 착용한 상태에서 분변판으로 최대한 수거	하고, 분변판은 멸균재해봉투에 모아서 멸균한다.

5)	분변판 :

사용한 분변판은 세척 후 건조하고, 고압증기멸균기로 멸균처리하여 반입한다.

6)	기타 :

실험에 따라서 기타 사항을 추가한다.

3.4	사료 관리

1)	사료 등은 사용량과 규모에 따라 보관조건과 공간을 정한다. 밀폐구역 외부에 마련	된 보관창고의 경우, 곤충 및 설치류 방제장치를 설치한다. 사료를 오랜기간 동안	보관하는 경우에는 냉장설비를 갖춘 보관창고에 보관하고, 보관물품에	대한 유효기	간을 확인하고 관리한다.

2)	마련된 저장공간에 보관되는 사료는 바닥에 직접 닿지 않도록 선반 또는 트레이에	보관한다.

3)	사용을 위해 보관하고 있는 사료는 유효기관과 보관방법을 확인하고 사용한다.

3.5	일과 후 사육관리

3.5.1	일과 후 관리절차

“제  장 연구시설운영관리, 7. 일과 후 연구시설관리”에 따라서 일과 후 사육관리를 한다.

3.5.2	업무사항

실험동물의 사료와 음수공급, 실내 온도와 공조상태 점검을 주된 업무로 한다.

3.6	사육실 및 부검실의 청소 및 소독 관리

사육실 및 부검실의 청소 및 소독관리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 3. 청소 및 소독절차”를 따른다.

3.7	실험동물 탈출

3.7.1	실험동물 탈출 방지

사육실에는 실험동물 탈출의 가능성에 대비하여 탈출방지턱을 설치한다.

3.7.2	탈출 시 포획

1)	실험동물 접종 및 부검 시에는 2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험동물의	탈출에 대비하고, 포획망 등의 장비를 이용하여 탈출한 실험동물을 포획한다.

2)	사육실에서 케이지에서 탈출한 경우, 케이지문의 열고 과일로 유인하여, 탈출한 동	물이 케이지안으로 들어가도록 한다.	원숭이는 자신보다 크다고 생각하는 동물에게	덤비는 습성이 있으므로, 탈출한 원숭이가 케이지 위로 가도록 과일로 유인하고,	자세를 원숭이보다 낮추고, 시선을 떼지 않고 원숭이를 케이지 안으로 유인해야 한	다.

3.7.3	탈출 실험동물 처리

1)	탈출한 실험동물을 포획한 후, 시험연구종사자는 시험연구책임자와 기관생물안전관	리책임자에게 보고를 한다.

2)	시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물에 대한 처리사항을	결정한다.

3.7.4	사육실의 청소 및 소독

시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물의 사육실에 대한 청소 및 소독에 대한 사항을 결정한다.

3.8	빈사 사망 및 이상동물 취급 (해당시)

실험동물의 빈사 사망 및 이상동물 취급방법은 “[부록  ] 실험동물의 빈사 사망 및 이상	동물 취급방법”을 참조한다.

4.	개인보호구

4.1	개인보호구 관리

개인보호구는 “제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차”에 따라 관리한다.

4.2	개인보호구 구성

개인보호구를 선택할 때에는 취급하는 미생물 및 위해물질의 감염경로 및 신체 노출 부	위를 고려하여 착용한다. (예. 흡입, 섭취, 주사 또는 주입, 흡수 등)

1)	실험복

2)	1회용 상하일체형 보호복 :

보호복 기준 (EN14126, ASTM1671)

3)	전면 보호형 마스크 및 필터 :

밀폐성, 견고성 및 투명성 등을 확보한 전면	보호형	마스크 및 NIOSH N100 기	준에 적합한 필터를 사용할 수 있다.

Filters at least 99.97% of airborne particles. Not resistant to oil. Natiotioal Institute for Occupational Safety and Health, USA

4)	고글

5)	보호 장갑 : Latex 혹은 Nitrile 재질의 1회용 실험용 장갑

6)	비침수성 보호덧신

7)	비침수성 장화

8)	상하일체형 보호복 착용시 소매와 밑단 부분은 보호 장갑과 보호덧신 바깥쪽으로	나오도록 착용하며 비침수성 테이프를 이용하여 완전히 밀착시켜 활동 중 신체가	노출되지 않도록 하여야 한다.

9)	시험연구종사자는 필요시 두건과 (비침수성)토시 등을 착용할 수 있다.

10)	시험연구종사자는 부검 및 기타 실험 중이나 실험 종료 후 사육실 및 실험장소의	청소 등 작업을 할 경우에는 비침수성 앞치마 착용과 1회용 실험장갑에 면장갑 덧	끼기 등 필요에 따라 적절한 개인보호구를 착용한다.

5.	실험동물 개체식별방법

5.1	실험동물 개체식별방법

실험동물의 개체식별방법은 “[부록  ] 동물식별”에 따르고, 오픈케이지에는 “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”를 작성해서 부착한다.

5.2	LMO동물 식별

유전자변형동물의 경우, “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”에 유전자변형동물에 대한 정보	를 반드시 표기한다. 또한 유전자변형동물의 생후 72시간 내에 개체식별이 가능하도록	표식을 해야 하며, 경우에 따라 영구 개체식별법을 사용할 수 있으며, 다음의 관리대장을	작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

6.	실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법 (해당시)

실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법은 “[부록  ] 실험동물의 체중, 음수 및 사	료섭취량 측정방법”을 참조한다.

7.	동물실험 기구류  (해당시)

동물실험에 사용되는 기구류와 사용법은 “[부록  ] 동물실험 기구류”을 참조한다.

1)	주사기

2)	경구투여기구

3)	외과용 기구류

4)	동물 고정기구류

8.	원숭이의 이송 및 보정  (해당시)

실험동물의 이송 및 보정방법은 “[부록  ] 실험동물의 이송 및 보정방법”을 참조한다.

9.	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리  (해당시)

9.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

9.2	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리

실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리는 “[부록  ] 실험물질의 투여방법 및 투여	후 실험동물관리”를 참조한다.

9.3	채뇨 및 채변

1)	원숭이류의 전용 대사케이지를 이용하여 채뇨 및 채변을 한다.

2)	간편하게 할 때는 케이지의 바닥 밑에 받침접시를 놓고 직접 채취할 수 있지만, 원	숭이가 장난칠 가능성이 있으므로 주의한다.

3)	직접 채취하는 방법으로서 요도에 카테터를 삽입하여 흡인하는 방법이 있으나 상	당히 숙련을 요한다.

4)	채변은 면봉을 항문에 삽입하는 방법도 있다.

10.	실험동물의 채혈 방법 (해당시)

10.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

10.2	실험동물 채혈

실험동물의 채혈 방법은 “[부록  ] 실험동물 채혈”을 참조한다.

11.	실험동물의 안락사 방법

실험동물의 안락사 방법은 “[부록  ] 실험동물 안락사”를 참조한다.

12.	부검 (해당시)

12.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

12.2	실험동물 부검

실험동물의 부검은 “[부록  ] 실험동물의 부검”을 참조한다.

13.	시료채취요령 (해당시)

13.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

13.2	시료채취

실험동물의 시료채취는 “[부록  ] 실험동물의 시료채취방법”을 참조한다.

14.	검체의 취급 주의사항

감염성 시료를 다루는 경우 시험연구종사자는 검체가 갖는 잠재적 위험성을 인식해야 하	며 장갑 등의 개인보호구를 착용하고 생물안전작업대 안에 소독 또는 멸균제를 비치하	고	실험에 임하며 사용된 일회용 기구나 오염된 장갑은 생물재해 봉투에 버린다.

15.	실험동물 사체 및 폐기물 처리

실험동물 사체 및 폐기물 처리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 4. 폐기물 관리”에 따라 처리한다.

16.	비상사항 대응

16.1	사고에 대처방법

원숭이류를 취급하는 사육실에서는 사육실마다 물리거나 할퀴거나 주사에 찔리는 사고에	대한 대비를 해야 한다. 사육실 내에는 상처소독용 소독약, 멸균된 외과용 브러시, 거즈,	반창고 등을 넣은 구급상자를 구비한다.

원숭이류에 의한 교상, 주사 등의 사고가 났을 경우, 다음과 같이 대처한다.

1)	사고자는 작업을 중지하고 부상부위의 깊은 곳까지 흐르는 물에 씻어 침입물, 혈액	을 충분히 제거한다.

2)	소독약 등으로 상처의 심부까지 충분히 소독하고 필요에 따라 거즈나 반창고를 붙	인다.

3)	사고자는 응급처리를 하고, 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자 등에게 보고	를 하고, 지정된 병원으로 가서 진료를 받는다.

16.2	기타 비상사항 대응

비상사항 대응은 “제  장 비상사항 관리”에 따라 대응한다.

[Prototype ABL2] 제  장  실험동물의 사용과 관리 (돼지)

1.	실험동물의 반입 관리

1.1	실험동물 반입 승인

※“실험동물의 사용과 관리(돼지)”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1.1	실험동물반입 신청

실험수행을 위한 실험동물의 반입은 승인을 득하고 이루어져야하고, 연구시설 내에서 사육된 실험동물의 반출은 원칙적으로 금지된다.

실험실내 실험동물을 반입하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

1.1.2	사육기간 확인

기관생물안전관리책임자는 사육기간과 해당 사육실의 사용현황을 확인하고 실험동물의 반입을 승인한다.

1.2	실험동물 검수 및 검역

1.2.1	실험동물 입수 준비

실험동물관리자와 시험연구종사자는 실험동물 입수 전에 검역실과 사육실의 수용규모 등의 확인, 시험계획서 확인, 사육기자재 등을 확인하고, 실험동물 입수를 준비한다.

1.2.2	실험동물 검수 (해당시)

1)	질병검사 성적서

-	실험동물관리자와 시험연구종사자는 입수동물에 대한 질병검사 성적서를 입수하	고,	이상이 없을 경우, 동물의 질병검사를 생략하고 동물의 검수검사를 실시한다.

-	입수동물의 질병검사 성적서가 없는 경우, 실험동물관리자와 시험연구책임자는	협의하여, 질병검사를 외부에 의뢰를 할 지 여부를 결정하고, 검역검사를 실시한	다.

2)	동물운송기록지

-	동물납품자로부터 동물수송 도중에 이상유무와 동물납품업체가 작성한 실험동물	공급표 또는 명세서에 기재된 내용을 확인하고, [서식  ]	“동물운송기록지” (또는	자체 기관양식)를 작성한다.

3)	이상발견 시 조치

-	동물공급표 또는 명세서의 부적합, 동물의 일반상태, 외관의 이상 등을 발견하였	을 경우 발견자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기관생물안전관리책임자에게	연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

-	이상의 종류, 정도에 따라 시험연구종사자는 실험동물관리자, 시험연구책임자, 기	관생물안전관리책임	자에게 연락하여 적절한 대책을 취하도록 한다.

1.2.3	실험동물 검역 (해당시)

1)	반입된 동물을 검역실내에서 검역하고, [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”(또는 자체	기관양식)를 작성한다.

2)	검역실내에서 [부록  ]	“동물식별”(또는 자체 기관양식)에 따라서 동물예비번호를	부여하고, 입수된 동물의 체중을 측정하고, [서식  ]	“검역 및 군분리 무게 측정	기	록지”(또는	자체 기관양식)를 작성한다.

1.3	사육실 반입절차

1.3.1	사육실 반입 동선

1)	“제  장 실험실 동선 및 절차”에 따라서 사육실로 실험동물을 반입한다.

2)	돼지는 목걸이와 줄을 매서 이동할 수 있지만, 앞으로 끌어당기면 뒷걸음질을 친	다. 이동할 때는 지시봉을 이용하여 전진할 때는 둔부를 뒤에서 가볍게 두드리고,	후진할 때는 코를 앞쪽으로 가볍게 두드린다. 우회전은 왼쪽 볼이나 어깨를 가볍게	두드리고, 좌회전은 오른쪽 볼이나 어깨를 가볍게 두드리는 등의 지시를 한다.

1.3.2	실험동물반입 확인

실험동물의 반입이 완료된 경우, [서식  ]“연구시설 실험동물 반입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)에 따라 기관생물안전관리자가 실험동물반입 사항을 확인한다.

1.3.3	실험동물 순화 (해당시)

1)	순화기간 동안 실험동물을 사육환경에 적응시키고, 건강상태를 평가한다.

2)	시험연구종사자는 순화기간동안 [서식  ]	“검역 및 순화 기록지”(또는 자체 기관양	식)를 작성한다.

1.4	LMO동물 반입기록

LMO동물이 반입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.	물품 반(출)입 관리

2.1	사육물품의 반(출)입 승인

2.1.1	반(출)입인가

동물실험실내 사육물품을 반입과 반출하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.1.2	반(출)입절차

기관생물안전관리책임자의 승인을 받은 정해진 절차와 방법에 따라 사육물품을 반입 또는 반출할 수 있다.

2.2	병원체 및 시료의 반(출)입 승인

2.2.1	반(출)입인가

승인된 「연구계획서」에 명기된 병원체 및 시료만이 연구시설으로 반(출)입되며, 그 이외의 시료는 반(출)입이 금지된다. 시료를 반(출)입시켜야 할 경우, 시험연구책임자는 안전한 포장 및 이동방법 등을 확인하고, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.2.2	반(출)입절차

시료(병원체 등)를 담은 밀폐 컨테이너 포장 용기 외부 및 표면을 알코올로 소독하고  반(출)입한다.

2.2.3	LMO병원체 경우

LMO병원체의 반(출)입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

2.3	실험장비 반(출)입 승인

2.3.1	반(출)입인가

실험장비를 연구시설으로 반입 또는 연구시설 내 실험장비를 반출할 경우에는 [서식  ] “연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.3.2	반(출)입절차

실험장비는 사전 승인, 병원체의 비 오염화 또는 소독 등의 절차 없이 반(출)입시킬 수 없다. 연구시설 내 반입된 실험장비는 시험연구종자가 사용하기 전에 충분한 사전 지식을 숙지할 수 있도록 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자가 사전교육을 실시한다.

3.	사육관리

3.1	사육실 환경조건

1)	온도 : 15~25℃

2)	습도 : 40~70%

3)	조명 : 150~300Lux (바닥에서 40~85cm 상부)

4)	소음 : 60 phone 이하

3.2	케이지 내 동물수용 밀도

두수/우리	무게(kg)	바닥면적/마리 (m2)
1	< 15	0.72
	25까지	1.08
	50까지	1.35
	100까지	2.16
	200까지	4.32
	> 200	≥ 5.4
2-5	< 25	0.54
	50까지	0.9
	100까지	1.8
	200까지	3.6
	> 200	≥ 4.68
> 5	< 25	0.54
	50까지	0.81
	100까지	1.62
	200까지	3.24
	> 200	≥ 4.32

※ 출처: Guide for the care and use of Laboratory Animals (Eighth Edition), Institute for

Laboratory Animal Research

3.3	사육물품 교환주기

1)	오픈 케이지

사육 중에는 오픈 케이지를 교환하지 않는다. 실험 종료 후, 액상소독액으로 오픈	케이지 내부를 충분히 도포하여 1시간 이상 정치 후 세척과 건조한 후 훈증소독하	여 사용한다.

2)	음수 :

돼지는 신장의 요재흡수가 적어 음수를 많이 필요하여 자동급수장치를 이용한다.

3)	사료 :

돼지는 사육구분별로 포육용 가루우유(14~28일령, 체중 3~8kg), 이유용(20~70일령,	체중 7~25kg), 육성용(60~110일령, 체중 25~45kg), 비육용(100일령이상, 체중 40kg	이상), 번식용 등이 있다. 발육촉진을 위해 혼합영양 첨가제, 항균제가 들어 있는	것을 확인할 필요가 있다.

4)	급이 :

급이는 통상 아침저녁 2회에 나누어서 제한급이를 한다. 급이량은 돼지의 품종, 계	통, 먹이의 종류에 따라 다르게 급이한다. 단독 사육케이지의 경우, 오픈케이지 앞	문에 전용급이기를 고정하여 사용한다.

3.4	사료 관리

1)	사료 등은 사용량과 규모에 따라 보관조건과 공간을 정한다. 밀폐구역 외부에 마련	된 보관창고의 경우, 곤충 및 설치류 방제장치를 설치한다. 사료를 오랜기간 동안	보관하는 경우에는 냉장설비를 갖춘 보관창고에 보관하고, 보관물품에	대한 유효기	간을 확인하고 관리한다.

2)	마련된 저장공간에 보관되는 사료는 바닥에 직접 닿지 않도록 선반 또는 트레이에	보관한다.

3)	사용을 위해 보관하고 있는 사료는 유효기관과 보관방법을 확인하고 사용한다.

3.5	분변청소

돼지의 행동은 아침저녁 급이 후 (10~15분 후)에 배뇨, 배변을 하고 운동(30~60분), 수면(1~2시간)을 고려하여 분변 청소를 한다. 돼지는 배변, 배뇨장소를 일정하게 하는 습성이 있으므로, 새로운 장소에서는 자신의 냄새를 묻히는 배변을 하는 습성이 있으므로 배변부를 물로 적시거나 배변을 놓아두는 등의 방법으로 배변을 촉진한다.

4)	분변처리 : (해당시)

분변판은 멸균재해봉투에 분변을 넣어 밀봉한 후 멸균처리를 하고, 오픈케이지 내	부의 잔여 분변 등은 보호장갑, 비침수성 장화 및 앞치마 착용과 분변처리 빗자루	등을 사용하여, 분변판으로 최대한 수거하고, 분변판은 멸균재해봉투에 모아서 멸	균한다.

5)	분변판 : (해당시)

사용한 분변판은 세척 후 건조하고, 고압증기멸균기로 멸균처리하여 반입한다.

3.6	일과 후 사육관리

3.6.1	일과 후 관리절차

“제  장 연구시설운영관리, 7. 일과 후 연구시설관리”에 따라서 일과 후 사육관리를 한다.

3.6.2	업무사항

실험동물의 사료와 음수공급, 실내 온도와 공조상태 점검을 주된 업무로 한다.

3.7	사육실 및 부검실의 청소 및 소독 관리

사육실 및 부검실의 청소 및 소독관리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 3. 청소 및 소독절차”를 따른다.

3.8	실험동물 탈출

3.8.1	실험동물 탈출 방지

사육실에는 실험동물 탈출의 가능성에 대비하여 탈출방지팬스 또는 탈출방지턱을 설치한다.

3.8.2	탈출 시 포획

실험동물 접종 및 부검 시에는 2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험동물의 탈출에 대비하고, 포획망 등의 장비를 이용하여 탈출한 실험동물을 포획한다.

3.8.3	탈출 실험동물 처리

1)	탈출한 실험동물을 포획한 후, 시험연구종사자는 시험연구책임자와 기관생물안전관	리책임자에게 보고를 한다.

2)	시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물에 대한 처리사항을	결정한다.

3.8.4	사육실의 청소 및 소독

시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 탈출한 실험동물의 사육실에 대한 청소 및 소독에 대한 사항을 결정한다.

3.9	빈사 사망 및 이상동물 취급 (해당시)

실험동물의 빈사 사망 및 이상동물 취급방법은 “[부록  ] 실험동물의 빈사 사망 및 이상	동물 취급방법”을 참조한다.

4.	개인보호구

4.1	개인보호구 관리

개인보호구는 “제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차”에 따라 관리한다.

4.2	개인보호구 구성

개인보호구를 선택할 때에는 취급하는 미생물 및 위해물질의 감염경로 및 신체 노출 부	위를 고려하여 착용한다. (예. 흡입, 섭취, 주사 또는 주입, 흡수 등)

1)	실험복

2)	1회용 상하일체형 보호복, 이중 착용 :

보호복 기준 (EN14126, ASTM1671)

3)	전면 보호형 마스크 및 필터 :

밀폐성, 견고성 및 투명성 등을 확보한 전면	보호형	마스크 및 NIOSH N100 기	준에 적합한 필터를 사용할 수 있으며, 필요에 따라서는 동급 이상의 전동기식(양	압식) 공기여과기를 사용할 수 있다.

Filters at least 99.97% of airborne particles. Not resistant to oil. Natiotioal Institute for Occupational Safety and Health, USA

4)	고글

5)	보호 장갑(이중 착용) : Latex 혹은 Nitrile 재질의 1회용 실험용 장갑

6)	비침수성 보호덧신

7)	비침수성 장화

8)	상하일체형 보호복 착용시 소매와 밑단 부분은 보호 장갑과 보호덧신 바깥쪽으로	나오도록 착용하며 비침수성 테이프를 이용하여 완전히 밀착시켜 활동 중 신체가	노출되지 않도록 하여야 한다.

9)	시험연구종사자는 필요시 두건과 (비침수성)토시 등을 착용할 수 있다.

10)	시험연구종사자는 부검 및 기타 실험 중이나 실험 종료 후 사육실 및 실험장소의	청소 등 작업을 할 경우에는 비침수성 앞치마 착용과 2중으로 착용한 1회용 실험	장갑에 면장갑 덧끼기 등 필요에 따라 적절한 개인보호구를 착용한다.

5.	실험동물 개체식별방법

5.1	실험동물 개체식별방법

실험동물의 개체식별방법은 “[부록  ] 동물식별”에 따르고, 오픈케이지에는 “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”를 작성해서 부착한다.

5.2	LMO동물 식별

유전자변형동물의 경우, “[서식  ] 실험동물 개체식별카드”에 유전자변형동물에 대한 정보	를 반드시 표기한다. 또한 유전자변형동물의 생후 72시간 내에 개체식별이 가능하도록	표식을 해야 하며, 경우에 따라 영구 개체식별법을 사용할 수 있으며, 다음의 관리대장을	작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

6.	실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법 (해당시)

실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법은 “[부록  ] 실험동물의 체중, 음수 및 사	료섭취량 측정방법”을 참조한다.

7.	동물실험 기구류 (해당시)

동물실험에 사용되는 기구류와 사용법은 “[부록  ] 동물실험 기구류”을 참조한다.

1)	주사기

2)	경구투여기구

3)	외과용 기구류

4)	동물 고정기구류

8.	돼지의 이송 및 보정 (해당시)

실험동물의 이송 및 보정방법은 “[부록  ] 실험동물의 이송 및 보정방법”을 참조한다.

9.	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리 (해당시)

9.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

9.2	실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리

실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리는 “[부록  ] 실험물질의 투여방법 및 투여	후 실험동물관리”를 참조한다.

9.3	채뇨 및 채변

9.3.1	채뇨

돼지용 케이지의 바닥재를 채뇨 시에만 작은 그물망으로 바꾸고, 그 밑에 채뇨 깔대기를	넣어 채취한다.

9.3.2	채변

채변은 식후 약15분 이내에 돼지가 배변하는 것을 기다렸다가 곧바로 채취한다.

9.3.3	기타

오줌이나 변의 사용목적에 따라서는 돼지를 진정시키거나 간단한 마취를 하여 요도 카테	터로 직접 방광 내의 오줌을 채취하거나 멸균한 면봉으로 직장변을 채취하는 방법도 있	다.

10.	실험동물의 채혈 방법 (해당시)

10.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

10.2	실험동물 채혈

실험동물의 채혈 방법은 “[부록  ] 실험동물 채혈”을 참조한다.

11.	실험동물의 안락사 방법

실험동물의 안락사 방법은 “[부록  ] 실험동물 안락사”를 참조한다.

12.	부검 (해당시)

12.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

12.2	실험동물 부검

실험동물의 부검은 “[부록  ] 실험동물의 부검”을 참조한다.

13.	시료채취요령 (해당시)

13.1	실험물질 정보 확인

실험물질에 대한 정보(MSDS등)를 확인하고, 주요사항을 숙지한다. 실험물질이 병원체인	경우, “제  장 OOO병원체정보"에서 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한다.

13.2	시료채취

실험동물의 시료채취는 “[부록  ] 실험동물의 시료채취방법”을 참조한다.

14.	검체의 취급 주의사항

감염성 시료를 다루는 경우 시험연구종사자는 검체가 갖는 잠재적 위험성을 인식해야 하	며 장갑 등의 개인보호구를 착용하고 생물안전작업대 안에 소독 또는 멸균제를 비치하	고	실험에 임하며 사용된 일회용 기구나 오염된 장갑은 생물재해 봉투에 버린다.

15.	실험동물 사체 및 폐기물 처리

실험동물 사체 및 폐기물 처리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 4. 폐기물 관리”에 따라 처리한다.

16.	비상사항 대응

비상사항 대응은 “제  장 비상사항 관리”에 따라 대응한다.

[Prototype ABL2] 제  장  병원체실험 표준작업절차

1.	병원체정보

※“병원체실험 표준작업절차”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

“제  장 OOO 병원체정보"에서 취급하는 병원체의 정보를 확인하고, 주요사항을 숙지한	다.

2.	병원체 및 시료의 반(출)입 관리

2.1	반(출)입인가

승인된 「연구계획서」에 명기된 병원체 및 시료만이 연구시설으로 반(출)입되며, 그 이외의 시료는 반(출)입이 금지된다. 시료를 반(출)입시켜야 할 경우, 시험연구책임자는 안전한 포장 및 이동방법 등을 확인하고, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

2.2	반(출)입절차

시료(병원체 등)를 담은 밀폐 컨테이너 포장 용기 외부 및 표면을 알코올로 소독하고 패스박스를 이용하여 패스박스 내 UV 램프 또는 필요시 H2O2 훈증으로 표면 소독 절차를 거친 후 반(출)입한다.

2.3	LMO병원체 반입기록

LMO병원체가 반입되는 경우, 시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급, 운반 및 관리를 위하여, 다음의 관리대장을 작성·보관한다.

1)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 관리대장”

2)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 운반 관리대장”

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형	생물체 보관 관리대장”

3.	물품의 반(출)입 관리

3.1	물품의 반(출)입 승인

3.1.1	반(출)입인가

실험실내 물품을 반입과 반출하고자 하는 경우, [서식  ]“연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

3.1.2	반(출)입절차

기관생물안전관리책임자의 승인을 받은 정해진 절차와 방법에 따라 물품을 반입 또는 반출할 수 있다.

3.2	실험장비 반(출)입 승인

3.2.1	반(출)입인가

실험장비를 연구시설으로 반입 또는 연구시설 내 실험장비를 반출할 경우에는 [서식  ] “연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)의 서식에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

3.2.1	반(출)입절차

실험장비는 사전 승인, 병원체의 비 오염화 또는 소독 등의 절차 없이 반(출)입시킬 수 없다. 연구시설 내 반입된 실험장비는 시험연구종자가 사용하기 전에 충분한 사전 지식을 숙지할 수 있도록 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자가 사전 교육을 실시한다.

4.	개인보호구

4.1	개인보호구 관리

개인보호구는 “제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차”에 따라 관리한다.

4.2	개인보호구 구성

개인보호구를 선택할 때에는 취급하는 미생물 및 위해물질의 감염경로 및 신체 노출 부	위를 고려하여 착용한다.

1)	실험복

2)	1회용 상하일체형 보호복 :

보호복 기준 (EN14126, ASTM1671)

3)	전면 보호형 마스크 및 필터 :

밀폐성, 견고성 및 투명성 등을 확보한 전면	보호형	마스크 및 NIOSH N100 기	준에 적합한 필터를 사용할 수 있다.

Filters at least 99.97% of airborne particles. Not resistant to oil. Natiotioal Institute for Occupational Safety and Health, USA

4)	고글

5)	보호 장갑 : Latex 혹은 Nitrile 재질의 1회용 실험용 장갑

6)	비침수성 보호덧신

7)	비침수성 장화

8)	상하일체형 보호복 착용시 소매와 밑단 부분은 보호 장갑과 보호덧신 바깥쪽으로	나오도록 착용하며 비침수성 테이프를 이용하여 완전히 밀착시켜 활동 중 신체가	노출되지 않도록 하여야 한다.

9)	시험연구종사자는 실험 중이나 실험 종료 후 실험장소의 청소 등 작업을 할 경우	에는 비침수성 앞치마 착용과 실험장갑에 면장갑 덧끼기 등	필요에 따라 적절한	복장으로 개인 생물안전도를 높이는 노력을 하여야 한다.

5.	실험장비

5.1	생물안전작업대 (해당시)

“제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차, 2. 생물안전작업대”에 따라 생물안전작업대를	사용한다.

5.2	피펫 및 관련 장비

“제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차, 6. 피펫 및 관련 장비”에 따라 사용한	다.

5.3	기타 실험장비 (해당시)

“제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차, 9. 기타장비”에 따라 기타장비를 사용한다.

6.	검체취급 준수사항

6.1	검체취급 준수사항

감염성 시료를 다루는 경우 시험연구종사자는 검체가 갖는 잠재적 위험성을 인식해야 하	며 장갑 등의 개인보호구를 착용하고 생물안전작업대 안에 소독 또는 멸균제를 비치하	고	실험에 임하며 사용된 일회용 기구나 오염된 장갑은 생물재해 봉투에 버린다.

6.2	검체취급 방법

“제  장 실험실 표준작업절차, 2. 검체위급방법”에 따라 검체를 취급한다.

7.	실험방법

7.1	병원체 실험방법

연구계획서의 실험방법에 따른다.

7.2	분석방법 (예시)

연구계획서의 분석방법에 따른다.

8.	실험실관리

8.1	실험실의 청소 및 소독 관리

실험실의 청소 및 소독관리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 3. 청소 및 소독절차”를 따른다.

8.2	일과 후 실험실관리

“제  장 연구시설운영관리, 7. 일과 후 연구시설관리”에 따라서 일과 후 실험실관리를 한다.

9.	폐기물처리방법

폐기물 처리는 “제  장 실험실 표준작업절차, 4. 폐기물 관리”에 따라 처리한다.

10.	비상사항 대응

비상사항 대응은 “제  장 비상사항 관리”에 따라 대응한다.

[Prototype ABL2] 제  장  실험실 동선 및 절차

1.	실험실 출입동선 및 절차

※“실험실 동선 및 절차”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

“제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차” 및 “제  장 연구시설 운영관리”, 취급하는 병원체와 기타 해당 관리지침에 따른다.

1.1	연구자 이동

1.1.1	동선

연구자 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

1.1.2	실험실 입실절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
출입구통로 ( 호)	출입대장기재	[서식 ] “연구시설 출입대장”에 모든 항목을 기재한다.
주출입문 ( 호)	출입인증	주출입구에서 카드키(허가된 출입연구자에게 배부된 카드키) 또는 기타 인증시스템을 이용하여 출입인증시스템을 해제한다.
락커(남/여) ( 호)	탈의	겉옷 등을 탈의하고 락커에 보관한다. 복도의 도어를 완전히 닫고 내부복도로 입실한다.
복도 ( 호)	내부복도 입실	실험실의 도어를 완전히 닫고 실험실로 입실한다.
실험실 ( 호)	실험실 입실	긴소매 실험복, 마스크 (또는 호흡보호구), 실험장갑 순으로 착용한다.

[착의 사진]	[착의 사진]	[착의 사진]	[착의 사진]

[입갱의실 개인보호구 착의 절차] (예시)

※ 취급하는 병원체와 실험방법에 따라서 개인보호구의 구성과 착의절차가 적용되어야 한다.

1.1.3	실험실 퇴실절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	실험실 퇴실	개인보호구를 탈의하고, 일회용 개인보호구는 지정폐기물통에 폐기한다. 손소독기 (또는 소독제)로 실험장갑을 소독한 후, 장갑을 폐기한다. 재사용장비(고글 또는 호흡보호구)는 소독제로 소독하고 UV챔버에 보관한다. 긴소매 실험복을 탈의하고, 필요 시 표면을 소독하고 지정 장소(또는 UV락커)에 보관한다.
복도 ( 호)	내부복도 퇴실	실험실의 도어를 완전히 닫고 복도로 퇴실한다.
락커(남/여) ( 호)	갱의	락커에 보관한 겉옷 등을 착의한다.
출입구통로 ( 호)	출입대장기재	[서식 ] “연구시설 출입대장”에 모든 항목을 기재한다.

[탈의 사진]	[탈의 사진]	[탈의 사진]	[탈의 사진]

[출갱의실 개인보호구 탈의 절차] (예시)

※ 취급하는 병원체와 실험방법에 따라서 개인보호구의 구성과 탈의절차가 적용되어야 한다.

1.2	물품 이동 (고압증기멸균기사용) 해당시

1.2.1	동선

물품 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

1.2.2	물품 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
멸균후실
고압증기멸균기 (장비번호: )	멸균실시	“[서식 ]고압증기멸균기 사용대장”을 기입하고, 고압증기멸균기를 이용하여, 멸균 절차를 거친 후 생물안전2등급 구역으로 물품을 반입한다.
복도 ( 호)	물품 반입	고압증기멸균기를 통해서 물품을 반입한다.
실험실 ( 호)	실험실 물품반입

1.2.3	물품 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	포장	반출할 물품을 소독하고, 밀폐용기 내에 담은 후, 밀폐용기 표면을 소독제로 소독한다.
	퇴실	소독작업이 종료되면, 실험실에서 실험장갑을 소독제로 소독한다.
복도 ( 호)	물품 반출	고압증기멸균기 앞에 설치된 손소독기를 아용하여 장갑을 착용한 상태로 손소독을 수행하고, 고압증기멸균기를 이용하여 멸균한다.
고압증기멸균기 (장비번호: )	멸균실시	“[서식 ]고압증기멸균기 사용대장”을 기입하고, 고압증기멸균기를 이용하여, 멸균 절차를 거친 후 생물안전2등급 구역에서 물품을 반출한다.
멸균후실	물품 반출	고압증기멸균기를 통해서 물품을 반출한다.

1.3	물품 이동 (패스박스사용) 해당시

1.3.1	동선

물품 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

1.3.2	물품 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용	“[서식 ]패스박스 사용대장”을 기입하고, 필요 시 패스박스 내 UV램프로 ( )분간 표면 소독 절차를 거친 후 물품을 생물안전2등급 구역으로 물품을 반입한다.
복도 ( 호)	물품 반입	패스박스를 통해서 물품을 반입한다.
실험실 ( 호)	실험실 반입

1.3.3	물품 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	포장	반출할 물품을 소독하고, 밀폐용기 내에 담은 후, 밀폐용기 표면을 소독제로 소독한다.
	퇴실	소독작업이 종료되면, 실험실에서 실험장갑을 소독제로 소독한다.
복도 ( 호)	물품 반출
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용	패스박스 앞에 설치된 손소독기를 아용하여 장갑을 착용한 상태로 손소독을 수행하고, 패스박스 내 UV램프로 ( )분간 표면 소독 절차를 거친 후 반출한다.
복도 또는 기타 ( 호)	반출	“[서식 ] 패스박스 사용대장”을 작성하고, UV램프로 ( )분간 표면 소독이 완료된 패스박스 내의 물품을 꺼낸다.

1.4	병원체 및 시료 이동 (패스박스사용) 해당시

1.4.1	동선

시료 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

1.4.2	병원체 및 시료 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용 (해당시)	“[서식 ]패스박스 사용대장”을 기입하고, 필요 시 패스박스 내 UV램프로 ( )분간 표면 소독 절차를 거친 후 병원체 및 시료를 생물안전2등급 구역으로 병원체 및 시료를 반입한다.
복도 ( 호)	물품 반입	패스박스를 통해서 병원체 및 시료를 반입한다.
실험실 ( 호)	실험실 반입

1.4.3	병원체 및 시료 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	포장	병원체 및 시료를 밀폐용기(3중포장) 내에 담은 후, 밀폐용기 표면을 소독제로 소독한다.
	퇴실	소독작업이 종료되면, 실험실에서 실험장갑을 소독제로 소독한다.
복도 ( 호)	병원체 및 시료 반출
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용 (해당시)	패스박스 앞에 설치된 손소독기를 아용하여 장갑을 착용한 상태로 손소독을 수행하고, 패스박스 내 UV램프로 ( )분간 표면 소독 절차를 거친 후 반출한다.
복도 또는 기타 ( 호)	병원체 및 시료 반출	“[서식 ] 패스박스 사용대장”을 작성하고, UV램프로 ( )분간 표면 소독이 완료된 패스박스 내의 병원체 및 시료를 꺼낸다.

1.4.4	실험실에서 다른 Zone (예: ABL2) 으로 병원체 및 시료 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	포장	병원체 및 시료를 밀폐용기(2중포장) 내에 담은 후, 밀폐용기 표면을 소독제로 소독한다.
	퇴실	소독작업이 종료되면, 실험실에서 실험장갑을 소독제로 소독한다.
복도 ( 호)	병원체 및 시료 반출
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용 (해당시)	패스박스 앞에 설치된 손소독기를 아용하여 장갑을 착용한 상태로 손소독을 수행하고, 패스박스 내 UV램프로 ( )분간 표면 소독 절차를 거친 후 반출한다.
복도 또는 기타 ( 호)	반출	“[서식 ] 패스박스 사용대장”을 작성하고, UV램프로 ( )분간 표면 소독이 완료된 패스박스 내의 병원체 및 시료를 꺼낸다.
출입구통로 ( 호)	출입대장기재	[서식 ] “연구시설 출입대장”에 모든 항목을 기재한다.
이동 경로		이동 경로 기술
멸균후실 ( 호)	출입인증	연구자는 병원체 및 시료의 반입을 위해서, 멸균후실입구에서 카드키(허가된 출입연구자에게 배부된 카드키) 또는 기타 인증시스템을 이용하여 출입인증시스템을 해제한다.
	출입대장기재	[서식 ] “연구시설 출입대장”에 모든 항목을 기재한다.
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용	“[서식 ]패스박스 사용대장”을 기입하고, 필요 시 패스박스 내 UV램프로 ( )분간 표면 소독 절차를 거친 후 물품을 ABL2 구역으로 병원체 및 시료의 반입을 반입한다.
ABL2복도 ( 호)	병원체 및 시료 반입	소독이 완료된 후, 패스박스를 통해서 병원체 및 시료를 반입한다.
ABL2사육실 ( 호)	사육실 반입	병원체 및 시료를 해당 실험실로 반입한다.

1.5	장비 및 물품 반출입 (패스룸사용) 해당시

1.5.1	동선

장비 및 물품 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

1.5.2	장비/물품 반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
주출입구	출입인증	연구자는 장비/물품의 반입을 위해서, 주출입구에서 카드키(허가된 출입연구자에게 배부된 카드키) 또는 기타 인증시스템을 이용하여 출입인증시스템을 해제한다.
	출입대장기재	[서식 ] “연구시설 출입대장”에 모든 항목을 기재한다.
복도 또는 기타 ( 호)	물품/장비 소독 (해당시)	소독제로 장비/물품을 표면 소독한다.
실험실 ( 호)	실험실 반입	장비/물품을 해당 실험실로 반입한다.

1.5.3	장비/물품 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	소독	반출할 장비/물품을 소독하고, 밀폐용기 내에 담은 후, 밀폐용기 표면을 소독제로 소독한다.
	실험실 퇴실	장비/물품을 휴대하고, 해당 실험실에서 퇴실한다.
복도 또는 기타 ( 호)	물품/장비 이동 (해당시)	장비/물품을 이동한다.
주출입구	출입대장기재	[서식 ] “연구시설 출입대장”에 모든 항목을 기재한다.
하역장 ( 호)	장비/물품 반출 (해당시)	장비/물품을 반출한다.

1.6	폐기물 이동

1.6.1	동선

폐기물 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

1.6.2	고상폐기물 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	폐기물 보관	고상폐기물은 지정 폐기물 처리 봉투 (또는 용기)에 담은 후, 봉투 (또는 용기) 표면을 소독하고, 폐기물 전용 보관함에 보관한다. 유리제품 및 바늘 등의 날카로운 폐기물은 다른 폐기물로부터 분리하여 별도의 손상성폐기물 전용폐기물함에 보관한다
	멸균용봉투 포장	보관한 폐기물을 멸균용봉투 내에 2/3 정도만 담고, 고압증기멸균확인용 테입을 붙인 후, 표면을 소독제로 소독한다.
	장갑 소독	소독작업이 종료되면, 해당 실험실에서 장갑을 소독제로 소독한다.
	실험실 퇴실	폐기물을 휴대하고, “복도”로 퇴실한다.
복도 ( 호)	이동	폐기물을 휴대하고, 고압증기멸균기로 이동한다.
고압증기멸균기 (장비번호: )	고압증기멸균기 사용	고압증기멸균기 앞에 설치된 손소독기를 아용하여 장갑을 착용한 상태로 손소독을 수행하고, 고압증기멸균기를 이용하여 멸균한다.
복도 ( 호)	폐기물 이동 (해당시)	[서식 ] 고압증기멸균기 사용대장을 작성하고, 멸균이 완료된 고압증기멸균기 내의 폐기물을 꺼낸다.
폐기물창고 ( 호)	폐기물 보관 (해당시)	폐기물을 지정장소에서 임시보관한 후, 법정기한을 준수하여 폐기처분한다.

1.6.3	액상폐기물 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	폐기물 보관	액상폐기물과 적정 농도의 살균제를 지정 폐기물 용기에 담은 후, 용기 표면을 소독제로 소독하고, 폐기물 전용 보관함에 보관한다.
	멸균용봉투 포장	액상폐기물 용기의 내용물이 3/4 정도일 때, 멸균용봉토로 용기를 포장하고, 고압증기멸균확인용 테입을 붙인 후, 표면을 소독한다.
		일회용 플라스틱 용기내의 액상폐기물은 뚜껑을 완전히 닫은 후 멸균봉투로 포장하고, 고압증기멸균확인용 테입을 붙인 후, 표면을 소독제로 소독한다.
	장갑 소독	소독작업이 종료되면, 해당 실험실에서 장갑을 소독제로 소독한다.
	실험실 퇴실	폐기물을 휴대하고, “복도”로 퇴실한다.
복도 ( 호)	이동	폐기물을 휴대하고, 고압증기멸균기로 이동한다.
고압증기멸균기 (장비번호: )	고압증기멸균기 사용	고압증기멸균기 앞에 설치된 손소독기를 아용하여 장갑을 착용한 상태로 손소독을 수행하고, 고압증기멸균기를 이용하여 멸균한다.
복도 ( 호)	폐기물 이동 (해당시)	[서식 ] 고압증기멸균기 사용대장을 작성하고, 멸균이 완료된 고압증기멸균기 내의 폐기물을 꺼낸다.
폐기물창고 ( 호)	폐기물 보관 (해당시)	폐기물을 지정장소에서 임시보관한 후, 법정기한을 준수하여 폐기처분한다.

2.	사육실 구역 출입동선 및 절차

사육실 구역에 적용되며,	“제  장 개인보호구 및 장비 표준작업절차” 및 “제  장 연구시설 운영관리”, 취급하는 병원체와 기타 해당 관리지침에 따른다.

2.1	연구자 사육실 이동

2.1.1	동선

연구자 사육실 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

2.1.2	사육실 입실절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
출입구통로 ( 호)	출입대장기재	[서식 ] “연구시설 출입대장”에 모든 항목을 기재한다.
주출입문 ( 호)	출입인증	주출입구에서 카드키(허가된 출입연구자에게 배부된 카드키) 또는 기타 인증시스템을 이용하여 출입인증시스템을 해제한다.
락커(남/여) ( 호)	탈의	겉옷을 탈의하고 락커에 보관한다. 입갱의실로 입실한다.
입갱의실(남/여) ( 호)	개인보호구 착용	개인보호구 착용 절차 기술~~~ 벽면 거울을 보고 개인보호구 착용 상태를 확인한다.
복도 ( 호)	내부복도 입실
전실 ( 호)	전실 입실 (해당시)
사육실 ( 호)	사육실 입실

(두건) - 1차 장갑 - 보호복 [착의 사진]	1차 덧신 - 마스크 [착의 사진]	고글 - (보호복 모자) - (2차 장갑) [착의 사진]	(2차 덧신) - (토시) - (소매/다리 테이핑) [착의 사진]

[입갱의실 개인보호구 착의 절차] (예시)

※ 취급하는 병원체와 실험방법에 따라서 개인보호구의 구성과 착의절차가 적용되어야 한다.

2.1.3	사육실 퇴실절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	사육실 퇴실	장갑 소독 후 사육실 퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)	개인보호구, 보호복, 장갑 소독 후 전실 퇴실
복도 ( 호)	내부복도 퇴실	출갱의실 입구 손소독기로 장갑 소독
출갱의실(남/여) ( 호)	개인보호구 탈의
샤워실 ( 호)	비상샤워 (해당시)
락커(남/여) ( 호)	갱의
출입구통로 ( 호)	출입대장기재

(소매/다리 테이프제거) - (2차 덧신) - (토시) [탈의 사진]	1차 덧신- (보호복 모자) - 보호복 [탈의 사진]	(2차장갑) - 고글 [탈의 사진]	마스크 - (두건) - 1차장갑 [탈의 사진]

[출갱의실 개인보호구 탈의 절차] (예시)

※ 취급하는 병원체와 실험방법에 따라서 개인보호구의 구성과 탈의절차가 적용되어야 한다.

2.2	연구자 부검실 이동 (해당시)

2.2.1	동선

연구자 부검실 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

2.2.2	부검실 입실절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
출입구통로 ( 호)	출입대장기재	[서식 ] “연구시설 출입대장”에 모든 항목을 기재한다.
주출입문 ( 호)	출입인증	주출입구에서 카드키(허가된 출입연구자에게 배부된 카드키) 또는 기타 인증시스템을 이용하여 출입인증시스템을 해제한다.
락커(남/여) ( 호)	탈의	겉옷을 탈의하고 락커에 보관한다. 입갱의실로 입실한다.
입갱의실(남/여) ( 호)	개인보호구 착용	개인보호구 착용 절차 기술~~~ 벽면 거울을 보고 개인보호구 착용 상태를 확인한다.
복도 ( 호)	내부복도 입실
전실 ( 호)	전실 입실 (해당시)
사육실 ( 호)	사육실 입실
후실복도 ( 호)	후실복도 입실 (해당시)
부검전실 ( 호)	부검전실 입실 (해당시)
부검실 ( 호)	부검실 입실

(두건) - 1차 장갑 - 보호복 [착의 사진]	1차 덧신 - 마스크 [착의 사진]	고글 - (보호복 모자) - (2차 장갑) [착의 사진]	(2차 덧신) - (토시/앞치마) - (소매/다리 테이핑) [착의 사진]

[입갱의실 개인보호구 착의 절차] (예시)

※ 취급하는 병원체와 실험방법에 따라서 개인보호구의 구성과 착의절차가 적용되어야 한다.

2.2.3	부검실 퇴실절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
부검실 ( 호)	부검실 퇴실	장갑 소독 후 부검실 퇴실
부검전실 ( 호)	부검전실 퇴실 (해당시)	개인보호구, 보호복, 장갑 소독 후 전실 퇴실
후실복도 ( 호)	후실복도 퇴실 (해당시)	(필요시) 장갑 소독 후 퇴실
후실복도전실 ( 호)	후실복도 전실 퇴실 (해당시)	(필요시) 장갑 소독 후 퇴실
복도 ( 호)	내부복도 퇴실	출갱의실 입구 손소독기로 장갑 소독
출갱의실(남/여) ( 호)	개인보호구 탈의
샤워실 ( 호)	비상샤워 (해당시)
락커(남/여) ( 호)	갱의
출입구통로 ( 호)	출입대장기재

(소매/다리 테이프제거) - (2차 덧신) - (토시/앞치마) [탈의 사진]	1차 덧신- (보호복 모자) - 보호복 [탈의 사진]	(2차장갑) - 고글 [탈의 사진]	마스크 - (두건) - 1차장갑 [탈의 사진]

[출갱의실 개인보호구 탈의 절차] (예시)

※ 취급하는 병원체와 실험방법에 따라서 개인보호구의 구성과 탈의절차가 적용되어야 한다.

2.3	실험동물 이동

동물실험윤리위원회에서 승인된 동물실험에 한하여, 실험동물을 반입한다.

2.3.1	사육실 실험동물 반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
하역장 ( 호)	실험동물 입고 (해당시)
복도 또는 기타 ( 호)	실험동물 이동 (해당시)
검역실 ( 호)	검역 (해당시)
세척실 ( 호)	실험동물 이동 (해당시)
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용 (해당시)
복도 ( 호)
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
사육실 ( 호)	실험실 반입

2.3.2	사육실 실험동물 반출절차

사육실에서 취급된 살아있는 실험동물은 반출이 금지되며, 취급된 실험동물의 사체는 부검 후 고압증기멸균 후 폐기처리 한다.

2.3.3	실험동물 부검실 이동

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	사육실 입실
패스박스 (장비번호: )	(해당시)
또는 후실복도, 부검전실 경우	(해당시)
부검실 ( 호)	부검실 입실 및 패스박스 이용 동물 반입 (해당시)

2.4	물품 이동 (고압증기멸균기사용) (해당시)

2.4.1	동선

물품 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

2.4.2	사육실 물품 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
멸균후실
고압증기멸균기 (장비번호: )	멸균실시
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
사육실 ( 호)	사육실 물품반입

2.4.3	사육실 물품 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
고압증기멸균기 (장비번호: )	멸균실시
멸균후실	물품 반출

2.4.4	부검실 물품 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
멸균후실
고압증기멸균기 (장비번호: )	멸균실시
복도 ( 호)	물품 반입
후실복도 전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
후실복도 ( 호)	(해당시)
부검전실 ( 호)	(해당시)
부검실 ( 호)	부검실 물품반입

2.4.5	부검실 물품 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
부검실 ( 호)	포장
패스박스 (장비번호: )	물품 이동 (해당시)
또는 부검전실, 후실복도, 후실복도 전실 경우
복도 ( 호)	물품 반입
고압증기멸균기	멸균실시
멸균후실	물품 반출

2.5	물품 이동 (패스박스사용) (해당시)

2.5.1	동선

물품 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

2.5.2	사육실 물품 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
사육실 ( 호)	사육실 반입

2.5.3	다른 Zone에서 사육실 물품 내부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
사육실 ( 호)	사육실 반입

2.5.4	사육실 물품 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 또는 기타 ( 호)	반출

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
실험실 ( 호)	실험실 반입

2.5.5	사육실에서 다른 Zone으로 물품 내부반출절차 (예시)

2.5.6	부검실 물품 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스	패스박스 이용
부검실 ( 호)	부검실 반입

2.5.7	다른 Zone에서 부검실 물품 내부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
부검실 ( 호)	사육실 반입

2.5.8	부검실 물품 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
부검실 ( 호)	포장
패스박스 (장비번호: )	물품 이동 (해당시)
또는 부검전실, 후실복도, 후실복도 전실 경우
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 또는 기타 ( 호)	반출

실명(호실)	단계	절차
부검실 ( 호)	포장
패스박스 (장비번호: )	물품 이동 (해당시)
또는 부검전실, 후실복도, 후실복도 전실 경우
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
실험실 ( 호)	실험실 반입

2.5.9	부검실에서 다른 Zone으로 물품 내부반출절차 (예시)

2.6	병원체 및 시료 이동 (패스박스사용) (해당시)

2.6.1	동선

시료 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

2.6.2	사육실 병원체 및 시료 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
사육실 ( 호)	사육실 반입

2.6.3	다른 Zone에서 사육실 병원체 및 시료 내부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
사육실 ( 호)	사육실 반입

2.6.4	사육실 병원체 및 시료 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 또는 기타 ( 호)	반출

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
실험실 ( 호)	실험실 반입

2.6.5	사육실에서 다른 Zone으로 병원체 및 시료 내부반출절차 (예시)

2.6.6	부검실 병원체 및 시료 외부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
부검실 ( 호)	부검실 반입

2.6.7	다른 Zone에서 부검실 병원체 및 시료 내부반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
실험실 ( 호)	포장
	퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스	패스박스 이용
부검실 ( 호)	사육실 반입

2.6.8	부검실 병원체 및 시료 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
부검실 ( 호)	포장
패스박스 (장비번호: )	물품 이동 (해당시)
또는 부검전실, 후실복도, 후실복도 전실 경우
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 또는 기타 ( 호)	반출

실명(호실)	단계	절차
부검실 ( 호)	포장
패스박스 (장비번호: )	물품 이동 (해당시)
또는 부검전실, 후실복도, 후실복도 전실 경우
복도 ( 호)	물품 반입
패스박스 (장비번호: )	패스박스 이용
복도 ( 호)	물품 반입
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
실험실 ( 호)	실험실 반입

2.6.9	부검실에서 다른 Zone으로 병원체 및 시료 내부반출절차 (예시)

2.7	장비 및 물품 반출입 (패스룸사용) (해당시)

2.7.1	동선

장비 및 물품 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

2.7.2	장비/물품 반입절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
하역장 ( 호)	장비/물품 입고 (해당시)
복도 또는 기타 ( 호)	물품/장비 이동 (해당시)
세척실 ( 호)	장비/물품 이동 (해당시)
패스룸 ( 호)	패스룸 이용
복도 ( 호)
전실 ( 호)	전실 반입 (해당시)
사육실 ( 호)	사육실 반입

2.7.3	장비/물품 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	1차 소독
	사육실 퇴식
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)
패스룸 ( 호)	패스룸 이용
세척실 ( 호)	장비/물품 이동 (해당시)
복도 또는 기타 ( 호)	물품/장비 이동 (해당시)
하역장 ( 호)	장비/물품 반출 (해당시)

2.8	폐기물 이동

2.8.1	동선

폐기물 이동 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

2.8.2	사육실 고상폐기물 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	폐기물 보관
	멸균용봉투 포장
	사육실 퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)
고압증기멸균기
세척실 ( 호)	반출 (해당시)
복도 ( 호)	폐기물 이동 (해당시)
폐기물창고 ( 호)	폐기물 보관 (해당시)

2.8.3	사육실 액상폐기물 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	폐기물 보관
	멸균용봉투 포장
	사육실 퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)
고압증기멸균기
세척실 ( 호)	반출 (해당시)
복도 ( 호)	폐기물 이동 (해당시)
폐기물창고 ( 호)	폐기물 보관 (해당시)

2.8.3	부검실 고상폐기물 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
부검실 ( 호)	폐기물 보관
	멸균용봉투 포장
	사육실 퇴실
패스박스	폐기물 이동 (해당시)
또는 부검전실, 후실복도, 후실복도 전실 경우
복도 ( 호)
고압증기멸균기
세척실 ( 호)	반출 (해당시)
복도 ( 호)	폐기물 이동 (해당시)
폐기물창고 ( 호)	폐기물 보관 (해당시)

2.8.4	부검실 액상폐기물 반출절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	폐기물 보관
	멸균용봉투 포장
	사육실 퇴실
패스박스	폐기물 이동 (해당시)
또는 부검전실, 후실복도, 후실복도 전실 경우
복도 ( 호)
고압증기멸균기
세척실 ( 호)	반출 (해당시)
복도 ( 호)	폐기물 이동 (해당시)
폐기물창고 ( 호)	폐기물 보관 (해당시)

2.8.5	사육실 실험동물 사체처리 절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
사육실 ( 호)	멸균용봉투 포장
	사육실 퇴실
전실 ( 호)	전실 퇴실 (해당시)
복도 ( 호)
고압증기멸균기
세척실 ( 호)	반출 (해당시)
복도 ( 호)	실험동물사체 이동 (해당시)
폐기물창고 ( 호)	실험동물사체 보관 (해당시)

2.8.6	부검실 실험동물 사체처리 절차 (예시)

실명(호실)	단계	절차
부검실 ( 호)	멸균용봉투 포장
	실험실 퇴실
패스박스	실험동물사체 이동 (해당시)
또는 부검전실, 후실복도, 후실복도 전실 경우
복도 ( 호)
고압증기멸균기
세척실 ( 호)	반출 (해당시)
복도 ( 호)	실험동물사체 이동 (해당시)
폐기물창고 ( 호)	실험동물사체 보관 (해당시)

3.	실험실 동선 및 절차 방법 게시

OOO기관생물안전관리책임자는 “[표지  ] 실험실 동선 및 절차 방법” 등을 각 실험실과 주요통로 등에 게시한다. 연구시설 출입자의 역방향 출입을 방지하기 위해 “[표지  ] 역방향출입금지 표지”를 해당 도어에 부착한다.

[Prototype ABL2] 제  장  생물안전확보 및 보안 관리

1.	위해성평가

1.1	목적

※“생물안전확보 및 보안 관리”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

생물안전은 사용자의 행위에 대한 안전조치 등을 마련하는 운영적 요소와 안전을 지켜주는 시설 및 기계설비 등의 물리적 요소로 구성되며, 이를 바탕으로 실험 대상 생물체와 사용 방법 등에 관한 위해요소를 분석하고 실험실 감염과 외부 환경 방출 등의 생물재해 방지를 위한 안전도를 평가하여 연구활동종사자가 안전하게 실험할 수 있도록 한다.

위해성평가는 과학적으로 타당하고 투명하게 수행되는 구조화된 절차로 모든 불확실성에 대해 고려하고, 해당 요인의 잠재적인 역효과 및 그 가능성과 결과를 탐지하고 평가하며, 예상되는 전반적인 위해수준이 수용 또는 관리가능한 지에 대한 권고사항을 만드는 것을 목적으로 한다.

사전유해인자위험분석은 연구실의 유해인자를 연구 활동종사자 스스로 찾아내고 관리기관(연구실 환경안전 관리자)과 연계하여 관리할 수 있는 방안을 모색하는 것을 목표로 한다. 이러한 유해인자의 사전 위험분석은 기본적으로 연구실에서 적절한 예방조치가 이루어졌는지를 평가하는 것으로, 예상되는 위험에 대하여 위험성을 조사하여 그 위험을 제거 또는 저감하여 재해 발생을 사전에 예방하는 사전 위해성평가(risk assessment) 방법이다.

1.2	위해성 평가 시기 및 위험요소 확인

1.2.1	위해성 평가 시기

위해성 평가는 다음이 경웨 수행한다.

1)	신규 병원체의 도입, 실험절차나 취급 병원체 양의 변경 등 연구방법의 변화가 발	생하거나 새로운 연구를 시작하는 경우

2)	신규 설비와 장비 도입 또는 장비의 작동에 대한 변경이 발생한 경우

3)	연구활동종사자의 교체 또는 외부 연구자 및 내․외부 방문객 등 인원의 재배치가	있는 경우

4)	병원체 소독 및 폐기물 처리 절차, 개인보호구 사용 및 실험실 입․출입 절차 등과	같은 실험실 표준운영절차서가 수정된 경우

5)	바이오리스크 관리와 연관된 예상치 못한 상황(events)이 발생한 경우

6)	새로운 법제도의 시행에 따른 실제적 또는 잠재적 부적합성이 확인된 경우

7)	연구시설 내 중대사고 발생의 경우

8)	연구시설 내 응급상황 대처 및 대응 계획 수립의 경우

9)	생물안전 3등급 연구시설 관리시스템을 재검토할 경우

1.2.2	위험요소 확인

실험실 위해성평가는 실험실 내 실험 수행의 모든 절차와 시설에 대한 유해요소를 검토하여, 안전관리항목과 잠재적 유해성․운영문제에 기반하여 안전성․운영효과 향상을 위한 활동 및 조치사항을 도출하는 것을 목적으로 한다. 생물학적(biological hazards) 요소, 화학적(chemical) 요소, 기계적(mechanical) 요소, 전기적(electrical) 요소, 열역학적 요소, 방사능적(radiations) 요소로 위해요소의 세부사항을 바탕으로, 실험과정의 특수성과 실험장소의 복잡성, 이용자 및 위해요소 취급자의 경험 수준 등 상호관련된 영향관계에 따라 다양한 정성․정량평가 기법을 활용하여 수행되는 종합적 위해성평가 과정이다.

생물학적 요소 : 세균․바이러스․진균 및 그 생산독소, 기생충, 실험동물, 식물, 곤충, 유전자재조합생물체 등이 이에 해당함

화학적 요소 : 물리적 위험성(반응성, 인화성, 부식성, 금수성, 폭발성) 및 건강유해성(독성, 발암성)

기계적 요소 : 손상성기기(주사바늘, 수술용 칼, 핀셋, 가위), 유리, 압축가스 실린더, 진공장비의 파손 및 과부화된 압력으로 인해 발생하는 폭발

전기적 요소 : 전기누전, 합선, 용량초과, 전기쇼크 등에 의한 화재, 고압전류, 부적절한 전기 배선의 설치 및 차단기 이상

열역학적 요소 : 발열기기(가스레인지, 버너, 알콜램프 등), 고압증기멸균기, 드라이오븐, 드라이아이스

방사능적 요소 : 방사능동위원소, 레이저, BSC․클린룸․전자레인지 등에서 발생되는 자외선 등

[실험실 내 작업흐름(workflow) 개요도]

1.3	일반 원칙

위해성평가는 위해성관리(risk management)와 위해성정보교류(risk communication)와 상호 연계되며, 위해성평가는 위해성 분석(risk analysis)과 위해성 판단(risk evaluation)으로 세분화된다. 그러나 대부분의 경우 위해성분석과 위해성평가는 동일한 의미로 받아들여지고 있다.

위해성심사는 이미 수립된 위해성 심사기준(과학적 근거, 법적 요구사항, 운영절차, 실험절차 혹은 성과에 의한 기준)에 의거하여 추정되는 위해성을 비교하는 절차를 의미한다. 다시 말해 위해성관리는 위해성분석 및 위해성심사에 의해 위해요인을 판단하고 이러한 판단을 통해 관리과업을 도출하여 이행하는 통합적 과정이다. 이러한 위해성 관리체계는 위해성분석, 위해성평가, 위해성관리가 상호작용하며, 이해관계자 및 관련자들 간의 긴밀한 위해성정보교류를 통해 발생 가능한 문제들이 유발하는 위해범위에 대한 대응과 그 수준을 사전에 평가하고, 그에 따른 대응과업을 발굴하여 이행하는 것을 원칙으로 한다.

재평가

위해성 분석

위해성 관리

위해성 판단

이해관계자

위해성 정보교류

Ⅲ.위해성관리

1. 선택사항 확인

1.1. 선택사항 설정

1.2. 방법론/도구 선택

1.3. 분석/판단

1.4. 선택사항 결정/추천

1.5. 잔여위해성 확인

2. 의사결정

3. 계획수립

4. 이행/집행

5. 후속조치/모니터링

Ⅱ.위해성판단

1. 위해성 기준 선택

2. 측정된 위해성 비교

3. 위해성 우선순위/서열화

4. 전략/계측방법 제안/개발

Ⅰ.위해성분석

1. 분석 준비

1.1. 예비 위해성분석 이행

1.2. 위해성 분석팀 선택

1.3. 관계자 확인

1.4. 위해성 유발활동 확인

1.5. 문제들의 확인 및 공식화

1.6. 목적 설정

1.7. 범위/경계 정의

1.8. 방법론/기법 선택

1.9. 데이터 수집 및 선택

2. 위해성 분석

2.1. 시스템 정의

2.2. 유해성 확인

2.3. 노출/개연성 분석

2.4. 발생가능성//정량화

2.5. 위해성 판단/가시화

2.6. 민감도 분석

3. 결론 및 권고

[위해성 관리체계의 주요 위상, 단계 및 순서]

1.4	평가방법

미생물학적 위해성 평가(microbiological risk assessment)는 실험실의 생물안전 위해성평가를 위하여 과학적 근거를 바탕으로 미생물 및 이들이 생산하는 독소 등으로 야기될 수 있는 질병의 심각성 및 발생 가능성을 5단계에 걸쳐 평가하는 체계적인 과정이다.

위해성 평가는 연구실 환경, 시험·연구종사자 및 작업 형태 등 평가하고자 하는 대상 및 목적에 따라 위험요소, 위해성의 특성, 노출의 종류 등이 달라질 수 있다.

1.4.1	위험요소 확인 (hazard identification)

위험요소 확인은 위해성 평가의 첫 단계로 인체 질병을 유발할 수 있는 대상 병원성 미생물이나 실험활동을 정하고 미생물이나 실험활동에 존재하는 위험요소를 찾아내는 과정으로 병원성 미생물의 정보, 실험실 획득 감염 사례, 실험과정에 사용되는 기술 및 실험 조건, 동물 실험의 실시 여부, 유전자재조합실험 여부 등에 대한 정보를 수집한다.

1.4.2	노출 평가 (exposure assessment)

노출 평가는 병원체가 실험자에게 실질적으로 노출된 양 또는 노출 예상치에 대한 정성적, 정량적 평가를 하는 과정이다. 즉, 병원체 또는 독소의 농도, 노출량, 빈도 및 기간, 숙주의 면역 수준 및 병원체에 대한 감수성, 오염물질에 노출됨으로 발생하는 위해정보 등을 이용하여 병원체 또는 독소의 위해 가능성을 정성적, 정량적으로 평가하는 것이다. 이러한 노출 평가는 실험의 위해 제어 및 관리에 유용하게 이용될 수 있을 것이다. 따라서 보다 과학적 판단에 근거를 두어야 하며, 불확실성도 함께 설명되어야 한다.

1.4.3	용량반응 평가 (dose-response assessment)

용량반응 평가는 어떤 물질에 대한 위해성이 확인되었다면, 그 물질이 과연 어느만큼의 위해성을 보이는 지를 정량적으로 평가하는 단계이다. 일반적으로 독성학적 역치(threshold)의 유무를 평가하고 그 결과에 따라 무해용량(NOEL), 최소독성용량(LOAEL)을 산출한다. 만일 역치를 확인할 수 없을 경우 DNA에 대한 돌연변이 유발 등 저농도에 의한 장기적 영향에 대한 위해가능성을 정성적, 정량적으로 평가하게 된다. 병원체의 경우 유전자 수준의 병리기전(pathogenesis)을 기반으로 기존에 알려진 발생률, 이환율, 유병률, 빈도, 사망률, 치사율 등을 반영하여 위해성을 판단할 수 있다. 이러한 용량반응 평가는 노출 평가와 연계되어 위해요소의 불확실성을 설명한다.

1.4.4	위해 특성 (risk characterization)

위해 특성단계에는 병원체, 환경과 인간 집단 간의 상호 관계의 평가가 포함되며 위험의 심각성이나 기간을 정성․정량적으로 기술하는 과정으로 주요 위험요소는 다음과 같다.

1)	병원체의 특성

복제 가능성, 잠재적 독성인자 방출력, 숙주와 환경의 상호 작용에 따른 병원체의	동적 진화, 환경에서의 병원체 안전성 및 다양성, 미생물 사이에서의 유전물질 전	달성, 항생제 내성 및 병독성 인자 특성의 전이 가능성 등

2)	숙주의 특성

면역상태, 연령, 기저질환, 질병에 대한 과거력, 개별 숙주의 감수성, 상재 균총의	특성 등

3)	환경적 특성

사용하는 병원체의 농도 및 양, 숙주 노출 빈도 및 기간, 전파경로 및 감염량, 실험	과정 중 에어로졸 발생 여부, 병원체 매개체의 접촉, 동물실험 여부, 실험환경 등

위험요소 확인에서 노출 평가까지의 정보를 통합하여 해당 인구 집단에서의 위해 발생 가능성과 건강에 미치는 심각성 및 악영향을 정성․정량적으로 추정하는 과정이다. 최종 위해 추정치의 신뢰도는 위해성 평가의 모든 단계에서 확인된 불확실성, 변이성, 가정 등에 의존함으로 위해 추정에 연관된 불확실성 등이 포함되어야 한다.

1.4.5	위해성 판단 (risk evaluation)

추정된 최종 위해 신뢰도에 따라 복합적인 정책․관리적 결정을 내리는 과정이다. 일반적으로 위해 기준을 선택하고 추정된 각 위해요인들을 상호비교(compare estimated risks)한다. 이 과정을 통해 위해의 우선순위(priorities/rank risks)를 선정하게 되는데, 기본적으로 이 과정은 위해관리(risk management)의 전략과 수단을 개발하거나 제안하기 위한 것이다.

위해성 판단의 논리절차는 기본적으로 무엇을(위해요소)․어떻게(작용기작)․얼마나(작용량)․빈도(노출 가능성)에 따라 이루어지며, 위해 판단은 이러한 위해성평가 결과에 근거하여 실험실의 생물안전을 위하여 ① 무엇을 할 필요가 있는가? ② 무엇을 할 수 있는가? ③ 무엇을 해야 하는가에 대한 실험실 및 시험연구기관 차원의 관리과업의 발굴과 이행조직을 운영하는 방향성을 제시한다.

[WHO의 위해성 평가 모식도]

1.5	고려사항

올바른 위해성 평가를 수행하기 위해서는 취급 미생물 또는 생산 독소 등의 병원성, 질병 발생 위험성, 전파방식, 에어로졸 발생 여부 등에 대한 과학적 근거뿐만 아니라 감염 위해를 최소화시키거나 제거하기 위해 생물안전연구시설, 안전 장비 등에 대한 적절한 과학적 지식과 이해가 중요하다.

1.6	위해성 평가 및 밀폐방법

1.6.1	위해성 평가 요소

실험에 적합한 밀폐방법이 결정되도록 실험의 위해성 평가는 다음 각 호의 요소에 따라 종합적으로 실시되어야 한다.

1)	숙주 및 공여체의 위험군

2)	숙주 및 공여체의 독소생산성 및 알레르기 유발성

3)	생물체의 숙주 범위 또는 감수성 변화 여부

4)	배양 규모 및 농도

5)	실험과정 중 발생 가능한 감염경로 및 감염량

6)	인정 숙주-벡터계의 사용 여부

7)	환경에서의 생물체 안정성

8)	유전자변형생물체의 효과적인 처리 계획

9)	효과적인 예방 또는 치료의 유효성

1.6.2	위해성평가 절차

실험시설의 설치에 대한 신고 및 허가 여부를 확인하고, 동물실험을 수행할 경우 동물실험윤리위원회(IACUC)로부터 시설 및 실험에 대하여 승인을 받았는지를 확인한 후, 시험·연구기관의 IBC 승인을 획득하였는지를 확인한다. 이후 실험자, 실험시설, 실험장비에 대한 안전성을 확인한 후 LMO 개발 및 이용 과정에 대한 안전성을 미생물학적 위해성평가의 원칙에 따라 단계적이며 복합적으로 평가한다.

[미생물학적 위해성평가 원칙에 따른 실험의 위해성평가항목]

1.6.3	밀폐등급

미생물 및 감염성 물질 등을 취급 □ 보존하는 실험 환경에서 이들을 안전하게 관리하는 방법을 확립하는데 있어 기본적인 개념은 ‘밀폐’이다. 밀폐의 목적은 연구활동종사자, 기타 관계자, 그리고 실험실과 외부 환경 등이 잠재적 위해 인자 등에 노출되는 것을 줄이거나 차단하기 위함이다. 밀폐의 세 가지 핵심 요소는 다음과 같다.

[물리적 밀폐 확보 구성 요소]

위의 세 요소는 상호 보완적이기 때문에 단계별 밀폐수준에 따른 필요에 따라 적합하게 조합하여 적용된다. 연구활동종사자와 실험환경이 감염성 병원체에 노출되는 것을 방지하는 일차적 밀폐(primary containment)에는 정확한 미생물학적 기술의 확립과 적절한 안전장비를 사용하는 것이 중요하다. 이와 더불어 실험실 외부환경이 감염성 병원체에 오염되는 것을 방지하기 위한 이차적 밀폐(secondary containment)에서는 연구 시설의 올바른 설계 및 설치, 그리고 시설을 관리 ․ 운영하기 위한 수칙 등을 마련하고 준수하는 것이 중요하다.

밀폐등급은 숙주 및 공여체 중 가장 높은 위험군에 대응하여 결정하는 것을 기본 원칙으로 하되, 위해성 평가 결과에 따라 해당 실험의 밀폐등급을 낮추거나 높일 수 있다.

1)	실험실 준수사항 및 관련기술

일반 미생물실험실에서 밀폐를 확보하기 위해 가장 중요한 요소는 표준  미생물실험	실의 생물안전수칙 및 안전기술을 엄격히 준수하는 것이다. 병원성 미생물 또는 감염	성 물질을 취급하는 시험·연구종사자는 그 위험성에 대하여 충분히 숙지하고 있어야	한다. 아울러 이러한 생물체를 안전하게 취급하기 위한 준수사항 및 실험기법 등에	대해 교육 ․ 훈련을 받아야 하며, 실험실 책임자는 연구활동종사자들에게 적절한 교육	훈련을 제공하여야 한다. 미생물 및 의과학 실험실을 갖추고 있는 기관에서는 발생할	수 있는 생물학적 위해 요인을 규명하고 이러한 위해 요인에 연구활동종사자 및 실	험실 등에 폭로되는 것을 최소화하거나 제거하기 위해 고안된 수칙과 절차를 규정하	는 생물안전관리규정을 제정하여 운영한다.

- 생물안전관리 조직체계 및 그 직무에 관한 사항

- 연구(실) 또는 연구시설 책임자 및 운영자의 지정

- 생물안전위원회의 구성과 운영에 관한 사항

- 연구(실) 또는 연구시설의 안정적 운영에 관한 사항

- 기본적으로 준수해야 할 실험실 생물안전수칙

- 실험실 폐기물 처리 절차 및 준수사항

- 실험자의 건강 및 의료 모니터링에 관한 사항

- 생물안전교육 및 관리에 관한 사항

- 응급상황 발생 시 대응방안 및 절차

또한, 특별한 병원체나 실험 절차를 관리하는데 표준 실험실 생물안전수칙만으로는	충분하지 않을 경우, 연구(실) 책임자의 판단에 따라 생물안전 심의, 표준작업절차서	(standard operating procedure, SOP) 등 이에 대한 부수적인 준수사항을 제시하고	이행하도록 한다.

2)	안전장비

병원체 및 감염성물질 등에 노출되는 것을 차단하거나 최소화시키기 위한 물리적 밀	폐 기능이 있는 중요 안전장비로 생물안전작업대(biological safety cabinet, BSC)가	있다. 이는 미생물 실험 수행 시 발생하는 유출물, 감염성 에어로졸 등으로부터 시료	뿐만 아니라 취급자를 보호하기 위한 안전장비로 매우 유용하다. 기타 안전장비로 원	심분리과정 중 에어로졸이 방출되는 것을 방지하기 위한 안전 원심 캡과 연구활동종	사자가 직접 착용함으로써 스스로를 보호할 수 있는 개인보호구로 장갑, 실험복, 가	운, 신발 덮개, 장화, 호흡보호구, 안면 보호대, 보안경 등을 들 수 있다.

3)	생물안전연구시설

인체에 질병을 유발시킬 수 있는 잠재적 가능성이 높은 미생물을 다룰 경우에는 적	절한 생물안전연구시설을 설치하고 운영함으로써 시험·연구종사자의 보호뿐만 아니라	실험실에서 비의도적으로 방출되는 미생물로부터 지역사회와 국민을 보호해야 한다.

생물안전연구시설의 밀폐수준은 취급하는 미생물의 전파 위험도에 따라 달라진다. 감	염성 에어로졸의 노출에 의한 감염 위험성이 클 경우에는 미생물이 외부환경으로 방	출되는 것을 방지하기 위해 높은 수준의 일차적 밀폐와 더불어 여러 단계의 이차적	밀폐가 요구된다.

이러한 생물안전연구시설 설계에서 중요한 것으로는 환기 시스템 및 배출되는 공기	에서 병원체를 제거시키는 공기 처리 시스템, 실험실 입구의 공기 차단 장치, 별도의	격리된 실험시설 설치 등을 들 수 있다.

진단 목적 상 혈액을 비롯한 각종 임상가검물들을 취급하는 경우, 이러한 가검물이	병원체 등 감염성 물질의 포함여부에 대해 모르고 다루는 경우, 취급자의 감염 가능	성이 높을 수 있으므로 특별한 주의가 필요하다. 즉, 임상가검물을 처리하기 위해서	는 생물안전 2등급 이상의 시설을 이용하고 검체의 사용, 포장, 수송 및 보관 등을	위한 세부 규정을 마련하여 운영 ․ 준수하는 것 등이 중요하다.

1.7	기관생물안전위원회의 위해성평가 심의 및 밀폐수준 결정

기관생물안전위원회 위원은 위험요소의 특성에 따라 숙주가 LMO로 변화하고 취급되는 과정에서 발생할 수 있는 위해성을 단계적으로 판단하고, 최종적으로 유전자재조합실험의 상당하는 물리적 밀폐수준을 결정한 후 실험생물체의 특성에 따라 추가적인 밀폐조치가 필요한지 여부에 따라 상당하는 최종 밀폐수준을 결정한다.

기관생물안전위원회에서는 유전자재조합실험의 위해성평가 및 심사체계를 참고하여, 기관의 특성 및 상황에 맞는 심사를 진행할 수 있다.

1.8	기타

기타로 기술할 사항이 있으면 추가 기술

2.	유전자변형생물체의 관리

2.1	유전자변형생물체의 사용

「유전자변형생물체법」에 따른 연구시설의 설치·운영에 대한 허가를 받거나, 신고를 한 경우, 연구시설의 안전관리등급별로 유전자변형생물체를 개발하거나 실험을 실시할 수 있다. 유전자변형생물체의 위험군 분류는 「유전자재조합실험지침」 [별표2] “생물체의 위험군 분류”에 따른다. 다만, 기관생물안전위원회의 심의를 거쳐 위험군 및 생물안전등급을 달리 분류할 수 있다.

2.2	유전자변형생물체의 취급관리

2.2.1	취급관리기준

유전자변형생물체의 취급관리기준이라 함은 다음 각 호의 사항을 말한다.

1)	이동시에는 시험·연구용 유전자변형생물체를 밀폐하여 운송하도록 할 것

2)	유전자변형생물체의 취급·관리에 적합한 전담자 또는 책임자를 지정할 것

3)	유전자변형생물체의 취급·관리를 위한 설비가 본래의 성능이 발휘될 수 있도록 적	정하게 유지·관리할 것

4)	유전자변형생물체의 취급시 주의사항 및 위해방지를 위한 비상조치방법을 알고 있	을 것

2.2.2	관리대장 작성

시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급관리를 위하여, 「유전자변형	생물체법 통합고시」 별지 제2-7호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형생물체 관리대장”

을 작성·보관하고, 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급·관리를 위한 설비를 적정하	게 유지·관리하여야 한다.

2.3	유전자변형생물체 보관 관리

2.3.1	준수사항

유전자변형생물체를 보관하는 경우에는 다음 각 호의 사항을 준수해야 한다.

1)	유전자변형생물체를 포함한 시료 및 폐기물은 "유전자변형생물체"라는 것을 표시	([표시  ]생물위해표시)하고, 정해진 수준의 물리적 밀폐 조건을 만족하는 실험실,	실험구역 또는 대량배양실험구역에 시건장치로 잠금을 하고 안전하게 보관한다.

2)	유전자변형생물체를 포함하는 시료를 보관하는 냉장고 및 냉동고 등에는 유전자변	형생물체를 보관 중임을 표시([표시  ]생물위해표시)해야 한다.

3)	시험·연구책임자는 해당 유전자변형생물체를 포함하는 시료 목록을 작성하여 보관	해야 한다. 다만, 생물안전 2등급 이하의 연구시설에서 사용하는 시료는 그 실험기	록만으로 대체할 수 있다.

2.3.2	보관관리대장 작성

시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 보관관리를 위하여, 「유전자변형	생물체법 통합고시」 별지 제2-9호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형생물체 보관 관리	대장”	을 작성·보관하고, 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급·관리를 위한 설비를	적정하게 유지·관리하여야 한다.

2.4	보존용기 표기

2.4.1	라벨부착

유전자변형생물체를 보존하기 위한 vial, tube, 앰플 등 단위 용기에 해당 병원체에 대하	여 병원체명(strain명), 제조일자 등의 정보를 표기하거나 표기된 라벨을 부착한다.

2.4.2	보존상자

유전자변형생물체 보존상자를 구비하고, 보존상자 표면에 유전자변형생물체 보존 정보를	간략히 표	기하여 관리가 용이하도록 한다.

2.4.3	보관방법

유전자변형생물체 보관은 보관상자 내 일련순서를 정하여 구획된 순서대로 보존용기를	넣고 구획별 해당 유전자변형생물체 보관 목록을 시험연구종사자가 [서식  ]“유전자변형	생물체 보관 목록“을 기록하여, 유전자변형생물체의 취급 및 관리가 용이하도록 한다.

2.5	유전자변형생물체의 운반

감염성물질의 안전수송방법은 [부록  ]“감염성물질 수송”에 따른다.

2.5.1	OOO기관 내 운반

OOO기관 내에서 유전자변형생물체를 포함하는 감염성물질을 운반하는 경우에는 견고하	고 새	지 않는 1차용기에 넣고 2차안전수송용기에 담아서 안전하게 운반해야 한다.

1)	1차 용기는 뚜껑을 돌려 닫는 것으로 잘 깨지지 않는 재질로 밀폐능이 있어야 한	다.

2)	2차 용기는 1차 용기를 담을 수 있는 크기로 재질 및 특성은 1차 용기와 같다. 내	용물에 대해 표기하고, 2차 용기 표면을 소독하여 실험실 외부로 이동한다.

3)	이동 시, 뛰거나 던지는 등의 위험한 행위는 금한다.

2.5.2	다른기관으로 운반

다른 시험·연구기관으로 감염성물질을 운반하는 경우에는 쉽게 파손되지 않는 1차용기에	넣고, 2차안전수용용기와 3차포장용기로 포장하여 용기가 파손되더라도 유전자변형생물	체가 외부로 유출되지 않도록 하며 용기 또는 포장물 표면의 보이기 쉬운 곳에 "유전자	변형생물체"라는 것을 표시해야 한다.

2.5.3	운반관리대장 작성

시험연구책임자는 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 보관관리를 위하여, 「유전자변형	생물체법 통합고시」 별지 제2-8호서식의 “시험·연구용 등의 유전자변형생물체 운반 관리	대장”을 작성·보관하고, 시험·연구용 등의 유전자변형생물체의 취급·관리를 위한 설비를	적정하게 유지·관리하여야 한다.

2.6	양도

유전자변형생물체는 다른 시험·연구기관에 양도할 수 있다. 유전자변형생물체의 양도자	및 인수자는 각각 유전자변형생물체의 양도에 관한 기록을 작성하여 보관해야 한다.

2.7	안전점검

시험연구책임자 및 시험연구종사자는 실험 활동 시작 전 또는 후 매일 1회 해당 실험실	에 대하여 「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제9-8호 서식의 “시험·연구용 등의 유전	자변형생물체 연구시설 관리·운영대장”에 대한 일상점검을 실시하여야 한다. 단, 시험연구	책임자는 실험실의 특성에 맞게 안전점검 사항을 추가 또는 삭제하여 점검할 수 있다.

2.8	실험종료 후 처리

2.8.1	불활성화 처리 폐기

실험종료 후에는 각 유전자변형생물체에 적합한 방법으로 완전히 불활성화한 후 폐기해	야 한다.

2.8.2	실험종료 후 유전자변형생물체 보존

해당 유전자변형생물체의 보존가치가 높거나 해당 유전자변형생물체를 이용하여 다른 실	험을 수행하고자 하는 경우에는 실험의 종료보고서와 유전자변형생물체의 사용계획, 보	관 장소 및 안전관리 방법에 대하여 OOO기관장에게 신고함으로써 유전자변형생물체를	보존할 수 있다.

3.	고위험병원체의 관리 (해당시)

3.1	고위험병원체 안전관리기준

3.1.1	안전관리사항 준수

고위험병원체 취급기관은 「감염병예방법」 제23조제1항 및 동법 시행규칙 제21조에 의거한 안전관리기준과 다음 각 호의 사항을 준수하여야 한다.

1)	고위험병원체의 검사․연구 등 취급에 대한 위해성평가를 실시하고 해당 안전관리	등급 연구시설을 설치ㆍ운영할 것

2)	고위험병원체의 취급․관리에 필요한 충분한 지식 및 기술을 갖춘 안전관리자 및	책임자를 지정하고 그 책임과 권한을 부여할 것

3)	고위험병원체의 취급 및 보관에 따른 생물안전 및 생물보안을 확보하기 위한 응급	처치, 비상조치 등 안전관리방안을 마련할 것

4)	고위험병원체를 취급․관리하는 자에 대한 안전교육을 실시하고 안전관리기준 및 사	항을 준수하도록 지도할 것

3.1.2	연구시설 설치․운영

고위험병원체 취급기관은 해당 고위험병원체의 위험군, 고위험병원체 또는 검체 등을 이용하는 실험 및 연구에 대한 위해성을 고려하여 적합한 안전관리 등급 연구시설을 확보하고 설치․운영기준을 준수하여야 한다.

3.1.3	고위험병원체의 종류 및 위험군

「고위험병원체 안전관리지침」 별표1 “고위험병원체 종류 및 위험군”을 참조한다.

3.1.4	실험실 안전수칙

고위험병원체와 이를 포함하는 것으로 추정되는 검체 등 물질을 검사하거나 실험하는 경우에는 다음 각 호의 실험실 안전수칙을 준수하여야 한다.

1)	실험을 실시하기에 앞서 필요한 안전작업 요령에 대한 사항을 충분히 숙지할 것

2)	고위험병원체 취급 및 실험은 연구시설 내 지정된 구역에서만 실시할 것

3)	실험실 출입문은 잘 닫아 두며 허가받지 않은 사람이 임의로 실험실에 출입하지	않도록 할 것

4)	실험의 위해수준을 고려하여 적합한 개인보호장구를 착용할 것

5)	고위험병원체, 검체 등 감염성 물질을 취급하거나 위해 가능성이 높은 실험은 생물	안전작업대 등 안전장비 내에서 수행할 것

6)	모든실험 조작은 가능한 에어로졸발생을 최대한 줄일 수 있는 방법으로 실시할 것

7)	피펫팅을 하는 경우 반드시 기계적 피펫을 사용할 것

8)	실험실 내에 음식물 및 음료수 등을 보관하지 말고 음식섭취, 흡연, 화장 행위를	금할 것

9)	고위험병원체를 취급하고 보존하는 장소(예: 실험실, 냉장고, 냉동고 등)에는 [표지]	”생물재해 (Biohazard)"표시를 부착 할 것

10)	실험이 끝난 후에는 실험대를 소독하도록 하며 실험 중 오염이 생겼을 경우 등 필	요 시 즉시 소독할 것

11)	실험종료 후, 실험실을 나올 때 등 필요 시 손을 씻을 것

12)	고위험병원체를 실험하는 자에 대한 정상 혈청을 보관하며 필요 시 추가 혈청을	채취, 보관할 것

3.2	고위험병원체 분리

감염병환자, 식품, 동식물, 그 밖의 환경 등으로부터 고위험병원체를 분리한 경우, 「감염병예방법」 제21조제1항에 따라 “고위험병원체 분리 신고서” (「감염병예방법」 시행규칙 별지 제7호서식)(전자문서로 된 신고서를 포함한다)를 질병관리본부장에게 제출한다.

3.3	고위험병원체 수송

3.3.1	준수사항

고위험병원체 및 관련 검체를 수송할 때에는 다음 각 호의 사항을 준수하여야 한다.

1)	고위험병원체, 검체 등 관련된 감염성 물질은 쉽게 파손되지 않고 밀폐할 수 있는	1차 수송용기 내에 담고 사고 등에 대비하여 내용물이 외부로 유출되지 않도록 3	중 포장할 것

2)	고위험병원체 및 검체의 특성이 보존될 수 있도록 적절한 온도 등 수송조건을 유	지할 것

3)	수송 시 3차 포장용기에 취급 시 주의사항 및 위해 표시를 부착하고, 「고위험병원	체 안전관리지침, 질병관리본부」별지 제6호서식 “고위험병원체 수송내역서”에 발송	자 및 수신자의 기관 및 소속, 성명, 주소, 전화번호, 고위험병원체 수송정보를 기재	하여 첨부할 것.

3.3.2	관련 지침

｢감염병예방법｣로 지정된 고위험병원체는 카테고리 A에 준하며, 고위험병원체 상세한 내용은 「고위험병원체 취급 및 보존 안전관리가이드, 질병관리본부」, 「고위험병원체 안전관리지침, 질병관리본부」에 따른다. [부록 ]“감염성물질 수송”을 참조한다.

3.3.3	이동 신고

고위험병원체 국내 수송의 경우, 고위험병원체를 수령하고자 하는 기관은 사전에 질병관리본부로 “고위험병원체 이동신고서”(「감염병예방법」 시행규칙 별지 제8호서식)를 제출하여 안전한 이동계획을 확인한 후 이동한다.

3.4	고위험병원체 반입허가 및 인수신고

3.4.1	반입 허가

고위험병원체를 국내로 반입하는 경우, 사전(계획단계)에 질병관리본부로 “고위험병원체 반입허가 신청서”(「감염병예방법」시행규칙 별지 제9호서식)를 제출하여 고위험병원체를 취급할 수 있는 연구시설과 사용 목적 등 국내 반입의 안전한 계획이 수립되었는지 확인 받아야 한다.

3.4.2	반입허가 변경

고위험병원체 변경허가를 받으려는 경우, “고위험병원체 변경신청서”(「감염병예방법」 시행규칙 별지 제 11호서식)와 함께 반입허가서 또는 조건부 반입허가서 사본, 변경내용을 증명하는 서류를 제출하여야 한다.

3.4.3	인수 신고

반입 허가받은 기관은 고위험병원체의 인수를 위한 절차를 이행하며, 인수예정일 및 인수장소가 확정되면 인수받을 고위험병원체의 사용·이동계획 등 “고위험병원체 인수신고서” (「감염병예방법」 시행규칙 별지 제 12호서식)를 작성하여 질병관리본부로 제출해야 한다.

3.5	고위험병원체 보존

고위험병원체 취급기관은 ｢감염병예방법｣ 시행규칙 제21조제1항 및 별표 4에 의거하여 다음의 고위험병원체 보존관리사항을 준수하여야 한다.

[별표 4] 고위험병원체 보존관리 방법(제21조제1항제2호 관련)
준 수 사 항	비고
1. 보존 단위용기에 고위험병원체명(Strain명), 관리번호 등 식별번호, 제조일 등 관련 정보를 표기할 것	필수
2. 고위험병원체의 특성 및 성상(性狀)을 유지할 수 있는 방법(동결, 동결건조, 냉장, 실온 등)으로 보존할 것	필수
3. 고위험병원체와 일반병원체를 하나의 보존상자에 혼합하여 보존하지 않으며, 별도의 잠금장치를 부착한 고위험병원체 전용 보존상자에 보존할 것	필수
4. 고위험병원체 보존 장비 및 설비에 보안 잠금장치를 설치할 것	필수
5. 고위험병원체 보존구역의 출입 제한조치를 하고 고위험병원체 전담관리자를 임명할 것	필수
6. 고위험병원체 보존장비의 취급 및 보존구역의 출입을 모니터링 할 수 있는 보안시스템을 운영할 것	필수

1)	바이알, 튜브, 앰플 등 고위험병원체 보존 단위용기에 해당 고위험병원체명(Strain	명), 관리번호 등 식별번호, 제조일, 제조번호 등 관련 정보를 표기하거나 표기된	라벨을 부착할 것

2)	고위험병원체의 특성 및 성상을 유지할 수 있는 방법(동결, 동결건조, 냉장, 실온	등)으로 보존할 것

3)	관리번호별로 보존상자에 일련의 순서대로 보존용기를 넣어 보존하고, 일반 병원체	와 함께 보존하지 않으며, 별도의 잠금장치를 부착한 고위험병원체 전용 보존상자	에 보존할 것

4)	고위험병원체 보존구역내 보존장비에 접근하려는 자를 모니터링할 수 있는 보안시	스템(CCTV 등)을 설치․운영해야 하며, 이 때 보안시스템은 유사시 보존장비 취급	및 보존구역 출입여부를 확인할 수 있도록 녹화와 저장기능이 있는 것을 권고함

5)	장기간(1년 이상) 사용계획이 없는 보존용 고위험병원체를 보관할 경우 질병관리본	부에 봉인을 요청할 수 있고, 질병관리본부와 협의 및 봉인시 질병관리본부 직원의	입회하에 적절한 시건장치 또는 봉인지 등을 이용하여 고위험병원체 전용 보존장	비를 봉인하며, 사용계획 발생시 봉인 해제를 요청할 수 있음

3.6	고위험병원체 보존현황 신고

OOO기관의 장은 ｢감염병예방법｣ 시행규칙 제21조제2항에 의거하여 매년 1월 31일까지 “고위험병원체 보존현황신고서”(｢감염병예방법｣ 시행규칙 별지 제15호)(전자문서로된 신고서를 포함한다)를 질병관리본부장에게 제출하여야 한다.

3.7	고위험병원체 폐기

고위험병원체와 고위험병원체가 포함되는 검체 등 감염성 물질을 폐기하는 경우 고위험병원체 특성 및 보존형태 등을 고려하여 고압증기멸균 등 적합한 방법으로 사멸시킨 후 「폐기물관리법」에 의거하여 처리하여야 한다.

3.8	고위험병원체 기록관리

3.8.1	고위험병원체 관리대장

OOO기관은 보존 중인 고위험병원체의 분리, 이동, 폐기 등 현황을 기록하기 위하여 ｢감	염병예방법｣ 시행규칙 제21조제1항제3호에 의거한 “고위험병원체 관리대장’(｢감염병예방	법｣ 시행규칙 별지제14호)을 작성하고 보관한다. 고위험병원체의 전부폐기 또는 타 기관	이동 등으로 해당 고위험병원체를 보존하지 않는 경우에는 ”고위험병원체 관리대장“에	그 내용을 기록하고 질병관리본부장에게 통지하여야 한다. 이때 ”고위험병원체 관리대장“	은 5년간 보관하여야 한다.

3.8.2	고위험병원체 사용내역대장

OOO기관은 보존하고 있는 고위험병원체별 유래 및 특성, 사용 및 용도, 보존수량 등 정	보는 “고위험병원체 사용내역대장”(｢감염병예방법｣ 시행규칙 별지 제7호서식)에 따라 기	록하고 보관한다. OOO기관은 고위험병원체 기록관리 사항을 보안관리한다.

4.	생물작용제 및 독소의 관리 (해당시)

4.1	생물작용제 및 독소의 관리기준

4.1.1	생물작용제

구분	인체ㆍ인수 병원균
바이러스	가. 크리미안-콩고 출혈열 바이러스 (Crimean-Congo haemorrhagic fever virus) 나. 동부 마 뇌염 바이러스(Eastern equine encephalitis virus) 다. 에볼라 바이러스(Ebola virus) 라. 라사열 바이러스(Lassa fever virus) 마. 마버그 바이러스(Marburg virus) 바. 원숭이 폭스 바이러스(Monkey pox virus) 사. 리프트계곡열 바이러스(Rift Valley fever virus) 아. 참진드기 매개뇌염 바이러스(Tick-borne encephalitis virus(Russian Spring-Summer encephalitis, Kyasanur Forest, Omsk Hemorrhagic Fever)) 자. 두창 바이러스(Variola virus) 차. 베네수엘라 마 뇌염 바이러스(Venezuelan equine encephalitis virus) 카. 헨드라 바이러스[Hendra virus(Equine morbillivirus)] 타. 남아메리카 출혈열 바이러스[South American haemorrhagic fever(Sabia, Flexal, Guanarito, Junin, Machupo)] 파. 니파 바이러스(Nipah virus) 하. 중증급성호흡기증후군 코로나 바이러스 거. 조류인플루엔자 인체감염증 바이러스 너. 우해면양 뇌병증 병원체(Bovine Spongiform encephalophathy agent)
미생물	가. 탄저균(Bacillus anthracis) 나. 양 브루셀라균(Brucella melitensis) 다. 보툴리눔균(Clostridium botulinum) 라. 야토균(Francisella tularensis) 마. 비저균(Burkholderia mallei) 바. 콜레라균(Vibrio cholerae) 사. 페스트균(Yersinia pestis) 아. 멜리오이도시스균(Burkholderia pseudomallei) 자. 큐열균(Coxiella burnetii) 차. 발진티푸스균(Rickettsia prowazekii) 카. 홍반열 리케치아균(Rickettsia rickettsii)

"생물작용제"란 자연적으로 존재하거나 유전자를 변형하여 만들어져 인간이나 동식물에 사망, 고사(枯死), 질병, 일시적 무능화나 영구적 상해를 일으키는 미생물 또는 바이러스로서 「생화학무기법」 시행령으로 정하는 물질을 말한다.

4.1.2	독소

"독소"란 생물체가 만드는 물질 중 인간이나 동식물에 사망, 고사, 질병, 일시적 무능화나 영구적 상해를 일으키는 것으로서 「생화학무기법」 시행령으로 정하는 물질을 말한다.

1. 보툴리눔 독소(Botulinum toxins)

2. 웰치균 독소(Clostridium perfringens epsilon toxins)

3. 코노 독소(Conotoxin)

4. 시가 독소(Shiga toxin)

5. 포도상구균 장 독소(Staphylococcus aureus toxins)

6. 복어독(Tetrodotoxin)

7. 베로톡신(Verotoxin)

8. 마이크로시스틴(시안지노신)[Microcystin(Cyanginosin)]

9. 아플라톡신(Aflatoxins)

10. 아브린(Abrin)

11. Diacetoxyscirpenol toxin

12. T-2 toxin

13. 볼켄신 독소(Volkensin toxin)

4.1.3	생물작용제등(생물작용제 또는 독소)의 보유량 신고

1)	「생화학무기법」 법률 제13조의2제1항에 따라 생물작용제등을 보유하는 경우는 보유	한 날부터 30일 안에 보유량, 보유경위, 보유기간 등을 산업통상자원부령으로 정하는	바에 따라 산업통상자원부장관에게 신고하여야 한다. 다만, 「생화학무기법」 시행령	별표 4에서 정하는 일정량 미만의 독소의 경우에는 그러하지 아니하다.

[별표 4] 신고가 면제되는 일정량 미만의 독소

1. 0.5밀리그램 미만의 보툴리눔 독소(Botulinum toxins)

2. 100밀리그램 미만의 웰치균 독소(Clostridium perfringens epsilon toxins)

3. 100밀리그램 미만의 코노 독소(Conotoxin)

4. 100밀리그램 미만의 시가 독소(Shiga toxin)

5. 100밀리그램 미만의 포도상구균 장 독소(Staphylococcus aureus toxins)

6. 100밀리그램 미만의 복어독(Tetrodotoxin)

7. 100밀리그램 미만의 베로톡신(Verotoxin)

8. 100밀리그램 미만의 마이크로시스틴(시안지노신)[Microcystin(Cyanginosin)]

9. 100밀리그램 미만의 아플라톡신(Aflatoxins)

10. 100밀리그램 미만의 아브린(Abrin)

11. 1천밀리그램 미만의 Diacetoxyscirpenol toxin

12. 1천밀리그램 미만의 T-2 toxin

13. 100밀리그램 미만의 볼켄신 독소(Volkensin toxin)

2)	생물작용제등을 보유하고, 「감염병의 예방 및 관리에 관한 법률」 제23조제3항에 따	라 고위험병원체의 보존 현황을 질병관리본부장에게 제출한 경우는 4.1.3의 1)항에	따른 신고를 한 것으로 본다.

3)	4.1.3의 1)항에 따른 보유신고를 한 경우, 매년 2월말일까지 생물작용제등의 보유 현	황을 「생화학무기법」 시행규칙 별지 제19호서식의 “생물작용제등의 보유신고서”(전	자문서로 된 신고서를 포함한다)에 다음 각 호의 서류(전자문서를 포함한다)를 첨부	하여 산업통상자원부장관에게 제출하여야 한다.

①	보유 경위를 증명할 수 있는 서류

②	보유량의 증가 또는 감소 가능성을 증명할 수 있는 서류

4.1.4	생물작용제 등의 보관

생물작용제 등의 보존 장비 및 설비에 시건장치와 같은 보안 잠금장치를 설치한다.

4.2	생물작용제 등의 검사

4.2.1	정기검사

생물작용제 또는 독소를 제조나 보유를 한 경우, 산업통상자원부장관은 2년마다 정기검사를 한다.

4.2.2	정기검사

산업통상자원부장관은 다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 경우에는 「생화학무기법」법률 제18조의2제1항에 따른 수시검사를 할 수 있다.

1)	생물작용제등의 유출 또는 오염 등의 사고가 발생한 경우

2)	생물작용제등의 취급시설의 노후 또는 파손 등으로 사고가 발생할 우려가 높은 경우

3)	생물작용제등의 보안을 유지하기 위한 보안시설 등이 정상적으로 기능하기 어렵다	고 인정되는 경우

4)	그 밖에 생물작용제등의 안전관리를 위하여 필요하다고 인정되는 경우

4.3	생물작용제 등의 기록관리

4.3.1	생물작용제 등에 대한 「생화학무기법」법률 제21조제1항제3호에 따라서 다음 각 호의 사항의 장비를 비치한다.

1)	생물작용제등의 월별 제조량 및 보유량

2)	생물작용제등의 제조를 위하여 사용된 주요 원료물질의 월별 사용량

3)	생물작용제등의 월별 국내 인도량·인수량 및 인도자·인수자명

4)	생물작용제등의 월별·국가별 수출입량

4.3.2	시험연구종사자는 [서식  ]“생물작용제 등의 관리장부”를 작성한다.

4.3.3	기록보존 기한

「생화학무기법」법률 제21조제2항에 따라 다음 각 호의 자료는 5년간 보존하여야 한다.

5.	건강프로그램 (권장)

5.1	연구자 혈청 보관

5.1.1	정상혈청 채취

시험연구책임자는 시험연구종사자가 연구시설 최초 출입 전 정상혈청을 채취할 수 있도	록 하여야 하며, 정상혈청 보관 및 기록은 생물안전관리부서에서 수행한다.

5.1.2	혈청관리대장

생물안전관리부서에서 [서식  ]“혈청관리대장”을 작성하여 관리한다.

5.2	백신 접종

연구시설 내에서 취급하는 병원체에 대하여 예방용 백신이 상용화되어있는 경우, 시험연	구책임자는 시험연구종사자에 대한 백신접종이 이루어 질 수 있도록 조치하여야 한다.

5.3	건강 검진

OOO기관장은 시험·연구종사자 등의 건강관리를 위하여 다음 각 호의 사항을 실시한다.

1)	정기적인 건강검진

2)	실험실 내에 감염사고 우려가 있는 경우 즉시 건강검진 및 적절한 사전·사	후조치

3)	시험·연구종사자가 다음 각 목의 어느 하나에 해당할 때 즉시 조사 및 필요한 조치

①	유전자변형생물체를 실수로 마시거나 흡입한 때

②	유전자변형생물체에 의하여 피부가 오염된 때

③	유전자변형생물체의 유출 등에 의하여 연구시설이 현저하게 오염된 경우 그	장소에 있었을 때

3)	시험연구종사자의 병원체 노출(병원체 흡입, 피부노출, 연구시설의 오염등)에 따른 건	강보호 조치

6.	생물안전교육

시험연구책임자 및 기관생물안전관리책임자는 시험·연구종사자들로 하여금 취급하는 미생물 등의 감염 시 증세와 병원성에 대해 충분히 숙지하도록 하고 무균 조작 기술, 소독 및 멸균법, 적합한 개인보호구의 선택과 사용법 등 기본적인 생물안전 준수사항을 교육해야 한다. 특히 생물안전 3등급 이상의 특수연구시설 출입자에 대하여는 별도의 생물안전 3등급 시설 운영규정 및 근무 시 필요한 준수사항을 추가적으로 교육하고 이행하도록 한다.

[연구시설 등급에 따른 생물안전 관계자의 교육요건]

연구시설 대상 및 조건		생물안전 2등급	생물안전 3등급 이상
지정요건 (사전 교육)	생물안전관리책임자 및 생물안전관리자	8시간 이상	20시간 이상
	전문위탁기관의 생물안전관리자	해당사항 없음	20시간 이상
	전문위탁기관의 유지보수 관계자	해당사항 없음	연구시설 운영교육 12시간 이상 (생물안전분야 4시간 이상)
운영요건 (연간 교육)	생물안전관리책임자및 생물안전관리자	4시간 이상	전문기관 운영교육 4시간 이상
	전문위탁기관의 생물안전관리자	해당사항 없음	8시간 이상 (연 2회 이상)
	연구시설 사용자	2시간 이상	전문기관 운영교육 2시간 이상

6.1	「유전자변형생물체법 통합고시」 지정교육

OOO기관의 장은 생물안전관리책임자 및 생물안전관리자에게 년 4시간 이상 생물안전관	리에 관한 교육·훈련을 받도록 하여야 하며, 연구시설 사용자에게 년 2시간 이상 생물안	전교육을 받도록 하여야 한다. 다만, 허가시설의 경우에는 해당 중앙행정기관 또는 「유전	자변형생물체법 통합고시」 제2-14조에 따른 안전관리전문기관에서 운영하는 교육을 이	수하여야 한다.

6.2	OOO기관 생물안전교육

OOO기관 생물안전교육은 시험연구종사자가 반드시 이수해야 하는 기본적인 교육으로	시험연구종사자를 대상으로 기관생물안전관리자 또는 시험연구책임자가 수행한다. 각 연	구실	별로 취급하고 있는 특정 병원체 및 미생물, 독소의 안전한 사용 및 관리를 위한	방법과	위해성 평가를 토대로 실험수행 시 요구되는 실험장비, 개인보호구 등의 사용법	등 실험	실 생물안전의 운영 및 관리를 위해 필요한 사항 등을 중심으로 교육하며, 기관	생물안전위원회의 지시사항 등을 전달 및 교육한다.

「유전자재조합실험지침」 및 「유전자변형생물체법 통합고시」에 근거하여 기관 내에서 시	험연구종사자의 건강 및 안전한 연구 환경 조성을 보호하기 위해 생물안전교육을 실시하	여야 한다. 생물안전교육은 연구시설의 생물안전등급에 따라, 생물안전 관계자는 법률과	규정이 정하는 수준의 생물안전 교육을 반드시 이수하여야 한다.

6.2.1	신규 연구자 교육

신규 연구자를 대상으로 실험실 생물안전에 대한 사항들을 교육한다. 기관생물안전관리	책임자 혹은 시험연구책임자 등에 의하여 교육이 진행될 수 있으며, 관계중앙행정기관이	지정하는 전문교육기관에 의한 온라인 및 오프라인 교육을 수강하여 대체할 수 있다.

1)	생물위해표지 사인과 라벨

2)	연구시설 출입 절차 (연구자, 시료, 장비 등)

3)	개인보호장비 착용 및 탈의 절차

4)	생물안전작업대 사용 방법

5)	고압증기멸균기 사용 방법

6)	패스박스/패스룸 사용 방법

7)	공용장비 사용 방법

8)	폐기물 처리 방법

9)	생물안전 사고 인지 및 사고 처리 절차

6.2.2	연구자 보수 정기 교육

기관의 전체 시험연구종사자를 대상으로 실시하며 생물안전에 관한 사항을 주제별, 세부	사항별로 교육하며 기관 내 시험연구종사자는 년 2시간의 교육을 반드시 이수해야 한다.

1)	생물체의 위험군에 따른 안전한 취급기술

2)	물리적 밀폐 및 생물학적 밀폐에 관한 사항

3)	해당 유전자재조합실험의 위해성 평가에 관한 사항

4)	생물안전사고 발생 시 비상조치에 관한 사항

6.2.3	유지보수관계자 교육

OOO기관장은 유지보수관계자를 대상으로 생물안전에 관한 사항을 신규자 및 보수자별	로 교육하며, 유지보수관계자는 OOO기관에서 실시하는 생물안전교육을 반드시 이수해야	한다.

6.2.4	교육이수 기록관리

OOO기관장은 OOO기관 생물안전교육을 이수한 자에게 [서식 ]“연구시설 안전 교육이수	증”을 교부한다.

6.3	기타 실험실 안전교육

OOO기관장은 OOO기관에서 정한 기타 실험실 안전교육을 실시한다.

7.	생물보안

7.1	생물보안 개요

생물안전은 실험실 사고에 의한 병원체의 유출과 실험 과정 중 병원체에 대한 비의도적	노출을 방지하려는 행위로써 실험기술과 밀폐의 원칙에 따라 활용되어 왔으나 생물보안	은 실험실과 실험 관련자들에 관한 내용 중 병원체의 분실, 탈취, 잘못된 사용 등 의도적	행위를 방지하는 목적으로 만들어진 개념으로 넓은 의미에서 생물안전에 포함된다.

따라서 생물보안을 위해서는 효과적인 생물안전 시스템 확보가요구되며 기관의 생물안전	프로그램, 병원체 보관 및 실험 장소, 실험자 정보 등을 이용하여 실제적인 생물보안 체	계를 마련할 수 있다. 이런 정보와 체계 확립을 통해 기관이 보유하고 있는 병원체의 접	근 및 안전한 사용, 책임 한계를 명확히 함으로서 부적절한 사용 및 관리를 사전에 예방	할 수 있다.

필요한 경우 별도의 생물보안 관리지침을 작성, 운영할 수 있으며 이때 지침에는 각 주	요 실험실 또는 병원체 보관 시설의 주요 사항, 위치, 접근 자격 및 관리체계, 비상조치	등을 포함하여 작성하도록 한다.

실제적으로 생물보안 체계는 해당 기관의 다양한 요구를 반영하도록 하여야 하며 시험연	구책임자, 기관생물안전관리(책임)자, 시험연구종사자, OOO기관장은 각자의 역할을 정하	여야 한다.

7.2	연구자 보안유지

OOO기관 연구시설내에서 취득한 기밀사항에 대하여는 보안을 유지하고 외부에 누설하	여서는 아니된다.

7.2.1	OOO기관 연구시설 내에서의 연구자 보안

1)	모든 연구자는 생물보안 책임자를 인지하고 있어야 한다.

2)	모든 연구자는 신원을 확인할 수 있는 신분증을 착용해야한다. 신분증에는 최소한	사진, 이름 등을 포함해야 한다. 필요시 신분증 색을 달리하여 제한된 지역에 출입	자를 표시하거나 쉽게 알아볼 수 있도록 표기할 수 있다.

3)	방문자는 발행된 신분증을 착용하고 신분증을 착용한 관련자의 인솔 하에 출입하	여야 한다.

4)	생물안전관리부서는 연구시설 출입허가자에 대하여 분기별로 카드 분실 유무 및 연	구자에 대한 안전 유무를 연구시설 사용부서로부터 전자문서(또는 메모)로서 확인한	다.

7.2.2	OOO기관연구시설 외에서의 연구자 보안

연구자는 연구시설 출입허가에 대한 사항을 기밀로 하며, 기타 외부인이 연구시설 출입에	관한 사항 문의 시, 시험연구책임자 또는 생물안전관리부서에게 이를 알려 연구시설 보	안을 유지한다.

7.3	보안구역의 지정 및 당직관리 (해당시)

OOO기관 보안업무규정 및 관계규정에 따라 보호구역 즉 "제한구역"을 설정할 수 있으	며 특별히 관리하여야 한다. 당직관리는 OOO기관 당직근무 규정 등에 따라야 한다.

7.3.1	출입허가자 관리

1)	연구시설 내․외부 출입지역은 보안출입카드를 받은 허가된 자만 출입할 수 있다.

2)	연구시설 출입허가 관리는 “제  장 연구시설 운영관리”의 절차를 따른다.

7.3.2	출입보안카드 등록 관리

1)	생물안전관리부서는 출입승인이 허가된 연구자에 한하여 출입보안카드를 배부한다.

2)	시험연구책임자 또는 해당 부서장은 출입승인 허가된 연구자의 퇴직 또는 업무변경	등의 경우에는 출입보안카드를 공문과 함께 생물안전관리부서로 반납한다.

7.4	실험실 생물보안 기본사항

실험실 생물보안은 다음과 같은 기본적인 사항이 포함되도록 한다.

1)	생물보안 대상 구역 지정 : 병원체 보관 목록 및 장소 등

2)	접근이 허락된 관련자 인적 사항

3)	병원체 사용 절차에 관한 사항

4)	OOO기관 내, 외부로의 병원체 이동에 관한 사항

5)	병원체의 증식 또는 폐기에 관한 사항

6)	생물보안사고에 따른 조사 및 보고에 관한 사항

7)	기타 실험실 생물보안에 관련된 사항

7.5	연구 데이터 및 병원체 정보 보안 관리

1)	연구시설 내 취급병원체 취급 등에 대한 정보는 OOO기관장의 승인이 있을 경우에	만 외부 공유가 가능하다.

2)	연구시설 내로 휴대용 “컴퓨터”, “저장매체”, “카메라”, “핸드폰” 등 의 반입은 금지	된다.

3)	연구시설 내 연구 데이터는 내부인트라망을 통하여 해당부서로 전송하여 부서 내	에서 확인한다.

7.6	보안위반 시 조치 (해당시)

병원체 안전한 관리 및 생물보안 필요성에 대하여 OOO기관 내 종사자들에게 교육하도	록 하며, 생물보안업무 수행 과정 중 생물보안의 위반 내용이 발생하였을 때 취할 조치	에 대하여서도 명확히 정해야 한다.

생물보안을 위해 관련자들은 다음사항을 명확히 인식하고 이에 대한 관리를 철저히 한	다.

7.6.1	실험실 보안 평가 및 관리

1)	주어진 시설이나 실험실에 대한 평가와 보안 개선 방안을 모색한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 적절한 관리 정책을 수립하고 검토하여야 한다. 기관생	물안전관리책임자는 모든 연구자와 방문객이 보안 시스템을 이해하고, 정해진 방법	을 숙지하고 준수토록 해야 한다.

7.6.2	생물학적 위해 요소, 물질 사용 및 보관 장소의 접근 통제

1)	실험실과 동물 취급 지역이 위치한 건물은 공공장소와 분리되어야 한다.

2)	관련 실험실과 동물 취급 지역은 항상 잠겨있어야 한다.

3)	관련 지역의 출입에는 카드-열쇠 등 보안 관련 장치들을 설치한다.

4)	통제구역 같은 주요 장소의 출입자에 대한 자료를 기록하도록 한다.

5)	시험연구종사자는 정해진 실험실 및 시간 동안 업무를 수행하도록 한다.

6)	학생, 방문자 등의 출입은 근무 시간 중 정해진 시간에 제한적으로 이루어지도록	한다.

7)	청소, 유지, 보수는 OOO기관 직원이 상주하는 정해진 시간에 이루어지도록 한다.

8)	생물학적 위해 요인이나 위험한 화학물질, 방사성 물질 등이 보관되어 있는 냉동·	냉장고 및 기타 보관용기는 시건 장치 후 안전한 장소에 보관한다.

7.7	시설보안 기타 (해당시)

1)	보호구역(통제구역)으로 설정된 연구시설 전 구역에서의 사진 촬영은 금지한다.

2)	연구시설 내 통제실을 두고, 방재담당자를 24시간 배치(해당시)하여 연구시설 전체의	방호상태를 CCTV를 통하여 모니터링 한다.

[Prototype ABL2] 제  장  시설안전관리

1.	목적 및 적용범위

1.1	목적

※“시설안전관리”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

OOO기관 생물안전 연구시설의 유지보수에 대한 기본적인 사항을 정함으로써 OOO기관 시설관리관계자, 시험연구종사자 또는 유지보수 관계자 등이 지침에 따라 주어진 업무를 수행하게 하여 해당 연구시설에서 일어날 수 있는 사고를 미연에 방지하며, 또한 예기치 못한 상황 발생시에 적절히 대처할 수 있도록 한다.

OOO기관 생물안전 연구시설의 장비, 설비, 밀폐구조 등에 대하여 유지보수 관계자가 정기적인 관리를 통해 시설을 안정적으로 운영할 수 있도록 한다. 그리고 이에 따른 최적의 실험실환경을 조성하고 시험연구종사자의 안전을 확보하기 위한 모든 활동을 문서화함으로써 시설안전 운영과 관리의 신뢰성을 확보한다.

1.2	적용범위

본 지침은 OOO기관 생물안전연구시설의 시설안전관리에 대하여 적용한다. 생물안전 연구시설의 안전한 운영을 위한 설비 및 시설과 고압증기 멸균기, 생물안전작업대(BSC), 패스박스 등과 같은 주요 장비 부분에 대한 유지보수를 통한 안전한 운영을 의미하며 시설을 이용하는 시험연구종사자의 안전관리는 적용되지 않는다.

1.3	기준 (해당시)

생물안전 연구시설의 안전하고 전문적인 유지보수를 위해 연구절차, 장비, 시설의 안전한 설계에 대한 특이사항을 종합적으로 고려하여 다음과 같은 원칙으로 진행한다.

1)	시설에서 실험하는 시험연구종사자 및 유지보수 관계자의 안전을 최우선으로 확보

2)	최대 위험구역은 최대 음압을 유지하며 다른 구역과 일정한 음압차를 유지하여 병	원체가 외부로 방출 방지

3)	실험실은 최소실간차압(예: -10 Pa)을 유지

4)	전외기 도입 및 전배기 공조방식으로 밀폐구역 내부의 공기가 재순환 방지

5)	실험실에서 다루어지는 병원체가 외부로 방출 또는 노출되지 않도록 실험실에서	배출되는 폐기물은 안전한 멸균시스템을 통하여 처리

6)	유지보수 및 관리 업무를 수행하는 유지보수 관계자는 시설 뿐 아니라 장비에 대	한 전문지식을 습득하여 비상시에 적극적으로 대처

7)	밀폐구역 내부에는 누기가 없도록 설치･운영

8)	유지보수 관계자는 정기적인 생물안전 교육을 받아 실제 업무에 적용

9)	유지보수 관계자는 해당 시설에서 다루어지는 병원체의 위험성을 충분히 인식하여	감염되지 않도록 스스로 보호

10)	유지보수 관계자는 본인의 건강관리를 소홀히 하여서는 안 되며 면역력이 떨어진	사람은 해당 업무의 수행 금지

1.4	연구시설안전관리 업무의 위탁 (해당시)

OOO기관장은 시설의 안전관리를 관련 전문기관에 위탁하여 관리할 수 있다.

2.	연구시설 점검분류 및 기록관리

2.1	일상점검

일상 점검에 해당되고 점검 사항은 다음과 같으며, OOO기관 시설관리관계자(또는 유지보수 전문위탁기관)에서 2회/일 이상 점검 후 일지를 작성한다.

1)	생물안전 연구시설 내 생물안전 점검

2)	생물안전 연구시설 온습도, 차압, 밀폐 정상작동 유무 등 점검

2.2	정기점검

1)	일 또는 주 단위로 시설 및 장비에 대한 점검을 실시하며 점검주기는 기관생물	안전관	리책임자의 지시에 따른다. 다만, 최소 월 1회는 반드시 점검을 실시하고 그 기록을 남	긴다.

2)	기록에는 최소한 점검 형태, 점검일, 점검자, 조치사항, 사용 자재, 점검인원, 점검 내	용, 점검 결과 등이 수록되어야 하며 내용 및 범위는 기관생물안전관리책임자의 지시	에 따른다.

3)	정기점검 내용은 기록하여 OOO기관에 보고하고 그 기록을 정기점검보고서에 첨부하	여야 한다.

2.3	빌트인 장비 기본 관리

빌트인장비는 유지보수 전문위탁기관(또는 빌트인장비 용역업체)가 수시/정기적으로 점검하며, 해당 장비별 “장비관리이력기록철”을 작성하여 관리한다.	(예시)

정기 점검항목	비정기 점검항목
- AHU, EFU, 실외기, 기타설비(고압증기 멸균기, BSC, Pass-box, Clean locker, Air lock booth, 차압계, 급수장치, 약품 및 폐수Tank 등) - 실험실 환경검사 및 자동제어 판넬 등 과업지시서 유지관리 대상시설 - 사용자요구 등에 따라 제시된 항목	- 정기 점검 대상 기기 이상 발생 - 사용자요구에 따른 수시 점검
- 프리, 미디움, 헤파 필터 등 소모품 교체	- 가습기, 냉동기, Heater 등 계절 변화 시 가동되는 기기
- 훈증 및 소독 Cleaning, TAB, Validation	- 사용자요구에 따른 점검
- 기타 사용자요구에 따른 추가 사항	- Water Filter 등 비정기적인 오염이 발생되는 기기 등

2.4	연구시설 관리 운영 기록 유지 (해당시)

유지보수 전문위탁기관은 기관생물안전관리책임자에게 현장 점검을 수시 및 정기적으로 보고한다. 기관생물안전책임관리자는 현장 점검에 따른 결과를 OOO기관장에게 수시로 보고하여, 생물안전 연구시설의 안전한 운영을 위한 지속적인 개선을 수행한다.

2.4.1	월간점검보고

유지보수 전문위탁기관은 점검 기록을 바탕으로 1개월 간 유지보수 활동 내용을 모두 기재하여야 하며, 1개월간의 점검 결과를 요약 보고, 일탈보고와 함께 장비별 현 상태를 명확히 기재하여야 한다. 기관생물안전관리책임자의 요구 및 상황에 따라 사진을 첨부하도록 한다.

2.4.2	종합평가보고

유지보수 전문위탁기관은 월간 점검 보고서 바탕으로 1년간 유지보수 활동 결과에 대한 요약보고서를 제출하여야 한다. 종합평가보고서에는 장비의 일탈보고서(일탈해소 결과부분 포함)와 소모품 교체내역이 포함되어 있어야 한다. 헤파 필터 등 시설의 검증이 필요한 사항이 있을 경우도 이를 포함하여 보고서를 작성해야 한다. 특이사항이 발생할 경우, 기관생물안전관리책임자에게 그 내용을 설명하고 향후 조치 계획을 수립한다.

2.4.3	기록유지

생물안전 연구시설의 안전관리에 대한 운영기록은 「유전자변형생물체법」 법률 제 26조 및 시행규칙 15조에 따라 반드시 작성해야 하며 그 기록은 5년간 보관해야 한다.

※	주요 기록 사항 : 잠금장치 상태, 차압, 온도, 습도, 폐수처리시설 작동상태, 점검시	간 및 점검자와 확인자

3.	시설안전관리 수행 위탁기관 조건 (해당시)

3.1	시설 유지보수 용역 목적

1)	생물안전 연구시설에 대해 지속적인 운영․관리를 함으로써 유전자변형생물체, 고위험	병원체 연구 등에 적합한 연구시설을 유지

2)	생물안전 연구시설의 운영관리를 실시하여 시설 및 장비의 점검과 소모품 교체, 검증	등 통상적인 시설운영에 필요한 사항을 시행

3)	생물안전 연구시설 및 장비의 오작동시 신속한 조치를 가능하게 하여 시험연구종사	자의 안전, 외부 환경 보호, 생물안전 및 보안유지에 철저를 기하고자 함

4)	유지관리 일지 및 보고서는 생물안전 연구시설의 객관적인 자료로 축적하여, 사고 및	비상시에 빠르고 적합한 조치가 가능하도록 활용하며, 추후 시설 보완 등 더 나은 유	지관리를 위한 자료로 활용

3.2	유지보수 전문위탁기관용역업체 자격

해당기관의 자격조건 기입

3.3	유지보수 인력 자격

해당기관의 자격조건 기입

3.4	유지보수 장비 현황

해당기관의 조건 기입

3.5	시설안전관리 수행 위탁기관 평가 및 관리

해당기관의 기준 기입

3.6	시설안전관리 수행 위탁기관 업무범위

해당기관의 자격조건 기입

3.7	용역인원 주요 업무내용 (상주근무 경우)

해당기관의 업무내용 기입

4.	시설안전관리 대상

4.1	폐기물/폐수처리시설 (사체처리기, 폐수소독설비, EDS 등) (해당시)

1)	생물안전 연구시설에서 발생하는 폐수를 안전하게 처리하는데 그 목적이 있다.

2)	폐수처리 SOP에는 점검 방법, 폐수처리 방법 등의 내용이 수록되어야 한다.

4.2	고압가스시설 (해당시)

1)	고압가스용기는 연구시설 내에 보관을 금하며, 고압가스용기의 보관함은 가스 누출에	의한 화재 및 폭발 방지조치가 이루어지고 정기적으로 가스누출경보기, 가스누출 감	지기 등의 안전장치의 작동여부를 점검해야 한다.

2)	고압가스용기는 전도방지 설치가 되어야 하고, 공동체결은 금한다. 또한 가연성가스	와 조연성가스는 격리보관하고 내용물에 대한 표지(MSDS, 점검표 등)를 부착한다.

3)	미사용 가스의 보관 시 안전캡을 사용하고, 충전기한이 경과한 가스용기 사용여부를	점검한다.

4)	가스용기는 직사광선 및 고온에 노출되지 않도록 보관하고, 가스배관 명칭 및 흐름	방향 표시를 한다.

4.3	훈증소독 (해당시)

1)	생물안전 연구시설 훈증 방법과 확인절차를 규정하고, 시험연구종사자와 유지보수(검	증)관계자를 보호하는데 그 목적이 있다.

2)	훈증소독 SOP에는 훈증의 시기, 훈증의 종류, 훈증의 특징, 훈증 방법, 유의사항, 검	증 및 평가 등의 내용이 수록되어 있어야 한다.

3)	훈증소독을 할 경우에는 소독 대상체에 효과적이고 해당 기관이 원하는 방법으로 훈	증소독 하여야 하며, 훈증소독과 병행하여 이에 대한 검증이 이루어져야 한다.

4)	훈증결과가 불합격 판정이 날 경우, 완전히 훈증이 될 때까지 지속적으로 실시하고	훈증 결과는 기록하여 문서로 최소 5년 이상 보존하여야 하며, 발주처에서 요청 시	즉시 제출하여야 한다.

5)	밀폐구역에 여러 개의 실험실이 있을 경우 각 실험실에 BI (Biological Indicator)를	위치시켜 훈증이 잘되었는지 확인하여야 한다.

4.4	차압조절 (해당시)

1)	실험실의 각 실간차압 및 생물안전작업대, 아이솔레이터, 공조기 등 설비에 부착된	차압계의 작동 이상 유무를 검증하여 차압계의 적합성을 보증하는데 그	목적이 있	다.

2)	TAB SOP에는 차압계의 종류, 차압계의 설치장소 및 설치방법, 차압계의 점검 방법,	차압계 검･교정주기 등의 내용이 수록 되어 있어야 한다.

4.5	자동제어 (해당시)

1)	생물안전 연구시설 및 각종 장비 센서 및 자동제어 연동상태 이상 유무를 확인하여	점검 및 예방함으로써 실험 활동에 차질이 없도록 하는데 그 목적이 있다.

2)	자동제어 SOP에는 운전방법, 점검방법, 고장원인 대처방법 등이 수록되어 있어야 한	다.

3)	자동제어 프로그램에 의해 동작되는 모든 장비에 대하여 프로그램 명령과 장비의 동	작이 일치하는지 확인하기위해 프로그램 동작 확인이 최소 매월 점검되어야 하며 점	검결과를 보고서를 작성하여야 한다.

4)	자동제어 상 실시간으로 결과 값을 확인할 수 있어야 한다(측정간격은 1초 이하).

4.6	배관설비 (해당시)

1)	배관의 효율적인 관리를 통하여 배관의 수명을 연장하고 유체 및 기체를 필요한 장	소로 안전하게 공급할 수 있도록 점검 및 예방함으로써 실험수행에 차질이 없도록	하는데 그 목적이 있다.

2)	배관설비 SOP에는 배관의 용도별 분류, 점검 및 대처방법 등의 내용이 수록되어 있	어야 한다.

3)	취기방지용 트랩의 봉수는 실내의 과도한 음압 및 높은 환기횟수로 인하여 쉽게 건	조될 수 있으므로 주기적으로 배수 및 확인해야 한다.

취기방지용 트랩 배치

[ OOO 생물안전 연구시설 취기방지용 트랩 배치도 ]

4.7	공조설비 (해당시)

1)	공기조화기를 보다 효율적으로 관리하여 각 실험실의 적정 온도, 습도, 압력을 유지	하는데 그 목적이 있다.

2)	공조 설비 SOP에는 공조기의 구조, 공조기의 공기 흐름도, 운전방법, 점검방법, 고장	원인 및 대책 등의 내용이 수록되어 있어야 한다.

3)	공조 설비의 온 습도는 비례제어가 될 수 있어야 한다.

4.8	전기설비 (해당시)

1)	생물안전 연구시설에서 사용되는 전원 공급용 배전반(panelboard)을 효율적으로 관리	하여 각 실험실에 전원을 안전하게 공급해 주고 사용자의 안전을 확보하는데 그 목	적이 있다.

2)	전기설비 SOP에는 점검방법, 점검항목, 고장발생 시 유의사항 등의 내용이 수록되어	있어야 한다.

3)	배전반에는 정확한 정보가 기술되어 있어야 한다.

4.9	비상전원 공급장치 (해당시)

1)	생물안전 연구시설에 설치된 무정전 전원 공급 장치(UPS : Uninterruptible Power Su	pply) 등 정전을 대비한 장치에는 유지 및 관리사항이 명시되어 있어야 한다. 이는	정전 시에도 중요 설비 및 장비에 안정된 전력을 공급하여 궁극적으로는 시험연구종	사자의 안전을 확보하는데 그 목적이 있다.

2)	비상전원 공급장치 SOP에는 운전 절차, 운전 및 보수 시 유의사항, 점검방법 등이	수록되어 있어야 한다. 또한 비상발전기를 가지고 있는 경우에는 ATS(Automatic Tra	nsfer Switch) 등 전력전환이 자동으로 될 수 있어야 하며, 주기적인 점검이 필요하	다.

4.10	냉동기 (해당시)

1)	생물안전 연구시설 내의 냉방 및 제습용으로 운전되고 있는 냉동기의 운전 및 정비	의 원칙을 정함으로써 냉동기의 고장을 예방하고 온도를 정확히 유지하여 실험수행	과 관련된 제반활동을 원활히 하는데 그 목적이 있다.

2)	냉동기 SOP에는 냉동기의 운전방법, 점검방법, 고장에 따른 조치방법 등이 수록되어	있어야 한다.

3)	냉동기의 작동은 비례제어가 될 수 있어야 한다.

4.11	헤파필터박스 (해당시)

1)	헤파 필터박스의 관리방법을 규정하여 정기점검을 함으로써 실험의 안전한 수행에	차질이 없도록 하는데 그 목적이 있다.

2)	헤파 필터박스 SOP에는 헤파 필터 적격성 검사방법, 교체주기, 교체방법 등이 수록	되어 있어야 한다.

4.12	비상샤워, (휴대용)아이샤워 (해당시)

1)	비상샤워의 작동여부와 비상샤워기의 물을 주기적으로 교체한다.

2)	(휴대용)아이샤워의 비치 상태와 유효기간 등을 주기적으로 교체한다.

4.13	손소독기 (해당시)

소독제의 잔량과 손소독기의 작동여부를 주기적으로 점검한다.

4.14	화재 및 폭발 예방 (해당시)

1)	화재 및 폭발에 의한 위험방지조치(소화기, 소화시설 등)가 이루어지고 있으며, 점검	및 보수 계획에 따라서 주기적으로 점검해야 한다.

2)	소화기 위치 표시 및 소화기 비치 관리(청결상태, 점검표 부착 및 점검여부)를 해야	한다.

3)	화재감지장치, 화재경보설비(비상벨, 바상방송 스피커 등)를 주기적으로 점검한다.

4)	피난유도 표지 등 피난설비를 주기적으로 점검한다.

4.15	안전표지관리

안전표지의 부착상태를 주기적으로 점검한다.

4.17	구급약

구급약의 유통기한을 확인하고, 내용물 구성을 주기적으로 점검한다.

4.18	청소도구

청소도구의 상태를 주기적으로 점검한다.

4.19	기타

기타 관리 장비가 있는 경우, 추가 기술한다.

5.	빌트인 장비관리 대상

5.1	빌트인 장비배치도

빌트인장비 배치도

[ OOO 생물안전 연구시설 빌트인장비 배치도 ]

5.2	고압증기멸균기

호실	실명	챔버용량	수량	제조사

5.3	패스룸 (해당시)

호실	실명	규격	수량

5.4	패스박스 (해당시)

호실	실명	규격	수량

5.5	훈증챔버 (해당시)

호실	실명	수량	훈증방식

5.6	기밀문 (해당시)

호실	실명	규격	수량

5.7	4면프레임도어 (해당시)

호실	실명	규격	수량

5.8	기타

기타 관리 장비가 있는 경우, 추가 기술한다.

6.	실험장비관리 대상

6.1	실험장비배치도

실험장비장비 배치도

[ OOO 생물안전 연구시설 실험장비 배치도 ]

6.2	생물안전작업대 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.3	인큐베이터 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.4	CO2 인큐베이터 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.5	냉장/냉동고 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.6	PCR (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.7	원심분리기 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.8	훈증멸균장비 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.9	아이솔레이터 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.10	균질화기 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.11	진탕기 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.12	초음파 파쇄기 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.13	피펫 및 관련 장비 (해당시)

호실	실명	규격	수량	제조사

6.14	기타

기타 실험장비가 있는 경우, 추가 기술한다.

7.	통신장비관리 대상 (권장)

7.1	통신장비 배치도

통신장비 배치도

[ OOO 생물안전 연구시설 통신장비 배치도 ]

7.2	전화기/인터폰

호실	실명	번호

7.3	FAX

호실	실명	번호

7.4	LAN

호실	실명	수량	제조사

8.	비상대응장비관리 대상

8.1	비상대응장비 배치도

비상대응장비 배치도

[ OOO 생물안전 연구시설 비상대응장비 배치도 ]

8.2	비상샤워기

호실	실명	규격	수량	제조사

8.3	(휴대용)아이샤워

호실	실명	규격	수량	제조사

8.4	손소독기

호실	실명	규격	수량	제조사

8.5	소화기/소화관련 장비

호실	실명	규격	수량	제조사

8.6	스필키트

호실	실명	규격	수량	제조사

8.7	청소도구

호실	실명	규격	수량	제조사

8.8	구급약

호실	실명	규격	수량	제조사

8.9	기타 비상대응장비

호실	실명	규격	수량	제조사

기타 비상대응장비가 있는 경우, 추가 기술한다.

9.	방충·방서 관리

9.1	방충·방서 개요

실험과 관련이 없는 곤충류 또는 설치류가 공조기계실 등의 연구시설로 접근할 경우 연	구시설 설비의 손상 원인이 될 수 있고, 이로 인하여 압력이상 등 밀폐가 깨질 수 있기	때문에 반드시 이에 대한 대책을 수립하고 이행해야 한다.

9.2	방충·방서 설비 구축

유지보수관계자는 곤충, 설치류 및 조류의 침입이 가능한 곳을 모두 파악하고, 이에 따른	방충·방충 관리할 지역에 방충망, 유인등(포충등) 등을 설치 및 관리한다.

1)	연구시설 외부와 통하는 구멍이 나있는 곳에 방충망 설치

2)	외부에서 날벌레 등이 연구시설 내부로 들어올 수 있는 곳에 유인등(포충등) 설치

3)	연구시설 외부에 쥐가 서식할 가능성이 있는 곳은 필요한 경우 쥐덫을 놓을 수 있	으며, 임의대로 이동시키지 않는다. 단, 쥐덫은 매월 위치를 주기적으로 변경한다.

4)	배관이나 덕트 등이 통과하여 틈이 생기는 벽은 모두 밀폐

9.3	방충·방서 설비 유지 및 관리

9.3.1	관리사항

1)	외부 공기가 유입되는 공조기급기구는 유입되는 곤충류 등에 의해 공조기의 손상	이 있을	수 있으므로 유입구에 방충	망 등을 설치하고 수시로 이를 청소하고 관리	해주어야 한다.

2)	공조실의 환기창에도 방충망을 설치하여 곤충류의 유입을 막아야 한다. 또한 건물	출입구나 로비에도 유문등(포충등)을 설치하여 곤충의 접근을 차단해야 한다.

3)	유지보수관리자는 설치된 방충망, 유문등(포충등), 트랩 등의 상태 뿐만 아니라 공	조 설비가 설치된 구역의 상태를 수시로 점검하여 최적의 성능을 나타내도록 관리	해야 한다.

9.3.2	업무위탁

방충·방서는 유지보수용역업체 또는 전문업체가 수행할 수 있다.

9.4	방충·방서장비 배치도

방충·방서장비 배치도

[ OOO 생물안전 연구시설 방충·방서 배치도 ]

9.5	유문등(포충등)

호실	실명	규격	수량	제조사

9.6	방충망

호실	실명	규격	수량	제조사

9.7	쥐덫 및 트랩 등

호실	실명	규격	수량	제조사

9.8	방충·방서 교육 실시

1)	기관생물안전관리책임자는 연구시설을 사용하는 전직원을 대상으로 매년 1회 이상	방충 방서에 관한 정기교육을 실시한다.

2)	전직원 대상 정기교육 내용은 다음 항과 같으나, 여기에 국한하지 않는다.

①	방충방서의 중요성

②	출입요령

③	음식물 반입 금지 규정

④	쓰레기 처리 요령

⑤	방충방서 약품의 독성 및 응급처치 요령

⑥	기타 대처 요령

9.9	기타

기타 방충방서관리가 있는 경우, 추가 기술한다.

10.	시설안전관리 안전교육

10.1	유지보수 관계자 안전교육

1)	유지보수를 수행하는 자는 교육을 통해서 생물안전 연구시설 운영방법을 이해하고	자신의 신체를 스스로 보호할 수 있어야 한다.

2)	OOO기관의 유지보수자 안전교육을 정기적으로 이수해야한다.

- 생물안전 연구시설 생물 안전 운영 지침 교육

- 생물안전 연구시설 가이드라인 교육

- 생물안전 연구시설에서 사용하는 병원체 등에 대한 기본 교육

10.2	유지보수 전문교육

생물안전 연구시설 유지보수 수행에 관련된(전기설비 및 자동제어, 기계설비 및 공조, 냉동설비, TAB 등) 외부교육을 이수하고 그 내용을 숙지하여 유지보수 업무에 적용한다.

11.	휴무일 및 야간의 연구시설 비상근무관리

11.1	휴무일 연구시설 관리

1)	토요일, 일요일 및 공휴일의 휴무일에는 연구시설 관리를 위한 비상근무를 원칙으로	한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 연구시설의 사정에 따라 비상근무의 여부를 결정 및 비상	근무자를	지정한다.

3)	비상근무시간은 오전 O시부터 오후 O시까지 O시간 근무를 기본으로 하되 사정에	따라 근무시간의 변경이 가능하다.

4)	비상근무시간 이외의 야간의 연구시설 관리는 “10.2 야간 연구시설 관리”에 따른다.

11.2	야간 연구시설 관리

1)	기관생물안전관리책임자는 근무시간 이외 야간의 연구시설 관리를 위한 비상근무의

여부를 결정한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 야간 연구시설 관리를 위한 비상근무자를 지정한다.

[Prototype ABL2] 제  장  유지보수

1.	유지보수 개요

1.1	유지보수 관계자 업무

※“유지보수”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1)	생물안전 연구시설 유지보수 관계자는 장비별 점검항목, 점검방법, 점검주기, 소모품	교체 주기를 명확히 인지하고 유지보수 업무를 수행하여야 한다.

2)	유지보수 관계자는 운전 상태를 중점적으로 확인하여야 하며, 비상사태를 대비하여	예비로 보유하고 있는 장비상태도 주기적으로 점검 하여야 한다.

3)	유지보수 관계자는 실험실 내부의 장비에 대한 시험연구종사자의 요청이 발생할 경	우에 점검	을 실시한다. 혹시 모를 감염 위험이 있는 실험실은 되도록 출입을 삼가	여야 하며, 비(非)오염 구역의 장비는 정기적으로 점검을 수행하여야 한다.

4)	안전관리 및 유지보수에 관련된 활동은 보고서를 통해서 문서화해야 하며, 이를 기관	생물안전관리책임자에 정기적으로 제출한다.

5)	시설에 경미한 문제가 발생할 경우 선 조치 후 기관생물안전관리책임자에게 보고를	하고, 중대한 문제가 발생할 경우 기관생물안전관리책임자에게 선 보고 후 조치방안	을 모색하여야 한다. 모든 일탈과 관련된 자료는 보고서에 첨부하여 기록으로 남겨야	한다.

6)	유지보수 전문위탁기관이 상주하여 관리하지 않는 경우에는 유지보수를 위한 OOO	기관방문과 방문 사이의 시설 상태 점검을 해야 한다.

(차압, 온도, 습도에 대한 그래프 분석 등)

2.	기록 및 보고서

2.1	기록관리 및 보관

생물안전 연구시설의 안전관리에 대한 운영기록은 「유전자변형생물체법」 법률 제 26조 및 시행규칙 15조에 따라 반드시 작성해야 하며 그 기록은 5년간 보관해야 한다.

※	주요 기록 사항 : 잠금장치 상태, 차압, 온도, 습도, 폐수처리시설 작동상태, 점검시간	및 점검자와 확인자

2.2	정기점검기록

1)	일 또는 주 단위로 시설 및 장비에 대한 점검을 실시하며 점검주기는 기관생물안	전관리책임자의 지시에 따른다. 다만, 최소 월 1회는 반드시 점검을 실시하고 그	기록을 남긴다.

2)	기록에는 최소한 점검 형태, 점검일, 점검자, 조치사항, 사용 자재, 점검인원, 점검	내용, 점검 결과 등을 수록하고, 내용 및 범위는 기관생물안전관리책임자의 지시에	따른다.

3)	정기점검 내용은 기록하여 기관생물안전관리책임자에 보고하고 그 기록을 정기점	검보고서(유지보수용역업체 양식)에 첨부하여야 한다.

2.3	월간점검보고서 (해당시)

점검 기록을 바탕으로 1개월 간 유지보수 활동 내용을 모두 기재하여야 하며, 1개월간의 점검 결과를 요약보고, 일탈보고와 함께 장비별 현 상태를 명확히 기재하여야 한다. 기관생물안전관리책임자의 요구 및 상황에 따라 사진을 월간점검보고서(유지보수용역업체 양식)에 첨부하도록 한다.

2.4	종합평가보고서 (해당시)

월간 점검 보고서 바탕으로 1년간 유지보수 활동 결과에 대한 요약보고서를 제출하여야 한다. 종합평가보고서에는 장비의 일탈보고서(일탈해소 결과부분 포함)와 소모품 교체내역이 포함되어 있어야 한다. 헤파 필터 등 시설의 검증이 필요한 사항이 있을 경우도 이를 포함하여 종합평가보고서(유지보수용역업체 양식)를 작성해야 한다. 특이사항이 발생할 경우, 기관생물안전관리책임자에게 그 내용을 설명하고 향후 조치 계획을 수립한다.

3.	연구시설 유지보수 출입자관리

3.1	출입관리개요

3.1.1	출입승인

생물안전 연구시설에 출입하고자 하는 유지보수 관계자는 매회 사전에 [서식  ] “비연구자 연구시설 출입신청서 및 승인서” (또는 자체 기관양식)에 따라 기관생물안전관리책임자의 승인을 받아야 한다.

3.1.2	출입관리 (권장)

승인을 받은 유지보수 관계자는 매회 생물안전 연구시설의 입실 전에 [서식  ] “연구시설 출입대장” (또는 자체 기관양식)에 기재하고 지정된 개인보호구를 착용하고, 지정된 경로를 통해서 입실한다. 퇴실 시에는 지정된 통로를 통하여 샤워 등의 안전조치를 취하고 퇴실한다. 안경 등을 착용하였을 경우에는 안경 등에 대한 소독조치를 시행한다.

3.2.	장비 관련 회사 관계자 출입 승인

1)	기기ㆍ장비 관련 회사직원이 장비의 수리 및 점검 등을 위해 출입을 희망하는 경우	에도 “3.1.1 출입승인”에 따라서 연구시설 출입 승인을 받아야 한다.

2)	출입승인을 받은 관련회사 직원은 연구시설 출입 시 반드시 OOO기관의 시험연구종	사자와 동반 출입하여야 한다. 다만, 혈청의 수집 및 보관은 기관생물안전관리책임자	와 장비 관련 회사와 협의하여 관리한다.

3)	OOO기관의 장은 출입 기간 및 목적에 맞는 연구시설 출입자 교육을 실시하고 해당	업무 수행이 원활할 수 있도록 지원한다.

4.	장비/설비별 점검방법 및 점검주기 (해당시)

주요 설비 및 장비에 대한 필수 점검사항 및 주기는 다음 표와 같다. 다만, 설비와 장비 특성에 따라 점검주기(일 또는 주 등) 및 항목을 조정할 수 있으나 제시된 항목은 최대한 반영하여 상시점검 및 감시를 수행할 수 있도록 한다. 또한, 생물안전 연구시설 가동에 따른 차압 상태, 온･습도는 상시 점검하고 기록되어야 하며 이는 자동제어장치 기록으로 대치 가능하다. 실험실내 판넬 및 등기구 등의 밀봉 상태는 누기에 따른 위험성을 방지하기위해 상시 점검하고 기록해야 한다. 필수장비인 경우 교체부품 및 일탈보고서를 작성하여 보관하여야 하며, 재확인 시 이를 제출하여야 한다.

4.1	공기조화기 및 덕트 (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
프리필터	육안검사	차압계로 확인하며 40 mmAq 이상일 경우 교체	1개월
미디움필터	육안검사	차압계로 확인하며 40 mmAq 이상일 경우 교체	1개월
Bearing grease 주유	육안검사	1,000시간에 1회 grease 주유 또는 자동 grease 주유기 사용 시 주유량 확인 후 보충	2주
MVD 작동상태	검사 및 점검	개도율 확인 및 오작동여부	년1회 또는 정지 시
팬 소음 및 진동	육안검사	팬의 작동상태 확인	2주
V-belt	육안 및 장력 검사	1.5 cm 이내 장력 및 마모상태	2주
Motor 절연저항	절연저항계	절연저항 0.3 MΩ 이상	1개월
Motor 운전전류	Clamp meter	정격 전류 이내	1개월
Manometer 검･교정	검･교정기	(0 ~ 50) mmAq	1회/년
가습기 작동상태	검사 및 점검	습도 변화에 따른 가습기 작동 상태 스케일제거	2주
Heater 작동상태	검사 및 점검	온도 변화에 따른 heater 작동 상태	2주
제습기 작동상태	검사 및 점검	온도/습도 변화에 따른 heater (제습기) 작동상태	2주
공조기 작동 (배관) 상태	육안검사	냉동기 배관 및 drain 배관	2주
자동제어 연동	검사 및 점검	Program 및 monitor 점검	2주
냉동기 작동상태	검사 및 점검	온도변화에 따른 냉동기 운전상태	2주
정전 시 운전	검사 및 점검	UPS전원으로 운전 여부 확인 ATS 절체 여부 및 비상발전기 가동 확인	년1회 또는 정지 시
Trip이나 비상 시 Stand by 전환	검사 및 점검	Stand by 전환여부	년1회 또는 정지 시

4.2	배기유니트(EFU) 및 배기 필터 박스 (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
헤파필터 완전성 test	Leak test	PAO Test (누기율 0.01% 미만)	년1회 또는 필요 시
헤파필터 차압	육안검사	차압계로 확인하며 40 mmAq 이상일 경우 교체	1개월
Bearing grease 주유	육안검사	1,000시간에 1회 grease 주유 또는 자동 grease 주유기 사용 시 주유량 확인 후 보충	2주
MVD 작동상태	육안검사	개도율 확인 및 오작동여부	년1회 또는 정지 시
V-belt	육안검사 및 장력 검사	1.5 cm 이내 장력 및 마모상태	2주
기밀 유지 상태	누기 검사	완전기밀유지	년1회 또는 필요시
Motor 절연저항	절연저항계	절연저항 0.3 MΩ 이상	1개월
Motor 운전전류	Clamp meter	정격 전류 이내	1개월
Trip이나 비상 시 Stand By 전환	검사 및 점검	Stand by 전환여부	년1회 또는 필요 시
정전 시 운전	검사 및 점검	Stand by 전환여부	년1회 또는 필요 시
자동제어 연동	검사 및 점검	Program 및 monitor 점검	년1회 또는 필요시

4.3	냉동기 (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
압력	육안검사	운전압력(고압, 저압)	2주
냉매누설	냉매가스 검출기	압력게이지 확인 및 가스 검출여부 확인	1개월
압축기 절연 저항	절연저항계	절연저항 0.3 MΩ 이상	1개월
압축기 운전전류	Clamp meter	정격전류 이내	1개월
응축기 냉각팬	검사 및 점검	냉각팬 작동여부	2주
제습운전	검사 및 점검	습도변화에 따른 냉동기 작동상태	2주
자동제어 연동	검사 및 점검	Program 및 monitor 점검	1개월
보온상태	육안검사	결로 발생 및 보온재 파손여부	1개월
냉방운전	검사 및 점검	온도변화에 따른 냉동기 작동상태	1개월

※	동절기 및 하절기에는 점검 주기를 OOO기관과 협의하여 변경, 적용함.

※	흡수식 냉동기 등의 시스템이 적용되는 경우는 상기점검 사항과는 점검 내용에 차이가 있음	에 따라 OOO기관과 협의하여 정함.

4.4	실험실 (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
헤파필터 완전성 test	Leak test	PAO Test (누기율 0.01% 미만)	년1회 또는 필요 시
환기횟수	풍량계	실 전체 풍량/체적이 10회 이상	년1회 또는 필요 시
작업실간차압 & 조정	차압계	(-10 ~ 15) Pa	2주
차압계 검･교정	검･교정된 기기	(-10 ~ 10) mmAq	1년
조도측정	조도측정기	실험실 500 lx 이상, 실험실외 구역 250 lx	년1회 또는 필요 시
Silicone 밀봉부 기밀상태	연무시험	연무시험를 이용한 유입시험	1개월
lnterlock 작동상태	육안검사 및 작동시험	인접된 도어 Interlock 시험	2주
Auto door 작동상태	육안검사 및 작동시험	작동시험	1개월
급수, 급탕 작동 및 누설상태	육안검사 및 작동시험	통수시험 및 누수여부	2주
약품혼합 여부	육안검사 및 작동시험	폐수탱크 내 약품투입 시험	2주
가스누출경보기 작동상태	육안검사 및 작동시험	가스 이용 test	년1회 또는 필요 시
샤워장 샤워작동 상태 및 누설	육안검사 및 작동시험	통수시험 및 누수여부	2주
생물안전작업대 (BSC) 가동상태	BSC 점검 표 참조	작동시험	1년
아이솔레이터 가동상태	아이솔레이터 점검표 참조	작동시험	1년
Pass-box 상태 및 누설	Pass-box 점검표 참조	작동시험	1개월
자동제어 연동	검사 및 점검	Program 및 monitor 점검	1개월
온도측정	온도측정기	설정온도 : (23 ± 3) ℃ 측정온도 : 설정온도 ± 2 ℃	2주
습도측정	습도측정기	설정습도 : (50 ± 10) % R.H. 측정습도 : 설정습도 ± 10 %	2주
소음측정	소음측정기	실험장비 가동시 65 dB(A)이하	2주

※	년 1회 종합점검 기간에 시행하며 OOO기관 요청 시 추가 시행 가능

4.5	기계실 및 폐수 (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
각 제어반 제어 장치 운전상태	검사 및 점검	정상작동여부	2주
설비 접지상태	검사 및 점검	접지상태 확인 (부식 및 이탈)	1개월
각 표시등 이상 유무	검사 및 점검	점멸 및 상태표시여부	2주
UPS 작동상태	계기판 확인 육안검사 및 점검	잔여시간, 정격전류, 운전상태, 부하율 점검	2주
설비 절연저항, 전류	검사 및 점검	정상작동여부	2주
각종 안전장치 동작 상태	검사 및 점검	정상작동여부	2주
정량펌프 동작 상태	검사 및 점검	정상작동여부	2주
급수필터 여과상태	육안검사	누수 및 누기여부	1개월
배관설비 유지 관리(물, 가스)	육안검사	정상작동여부	2주
밸브 등 기기류 작동상태	육안검사	개도율 및 조작시험	2주
전기순간온수기 유지관리	육안검사	통수시험 및 설정온도 변경	2주
폐수 처리시설 유지관리	검사 및 점검	고수위 경보 및 폐수량 점검	2주
배수용 약품시설 유지관리	검사 및 점검	약품량, 저수위 경보, 약품투입시험	2주
자동제어 연동	검사 및 점검	Program 및 monitor 점검	1개월

4.6	고압증기 멸균기 (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
레코더 작동상태	육안검사	시험작동	1개월
레코더 기록지 교체 및 잉크 보충	육안검사	시험작동 및 잔여량점검	2주
온도 Control 작동상태	검사 및 점검	시험작동 후 결과점검	1개월
온도 Controller 온도보정	표준저항기	온도편차	년1회 또는 필요 시
Timer 작동상태	검사 및 점검	시험작동 후 결과점검	1개월
Control panel 내부청소	육안검사	Panel 내부 청소 상태	1개월
각종 램프 작동상태 및 교환	검사 및 점검	정상작동여부	2주
히터의 이상유무	검사 및 점검	절연저항 0.3 MΩ 이상	1개월
각종 게이지 및 스위치류 이상 유무	검사 및 점검	정상작동여부	2주
누전여부	절연저항계	절연저항 0.3 MΩ 이상	1개월
Door interlock 이상 유무	검사 및 점검	양문개폐 시험	1년 또는 필요 시
온도 감지 센서류 작동상태 및 교환	검사 및 점검	온도분포 시험	1년 또는 필요 시
배관계통의 누설 및 보온상태	검사 및 점검	누설 및 보온상태 점검	1개월
압력계, 진공계의 정상여부	검사 및 점검	진공시험	1년 또는 필요 시
밸브류의 작동상태 및 누설여부	검사 및 점검	누수여부	1개월
Door packing의 누설 및 마모	검사 및 점검	누수 및 경화, 변색여부	1개월

4.7	생물안전작업대  (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
급기팬	검사 및 점검	정상작동여부	1개월
배기팬	BSC용, EFU 점검표참조	정상작동여부	1개월
Control panel 내부 청소	육안검사	Panel 내부 청소 상태	1년
각종 램프 작동상태 및 교환	검사 및 점검	정상작동여부	2주
M/G, switch류의 이상유무	검사 및 점검	정상작동여부	1년
Door 상한 limit 이상유무	검사 및 점검	경보발생 여부	1개월
급기 인버터	검사 및 점검	풍량측정 및 점검	1년
조명 점등상태	검사 및 점검	정상작동여부	1개월
UV 램프 점등상태	검사 및 점검	정상작동여부	1개월
자동제어 연동	검사 및 점검	Program 및 monitor 점검	1개월
헤파필터	Leak test	PAO Test (누기율 0.01 % 미만)	1년 또는 필요 시
기류흐름	연무시험	연무를 이용한 유입 및 하방향 시험	1년 또는 필요 시
조도측정	조도측정기	조명을 켠 평균조도가 Background 조도(160 lx 이하로 조정)보다 480 lx 이상	1년 또는 필요 시
소음측정	소음측정기	실험장비 가동 시 65 dB(A)이하	1년 또는 필요 시

※	년 1회 종합점검 기간에 시행하며 OOO기관 요청 시 추가 시행 가능

4.8	UPS  (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점거방법 및 기준	점검주기
1차 전원의 정상 공급 여부	Multimeter	공급전압 : (380 ± 38) V 이내 공급전압 : (220 ± 18) V 이내	1개월
출력 전압의 정격 공급 여부	Multimeter	380 V ± 5% 이내 220 V ± 5% 이내	1개월
출력 부하 용량의 정격	Multimeter, 전류측정기	부하율 점검	2주
각종 램프 작동상태 및 교환	육안검사 및 Multimeter	정상작동여부	2주
내부배선의 열화 발생 여부	육안점검	변색 여부	1개월
배터리 단자의 부식 발생 및 소재	육안검사	변색 및 부식발생 여부	2주
내부순환 팬 소음 발생 및 교체	육안검사	정상작동여부	2주
배터리의 변형 및 액 누설 여부	육안검사	배터리액 누설여부	2주
상시전원 차단 후 비 상 전원 투입 시험	동작시험	30분 이상 운전시험	년1회 또는 필요 시
Panel 내 각종 단자 재조임	검사 및 점검	단자 재조임	1년
Panel 내부 이물 청소	검사 및 점검	내부청소상태 확인	1개월
UPS실 온도측정	온도계	설정온도 : (20 ~ 25) ℃	1개월
UPS 알람 확인	육안검사	알람 히스토리 확인	1개월

※	설치된 용량, 제원을 고려하여 항목 및 주기 등 변경 가능

4.9	패스박스  (해당시)

점검항목	점검방법	세부점검방법 및 기준	점검주기
각 부속기기의 청소 상태	육안검사	내부청소상태	2주
경보 작동 상태 및 교환	육안검사	작동시험	1개월
Interlock 솔레노이드밸브의 작동 상태 및 교환	육안검사	작동시험	1개월
내･외부 부식, 오염발생 여부 및 소재	육안검사	내부청소상태 및 정상여부	1개월
Pass-box 자체 절연 저항 측정	메가 tester	절연저항 0.3 MΩ 이내	1개월
각종 작동 스위치	육안검사 및 Multimeter	작동시험	1개월
Door packing	육안검사	연무시험	1개월
내부FL의 점등 및 안정기	육안검사	점등 여부확인	1개월
내부 UV등 점등 및 상태	육안검사 및 UV강도 test	UV강도시험 (40 ㎼/㎠ 이상)	6개월
Door handle 작동상태	육안검사	작동시험	1개월

※	설치제원에 따라 항목 등 변경 가능

4.10	아이솔레이터  (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
급기팬	검사 및 점검	정상작동여부	1개월
배기팬	BSC용, EFU 점검표참조	정상작동여부	1개월
Control panel 내부 청소	육안 점검	Panel 내부 청소 상태	1년
각종 램프 작동상태 및 교환	검사 및 점검	정상작동여부	1개월
Control 부속류의 이상유무	검사 및 점검	정상작동여부	1개월
조명 점등 상태	검사 및 점검	정상작동여부	1개월
UV 램프 점등상태	검사 및 점검	정상작동여부	1개월
차압상태	검사 및 점검	제조사 기준	1년 또는 필요 시
자동제어 연동	검사 및 점검	Program 및 Monitor 점검	1개월
헤파필터 완전성 test	Leak test	PAO Test (누기율 0.01 % 미만)	1년 또는 필요 시
기류흐름	연무시험	연무를 이용한 유입시험	1년 또는 필요 시
아이솔레이터 누기시험	연무시험	연무를 이용한 누기확인	1년 또는 필요 시
장갑의 상태	육안검사	장갑파손여부 확인	1개월
덕트누기	가압시험	1,000 Pa 가압 30분간 압력 감소율 3 % 이하	1년 또는 필요 시

※	장비 규격에 따라 추가 가능

4.11	동력 및 전등 Panel (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
정격전류 공급	Multimeter	정격전류 (A)	1개월
부하 절연 저항	메가 tester	절연저항 0.3 MΩ 이내	1개월
각종 차단기 및 케이블 발열 등의 이상 유무	육안	열화/변색 여부	1개월
정격 NFB의 사용 여부	육안검사 및 전류 측정기	정격전류 (A)	1개월
각종 지시계의 정상작동 및 교정	육안검사 및 Multimeter	정격전류(A)/정격전압(V)	2주
단자 조임 터미널의 발열 변색	육안검사	열화/변색 여부	2주
접촉 불량 단자의 재조임 실시	검사 및 점검	단자 재조임	1개월
절연판의 발열 변색 여부	육안검사	열화/변색 여부	2주
Panel 표시등의 정상적 점등여부	육안검사	정상작동여부	2주
부하 측과의 연결 배선상태	육안검사	정상작동여부	2주
내부냉각팬의 정상동작	육안검사	정상작동여부	2주
명판의 훼손 및 표기	육안검사	표기상태 확인	2주
Panel 내부 점검용 FL의 정상점등	육안검사 및 Multimeter	점등상태	2주
Panel 내부 청소 실시	브러쉬 이용	Panel 내부 청소 상태	1개월

4.12	자동제어용 Control Panel  (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
센서 전원 공급용 Power supply 전압	Multimeter	DC (24 ± 2) V 이내	1개월
각종 Controller의 정상동작	육안검사 및 multimeter	정상작동여부	2주
인버터 신호에 따른 가변 조절상태	육안검사 및 multimeter	Hz 조절시 가변상태	년1회 또 는 필요 시
인버터외부 유출단자 재조임	검사 및 점검	단자 재조임	1개월
각종경보 램프 점등상태	육안검사 및 multimeter	램프점등여부	2주
인버터 내부 냉각팬 동작 상태	육안검사	정상작동여부	2주
인버터 내부 청소	브러쉬 이용	청소상태점검	1개월
제어 Relay 동작 상태 및 소켓 접속	육안검사 및 multimeter	파손 및 열화/변색 여부	2주
조립식 단자대 접속 불량 및 단자 재조임	육안검사	단자 재조임	1개월
전원공급용 TR 열화, 변색	육안검사	열화/변색여부	2주
타이머 작동상태	Multimeter	정상작동여부	2주
DDC 또는 PLC 랙 정상동작 및 이물 소재	육안검사	정상작동여부 및 청소상태점검	2주
Panel 내부 점검용 조명의 정상점등	육안검사	점등여부	2주
Panel 내부 냉각용팬 동작 및 청소	브러쉬 이용	정상작동여부 및 청소상태점검	2주

※	설치제원에 따라 항목 등 변경 가능

* DDC : direct digital control, PLC :Programmable Logic Controller

4.13	통신설비 (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
통신설비(인터폰 등) 동작상태	동작시험	정상작동여부	2주
통신설비(인터폰 등) 전원장치	Multimeter	DC (12 ± 2) V 이내	1개월
통신설비(인터폰 등) 주장치 함 청소	브러쉬 이용	청소상태점검	1개월
LAN HUB 동작 상태 및 소재	LAN tester, 소재용 브러쉬	정상작동여부 및 청소상태점검	1개월
각 Port별 콘넥터 소손분	육안점검	파손여부	2주
각 Port별 통신 상태	LAN tester	통신상태 시험	1개월

4.14	소방설비  (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
수동발신기 동작 시험 실시	육안검사	P형 1급 (설치된 형태에 따라 점검)	1개월
감지기 상태	동작시험	설치된 형태에 따라 점검 (연기감지기, 차동식감지기 및 열동식 등)	1개월
피난구 유도등 점등상태	동작시험	피난구 유도등 전원차단 시 유도등 점등 여부	1개월
소화기 액 충진상태 및 점검표	육안점검	점검표 확인 (설치 소화기 종류에 따라 점검)	1개월

※	설치된 설비 종류에 따라 변경 가능

4.15	폐수소독설비 (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
폐기액 탱크 수위감지 기 작동 여부	검사 및 점검	수위변동 시 감지여부	1개월
폐기액 탱크 누수 여부	육안검사	누수여부	2주
펌프 소음 및 진동 여부	육안검사 및 점검	이상소음발생 및 진동발생여부	2주
펌프 공급압력 및 압력계의 작동 여부	육안검사 및 점검	정상작동여부	2주
각종 표시 램프 점등상태	육안검사	운전중 동작표시등 점등여부	2주
압축공기의 공급 및 압력계의 작동 여부	육안검사 및 점검	탱크내부 버블 발생여부	2주
히터의 이상 유무	검사 및 점검	절연저항 0.3 MΩ 이상	1개월
M/G, Switch류 이상 유무	검사 및 점검	신호에 따른 작동여부	1개월
전원공급용 TR 열화, 변색	육안	열화 및 변색	1개월
NFB 및 케이블 발열 등의 이상 유무	육안검사	케이블 및 캡 발열로 인한 변색여부	1개월
각 배관의 누수 및 노후 여부	육안검사	누수 및 부식여부	2주
각 센서류의 작동 및 전원공급 상태 확인	육안검사 및 점검	센서시험	1개월
자동제어 연동	검사 및 점검	Program 및 Monitor 점검	1개월
Panel 내부 냉각용팬 동작 및 청소	브러쉬 이용	정상작동여부 및 청소상태점검	2주

4.16	패스룸 (해당시)

패스룸의 제작사는 OOO기관과 협의하여 사양에 따라서, 점검방법 및 점검주기를 설정	한다.

4.17	훈증챔버 (해당시)

훈증챔버의 제작사는 OOO기관과 협의하여 사양에 따라서, 점검방법 및 점검주기를 설정	한다.

4.18	훈증멸균장비 (해당시)

훈증멸균장비의 제작사는 OOO기관과 협의하여 사양에 따라서, 점검방법 및 점검주기를	설정한다.

4.19	기밀문 (해당시)

기밀문의 제작사는 OOO기관과 협의하여 사양에 따라서, 점검방법 및 점검주기를 설정한다.

4.20	4면프레임도어 (해당시)

4면프레임도어의 제작사는 OOO기관과 협의하여 사양에 따라서, 점검방법 및 점검주기를 설정한다.

4.21	기타사항  (해당시)

점검항목	점검방법	세부 점검방법 및 기준	점검주기
자동제어설비 진단	자동제어	각종 센서류 등	1개월
훈증소독	실험실 및 공조 설비	실험 종료 및 헤파필터 교체 시 멸균시험	1년
소독에 따른 세척 및 청소	실험실 및 공조 설비	실험실 환경	1년
TAB	실험실 및 공조 설비	Air balancing , 환기횟수, 누기, 차압	1년

※	설비 제원, 사용빈도 등에 따라 변경 가능

5.	장비별 부품 교체주기 (해당시)

기계적 고장으로 인한 사고를 사전에 예방하기위해 시설에 들어가는 각종 부품을 적기에 교체하여 안정적인 시설운영을 하도록 한다. 각 시설은 고유의 설계에 따라 유지보수 전문위탁기관은 OOO기관과 면밀히 상의하여 교체대상 및 주기를 정하여 시행한다.

헤파필터의 수명은 시설의 설비, 시설 사용 빈도, 실험내용, 주변 환경 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다. 또한 급기에 헤파 필터가 설치되어 있다면 배기 부분의 헤파 필터의 사용 수명이 길어질 수 있다. 일반적으로 아래 표와 같이 1년에 한번 교체하는 것을 권장한다. 그러나 본 지침에 따라 급기 필터(프리, 미디움, 헤파 필터 등)의 유지관리가 잘 이루어지고 있을 경우, 교체주기에 관한 헤파 필터 제조사의 기준에 따라 최대 2년까지 OOO기관과 협의하여 교체주기를 연장할 수 있다. (예시)

점검항목	용 도	규격 및 기준	권장주기
프리필터	AHU	중량법(70 ~ 85) % 포집효율	2주
미디움필터	AHU	비색법(60 ~ 90) % 포집효율	6개월
헤파필터	실험실 등의 공기 처리	PAO Test (누기율 0.01 % 미만)	1년 이상
헤파필터	EFU	PAO Test (누기율 0.01 % 미만)	1년 이상
Motor/팬 베어링, belt 외	AHU/EF	손상된 일반소모품 교체 (Belt 및 베어링 등)	1년 이상
가습기	AHU	Heater 소손분 교체	1년 이상
급수필터	일반용수 및 실험용수	10 ㎛, 5 ㎛, 1 ㎛ 등 설치 사양에 따른 교체	3개월
냉동설비 소모품	냉동기/ 소모품교체	Oil, 드라이어	1년 또는 필요 시
공조기 윤활유	공조 설비	자동 주입기	필요 시
램프류	실험실/ 기계실	20 W / 32 W 등	필요 시
UV 램프	Pass-box/BSC /아이솔레이터 등	UV강도 40 ㎼/㎠ 미만 시 교체	1년 또는 필요 시
기타 소모품	기타	기타 잡자재	1개월

6	전원 차단의 경우 (해당시)

1)	유지보수 전문위탁기관은 실험실 보수 또는 훈증작업 등을 수행하기 위하여 전원을	차단하여야 할 경우, 기관생물안전관리책임자와 협의 후 수행한다.

2)	유지보수 전문위탁기관은 연구시설 전원을 차단하여야 할 경우에는 연구	시설 내부에	서 진행되고 있는 실험 및 기타 상황을 고려하여 진행한다.

[Prototype ABL2]  연구시설 설치ㆍ운영의 변경 및 폐쇄

※“연구시설 설치·운영의 변경 및 폐쇄”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.	연구시설 설치ㆍ운영의 신고사항 변경

신고한 연구시설의 대표자 및 설치·운영 책임자, 기관생물안전관리책임자, 연구시설의 규모와 시설내역, 설치장소 및 안전관리등급의 변경사유가 있을 시에는 「유전자변형생물체법 시행규칙」 별지 제28호서식의 “연구시설 설치·운영 신고사항 변경신고서”와 다음 각 호의 서류 1부 또는 전자문서 1부를 첨부하여, 질병관리본부장 또는 「유전자변형생물체법 통합고시」제9-1조의 관계 중앙행정기관의 장 또는 위임기관의 장에게 제출하여야 한다.

1)	변경사항을 증명하는 서류

2)	연구시설 설치·운영신고 확인서 원본

3)	「유전자변형생물체법 통합고시」 별지 제9-1호부터 제9-5호까지 서식의 연구시설	종류별 1, 2등급 연구시설 설치·운영 점검결과서

2.	고위험병원체 시설 변경 (해당시)

고위험병원체를 취급하거나 이를 이용하여 실험을 하는 시설의 변경사항은 「유전자변형생물체법」의 기준과 준수사항에 따르며, 상세사항은 「고위험병원체 안전관리지침」에 따른다.

3.	신고시설 폐쇄

신고한 연구시설을 폐쇄하려는 경우, 「유전자변형생물체법」 시행규칙 별지 제29호서식의 “연구시설 폐쇄신고서”에 유전자변형생물체의 폐기처리를 증명하는 서류 1부를 첨부하여 신고하여야 한다.

[Prototype ABL2] 제  장  비상사항 관리

1.	비상사항관리 생물안전 프로그램

1.1	목표

※“비상사항 관리”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

OOO기관 내 실험실 사고로 인한 문제의 발생을 사전에 차단하고, 비록 사고가 발생하였다 하더라고 확산을 방지하며, 지속적인 안전점검으로 생물학적 위기(bio-crisis)로의 진행을 막는 것을 목표로 한다.

1.2	기관생물안전관리책임자의 역할

기관생물안전관리책임자는 OOO기관 내 생물안전 준수사항 이행을 감독하고 관계자에 대한 생물안전 교육·훈련을 이행하며, 생물안전 관련 국내·외 정보 수집 및 제공하는 의무를 갖게 된다. 또한 실험실 획득감염 등 실험실 내 생물안전 사고가 발생하였을 경우, 이를 조사하고 OOO기관장 및 기관생물안전위원회에 보고하며 최종적으로 시설을 폐쇄하거나 긴급 건강검진 등을 실시하는 등 생물안전 확보조치를 이행하는 주체이다.

[생물안전사고 발생 차단조치(X 표시)를 위한 생물안전 프로그램 구성도]

기관생물안전관리책임자는 OOO기관 내 실험시설 및 관계자의 흐름과 업무 프로세스를 파악하고, 사고의 발생 및 확산을 사전에 차단하기 위한 여러 행정조치 및 관리조치를 수립하고 이행한다. 그리고 이러한 사항들은 기관장이 확인하도록 하여 생물안전 프로그램을 문서화하고 이행하게 하여야 한다. 생물안전 프로그램은 생물안전사고 발생시 신속한 피해확산을 방지하고 적절한 후속대응조치를 마련하는데 도움을 주며, 사고가 발생하였을 경우 체계적인 재발방지 조치를 마련하고 이행하는 근간이 된다.

2.	안전점검 및 정보교류

2.1	안전점검

OOO기관은 생물안전관리를 유지하기 위하여 안전점검을 실시한다.

1)	지역사회 내 경찰, 소방, 유사시 대비 지정 의료기관 등이 포함된 비상연락	망을 마	련하고 연2회 점검

2)	사고대응매뉴얼 마련

3)	병원체 취급시설 및 보존장소 등에 안전점검을 정기적으로 실시

2.2	정보교류

OOO기관 내 생물안전 확보를 위해서는 총괄적인 생물안전 관리 및 실무업무를 담당하는 기관생물안전관리책임자와 생물안전 사항에 대한 전문적인 자문을 제공하는 기관생물안전위원회, 이들과 협력하여 실질적인 실험실 등 연구시설을 안전하게 관리하는 시험연구책임자 및 시험연구종사자의 정보교류 및 협력체계가 필수적이다.

필요시 다음의 관련자와도 정보를 교류한다.

1)	관련 정부 기관

2)	지역 내 시설 인ㆍ허가 기관 (지역사회)

3)	의료서비스 기관

4)	시설유지보수, 청소, 보안 등 용역업체 및 설비, 장비업체

3.	비상사항 대응 교육 및 훈련

3.1	응급사항 대응 교육 및 훈련

생물안전 연구시설 내에서 발생 가능한 응급사항에 대하여 OOO기관은 출입연구자 및 시설 유지보수관계자를 대상으로 응급사항 대응 교육ㆍ훈련을 년 O회 이상 수행한다.

3.2	교육 및 훈련 보고

기관생물안전관리책임자는 응급사항 대응 훈련에 대한 보고서를 작성하여 OOO기관장에게 보고한다.

4.	비상상황 대응 관리 조직

4.1	OOO기관 비상연락체계도

비상상황 발생 시 비상연락체계는 다음과 같으며, 비상상황발생 인지의 경우, 담당자에게 보고 후 조치가 이루어질 수 있도록 한다.

OOO 기관 비상연락체계도

[OOO 기관 비상연락체계도]

유지보수 전문위탁기관 비상연락체계도

[유지보수 전문위탁기관 비상연락체계도]

4.2	OOO기관 실험실 안전관리 업무분장

성명	소속	직위	담당업무	연락처(내선)	핸드폰

4.3	유지보수 전문위탁기관 업무분장

성명	소속	직위	담당업무	연락처(내선)	핸드폰

4.4	시설/빌트인장비/실험장비 업체 연락처

장비명	소속	성명	직위	연락처(내선)	핸드폰

4.5	비상 대응 협조 기관 현황

구분		연락처	비고
OOO부	당직실
질병관리본부	생물안전평가과
OOO기관	당직실
OOO기관 출입통제	중앙통제실
	방재실
	출입경비실
재난신고	OOO소방서
	OOO경찰서
	OOO파출소
	OOO보건소
OOO시청	당직실
	환경과
	재난안전과

5.	비상상황 단계별 수행업무 (예시)

진행 단계		수행 업무		담당자
연구실 사고 발생
↓
초동 조치		◦사고확대방지 조치, 사고발생 주위 전파		최초 사고 발견자
↓
사고초기 보고		◦시험연구책임자, 기관생물안전관리자, 기관생물안전관리책임자, 의료관리자 보고 → 필요시 119 및 관련 기관에 신고		최초 사고 발견자
↓
상황파악		◦사고상황 파악 ◦필요시 연구실사고대책본부 구성		시험연구책임자, 기관생물안전관리자, 기관생물안전관리책임자, 의료관리자, 기관시설관계자
↓
사고수습		◦사고현장 통제 ◦상황별 사고 대응 조치		시험연구책임자, 기관생물안전관리자, 기관생물안전관리책임자, 의료관리자, 기관시설관계자
↓
조치완료 보고		◦사고원인 및 경위조사, 처리 및 대책수립 ◦기관생물안전위원회 보고		시험연구책임자, 기관생물안전관리책임자, 기관생물안전위원회, 기관장
↓
사후관리		◦재발방지 대책시행 여부 확인 및 사고 분석 결과를 바탕으로 향후 안전관리 추진계획에 반영 ◦사고사례공지 및 교육		생물안전담당부서, 기관생물안전관리책임자, 기관장

6.	사례별 응급대응 절차 (시설관련)

생물안전사고가 발생한 경우, 시험연구종사자는 신속한 응급조치를 실시하여야 한다. 따라서 기본 조치 및 관련 사항에 대한 이해와 숙지하고, 시험연구종사자는 응급조치 후 시험연구책임자, 기관생물안전관리(책임)자, 의료관리자 등에게 즉시 보고하여 적절한 의료적 처치 및 후속 조치 등이 신속하게 수행될 수 있도록 해야 한다.

단계	화재의 경우 응급대응 절차
1	화재 발생시 신속히 주위에 있는 시험연구종사자에게 알리고 출입문을 닫아 연소의 확대를 방지한다.
2	근접한 화재경보기를 눌러 경보 사이렌을 작동시킨 후 소방서 등에 화재발생을 신고한다. 만약 안전하게 초기진압이 가능한 소규모 화재로 판단될 경우 가장 가까이에 있는 소화기로 진화한다.
3	화재 초기 진압이 어렵다고 판단되는 경우 가스 및 전기의 중앙 밸브를 잠그고, 즉시 대피한다.
	병원체가 보관되어 있는 냉장고 또는 냉동고 배양기에 난연성재질의 표지판으로 사전 제작된 [표시 ]“병원체 보관, 열지 마시오”을 부착하여, 소방관들이 열지 않도록 한다.
	생물안전작업대(BSC) 내에서 실험을 하던 경우나 병원체 등 실험하던 중에는 가까운 생물안전작업대에 넣고 문을 내리고 탈출하고 난연성재질의 표지판으로 사전 제작된 [표시 ]“병원체 보관, 열지 마시오”을 부착하여, 소방관들이 열지 않도록 한다.
	실험동물이 탈출하지 못하도록 문을 닫아 놓고 탈출한다.
4	시야가 확보되는 비상대피경로를 이용하여 출구를 통해 지정된 집결장소로 이동한다. 대피할 경우, 대피경로에 있는 모든 문은 닫으면서 빠져나간다.
5	대피 시 젖은 손수건 등으로 입과 코를 가리고 숨을 짧게 쉬며 낮은 자세로 벽을 더듬으며 이동한다. 대피경로는 비상구 사인 또는 바닥에 있는 형광 화살표를 따라 이동한다. 이때 승강기는 고립 위험이 있으므로 사용을 금지한다.
6	화재나 폭발 등으로 인하여 시험연구종사자의 머리나 옷에 불이 붙었을 경우 두 손으로 눈과 입을 가리고 멈춰서기-눕기-구르기(Stop-Drop-Roll)방법, 담요 및 물 등을 사용하여 옷이나 머리에 붙은 불을 끈다.
7	지정된 집결장소로 대피하고, 시험연구책임자 또는 기관생물안전관리자에게 화재발생장소, 고립된 사람, 위험물질, 관련 장비 등을 보고한다.
8	화재상황을 보고받은 시험연구책임자 또는 기관생물안전관리자는 사고상황 수준에 따라 사고상황을 기관생물안전관리책임자 등에게 전파하고 현장을 격리 통제한다
9	사고자는 대피장소에서 대기하고 시험연구책임자 또는 기관생물안전관리자 는 사고자의 오염된 개인보호구 등을 폐기하도록 하고 오염장소를 소독 및 멸균하도록 한다.
10	사고자의 감염이 우려되는 경우, 의료관리자에게 알리고, 응급기관에 연락 및 후송 조치한다.
11	화재가 진화된 후, 해당 실험실 연구자 또는 기관생물안전관리자가 소방관, 유지보수관계자 등과 전동식 호흡보호구 등 또는 일회용 보호구(마스크, 장갑, 가운, 안면보호구)를 착용하고 사고지역으로 돌아간다. 피해상황과 모든 장비 및 시설을 점검한다.
12	해당 실험실 시험연구종사자는 전동식 호흡보호구 등 또는 일회용 보호구(마스크, 장갑, 가운, 안면보호구)를 착용하고 소독제와 멸균재해봉투를 이용하여, 감염성 물질을 수거하고, 기관생물안전관리책임자는 수거한 물질의 폐기 여부와 방법 등을 결정한다.

6.1	화재의 경우

단계	옷 또는 전신 보호복에 불이 붙었을 경우 응급대응 절차
1	바닥에 누워 구른다. (사람을 향해 소화기를 사용하지 않도록 한다.)
2	불을 끈 후에는 출갱의실 (필요시 샤워실에서 샤워)에서 개인보호구를 벗는다.
3	발생 사고에 대해 시험연구책임자에게 즉시 보고하고 필요한 조치를 받는다. 시험연구책임자는 기관생물안전관리책임자 또는 의료관리자에게 보고하고, 취급하였던 감염성물질을 고려한 적절한 의학적 조치 등을 취한다.

1)	화재가 진화된 후 (자체 진화한 경우 포함) 기관생물안전관리책임자는 OOO기관시설	관계자와 유지보수 관계자로 하여금 실험실의 모든 장비 및 시설을 점검토록 하여	실험실의 정상 가동상태를 확인한 후 이를 사용할 수 있도록 하여야 한다.

2)	유지보수 전문위탁기관은 "사고조사보고서"(유지보수기관 양식)를 작성하고, 공문으로	기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 추후 화재방지대책을 수립한다.

6.2	정전의 경우

단계	정전의 경우 응급대응 절차
1	시험연구종사자는 즉시 모든 활동을 멈춘다.
2	사용 중이었던 가스, 수도 등을 모두 잠그거나 끈다. 인화성 물질을 다룰 경우 가능하면 주위에 가연성 물질을 분리한 후 안전하게 다루도록 하여야 하며, 알코올램프 등 인화성 물질을 옮길 경우 반드시 불을 끄고 안전하게 옮긴다.
3	모든 장비는 안전하게 전원을 끈다.
4	생물안전작업대의 작동이 멈춘 경우에는 실험을 중단하여 에어로졸 또는 위해 기체 등을 발생시키지 않는다.
5	연구시설 내 비상발전 및 무정전 전원공급장치(UPS)에 의하여 즉시 전원이 공급되므로 병원체에 대하여는 밀폐처리를 하고 생물안전작업대의 개구부 창을 닫고 실험실에서 퇴실한다. 시험연구종사자는 퇴실 시 비상구 사인 또는 바닥에 있는 형광 화살표를 따라 퇴실한다.
6	시험연구종사자는 기관생물안전관리책임자에게 보고한 후 지시에 따른다.
7	기관생물안전관리책임자는 건물 내부로 불필요한 인원의 출입을 막을 수 있도록 [표시 ]출입금지표시에 필요한 사항을 기입하고 이를 실험실 각 출입구에 부착하여야 한다.
8	상황을 전달받은 시설 유지보수관계자는 최대한 빠른 시간 내에 실험실의 정전원인을 찾아 원래의 상태로 복구하고 관련 내용을 기관생물안전관리책임자에게 보고하여야 한다.
9	기관생물안전관리책임자는 정전상태가 해소되어 실험실의 모든 장비 및 시설이 정상 가동함을 확인하고 실험실을 사용할 수 있도록 하여야 한다.
10	기관생물안전관리책임자는 실험실 및 생물안전작업대의 훈증 소독 여부를 결정하고, 실험실의 안정적 운영 가능 여부를 확인 후 장비들을 재가동 시킨다.
11	기관생물안전관리책임자는 연구시설이 하루에 2회 이상 정전이 될 경우, 연구시설의 운전을 중지하고, 전력 및 실험실의 안정적 운영 가능 여부를 확인 후 실험실을 출입할 수 있도록 조치한다.

1)	정전상황을 전달받은 시험연구책임자는 유지보수 전문위탁기관에 연락하여	최대한	빠른 시간 내에 정전된 실험실의 정전원인을 찾아 원래의 상태로 복구하고 관련 내	용을 기관생물안전관리책임자에게 보고하여야 한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 정전상태가 해소되어 실험실의 모든 장비 및 시설이 정상	가동함을 확인하고 실험실을 사용할 수 있도록 하여야 한다.

3)	기관생물안전관리책임자는 실험실 및 생물안전작업대의 훈증 소독 여부를 결정하고,	실험실의 안정적 운영 가능 여부를 확인 후 장비들을 재가동 시킨다.

4)	기관생물안전관리책임자는 연구시설이 하루에 2회 이상 정전이 될 경우, 연구시설의	운전을 중지하고, 전력 및 실험실의 안정적 운영 가능 여부를 확인 후 실험실을 출입	할 수 있도록 조치한다.

5)	유지보수 전문위탁기관은 "사고조사보고서"(유지보수기관 양식)를 작성하고, 공문으로	기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 추후 정전방지대책을 수립한다.

단계	낙뢰, 홍수 등 천재지변의 경우 응급대응 절차
1	연구자는 즉시 모든 활동을 멈춘다.
2	사용 중이었던 가스, 수도 등을 모두 잠그거나 끈다.
3	모든 장비는 안전하게 전원을 끈다.
4	생물안전작업대의 작동이 멈춘 경우에는 실험을 중단하여 에어로졸 또는 위해 기체 등을 발생시키지 않는다. 생물안전작업대의 개구부 창을 닫는다.
5	발생 사고에 대해 시험연구책임자에게 즉시 보고하고 필요한 조치를 받는다. 시험연구책임자는 기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 취급하였던 감염성물질을 고려한 적절한 조치 등을 취한다.

6.3	낙뢰, 홍수 등 천재지변의 경우

1)	천재지변이 종료가 된 후, 기관생물안전관리책임자는 OOO기관시설관계자와 유지보	수 관계자로 하여금	실험실의 모든 장비 및 시설을 점검토록 하여 실험실의 정상	가동 상태를 확인한 후 이를 사용할 수 있도록 하여야 한다.

2)	기관생물안전관리책임자는 실험실 및 생물안전작업대의 훈증 소독 여부를 결정하고,	실험실의 안정적 운영 가능 여부를 확인 후 장비들을 재가동 시킨다.

3)	유지보수 전문위탁기관은 "사고조사보고서"(유지보수기관 양식)를 작성하고, 공문으로	기관생물안전관리책임자에게 보고한다.

6.4	밀폐구역 누기의 경우

1)	연구시설 내 밀폐실험실 차압 이상이 발견될 경우, OOO기관시설관계자, 기관생물안	전관리책임자 및 유	지보수전문위탁기관에 연락한다.

2)	유지보수 전문위탁기관은 OOO기관시설관계자와 함께 차압 이상 유무를 확인 후 공	기조화설비 및 누기에 대한 유지 보수를 수행한다.

3)	유지보수 전문위탁기관은 OOO기관시설관계자와 협의하여 "사고조사보고서"(유지보수	기관 양식)를 작성하고, 공문으로 기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 추후 방지대	책을 수립하도록 한다.

6.5	온ㆍ습도 및 압력 이상의 경우

1)	연구시설 내 온ㆍ습도에 이상이 발견될 경우, OOO기관시설관계자, 기관생물안전관리	책임자 및 유지보수전문위탁기관에 연락한다.

2)	유지보수전문위탁기관 및 OOO기관시설관계자는 중앙통제 모니터를 통하여 환기횟	수, 배기온도, 코일이상 유무 등을 확인한 후 공기조화설비에 대한 유지보수를 수행	한다.

3)	유지보수 전문위탁기관은 "사고조사보고서"(유지보수기관 양식)를 작성하고, 공문으로	기관생물안전관리책임자에게 보고한다.

7.	사례별 응급대응 절차 (유해물질유출 경우)

7.1	실험구역 내에서 감염성물질 등이 유출된 경우

단계	실험구역 내에서 감염성물질 등이 유출된 경우 응급대응 절차
유출 확산 방지	사고 발생 직후, 종이타월이나 소독제가 포함된 흡수물질 등으로 유출물을 조심스럽게 천천히 덮어 에어로졸 발생 및 유출 부위가 확산되는 것을 방지한다.
전파 및 보고	공기 중의 감염성물질 흡입을 막기 위해 재빨리 사고 장소로부터 벗어난다. 사고 사실을 유출지역 시험연구종사들에게 알려 사고구역을 벗어나게 하고, 문을 닫아 밖으로의 유출을 막는다. 문에 [표시 ]위험물질유출표시를 부착하고, 기관생물안전관리책임자에게 보고한 후 지시에 따른다.
세척	오염된 실험복 등은 제거하고 손 등의 노출된 신체부위는 소독제로 세척한다. 연구시설 밀폐구역을 나오기 전 샤워실에서 샤워하여 잠재적인 병원체 오염을 제거하도록 한다.
보호구 착용	비상처리반은 에어로졸이 발생하여 확산될 수 있으므로 가라앉을 때까지 그대로 20-30분 정도 방치한 후 전동식 호흡보호구 등 또는 일회용 보호구(장갑, 가운, 안면보호구)를 착용하고 사고지역으로 돌아간다.
위험요소 제거	핀셋을 사용하여 깨진 유리조각, 주사기 바늘 등을 집고, 손상성 의료폐기물 전용용기에 넣는다.
소독제 처리	병원체정보에 따른 유출된 모든 구역의 미생물을 비 활성화시킬 수 있는 소독제를 유출부위의 가장자리부터 살포하여 중앙으로 침투할 수 있도록 처리하고 20~30분 이상 그대로 둔다.
오염장소 소독	소독제를 사용하여 유출된 모든 구역을 닦는다. ※ 필요 시, 오염된 모든 구역을 소독제를 뿌린 후 건조될 때까지 기다린다. 혹은 10분 정도 방치 후에 닦는다.
멸균	청소가 끝난 후 처리작업에 사용했던 모든 기구를 의료폐기물 전용용기에 넣은 후에 착용한 보호구도 의료폐기물 용기에 담아 멸균 처리한다. 재사용할 경우 소독 및 세척한다.
오염부위 세척	착용했던 개인보호구는 의료폐기물 전용용기에 넣어 폐기하고, 전동식 호흡보호구는 재사용을 위하여 소독ㆍ세척한다. 유출물 처리 후 노출된 신체부위는 비누와 물을 사용하여 세척하고, 필요한 경우 소독 및 샤워 등으로 오염을 제거한다.
물품 교체	사용한 spill kit 등은 새로운 물품으로 다시 비치한다.

사고 지역에 있는 시험연구종사자에게 알리고 즉시 시험연구책임자에게 보고한다. 필요시 시험연구종사자는 연구시설 내부에 비치된 스필키트(Biological spill kit)를 이용하여 초기 대응한다. 스필에 의한 병원체 노출 사고 발생의 경우 기관생물안전관리책임자는 연구시설 관리 관계자들이 포함된 비상처리반을 구성하여 밀폐구역 내 병원체 제거 또는 제독 등 필요한 조치를 수행한다.

※	유출된 병원체에 따라서, 밀폐실험실에 대하여 유지보수용역업체에게 알려 훈증소독	조치를 수행하게 하고, 기관생물안전관리책임자의 안전 여부 확인 후 사용토록 한다.

7.2	생물안전작업대 내에서 감염성 물질 등이 유출된 경우

사고 지역에 있는 시험연구종사자에게 알리고 즉시 연구시설 담당자 및 시험연구책임자에게 보고한다. 필요시 시험연구종사자는 연구시설 내부에 비치된 스필키트(Biological spill kit)를 이용하여 초기 대응한다. 스필에 의한 병원체 노출 사고 발생의 경우 기관생물안전관리책임자는 연구시설 관리 관계자들이 포함된 비상처리반을 구성하여 밀폐구역 내 병원체 제거 또는 제독 등 필요한 조치를 수행한다.

단계	응급대응 절차
유출 확산 방지	사고 발생 직후, 종이타월이나 소독제가 포함된 흡수물질 등으로 유출물을 조심스럽게 천천히 덮어 에어로졸 발생 및 유출 부위가 확산되는 것을 방지한다.
전파 및 보고	생물안전작업대의 팬을 가동 시킨 후 개구부 창을 내리고, 공기 중의 감염성물질 흡입을 막기 위해 재빨리 사고 장소로부터 벗어난다. 사고 사실을 유출지역 연구활동종사자들에게 알려 사고구역을 벗어나게 하고, 문을 닫아 밖으로의 유출을 막는다. [표시 ]위험물질유출표시를 부착하고, 기관생물안전관리책임자에게 보고한 후 지시에 따른다.
세척	오염된 실험복 등은 제거하고 손 등의 노출된 신체부위는 소독제로 세척한다. 연구시설 밀폐구역을 나오기 전 샤워실에서 샤워하여 잠재적인 병원체 오염을 제거하도록 한다.
보호구 착용	비상처리반은 에어로졸이 발생하여 확산될 수 있으므로 가라앉을 때까지 그대로 20-30분 정도 방치한 후 전동식 호흡보호구 등 또는 일회용 보호구(장갑, 가운, 안면보호구)를 착용하고 사고지역으로 돌아간다.
위험요소 제거	핀셋을 사용하여 깨진 유리조각, 주사기 바늘 등을 집고, 손상성 의료폐기물 전용용기에 넣는다.
유출물 처리	장갑, 호흡보호구 등 개인보호구를 착용하고, 병원체정보에 따른 효과적인 소독제를 사용하여 생물안전작업대 벽면, 작업 표면 및 이용한 장비들에 뿌리고 적정 시간 동안 방치해 둔다.
소독제 처리	병원체정보에 따른 유출된 모든 구역의 미생물을 비 활성화시킬 수 있는 소독제를 유출부위의 가장자리부터 살포하여 중앙으로 침투할 수 있도록 처리하고 20~30분 이상 그대로 둔다. 종이타월을 사용하여 소독제와 유출 물질을 치우고 생물안전작업대 표면을 닦아낸다.
UV램프 작동	생물안전작업대 내의 모든 기기들은 빼내기 전에 생물안전작업대 UV 램프를 켜서 기기 표면을 살균처리 한다.
멸균	청소가 끝난 후 처리작업에 사용했던 모든 기구를 의료폐기물 전용용기에 넣은 후에 착용한 보호구도 의료폐기물 용기에 담아 멸균 처리한다. 재사용할 경우 소독 및 세척한다.
오염부위 세척	착용했던 개인보호구는 의료폐기물 전용용기에 넣어 폐기하고, 전동식 호흡보호구는 재사용을 위하여 소독ㆍ세척한다. 유출물 처리 후 노출된 신체부위는 비누와 물을 사용하여 세척하고, 필요한 경우 소독 및 샤워 등으로 오염을 제거한다.
물품 교체	사용한 spill kit 등은 새로운 물품으로 다시 비치한다.

※	만일 유출된 감염성물질이 생물안전작업대 안으로 흘러들어간 경우, 생물안전작업대	를 포함한 밀폐실험실에 대하여 유지보수용역업체에게 알려 훈증소독조치를 수행하	게 하고, 기관생물안전관리책임자의 안전 여부 확인 후 사용토록 한다.

7.3	원심분리기 내에서 감염성 물질 등이 유출된 경우

사고 지역에 있는 시험연구종사자에게 알리고 즉시 연구시설 담당자 및 시험연구책임자에게 보고한다. 필요시 시험연구종사자는 연구시설 내부에 비치된 스필키트(Biological spill kit)를 이용하여 초기 대응한다. 스필에 의한 병원체 노출 사고 발생의 경우 기관생물안전관리책임자는 연구시설 관리 관계자들이 포함된 비상처리반을 구성하여 밀폐구역 내 병원체 제거 또는 제독 등 필요한 조치를 수행한다.

단계	응급대응 절차
유출 확산 방지	사고 발생 직후, 종이타월이나 소독제가 포함된 흡수물질 등으로 유출물을 조심스럽게 천천히 덮어 에어로졸 발생 및 유출 부위가 확산되는 것을 방지한다.
전파 및 보고	원심분리기의 작동을 중지시키고, 공기 중의 감염성물질 흡입을 막기 위해 재빨리 사고 장소로부터 벗어난다. 사고 사실을 유출지역 시험연구종사자들에게 알려 사고구역을 벗어나게 하고, 문을 닫아 밖으로의 유출을 막는다. [표시 ]위험물질유출표시를 부착하고, 기관생물안전관리책임자에게 보고한 후 지시에 따른다.
세척	오염된 실험복 등은 제거하고 손 등의 노출된 신체부위는 소독제로 세척한다. 연구시설 밀폐구역을 나오기 전 샤워실에서 샤워하여 잠재적인 병원체 오염을 제거하도록 한다.
보호구 착용	비상처리반은 에어로졸이 발생하여 확산될 수 있으므로 가라앉을 때까지 그대로 20-30분 정도 방치한 후 전동식 호흡보호구 등 또는 일회용 보호구(장갑, 가운, 안면보호구)를 착용하고 사고지역으로 돌아간다.
위험요소 제거	핀셋을 사용하여 깨진 유리조각, 주사기 바늘 등을 집고, 손상성 의료폐기물 전용용기에 넣는다.
유출물 처리	장갑, 호흡보호구 등 개인보호구를 착용하고, 병원체정보에 따른 효과적인 소독제를 사용하여, 오염된 원심분리기의 표면을 소독 후, 로터를 포함한 원심분리기 내부를 소독제를 뿌리고 적정 시간 동안 방치해 둔다.
소독제 처리	병원체정보에 따른 유출된 모든 구역의 미생물을 비 활성화시킬 수 있는 소독제를 유출부위의 가장자리부터 살포하여 중앙으로 침투할 수 있도록 처리하고 20~30분 이상 그대로 둔다. 종이타월을 사용하여 소독제와 유출 물질을 치우고 원심분리기기 표면과 내부를 닦아낸다.
멸균	필요시 로터를 고압증기멸균기를 사용하여, 멸균처리하여, 재사용을 한다. 청소가 끝난 후 처리작업에 사용했던 모든 기구를 의료폐기물 전용용기에 넣은 후에 착용한 보호구도 의료폐기물 용기에 담아 멸균 처리한다. 재사용할 경우 소독 및 세척한다.
오염부위 세척	착용했던 개인보호구는 의료폐기물 전용용기에 넣어 폐기하고, 전동식 호흡보호구는 재사용을 위하여 소독ㆍ세척한다. 유출물 처리 후 노출된 신체부위는 비누와 물을 사용하여 세척하고, 필요한 경우 소독 및 샤워 등으로 오염을 제거한다.
물품 교체	사용한 spill kit 등은 새로운 물품으로 다시 비치한다.

※	유출된 병원체에 따라서, 밀폐실험실에 대하여 유지보수용역업체에게 알려 훈증소독	조치를 수행하게 하고, 기관생물안전관리책임자의 안전 여부 확인 후 사용토록 한다.

7.4	감염성물질 등이 신체에 직접 노출되었을 때

7.4.1	안면부에 접촉되었을 때

단계	안면부에 접촉되었을 때 응급대응 절차
1	눈에 물질이 튀거나 들어간 경우, 즉시 eye washer 또는 흐르는 깨끗한 물, 눈세척제를 사용하여 15분 이상 세척하고 눈을 비비거나 압박하지 않도록 주의한다. ※ 눈세척제 사용시 실험실내 일정 장소에서 사용하고 세척에 사용된 눈세척제, 티슈 등은 의료폐기물로 처리한다. 사용 후 소독제(락스 등)로 주위를 소독 하고 정리한다.
	① 세안장치로부터 분사되는 물 또는 눈 세척제는 직접 눈을 향하게 하는 것 보다는 코의 낮은 부분을 향하도록 한다. ② 눈꺼풀은 강제적으로 열리도록 하여 눈꺼풀 뒤쪽 면도 효과적으로 세척할 수 있도록 한다. ③ 코의 바깥쪽에서 귀 쪽으로 세척하여 씻겨진 물질이 역으로 눈 안쪽이나 오염되지 않는 눈으로 들어가지 않도록 한다. ④ 세안장치의 분사되는 물로 최소 15분 이상 세척한다. ⑤ 피해를 입은 눈은 구급함 내 깨끗하고 살균된 거즈로 덮어 보호한다.
2	필요한 경우 비상샤워장치를 이용하여 전신을 세척한다. ※ 비상샤워장치를 사용할 경우 주위를 통제하고 접근을 금지한다. 사용 후 소독제(락스 등)로 주위를 소독하고 정리한다.
3	발생 사고에 대해 시험연구책임자에게 즉시 보고하고 필요한 조치를 받는다. 시험연구책임자는 기관생물안전관리책임자와 의료관리자에게 보고하고, 취급하였던 감염성물질을 고려한 적절한 의학적 조치 등을 취한다.

7.4.2	안면부를 제외한 신체에 접촉되었을 때

단계	안면부를 제외한 신체에 접촉되었을 때 응급대응 절차
1	착용한 개인보호구를 소독제 등을 이용하여 개인보호구를 제독한 후, 출갱의실에서 신속히 탈의한다.
2	출갱의실 옆 샤워실 실에서 물로 세척하거나 오염 부위를 소독한다.
3	발생 사고에 대해 시험연구책임자에게 즉시 보고하고 필요한 조치를 받는다. 시험연구책임자는 기관생물안전관리책임자와 의료관리자에게 보고하고, 취급하였던 감염성물질을 고려한 적절한 의학적 조치 등을 취한다.

7.4.3	주사기에 찔렸을 때

단계	주사기에 찔렸을 때 응급대응 절차
1	주사기에 찔린 부위에 착용하고 있는 보호구를 신속히 벗는다.
2	즉시 찔린 부위 주변을 압박, 방혈한다.
3	5분 이상 충분히 흐르는 물 또는 생리식염수로 세척한다.
4	발생 사고에 대해 시험연구책임자에게 즉시 보고하고 필요한 조치를 받는다. 시험연구책임자는 기관생물안전관리책임자와 의료관리자에게 보고하고, 취급하였던 감염성물질을 고려한 적절한 의학적 조치 등을 취한다.

7.4.4	감염성물질 등을 섭취한 경우

단계	감염성물질 등을 섭취한 경우 응급대응 절차
1	즉시 개인보호구를 벗고 즉각적인 의료적 처치가 가능하도록 의료관리자에게 연락하여 조치에 따르고 의료기관으로 이송한다.
2	섭취한 물질과 사고 사항을 즉시 기록하여 치료에 도움이 될 수 있도록 관련자에게 전달한다.

7.5	화학물질이 유출된 경우

단계	화학물질이 유출된 경우 응급대응 절차
전파	즉시 주변에 사고사실을 알려 화학물질 유출장소로 다른 연구활동종사자의 접근을 제한한다.
보호구 착용	적합한 개인보호구(보호복, 보호장갑, 고글, 호흡보호구)를 착용한다.
확산방지	유출된 지점 주위를 pillow로 둘러 화학물질이 더이상 퍼지지 않도록 한다.
중화	화학물질 위로 kit 내에 있는 흡수제 분말(sorbent powder)을 뿌린다. ※ 화학물질 중화역할 및 화학물질 잔여에 의한 막이 생기지 않게 한다.
흡착	흡수포(pad)를 화학물에 올려 흡착시킨다.
위험요소 제거	비와 쓰레받이로 병조각들을 모아 거둔다.
폐기	착용한 보호구 및 사용된 물품과 폐기물을 폐기물 봉투에 담아 배출한다.

단계	화학물질 등이 신체에 직접 노출되었을 때 응급대응 절차
1	화학약품에 의하여 오염된 의류는 탈의하여 흐르는 물로 씻어낸다.
2	몸에 화학약품이 묻었을 경우 적어도 15분 이상 흐르는 물(비상샤워장치 또는 주위 개수대)에 씻어내고, 조금 묻은 경우 응급조치를 한 후 전문의에게 진료를 받는다. 많은 부위에 묻었다면 구급차를 부르도록 한다.
3	얼굴에 화학약품이 튀었을 경우 눈세척제 또는 세안장치를 사용하여 15분 이상 세척한다.

7.6	화학물질 등이 신체에 직접 노출되었을 때

8.	사례별 응급대응 절차 (실험동물)

8.1	실험동물에 물렸을 경우

비상대응은 취급하는 병원체와 동물실험에 따라서 응급처치를 하고, 추후 조치는 의료관리자의 지시에 따른다.

구분	실험동물에 물렸을 경우 응급대응 절차
일반	실험동물에 물리거나 할퀴었을 경우 상처부위 주변을 압박하여 약간의 피를 짜낸 다음 70% ethanol 또는 기타 소독제(povidone-iodine, boric acid 등)로 소독한다.
랫드	고초균에 효력이 있는 항생제의 투여가 필요하다. 이는 랫드 bite fever 등을 조기 예방하기 위함이다.
고양이	원인불명의 피부질환 발생우려가 있으므로 반드시 소독한다.
개	광견병 예방 접종 여부를 확인한다.
비인간 영장류	Herpes B virus에 의한 뇌척수염이 발병할 수 있으므로, 즉시 환부를 소독하고, 병원에 방문하여 치료를 받아야 한다. ※ 비인간 영장류를 사육하는 경우 tuberculosis의 위험성이 있으므로, 신규직원은 반드시 X-ray 촬영 후 결핵 유무에 대해 의사의 소견서를 제출하여야 하며, 연간 1회 이상 꾸준히 결핵검사 및 항체가 검사를 수행해야 한다.

8.2	실험동물의 탈출 경우

동물실험실은 동물탈출방지를 위한 “트랩”, “탈출방지턱”, “팬스” 등을 실험동물에 따라서 설치한다. 동물포획전용장갑, 포획장비, 개인보호구를 착용 한 후, 탈출한 동물을 포획한다. 탈출한 동물을 포획한 후, 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 동물을 계속 사용할지 또는 안락사를 시킬지 여부와 탈출한 동물의 실험실, 사육장비 및 기타 공간의 이상유무 확인과 소독 여부를 결정한다.

구분	실험동물의 탈출 경우 응급대응 절차
마우스/랫드/기니픽	시험연구종사자가 실험 중에 생물안전작업대 내에서 탈출 시, 실험동물을 사육케이지로 넣어서 다시 사육하고, 그 외의 장소까지 탈출한 경우는 바로잡아서 임시로 사육케이지에 보관하고, 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자의 지시에 따른다.
	CCTV나 관찰창 등으로 동물의 탈출 여부를 확인한다. 동물이 탈출하면 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 2인1조로 포획 및 사육장에 넣는 작업을 실시한다.
페렛/토끼/닭/오리/미니피그	2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험 중 동물의 탈출을 대비한다.
	CCTV나 관찰창 등으로 동물의 탈출 여부를 확인한다. 동물이 탈출하면 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 2인1조로 포획 및 사육장에 넣는 작업을 실시한다.
개	2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험 중 동물의 탈출을 대비한다.
	CCTV나 관찰창 등으로 동물의 탈출 여부를 확인한다. 동물이 탈출하면 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 2인1조로 포획 및 사육장에 넣는 작업을 실시한다.
비인간 영장류	2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험 중 동물의 탈출을 대비한다.
	CCTV나 관찰창 등으로 동물의 탈출 여부를 확인한다. 동물이 탈출하면 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 2인1조로 과일 등의 먹이로 유인하여 포획 및 사육장에 넣는 작업을 실시한다.
소/돼지	2인1조로 실험하는 것을 원칙으로 하여, 실험 중 동물의 탈출을 대비한다.
	CCTV나 관찰창 등으로 동물의 탈출 여부를 확인한다. 동물이 탈출하면 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자에게 보고하고, 2인1조로 포획 및 사육장에 넣는 작업을 실시한다.

9.	사례별 응급대응 절차 (인명사고관련)

9.1	화상 대처요령

화염에 의한 국소 부위의 경미한 화상

1) 통증과 부풀어 오르는 것을 줄이기 위하여 밀폐구역 내부복도 또는 락커룸에 비치     된 구급함에서 콜드팩으로 화상부위를 식힌다.

2) 소독 후 화상연고를 바르고, 강제로 물집을 터트리지 않는다.

중증화상

1) 환자를 실온에서 젖은 천이나 수건으로 싸준다.

2) 화상부위를 씻지 말고, 옷이나 오염물질 등을 제거하지 않는다.

3) 환자를 눕히고 안정된 상태를 유지한다.

4) 응급구조대에 연락하여 즉시 전문가의 치료를 받는다.

눈 화상

1) 다량의 물을 흘려보낸 후 깨끗한 젖은 수건, 거즈 등으로 눈을 덮어두고, 즉시

구급차를 부르도록 한다.

전기에 의한 화상

1) 전기에 의한 화상은 피부표면으로 증상이 나타나지 않기 때문에 피해정도를 알아

내기가 힘들뿐 아니라 심한 합병증을 유발할 수 있으므로 즉시 의료진의 치료를

받는다.

9.2	출혈 발생 시 대처요령

9.2.1	외부출혈

단계	외부출혈 응급대응 절차
1	환자를 반듯이 눕히고, 신속하게 주위에 도움을 요청한다.
2	상처부위에 직접 압박(거즈나 깨끗한 천으로 상처부위를 누르고 붕대를 감싼다)을 가하며, 지혈대는 마지막 방법으로 사용한다.
3	가능하면 소독된 붕대를 사용하도록 하고, 위생용 휴지 및 깨끗한 손수건 또는 손을 직접 이용할 수도 있다.
4	5~15분 동안 지속적으로 출혈부위에 직접 강한 압박을 가한다.(대부분의 출혈은 수분 내에 멎는다.)
5	출혈부위가 손, 팔, 발 및 다리 등일 때에는 이 부위를 심장보다 높게 위치시켜 중력을 이용하여 출혈을 줄일 수 있다.

9.2.2	내부출혈

단계	내부출혈 응급대응 절차
1	기침과 토사물 또는 대변, 소변에 혈액이 섞여 있거나 점액성의 검붉은 대변이 나올 경우에는 즉시 의료기관의 검사를 받는다.
2	환자를 반듯하게 눕힌 후 깊게 숨을 쉬게 하고, 마음의 안정을 찾도록 안심시킨다.
3	의사의 진찰이 있기 전까지 어떤 약물이나 음식물을 섭취하지 못하도록 한다.
4	신속히 응급구조대에 도움을 요청한다.

9.3	두부 상해

단계	두부상해 응급대응 절차
1	상처가 심하지 않더라도 출혈은 심할 수 있으며, 두개골 골절에 의한 출혈을 멈추게 할 시 특별한 주의를 요한다.
2	두개골 조각들이 뇌를 압박하지 않도록 극도로 주의하면서 상처 부위에 압박을 가한다.
3	두부 상해 시 목 부위의 상해도 의심하고, 목과 머리를 고정시킨다.
4	중요한 증상들을 관찰하지 못할 수 있으므로 술이나 약물을 삼간다.

9.4	감전

단계	감전 응급대응 절차
1	전기가 소멸했다는 확신이 있을 때까지 감전된 사람을 건드리지 않는다.
2	플러그, 회로 폐쇄기 및 퓨즈상자 등의 전원을 차단한다.
3	감전된 사람이 철사나 전선 등을 접촉하고 있다면 마른 막대기 등을 이용하여 이를 멀리 치운다.
4	환자가 호흡하고 있는지 확인한다. 만약 호흡이 약하거나 멈춘 상태인 경우 즉시 인공호흡을 수행한다.
5	응급구조대에 도움을 요청한다.
6	감전된 환자를 담요, 외투 및 재킷 등으로 덮어서 따뜻하게 한다.
7	의사에게 검진을 받을 때까지 감전된 사람이 음료수나 음식물 등의 섭취를 금한다.

9.5	약물 섭취

단계	약물 섭취 응급대응 절차
1	의식이 있는 사람에 한하여 입안 세척 및 많은 양의 물 또는 우유를 마시게 하되 억지로 구토를 시키지 않는다.
2	독극물을 섭취한 경우, 독극물 치료센터에 도움을 청하고 부근에 이러한 기관이 없다면 응급구조대를 부른 후 의심되는 독극물의 종류와 용기를 가지고 간다.
3	독극물 중독자가 의식불명인 경우, 환자의 호흡을 확인하여 호흡곤란의 경우에는 머리를 뒤로 기울여 인공호흡을 실시하되, 구강 대 구강 인공호흡을 행한다. 이때 환자를 자극하지 않도록 주의하고, 즉시 응급 구조대에 도움을 요청한다.
4	독극물 중독자가 구토하는 경우, 질식하지 않도록 구부려서 옆으로 눕게 한다.

환자가 아래와 같은 통증을 느끼면 즉시 응급조치를 취한다.

• 가슴에 심한 통증

• 가슴에서 팔, 목 및 턱으로 전파되는 통증

• 발한, 오심, 구토 및 숨이 가빠짐

• 어깨에서 등으로 퍼지는 통증

9.6	심장마비

심장마비 환자의 생명을 위협하는 2가지 증세

• 호흡이 느려지거나 멈춤

• 심장박동이 느려지거나 멈춤

환자가 호흡이 멈춘 경우

즉시 인공호흡을 실시하고 응급조치를 위한 도움을 구한다.

경동맥에서 맥박이 느껴지지 않는 경우

능숙한 전문가가 인공호흡 및 심폐소생술을 시행한다.

9.7	질식

사고자가 말을 하며, 기침 및 호흡을 할 수 있으면 그냥 지켜본다. 질식 정도가 차도 없이 계속되면 응급의료지원을 요청한다.

의식 여부에 따라 즉시 다음의 조치를 취하고, 나머지 사람이 응급의료지원을 요청한다.

9.7.1	의식이 있는 경우

단계	의식이 있는 경우 응급대응 절차
1	환자를 세우거나 앉힌다.
2	환자의 머리를 낮추고 환자의 옆 또는 뒤에 서서 한 손으로 환자의 가슴을 지탱한다.
3	견갑골(목덜미 아래쪽의 날개 뼈) 사이로 4회 타격을 가한다.
4	환자의 뒤에 서서 환자의 중앙을 팔로 감싼다.
5	양쪽 손을 서로 잡고 위쪽으로 밀어 올리듯 누른다.
6	몇 번 반복한 후 차도가 없으면, 질식 상태가 없어질 때까지 무의식 상태가 되지 않도록 등을 4회 타격하고, 가슴 쪽을 4회 누른다.

9.7.2	무의식 상태의 경우

단계	무의식 상태의 경우 응급대응 절차
1	환자를 똑바로 눕힌 채 인공호흡을 실시한다.
2	환자가 공기를 들이쉬지 않으면, 환자를 움직여 환자의 가슴이 치료자의 무릎에 닿게 한 후 견갑골 사이로 4회 타격을 가한다.
3	환자가 여전히 숨을 쉬지 않으면, 다시 환자를 똑바로 눕힌 채 환자 복부에 양쪽 손을 겹쳐 놓은 후 한쪽으로 치우치지 않게 누른다.

9.8	기타 물질 또는 실험 중 부상을 당했을 경우

1)	발생한 사고에 대하여 시험연구책임자 및 의료관리자에게 즉시 보고하여 필요한 조	치를 받는다.

2)	시험연구책임자는 기관생물안전관리책임자 또는 의료관리자에게 보고하고 취급하였	던 감염성물질을 고려한 적절한 의학적 조치 등을 하도록 한다.

9.9	시험연구종사자 건강 이력 카드 관리

의료관리자는 생물안전 연구시설은 출입하는 시험연구종사자의 건강 이력 카드를 관리하고, 환자가 발생할 경우, 건강 이력 카드를 이송한 의료기관에 제공하여, 신속한 응급처치가 될 수 있도록 한다.

성 명:	백신접종 여부
소 속:	병력 사항
생년월일:	상시 복용약
성 별:	임신 여부
연 락 처:	기타 참고 사항

10.	유출물 처리 키트(Spill kit) 보유제품에 따라 수정

10.1	사고 상황에 대한 조치

병원성 미생물 및 감염성물질에 관련된 연구를 수행하는 각각의 실험실에는 생물학적 유출물 처리함(biological spill kit) 등을 비치하여 발생할 수 있는 유출사고에 대비하도록 한다. 생물학적 유출물 처리함은 유출사고에 빠르게 대처할 수 있도록 필요한 물품들로 구성되어 있다. 기본 물품으로 소독제, 멸균용 봉투, 종이타월, 소독제, 멸균용 봉투, 종이타월, 개인보호구(일회용 장갑, 보안경, 마스크 등) 및 깨진 유리조각을 집을 수 있는 핀셋, 빗자루 등 의 도구도 필요하다. 또한 화학적 유출물 처리함(chemical spill kit) 등을 함께 구비할 수 있다.

10.2	생물학적 유출물 처리 키트

10.2.1	키트 구성품 (예시)

10.2.2	사용절차 (예시) (유출병원체에 따라서 적절한 개인보호구 착용)

①	앞치마→마스크→장갑 순으로 보호구를 착용한다.

②	분말 응고제를 유출물질에 도포하여 응고시킨다.(최대 10분소요)

* 약 O 리터의 유출물 처리 가능

③	쓰레받이로로 응고된 물질을 쓸어 담아 폐기물 봉투에 담는다.

④	오염된 부위는 소독제를 사용하여 닦는다.

⑤	모든 작업 후 처리에 사용한 보호구는 탈의하여(장갑->마스크->앞치마) 폐기물 봉투	에 담는다.

⑥	핸드타올로 손을 닦는다.

⑦	폐기물 봉투 및 사용한 물품은 멸균 처리한다.

10.3	화학물질 처리 키트(Chemical Spill kit) 보유제품에 따라 수정

10.3.1	키트 구성품 (예시)

10.3.2	사용절차 (예시) (유출병원체에 따라서 적절한 개인보호구 착용)

11.	비상샤워장치 및 눈세척제 사용법 보유제품에 따라 수정

11.1	비상샤워장치 사용법 (예시)

11.2	눈세척제 사용법 (예시)

①	해당 세척제를 뽑는다.

②	화살표 방향으로 뚜껑을 돌린다.

③	고개를 들어 세척제를 눈에 고정시킨다.

④	15분간 세척제를 흘려준다.

⑤	눈에 이물질이 들어갔을 경우 고개를 숙여 세척제를 눌러줌으로 압력으로 이물질을	제거한다.

12.	실험실사고 조사 기록 작성, 보고, 보관, 조치

12.1	생물안전 사고 조사, 보고 및 조치

1)	시험연구책임자는 실험실 안전사고가 발생한 경우 즉시 기관생물안전관리책임자자	에게 통보하고, 사고발생 O일 이내에 [서식  ] 생물안전사고보고서를 작성하여, 기	관생물안전관리책임자에게 보고한다.

2)	안전사고 발생현장은 특별한 경우를 제외하고, 사고원인 조사가 끝날 때까지 원상	태로 보존하여야 하며, 기관생물안전관리책임자의 지시 없이 변경 또는 훼손하여서	는 아니 된다.

12.2	사고 조사 처리 절차 및 책임, 권한

1)	생물안전사고 조사는 생물안전관리부서, 기관시설관계자, 안전관련 관리자로 구성	된 대책반을 구성하여 수행 한다.

2)	생물안전 사고처리 대책반은 기관생물안전관리책임자가 OOO기관장에게 요청하여	승인 후 구성 한다.

3)	대책반은 보고체계 유지를 위하여 기관생물안전관리책임자를 대책반 책임자로 지	정한다.

4)	생물안전사고 조사를 위하여 대책반은 OOO기관 내부 및 외부 전문가을 활용하여	근본 원인을 파악할 수 있다.

5)	대책반은 사고 처리 완료 후 OOO기관장 및 기관생물안전위원회에 보고서를 제출	하고, 대책만을 해체한다.

12.3	시정조치 및 예방 활동

12.3.1	시정조치

실험실안전사고의 발생, 안전점검 결과에 따른 3회 경고누적 또는 시정을 하지 않는 경우 기관생물안전관리책임자는 다음 각 호와 같이 조치한다.

1)	실험실안전사고가 발생한 경우:

사고경위서 제출, 시정 및 경고조치, 교육 및 훈련, 실험실의 사용제한 등

2)	경고누적 및 미시정의 경우:

경위서 제출, 실험실의 사용제한 등

12.3.2	기관장보고

기관생물안전관리책임자는 시정조치사항에 대하여 OOO기관장 및 기관생물안전위원회에 보고하고 그 자료를 유지·관리하여야 한다.

12.3.3	예방 활동

기관생물안전관리책임자는 사고경위 및 사고 원인 등을 조사하여 동종재해의 재발을 방지하기 위한 대책을 수립하고, 사고 조사 후 사고의 반복을 피하고 잠재적 악영향을 최소화시킬 수 있도록 사고결과에 대한 피드백을 통하여 생물안전 확보의 지속적 개선을 수행한다.

12.4	고위험병원체 사고보고

1)	고위험병원체를 취급하거나 보존하는 과정에서 사고로 인하여 피해가 발생한 경우	에는 응급처치 및 비상조치를 이행하고 그 결과를 「고위험병원체 안전관리지침, 질	병관리본부」 별지 제8호서식 “고위험병원체 생물안전 사고 보고서”에 의거 질병관	리본부장에게 제출한다.

2)	고위험병원체의 유실, 도난, 오용, 전용, 무단 접근 또는 고의적 무단 방출이 발생한	경우에는 즉시 관할지역 경찰서와 질병관리본부 생물테러대책반에 신고한다.

12.5	실험 감염 사고에 대한 기록 작성, 보고 및 보관 (권장)

시설 사용 및 운영과정 중 발생한 실험 감염사고에 대하여 조사하고 그 기록을 작성보관해야 한다. 안전관리 계획을 수립하고 이행하도록 한다. 만일 실험실 감염 사고가 발생하였다면  생물안전사고 및 응급조치에 따라 대응하고 사고의 경위와 처리과정, 예방에 대한보고서를 작성하여 이를 기관생물안전위원회에 보고하며 그 기록을 5년간 보관한다.

13.	비상탈출 동선

13.1	동선

비상 탈출 동선 도면

호실	실명	구역

호실	실명	구역

13.2	비상탈출 절차 및 조치사항 (예시)

13.2.1	실험실

실명(호실)	단계	절차

13.2.2	동물실험실

실명(호실)	단계	절차

13.2.3	대동물실험실 (해당시)

실명(호실)	단계	절차

14.	비상 게시물

OOO기관생물안전관리책임자는 다음의 비상 게시물을 각 실험실과 주요통로 등에 게시한다.

1)	OOO기관 비상연락체계도

2)	사례별 응급대응 절차

3)	구급의약품 표지

4)	비상구 표지

5)	비상샤워기 표지

6)	세안장치 표지

7)	소화기 표지

8)	스필키트 표지

9)	기타 생물안전에 필요한 비상 게시물 등

[서식   ]

(장비명) (장비번호: ) 사용대장
사용 일시	사용목적	사용자		확인자
		부 서	성 명	성 명
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

검역 및 군분리 무게 측정 기록지

연구과제명
기관승인번호	IBC:	IACUC:

검역 및 군분리 무게 비교
동물종
작성일	년 월 일	작성자	(인)
확인	년 월 일	시험연구책임자	(인)

입수 시		군분리 시		무게증감	비고
동물예비번호	무게	동물번호	무게
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소
				□증가 □감소

[서식   ]

검역 및 순화 기록지

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

연구과제명
기관승인번호	IBC:	IACUC:

입수동물 검역기록
동물입수일	년 월 일	동물입수시간	:
동물종		동물계통
동물수	수컷: /암컷:	주령
동물생산처		동물공급처
검역/순화장소
검사항목	□ 질병검사성적서 [□이상없음, □이상있음( ), □ 성적서없음] □ 동물수송 중 이상유무 청취 [□이상없음, □이상있음( )] □ 동물수송상자 상태 [□이상없음, □이상있음( )] □ 동물의 외관 상태 – 영양상태, 피모, 눈, 입, 코, 사지, 꼬리 등 [□이상없음, □이상있음( )]
비고

입수동물 순화 기록
동물예비번호	순 화 일 차 (정상: O, 비정상: X)							판정
	1	2	3	4	5	6	7
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
								□합격, □불합격
월/일	/	/	/	/	/	/	/	/
관찰자성명								실험동물관리자
서명

시험연구종사자	년 월 일 (인)
실험동물관리자	년 월 일 (인)

[서식   ]

고압증기멸균기 (장비번호: ) 사용대장
사용 일시	멸균대상 (출처: 실 호)	사용자		확인자
		부 서	성 명	성 명
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분
20 . . . 시 분 ~ 시 분

[서식   ]

동물운송기록지

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

연구과제명
기관승인번호	IBC:	IACUC:

동물운송 확인
동물명		성별 / 마리수
생산처		납품처
동물납품일자		운송담당자	(인)
운송방법		차량번호
운송시간	년 월 일 시 분 ~ 년 월 일 시 분
해외운송경우	년 월 일 (출발공항: ) ~ 년 월 일 (도착공항: )
운송상태
비고

시험연구종사자	년 월 일 (인)
실험동물관리자	년 월 일 (인)

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

		배양실험 식별 카드
	과제승인번호
	생물안전등급
	배양병원체
	배양조건
	배양기간
	비고

[서식   ]

배양용기 (장비번호:      ) 밀폐도 기록

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

구 분	□ 배양실험 중 정기점검 □ 시설관리 정기점검
연구과제명
기관승인번호		배양기간 : ~

점검일시	상태	사용자		확인자
		부 서	성 명	성 명
20 . . . 시 분	□양호 □불량( )

[서식   ]

배양용기 (장비번호:      ) 밀폐도 기록

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

구 분	□ 배양실험 중 정기점검 □ 시설관리 정기점검
연구과제명
기관승인번호		배양기간 : ~

점검일시	상태	사용자		확인자
		부 서	성 명	성 명
20 . . . 시 분	□양호 □불량( )

비연구자 연구시설 출입신청서 및 승인서 ※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.
다음과 같이 연구시설 출입을 신청합니다. 년 월 일 승인 요청자 소속: 직급: 성명: (서명)
출입목적	□ 유지보수 □ 장비점검 □ 견학 □ 기타 ( )
출입일정	년 월 일 00:00 ~ 00:00
방문시설 (생물안전등급)	실험실 호 ( 등급)
관련장비
출 입 자 사 항
소속	성명	해당부서 생물안전교육이수	비상연락처
		□ 이수 ( 년 월 일) □ 미이수 □ 교육예정 ( 년 월 일)
		□ 이수 ( 년 월 일) □ 미이수 □ 교육예정 ( 년 월 일)
		□ 이수 ( 년 월 일) □ 미이수 □ 교육예정 ( 년 월 일)	`
상기와 같이 연구시설 출입을 승인합니다. 년 월 일 기관생물안전관리책임자 성명: (서명)

[서식   ]

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

생물안전사고보고서

제목 (----에 대한 조사 보고서)

20   .  .  .

○○○○연구원

00 센터 00과

❏ 보고서 작성경위

❏ 사고 개요

-

-

-

(예시)

실험시작                                                                     발병일      1차검사              2차검사            3차검사

↓                                                         ↓       ↓              ↓              ↓

																																												1차 입원					2차 입원

7/3                                                                                            8/12         16  -  18            23          -        28           9/2

❏ 사고자의 실험 행위 조사

○ 사고자 근무 경력：

-

-

○ 실험행위(실험사용장비 및 배양용량 등)

-

- 실험 일지

▪

- 실험 protocol

▪

○ 관련 실험 장비 현황 및 사용

❏ 시설 관련 조사

○

○ 점검결과

-

-

❏ 시험·연구종사자의 교육관련 조사

○

○

❏ 결 론

○

○

1) 실험행위 관련

-

-

2) 시설 관련

-

-

3) 생물안전교육 관련

-

20  .   .   .

보고자：소속 및 이름

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

생물작용제 등의 관리장부

기 관 명
생물작용제등	명 칭
	특 성
	보유경위
	보유일자/수량
	용 도
	보존장비	□ 냉동고(-70℃) □ 냉동고(-20℃) □ 냉장고 □ 액체질소탱크 □ 기타( )
	보존상태	□ 동결건조 □ 고형 또는 액체배지 □ 동결 □ 기타( )
일자	사용내역		수량	보유량 (계)	시험연구 종사자	시험연구 책임자

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

실       호 소독 기록 대장

소독일자	소독방법	소독사유	실시부서	실시자	서명
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분
/ / 시 분

[서식   ]

		실험동물 개체식별 카드
	과제승인번호 (IBC / IACUC )
	투여병원체/투여량		/
	개체번호
	성 별		♂	♀
	동물종/계통
	투여경로
	시험기간
	비고

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[서식   ]

실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서

다음과 같이 실험동물 폐기 확인을 요청합니다.

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

승인요청자:             성명:                    서명:

연구과제명
과제승인번호	IBC:	IACUC:
취급병원체		생물안전등급: 등급
폐기실험동물 종류/수량/무게
실험동물 사육실명	( 호)
실험동물사육기간
실험동물 폐기방법
실험동물 폐기날짜

위와 같이 생물안전연구시설 내 실험동물 폐기를 확인합니다.

년      월      일

기관생물안전관리책임자:   성명:                    서명:

연구시설 물품반(출)입 신청서 및 승인서
다음과 같이 물품 반(출)입을 신청합니다. 년 월 일 승인 요청자 소속: 직급: 성명: (서명)
구분		□ 물품 □ 시료 □ 장비 □ 기타 ( )					□ 반입 □ 반출
품명 (수량)		포장방법	반(출)입 실험실		반(출)입 사유
반(출)입 일정		년 월 일 00:00 ~ 00:00
반(출)입 경로			소독방법	소독시간	유의사항
□ 고압증기멸균기 □ 패스룸 □ 패스박스 □ 기타 ( )
비 고
담 당 자 사 항
소속		성명	생물안전교육이수			비상연락처
			□ 이수 ( 년 월 일) □ 미이수 □ 교육예정 ( 년 월 일)
상기와 같이 물품 반(출)입을 승인합니다. 년 월 일 기관생물안전관리책임자 성명: (서명)
반(출)입 확인	년 월 일
	기관생물안전관리자 성명: (서명)

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

연구시설  실험동물 반입 신청서 및 승인서

다음과 같이 실험동물의 반입을 신청합니다. 년 월 일 승인 요청자 소속: 직급: 성명: (서명)
연구과제명
기관승인번호		IBC :	IACUC :
실험동물정보		□ 실험동물명: (마리: ) □ 실험동물무게: 약 kg/마리
사육실 (생물안전등급)		실험실 호 ( 등급)
사육기간
반입 일정		년 월 일 00:00 ~ 00:00
반입 경로		□ 패스박스 (장비번호: 호) □ 패스룸 (장비번호: 호) □ 기타 ( )
반입유의사항
비 고
시험연구책임자		소속: 직급: 성명: (서명)
상기와 같이 실험동물 반입을 승인합니다. 년 월 일 기관생물안전관리책임자 성명: (서명)
반입 확인	년 월 일
	기관생물안전관리자 성명: (서명)

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

연구시설 안전 교육이수증

□ 신규연구자 □ 연구자 보수 □ 유지보수관계자 □ 기타 ( )
교육이수번호 : 성 명 : 소 속 : 직 급 : 교 육 날 짜 : 20 . . . (교육시간: 시간)
교육 내용	□ 생물위해표지 사인과 라벨 □ 연구시설 출입 절차 □ 개인보호장비 착용 및 탈의 절차 □ 생물안전작업대 사용 방법 □ 고압멸균기 사용 방법 □ 패스박스/패스룸 사용법 □ 공용장비 사용 방법 □ 폐기물 처리 방법 □ 생물안전 사고 인지 및 사고 처리 절차 □ 기타 생물안전 관련 사항
위와 같이 20 년도 OOO기관 생물안전 연구시설 사용을 위한 OOO기관 생물안전교육을 이수하였음을 확인합니다. 20 년 월 일 OOO기관장 (인)

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

연구시설 출입대장 실( 호)
연번	출 입 일 시		출 입 자			출 입 목 적	이용상문제점 (시설고장, 내부환경)	서명
								출입자	시험연구 책임자
	부터	까지	소 속	직급	성명

연구자 연구시설 출입신청서 및 승인서
다음과 같이 연구시설 출입을 신청합니다. 년 월 일 승인 요청자 소속: 직급: 성명: (서명)
※ 첨부서류: 외부연구자 출입의 경우 ‘연구계획서’, ‘연구시설사용 과제 증빙문서’
구분		□ 내부연구자 □ 외부연구자
연구과제명
기관승인번호		IBC :			IACUC :
출입기간		년 월 일 ~ 년 월 일
실험실 (생물안전등급)		실험실 호 ( 등급)
시험연구책임자		소속: 직급: 성명: (서명)
출 입 자 사 항
소속	직급	성명	혈청보관	생물안전교육이수		연락처
			□ 유 □ 무	□ 이수 ( 년 월 일) □ 예정 ( 년 월 일)
			□ 유 □ 무	□ 이수 ( 년 월 일) □ 예정 ( 년 월 일)
			□ 유 □ 무	□ 이수 ( 년 월 일) □ 예정 ( 년 월 일)		`
상기와 같이 연구시설 출입을 승인합니다. 년 월 일 기관생물안전관리책임자 성명: (서명)

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

외부방문자 출입자 대장
신분증번호	소속	성명	방문목적	방문일시	부터(시간)	까지(시간)

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

유전자변형생물체 보관 목록
유전자변형생물체명	관리번호	최초 보관일	보존장소	보존상태	전부 폐기일	취급자		확인자
						부 서	성 명	성 명

일과 후 연구시설 사용신청서 및 승인서
다음 같이 일과 후 연구시설 사용을 신청합니다. 년 월 일 승인 요청자 소속: 직급: 성명: (서명)
구분	□ 야간 연구시설 □ 휴무일 연구시설 □ 기타( )
연구과제명
사용목적
사용일정	년 월 일 00:00 ~ 00:00
사용시설 (생물안전등급)	( 등급)
주요사용장비
상기와 같이 일과 후 연구시설 사용을 승인합니다. 년 월 일 기관생물안전관리책임자 성명: (서명)

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

패스룸 (실번호: ) 사용대장
사용 일시	구분	사용물품 (출처)	훈증소독 여부	사용자		확인자
				부 서	성 명	성 명
20 . . . 시 분 ~ 시 분	반입( ) 반출( )
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[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

패스박스 (장비번호: ) 사용대장
사용 일시	구분	사용물품 (출처)	UV램프 작동확인	훈증소독 여부	사용자		확인자
					부 서	성 명	성 명
20 . . . 시 분 ~ 시 분	반입( ) 반출( )
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[서식   ]

※본 서식은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

혈청관리대장

혈청 관리 대상자	관리번호	최초 취득일	구분1)	보존 장소	보존상태	전부 폐기일

1)구분: 내부연구자, 외부연구자, 유지보수관계자, 기타 등으로 소속에 따른 구분 사항을 기입

[표시 OO] 병원체 보관 열지 마시오 표시

※본 표시는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[표시   ] 생물위해표시

※본 표시는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

<예제 1>

<예제 2>

[표시 OO] 위험물질유출표시

※본 표시는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

출입물에 부착이 되도록 자석부착 처리 권장

[표시 OO] 출입금지표시

※본 표시는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[표지 OO] 구급의약품 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[표지 OO] 비상구 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[표지 OO] 비상대응 조치 요령 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

1) 해당 연구실에서 발생할 수 있는 주요 사고에 대한 비상대응 조치

사항에 대한 요령을 표지로 작성

- 오염물질(병원체 등) 접촉 및 실험실 내 유출사고, 화재 사고 등의

주요 중대 사고에 대한 비상대응 조치를 표지로 작성

2) 위기대응 행동요령, 담당자, 비상연락처 등을 기입

3) 고위험병원체 사고의 경우, 질병관리본부장에게 생물안전사고 보고서

작성 및 보고 사항 필수 기입

[표지 OO] 비상샤워기 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

비상샤워기

[표지 OO] 비상탈출도 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

해당 연구시설의 도면에 비상탈출 경로를 표시

[표지 OO] 생물안전표지판

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

미생물을 포함한 병원체, 감염성물질 등을 취급하는 실험실과 연구시설에서는 생물안전표지판을 연구실 또는 실험구역의 출입문에 배치하여야 한다. 이는 해당 시설에서 취급하는 미생물 및 감염성물질 등 생물안전정보를 공지함으로써 시험·연구종사자, 방문자 및 임시 출입자들에게 생물안전에 관한 사항을 알리고, 생물재해에 대한 경각심을 갖게 할 수 있다. 생물안전에 관한 사항들 중 생물안전표지판에 표시할 수 있는 사항은 아래와 같다.

1.	취급병원체명

해당 연구시설에서 주로 취급하는 미생물 및 감염성물질을 기재한다. 영문명을 기재할 것을 권고하며, 미생물의 경우 종․속명을 기재한다.

2.	요구되는 밀폐수준

실험실책임자는 ｢취급 병원체 명｣에 기재한 미생물 또는 감염성물질 등을 이용하는 실험에 대한 위해성 평가를 실시하고, 이를 토대로 실험실의 밀폐수준을 고려하여 해당 연구시설의 밀폐수준을 결정하고 그에 맞는 시설설치 및 운영기준을 준수하고 관리한다.

3.	연구활동종사자 이름 및 연락처

해당 실험실에서 주로 근무하는 연구활동종사자의 이름 및 연락처를 기재한다.

4.	실험 책임자 이름 및 연락처

해당 실험실의 책임자 및 관련 담당자의 성명 및 연락처를 기재한다. 이는 해당 실험실에서 수행하는 모든 실험에 대한 책임을 지며, 감염사고 등 비상 시 연락을 취할 수 있는 사람이어야 한다.

5.	기타 실험에 요구되는 주의사항

해당 실험실에서 취급 병원체를 이용한 실험을 수행 시에 필요한 개인보호구 및 출입 시 주의사항 등 생물안전을 위해 필요한 기타 사항들을 기재한다.

6.	관리 및 운영

생물안전표지판은 실험실 출입문에 부착하여 해당 실험실에 출입하는 모든 사람들에게 해당 정보를 올바르게 제공할 수 있어야 하며, 기재한 내용 중 변경 사항 등에 대한 수정 및 지속적인 관리가 필요하다. 또한 「유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률」에 따른 연구시설의 국가 신고 또는 허가 사항이 있는 경우, 확인번호를 생물안전표지판에 기재하도록 한다.

[표지 OO] 세안장치 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[표지 OO] 소독·멸균 작업 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[표지 OO] 소화기 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[표지 OO] 스필키트 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[표지 OO] 실험실 동선 및 절차방법 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

1) 해당 연구시설의 도면에 실험실 동선을 표시

2) 입실절차, 퇴실절차의 방법을 표시 (사진 등 활용)

[표지 OO] 역방향 출입금지 표지

※본 표지는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

제  장  점검양식 및 유지보수용역업체 양식

※ 장비업체의 점검양식을 사용한다.

[양식 00] 폐기물/폐수처리시설 점검리스트 (사체처리기, 폐수소독설비, EDS 등)

[양식 00] 취기방지용 트랩 봉수 점검리스트

※양식리스트는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[양식 00] 고압가스 점검리스트

[양식 00] (양문형)고압증기멸균기 점검리스트

※양식리스트는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[양식 00] 패스룸 점검리스트

[양식 00] 패스박스 점검리스트

[양식 00] 훈증챔버 점검리스트

[양식 00] 기밀문 점검리스트

[양식 00] 생물안전작업대 점검리스트

[양식 00] 인큐베이터 점검리스트

[양식 00] CO2 인큐베이터 점검리스트

[양식 00] 배양기 점검리스트

[양식 00] 냉장/냉동고 점검리스트

[양식 00] PCR 점검리스트

[양식 00] 원심분리기 점검리스트

[양식 00] 훈증멸균기 점검리스트

[양식 00] 아이솔레이터 점검리스트

[양식 00] 사육장비 (소동물, 중동물, 대동물 등) 점검리스트

[양식 00] 부검대 점검리스트

[양식 00] 무정전원장치(UPS) 점검리스트

[양식 00] 발전기 점검리스트

[양식 00] 공조시스템 점검리스트

[양식 00] 비상샤워 및 (휴대용)아이샤워 점검리스트

[양식 00] 손소독기 점검리스트

[양식 00] 균질화기 점검리스트

[양식 00] 진탕기 점검리스트

[양식 00] 초음파 파쇄기 점검리스트

[양식 00] 피펫 및 관련 장비 점검리스트

기타 점검리스트

※ 유지보수용역업체의 양식을 사용한다.

[첨부 00] 유지보수 보고서 (정기/요청/기타)

[첨부 00] 유지보수 점검보고서 (월간)

[첨부 00] 사고조사보고서

[첨부 00] 소독 기록 대장

[첨부 00] (시설명:    ) 관리기록

[첨부 00] 비상샤워 및 (휴대용)아이샤워 점검표

[첨부 00] 손소독기 점검표

[첨부 00] 소화기 점검표

[첨부 00] 장비관리이력

[첨부 00] 방충방서관리 대장

기타

제  장  OOO 병원체정보 페스트균 (Yersinia pestis) (예시)

※“병원체정보”는 예시용으로 해당기관에서 취급하는 병원체에 따라 작성되어야 한다.

1.	생물안전관리

1.1	병원체 관리범주

①	제3위험군 「유전자재조합실험지침」

②	고위험병원체 「감염병의 예방 및 관리에 관한 법률」

③	생물작용제 「화학무기ㆍ생물무기의 금지와 특정화학물질ㆍ생물작용제 등의 제조ㆍ수출입 규제 등에	관한 법률 」

④	전략물자통제병원체 「대외무역법」

1.2	생물안전 밀폐등급 「고위험병원체 생물안전정보집 (2013)」

BL2	• 분자생물학적, 혈청학적 검사 • 임상검체 시험 검사
BL3	• 균 배양 등 병원체를 직접 취급하는 실험 • 에어로졸 발생가능성이 큰 실험
ABL3	• 동물 감염실험 및 감염동물 해부 등

2.	병원체 정보

2.1	페스트균

과 (Family) Enterobacteriaceae, 속 (Genus) Yersinia, 종 (Species) pestis

2.2	특성

1)	페스트 (plague)를 일으키는 원인균으로 1894년 홍콩에서 페스트가 발생했을 당시	Yersin이 처음으로 발견함

2)	호기성 그람음성 막대균으로 운동성이 없고 포자를 형성하지 않음

3)	크기는 1∼3 ㎛ X 0.5∼0.8 ㎛ 정도이며, 배양 최적 pH는 7.2∼7.6 임

4)	혈액 한천배지에서 37 ℃, 48∼72시간 배양할 경우 회색이나 회백색의 약간 점조성을	띤 집락을 형성함

2.3	생존능력

혈액 검체에서 100일, 사람의 조직 등에서 270일까지 생존이 가능함

3.	감염 정보

3.1	역학정보

1)	북중미, 중앙아시아, 인도, 아프리카 지역의 풍토병으로, 쥐벼룩이 유행하는 시기와	비슷한 시기에 주로 발생하며, 인체 감염사례는 아시아, 아프리카 등 개발도상국에서	보고됨

2)	전세계 발생의 98.7%가 알제리, 콩고공화국, 마다카스카르, 모잠비크 및 우간다에서	발생함

3)	아메리카와 아시아에서 야생설치류와 쥐벼룩을 통한 감염사례가 산발적으로 보고됨

4)	우리나라에는 발생된 기록이 없음

3.2	임상증상

1)	폐 페스트 (pneumonic plague)

-	애완동물이나 사람으로부터 에어로졸을 통하여 흡입한 병원균이 폐에 감염되어 발	생함

-	폐렴, 고열, 두통 증세를 보이며, 치료하지 않을 경우 치사율은 90%임

2)	림프절 페스트 (bubonic plague)

-	사람 감염의 80~90%를 차지하며, 벼룩에 물린 자리나 물린 부위의 림프절이 붓고	발열 등의 증상이 발생함

-	일반적으로 3~4일 후 패혈증을 일으키고 2~3일 후 사망함

- 감염 후 치료하지 않을 경우 치사율은 75%임

3)	패혈증 페스트 (septicemic plague)

-	림프절 페스트에서 진행되거나 상처가 난 피부를 통하여 감염되어 혈행성으로 퍼	져 발병함

-	발열, 급격한 쇼크 증상이나 혼수 등의 증세를 보이며, 치료하지 않으면 2~3일 이	내에 전신이 흑색이 되어 사망함

3.3	감염경로

1)	동물간 감염을 형성하다가 설치류 또는 벼룩에 의해 사람 주거지로 침입하여 감염됨

2)	사람 감염의 경우 감염된 설치류 및 벼룩에 물리는 경우가 대부분이며, 감염된 벼룩	은 애완동물에 의해 매개되기도 함

3)	폐 페스트의 경우 감염된 사람 또는 동물의 비말을 흡입하는 경우 감염됨

4)	사람 벼룩에 의하여도 사람 간 전파가 가능함

3.4	감염량

1)	흡입 감염의 경우 100~500개의 균으로 발병이 가능한 것으로 추정됨

2)	감염된 벼룩에 물렸을 경우 약 25,000~100,000개의 페스트균이 피부를 통해 감염되	는 것으로 알려짐

3.5	잠복기

잠복기간은 보통 1~3일이지만, 최단 12~15시간, 최대 10일 이내임

3.6	숙주

사람과 200종 이상의 포유류

3.7	병원소

야생 설치류, 토끼목 (토끼, 집토끼), 고양이 등

3.8	매개체

야생 설치류의 벼룩인 Xeropsylla cheopis가 대표적이며, 사람벼룩인 Pulex irritans에 의하여도 전파가 가능함

4.	진단 및 예방, 치료 정보

4.1	검사 및 동정

1)	Wayson 염색, Wright-Giemsa 염색: 양극단의 특징적인 보라색 염색상 확인

2)	생화학적 동정

3)	형광항체법: F1 특이항체의 페스트균 반응 (황록형광색 확인)

4)	혈구응집 시험법: 회복기 혈청의 항체가가 급성기에 비하여 4배 이상 증가 확인

5)	효소면역측정법(ELISA): 회복기 혈청의 항체가가 급성기에 비하여 4배이상 증가 확인

6)	웨스턴 블롯 시험: 페스트 F1 항원에 대한 항체 검출 확인

7)	분자생물학적 검사: 특이 유전자 caf1, inv, pla을 이용한 PCR 확인

4.2	응급처치 및 치료

1)	페스트가 의심되면 처음 48시간은 격리 수용 (격리자의 호흡기 비말 주의)

2)	Streptomycin을 IM/IV로 투여하며, 증상이 호전되면 경구로 전환하여 총 10~14 일간	투여

3)	페스트 접촉자는 doxycycline 또는 ciprofloxacin으로 7 일간 화학예방 치료

4)	치료를 하지 않을 경우 높은 사망률을 보이지만, 발병 초기에 치료할 경우 효과가 높	음

4.3	약제 감수성

streptomycin, tetracycline, chloramphenicol (페스트성 수막염의 경우), gentamycin (신생아의 경우)

4.4	약제 저항성

일반적으로 약제 저항성에 대한 우려가 적으나, 1995년 전달성 plasmid에 의한 다제내성(streptomycin 등) 균주가 보고됨

4.5	백신

1)	1896년 이후로 formalin을 처리한 사균 백신이 이용되어 왔으나, 부작용 및 추가 백	신 접종의 불편함으로 1999년에 생산이 중단됨

2)	구소련 위성국가 및 중국, 동남아 일부국가에서는 약독화 균주인 EV76을 이용한 생	백신을 이용하고 있는 것으로 알려짐

3)	현재 국내에서는 사용가능한 백신이 없음

5.	실험실 생물안전

5.1	실험실 감염위해요소

1)	취급검체

혈액, 종창된 림프절액(bubo fluid), 객담, 뇌척수액, 소변, 대변, 림프절의 흡인액, 농	양, 감염된 동물의 조직 등

2)	감염위해요소

- 감염된 동물 또는 사람에서 분리된 균 배양액

- 감염된 조직에 직접적인 접촉

- 페스트균 배양 등 감염성물질 조작과정 중 발생한 에어로졸

- 실험동물 취급 시 감염된 벼룩

5.2	실험실 감염사례

1)	1959년: 미국에서 실험자가 실험과정 중 페스트균을 흡입하여 감염됨

2)	2009년: 미국 시카고의 약독화된 페스트균 (KIM D27 strain)을 취급하던 연구자가 실	험실에서 감염되어 사망함. 이 사례의 경우 안전사고는 없었으나 취급자의 기저질환	(장기에 철분 과다 축적이 되는 유전성 혈색소침착증)으로 인해 약독화된 KIM D27의	독성이 증대되어 감염이 유발된 것으로 추정됨

5.3	개인보호장비 및 주의사항

1)	반드시 앞트임이 없는 실험복과 장갑, 호흡보호장비 착용 (BL3에서 취급할 경우 N95	이상 호흡보호장비 착용)

2)	대량 배양 및 감염성 물질이 튈 우려가 있을 경우에는 호흡보호장비가 장착된 안면	보호장비 착용

3)	고농도의 배양액 취급 및 에어로졸 발생가능 실험은 모두 생물안전작업대 (BSC)내에	서 실험 수행

4)	주사바늘 및 뾰족한 실험도구 사용 자제

5)	설치류로부터 채집한 벼룩에 물리지 않도록 주의

5.4	보관방법

1)	보존용기에 고위험병원체명, 관리번호 등 관련정보를 표기하여 특성 및 성상을 유지	할 수 있는 방법으로 보존

2)	일반병원체와 분리하여 보존하여야 하며, 고위험병원체 보존 장비와 설비에 보안 잠	금장치 설치

5.5	소독 및 불활성화

1)	소독제: 1% sodium hypochlorite, 70% ethanol, 2% glutaraldehyde, iodines,	phenolics, formaldehyde 등

2)	물리적 불활성화: 121 ℃에서 15분 이상 고압증기멸균, 160~170 ℃에서 1 시간 이상	건열 멸균

3)	폐기물 처리: 실험에 사용한 물품은 고압증기멸균 등의 방법으로 불활성화한 후 의료	폐기물로 처리

5.6	유출시 대처방안

1)	오염된 지역을 신속히 격리시킨 후, 개인보호장비 (장갑, 마스크, 실험복 등)를 착용하	고 오염지역에 대한 제독 실시

2)	1% sodium hypochlorite 등의 소독제로 오염지역에 제독하고, 제독 후 30분 이후에	오염원을 종이타월로 제거 후, 고압증기멸균하여 의료폐기물로 처리

3)	고위험병원체 안전관리지침 생물안전사고보고서를 작성 후 질병관리본부장에게 보고

6.	생물테러발생사례

1)	1346년 타타르족이 페스트로 사망한 시체를 이용하여 흑해연안 크리미안 포트에 생	물테러를 감행함

2)	2차 대전 중 일본군이 만주지역에서 페스트균을 생물학전에 이용함

7.	참고

1)	「유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률」 및 「유전자재조합실험지침」

2)	「감염병의 예방 및 관리에 관한 법률」 및 「고위험병원체 안전관리지침」

3)	「화학무기ㆍ생물무기의 금지와 특정화학물질ㆍ생물작용제 등의 제조ㆍ수출입 규제 등에 관한 법률 」

4)	「대외무역법」

5)	「고위험병원체 생물안전정보집 (2013)」

6)	「병원체 생물안전정보집 [제3,4위험군] (2014)」

7)	「Canada Pathogen Safety Data Sheets and Risk Assessment」

http://www.phac-aspc.gc.ca/lab-bio/res/psds-ftss/index-eng.php

제  장  간략매뉴얼 및 매뉴얼

※ 장비업체의 간략매뉴얼 및 매뉴얼을 사용한다.

※매뉴얼리스트는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용되어야 한다.

[별첨 00] 폐기물/폐수처리시설 (사체처리기, 폐수소독설비, EDS 등)

[별첨 00] 고압가스

[별첨 00] (양문형)고압증기멸균기

[별첨 00] 패스룸

[별첨 00] 패스박스

[별첨 00] 훈증챔버

[별첨 00] 기밀문

[별첨 00] 생물안전작업대

[별첨 00] 인큐베이터

[별첨 00] CO2 인큐베이터

[별첨 00] 배양기

[별첨 00] 냉장/냉동고

[별첨 00] PCR

[별첨 00] 원심분리기

[별첨 00] 분리정제장치

[별첨 00] 훈증멸균기

[별첨 00] 아이솔레이터

[별첨 00] 사육장비 (소동물, 중동물, 대동물 등)

[별첨 00] 부검대

[별첨 00] 무정전원장치(UPS)

[별첨 00] 발전기

[별첨 00] 공조시스템

[별첨 00] 손소독기

[별첨 00] 균질화기

[별첨 00] 진탕기

[별첨 00] 초음파 파쇄기

[별첨 00] 피펫 및 관련 장비

기타

[부록   ] 감염성물질 수송

※“감염성물질 수송”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.	감염성물질의 안전수송개요

1.1	국제기준

국제연합기구(UN)에서는 위험물 이동 시, 부적절한 포장 및 수송 용기의 파손으로 인한 위험물 유출 가능성과 위험물로 야기되는 문제, 사회적 위기상황을 예방하고자 “UN 위험물수송권고안(UN Recommendations on the Transport of Dangerous Goods)”을 제시하였으며, 감염성물질(위험물)에 대한 국제 수송 규정을 정하였다. 또한 국제항공수송 관련기관인 국제민간항공기구(ICAO)와 국제항공수송협회(IATA)를 비롯한 만국우편연합(UPU)과의 공조를 통하여 “UN 위험물수송권고안” 규정을 준수토록 하고 있다. 세계보건기구(WHO)는 “UN 위험물수송권고안”에 따라 감염성물질의 생물학적 위해도를 카테고리 A와 B로 구분하여 포장 방법 및 준수 수칙 등을 정한 “감염성물질의 수송 가이드(Guidance on regulations for the Transport of Infectious Substances)”를 제시하고 있다.

국제민간항공기구(International Civil Aviation Organization)

국제항공수송협회(International Air Transport Association)

만국우편연합(Universal Postal Union)

1.2	국내기준

국내에서 감염성물질의 안전한 포장 및 수송에 대한 기준은 질병관리본부「감염성물질 안전수송 지침」을 따르며, 고위험병원체의 국내 수송의 경우 「고위험병원체 안전관리지침」(제6조 고위험병원체 수송)에 따라야 한다. 또한 병원성 미생물의 수입․수출․분양(국내 이동)을 할 경우 관련 법에 따라 관계 중앙 행정기관으로부터 사전에 승인 또는 허가를 받거나 신고를 하여야 한다.

2.	용어 정의

2.1	감염성물질 (Infectious substances)

감염성물질이란 병원체를 보유한 것으로 추정되는 물질 또는 병원체를 보유하는 물질로써 검체, 배양체, 병원체 등을 말한다.

2.2	병원체 (Pathogens)

사람, 동물 및 식물 등의 생물체에 질병을 일으킬 수 있는 박테리아, 바이러스, 리케치아, 기생충, 곰팡이 및 프리온 등의 미생물(유전자변형미생물 포함)을 말한다.

2.3	배양체 (Cultures)

병원체 증식을 목적으로 한 미생물 배양 결과물을 말하며 검체는 해당되지 않는다.

2.4	검체 (Patient specimens)

질병 진단, 조사 및 질병 치료와 예방 등의 목적으로 사람이나 동물에게서 직접 채취된 배설물, 분비물, 혈액과 그 구성분, 조직과 조직액, 인체 조직 일부 및 인체에 대하여 감염원이 되는 동물 조직 그리고 그 밖의 가검물 등을 말한다.

3.	감염성물질의 분류 절차

UN 위험물수송권고안(UN Recommendations on the Transport of Dangerous Goods)의 위험물질 분류* 및 세계보건기구(WHO)의 “감염성물질 수송가이드”의 생물학적 위해도에 따른 2가지 카테고리(카테고리 A와 B)에 따라 감염성물질을 분류한다.

카테고리 A	수송과정 중 포장 외부로 유출되어 물리적인 접촉이 있는 경우 건강한 사람이나 동물에게 치명적인 질병이나 영구적 장애를 유발할 수 있는 병원체를 포함하거나, 포함하는 것으로 의심되는 감염성 미생물 배양체 또는 검체
카테고리 B	카테고리 A 범주에 속하지 않는 병원체를 포함하거나, 포함하는 것으로 의심되는 감염성 미생물 배양체 또는 검체

ʻ

감염성물질을 안전하게 포장 및 수송하기 위해, 우선적으로 고려되어야하는 생물학적 위해도에 따른 감염성물질 분류 절차는 다음과 같다.

UN 위험물수송권고안의 위험물질 분류는 다음과 같다.

6급 : Toxic and infectious substances (독성 & 감염성물질)
6.1 분류 : Toxic substances (독성물질)	식물, 동물, 박테리아 유래의 감염성물질을 포함하지 않는 독소나 감염성 물질로 분류되지 않는 독소
6.2 분류 : Infectious substances (감염성물질)	병원체를 보유한 것으로 추정되는 물질 또는 병원체를 보유한 물질로써 검체, 배양체, 병원체 등

4.	감염성물질의 분류

4.1	카테고리 A (Category A)

카테고리 A 감염성물질(Infectious substances)은 수송과정 중 포장 외부로 유출되어 물리적인 접촉이 있는 경우 건강한 사람이나 동물에게 치명적인 질병이나 영구적 장애를 유발할 수 있는 병원체 및 검체 등의 감염성물질을 말한다.

카테고리 A (Category A)	⦁제4위험군 병원체의 배양체 및 검체(의심 검체 포함) ⦁제3위험군 병원체의 배양체 ⦁제2위험군 고위험병원체*의 배양체

1)	｢유전자재조합실험지침｣ 제4위험군 병원체의 배양체 및 검체

｢유전자재조합실험지침｣(보건복지부고시 제2014-201호)의 제4위험군은 사람에게	감염되었을 경우 증세가 매우 심각하거나 치명적이며 예방 또는 치료가 어려운 질	병을 일으킬 수 있는 생물체로써, 해당 병원체의 배양체 및 검체(의심 검체 포함)가	포함된다.

2)	｢유전자재조합실험지침｣ 제3위험군 병원체의 배양체

제3위험군은 사람에게 감염되었을 경우 증세가 심각하거나 치명적일 수도 있으나	예방 또는 치료가 가능한 질병을 일으킬 수 있는 생물체로써, 해당 병원체의 배양	체만 포함된다.

- 전염성 해면상 뇌병증(BSE, vCJD) 병원체는 검체(의심 검체 포함) 포함

3)	｢유전자재조합실험지침｣ 제2위험군 중 고위험병원체의 배양체

제2위험군 중 ｢감염병의 예방 및 관리에 관한 법률｣ 의거 고위험병원체에 해당된	병원체(배양체)는 카테고리 A에 준한다. (Chlamydia psittaci, Clostridium botulinu	m, Shigella dysenteriae type 1, Vibrio Cholerae O1･O139, Eastern equine enceph	alitis virus, Western equine encephalitis virus)

4.2	카테고리 B (Category B)

카테고리 B 감염성물질(Biological substances)은 카테고리 A 범주에 속하지 않는 병원체를 포함하거나, 포함하는 것으로 의심되는 검체 등의 감염성물질을 말한다.

카테고리 B (Category B)	⦁제3위험군 병원체의 검체 (의심검체 포함) ⦁제2위험군 병원체의 배양체 및 검체 (의심검체 포함)

1)	｢유전자재조합실험지침｣ 제3위험군 병원체의 검체

제3위험군은 사람에게 감염되었을 경우 증세가 심각하거나 치명적일 수도 있으나, 예방	또는 치료가 가능한 질병을 일으킬 수 있는 생물체로써 해당 병원체의 검체(의심 검체	포함)가 포함된다.

2)	｢유전자재조합실험지침｣ 제2위험군 병원체의 배양체, 검체

제2위험군은 사람에게 감염되었을 경우 증세가 심각하지 않고 예방 또는 치료가 비교적	용이한 질병을 일으킬 수 있는 생물체로써, 병원체의 배양체, 검체(의심 검체 포함)가 포	함된다.

4.3	카테고리 A & B 예외 대상 (비감염성물질)

감염성물질 카테고리 A와 카테고리 B에 해당하지 않는 비감염성물질은 본 수송지침에서 명시한 포장 규정(3중 안전 포장)이 아닌 별도의 안전 포장 및 수송방법을 정하여 수송할 수 있다.

카테고리 A & B 예외 대상 (비감염성물질)	⦁병원체를 포함하는 물질이 중화되거나 불활화되어 더 이상 질병을 유발할 수 없는 물질 (제4위험군, 고위험병원체에 해당되는 병원체를 불활화하여 비감 염성물질로 수송하고자 하는 경우, 멸균이나 불활화 확인 등의 절차를 거친 후 카테고리 B 에 준하는 3중 안전 포장 작업을 수행한다.) ⦁사람이나 동물에게 질병을 일으키는 감염성물질을 포함하지 않는 것 ⦁사람이나 동물에 비병원성인 미생물을 포함하는 물질 ⦁심각한 감염 유발원이 아니라고 판단되는 음식, 물 등의 환경시료 ⦁수혈용 혈액과 혈액 구성 요소 ⦁이식을 위한 조직 및 장기 ⦁흡습제에 채취된 건조 혈흔 및 배설물 ⦁오염원이 제거된 의료폐기물 ⦁병원체 함유 가능성이 희박하다는 전문적 소견이 있는 검체 ※ 포르말린(30㎖ 이하)으로 고정시킨 조직 검체 ※ 파라핀 고정 조직 검체 ※ 고정시킨 세포 도말표본 ※ 항체, 콜레스테롤, 글루코오스, 호르몬, 암진단, 신장 또는 간기능 검사 등 진단시험을 위한 혈액이나 소변 검체 등

5.	감염성물질의 포장 및 표식

감염성물질을 수송하고자 할 때는 국제 기준인 ʻUN 위험물수송권고안ʼ 포장 기준	(Packaging Instruction, PI)과 생물학적 위해도에 따른 포장 및 표식기준을 따라, 발송자(진단의뢰기관, 분양기관 등)는 3중 안전 포장을 수행해야 한다.	또한, 감염성물질을 취급(포장작업 등)하는자는 감염성물질의 위해도등급에 따라 적합한 개인보호구(장갑, 마스크, 보호복 등)를 착용하며, 사용된 개인보호구, 기구는 의료폐기물절차에 따라 폐기한다.

5.1	카테고리 A (Category A)의 포장 및 표식

카테고리 A 감염성물질 포장은 UN 포장기준 PI 620을 준수한 3중 안전 포장을 수행해야 한다. 1차 용기는 누수방지용기로 수송과정에서 임의의 충격에 의한 파손을 막기 위해 견고한 용기(플라스틱용기 등)를 사용해야 한다. 2차 안전 수송용기는 95kPa 내부압력을 견딜 수 있는 누수방지용기여야 하며, 수송과정 중 임의의 충격에 의한 파손을 방지하고자, 안정성이 입증된 3차 포장 용기를 사용해야 한다.

카테고리 A (Category A)의 포장	∙ UN 포장기준 PI 620 준수한 3중 안전 포장 (UN인증 수송용기 사용)

5.1.1	포장 용기 및 내용물

1차 용기	감염성물질에 직접 닿는 용기로 방수 가능한 용기를 사용해야하며, 스크류 캡 등 마개로 밀봉하여 내용물의 유출을 방지하도록 밀폐한다.
2차 안전 수송용기	2차 안전 수송용기는 1차 용기 보호 및 파손을 방지하고자 내구성이 뛰어나야 한다. -40 ∼ +55℃ 범위 온도와 95kPa 이상의 압력 차이에서 발생되는 내부압력을 견딜 수 있는 안전성이 입증된 용기여야하며, 방수 및 누수방지 용기(플라스틱, 철제 등)를 사용한다.
3차 포장 용기 (최종 외곽 포장 용기)	3차 포장 용기는 2차 안전 수송용기를 담는 최종 외곽 포장 용기로, 수송 중 외부로부터 물리적 충격을 견딜 수 있도록 1차와 2차 용기를 포함하여 안전성을 인증 받은 3차 포장 용기 제조 규격 표기 사항*(UN 인증마크)이 표기된 용기를 사용해야 한다.
흡수제	1차 용기와 2차 안전 수송용기 사이에 포함되는 내용물로써 1차 용기 파손 시 감염성물질을 흡수할 수 있는 재질을 사용한다. (예：흡수용 패드, 흡수용 겔, 코튼볼 등)
충격완화제	1차 용기와 2차 안전 수송용기 사이, 2차 안전 수송용기와 3차 포장 용기 사이의 공간에 채우는 내용물로써 수송 시 물리적 충격을 완화시킬 수 있는 재질을 사용한다. (예：에어비닐 등)

5.1.2	포장방법

반드시 전용 수송용기를 사용하여 수송과정 중 사고가 발생하더라도 감염성물질이	외부로 유출되지 않도록 3중 안전 포장한다.

단계	카테고리 A (Category A)의 포장방법
1	카테고리 A에 해당되는 감염성물질을 방수 및 누수방지가 되는 유리, 금속, 플라스틱 재질의 1차 용기에 넣는다. 1차 용기에 포장 가능한 감염성물질의 최대 부피는 50㎖, 최대 무게는 50ｇ이다.
2	카테고리 A에 해당되는 감염성물질을 담은 후 즉시 1차 용기의 외부는 반드시 적절한 소독제(의료용 소독제)를 사용하여 소독한다.
3	1차 용기는 충분한 양의 흡수제로 둘러 싼 후 1차 용기의 마개 부위가 위쪽을 향하도록 2차 안전 수송용기에 넣고 방수 및 누수방지를 위해 O-링이 포함된 스크류 캡 등 견고한 마개로 닫는다. 1차 용기 내 감염성물질의 양을 모두 흡수할 수 있는 흡수제를 충분히 넣어 유출 가능성을 최소화한다.
4	3차 포장 용기 안에 수송 중 외부 충격을 감소시키기 위한 에어비닐 등 충격완화제를 넣고, 2차 안전 수송용기는 흔들리지 않도록 고정시킨다.
5	시험의뢰서 등 감염성물질 정보는 2차 안전 수송용기와 3차 포장 용기 사이에 넣는다. 필요한 경우 감염성물질의 내용 및 용량을 2차 안전수송용기 표면에 부착한다.
6	3차 포장 용기(외곽 포장 용기)는 각 단면이 최소 10㎝이상이어야 한다.
7	3중 안전 포장이 완료된 수송 용기는 최대 부피 4ℓ 또는 무게 4㎏을 초과할 수 없다.

5.1.3	표식 및 표기

카테고리 A 감염성물질을 포장 할 때에는 최종 외곽 포장 용기에 직접 연락이 가능한 수신･발송자 기입과 24시간 연락 가능한 연락처 기입으로, 인수인계 확인 및 응급상황 시 비상연락이 가능하도록 하며, 감염성물질 마크(생물학적 위해 표식)와 방향표식을 부착해야 한다.

카테고리 A (Category A)의 표식 및 표기	⦁표식 : 감염성물질 마크(생물학적 위해 표식), 방향 표식 ⦁표기 : 수신･발송자, 응급상황 시 연락처

5.1.4	표식 부착 (기본)

①	감염성물질 위해 표식(생물학적 위해 표식)

감염성물질 위해 표식(생물학적 위해 표식)을 3차 포장 용기 외부에 부착한다.	“감염성물질(Infectious Substance, Category A)”은 글자 높이가 6mm 이상 되	도록 기재하며, ʻ포장이 손상되거나 감염성물질의 유출이 있는 경우 보건당국	(국제수송) 또는 119(국내수송)에 알려야 한다.ʼ는 문구를 포함해야 한다.

	∙ 감염성물질 (Class 6, Division 6.2) ∙ UN 번호* (카테고리 A) : UN 2814 (인체위해성 감염성물질) UN 2900 (동물위해성 감염성물질)

※	UN 번호(UN number)

UN 위험물 수송 전문가 위원회로부터 운송위험물 및 유해성있는 화학 물질 등 위험 물질	군을 식별하기 위하여 부여한 4자리 숫자를 말한다.

②	방향 표식
1차 용기 마개와 화살표의 방향이 동일하도록 방향표식을 3차 포장 용기의 각	옆면에 부착한다.

	∙ 방향 표식 ∙ 반대편 면에 각 1개씩 부착

5.1.5	표기 사항

∙ 발송자 이름, 주소 및 전화번호

∙ 수신자 이름, 주소 및 전화번호

∙ 응급상황 시 24시간 연락 가능한 책임자 이름 및 전화번호

∙ 사고 시 응급처리 연락처：119

5.2	카테고리 B (Category B)의 포장 및 표식

카테고리 B 감염성물질의 포장은 UN 포장기준 PI650을 준수한 3중 안전 포장을 수행해야 한다. 1차용기와 2차 안전 수송용기는 누수방지용기로 수송과정에서 임의의 충격에 의한 파손을 막기 위해 견고한 용기(플라스틱용기 등) 사용과 수송 중 물리적 충격을 견딜 수 있는 내구성이 있는 3차 포장 용기를 사용해야 한다.

카테고리 B (Category B)의 포장	UN 포장기준 PI650 준수한 3중 안전 포장(견고한 2차, 3차 포장 용기 사용)

1차 용기	감염성물질에 직접 닿는 용기로 방수 가능한 용기를 사용해야하며, 스크류 캡 등 마개로 밀봉하여 내용물의 유출을 방지하도록 밀폐한다.
2차 안전 수송용기	2차 안전 수송용기는 1차 용기 보호 및 파손을 방지하고자 내구성이 뛰어나야 한다. 수송과정에서 임의의 충격에 의한 파손과 압력변화를 견딜 수 있는 재질로 견고해야하며, 방수 및 누수방지 용기(플라스틱, 철제 등)를 사용해야 한다. 액상의 감염성물질의 경우, -40 ∼ +55℃ 범위 온도와 95kPa 이상의 압력 차이에서 발생되는 내부압력을 견딜 수 있는 용기를 사용하여야 한다.
3차 포장 용기 (최종 외곽 포장 용기)	2차 안전 수송용기를 담을 수 있는 최종 외곽 포장 용기로 수송 중 물리적 충격을 견딜 수 있는 내구성이 있는 용기를 사용해야 한다.
흡수제	1차 용기와 2차 안전 수송용기 사이에 포함되는 내용물로써 1차 용기 파손 시 감염성물질을 흡수할 수 있는 재질을 사용한다. (예：흡수용 패드, 흡수용 겔, 코튼볼 등)
충격완화제	1차 용기와 2차 안전 수송용기 사이, 2차 안전 수송용기와 3차 포장 용기 사이의 공간에 채우는 내용물로써 수송 시 물리적 충격을 완화시킬 수 있는 재질을 사용한다. (예：에어비닐 등)

5.2.1	포장 용기 및 내용물

5.2.2	포장방법

수송과정 중 사고가 발생하더라도 카테고리 B 감염성물질이 외부로 유출되지 않도	록

3중 안전 포장한다.

단계	카테고리 B (Category B)의 포장방법
1	카테고리 B에 해당되는 감염성물질은 방수 및 누수방지가 되는 유리, 금속, 플라스틱 재질의 1차 용기에 넣는다. 1차 용기에 포장 가능한 감염성물질의 최대 부피는 1ℓ, 최대 무게는 1kg이다.
2	카테고리 B에 해당되는 감염성물질을 담은 후 즉시 1차 용기의 외부는 반드시 적절한 소독제(의료용 소독제)를 사용하여 소독한다.
3	1차 용기는 충분한 양의 흡수제로 둘러 싼 후 1차 용기의 마개 부위가 위쪽을 향하도록 2차 안전 수송용기에 넣고 방수 및 누수방지를 위해 O-링이 포함된 스크류 캡 등 견고한 마개로 닫는다. 1차 용기 내 감염성물질의 양을 모두 흡수할 수 있는 흡수제를 충분히 넣어 유출 가능성을 최소화한다.
4	3차 포장 용기 안에 수송 중 외부 충격을 감소시키기 위한 에어비닐 등 충격완화제를 넣고, 2차 안전 수송용기는 흔들리지 않도록 고정시킨다.
5	시험의뢰서 등 감염성물질 정보는 2차 안전 수송용기와 3차 포장 용기 사이에 넣는다. 필요할 경우 감염성물질의 내용 및 용량을 2차 안전 수송용기 표면에 부착한다.
6	3차 포장 용기(외곽 포장 용기)는 각 단면이 최소 10㎝ 이상이어야 한다.
7	3중 안전 포장이 완료된 수송 용기는 최대 부피 20ℓ또는 무게 20㎏을 초과할 수 없다.

5.2.3	표식 및 표기

카테고리 B 감염성물질을 포장 할 때에는 최종 외곽 포장 용기에 직접 연락이 가능한 수신･발송자 기입과 24시간 연락 가능한 연락처 기입으로 인수인계 확인 및 응급상황 시 비상연락이 가능하도록 하며, 감염성물질(Biological substance, Category B)과 방향표식을 부착해야 한다.

카테고리 B (Category B)의 표식 및 표기	∙ 표식 : 감염성물질 표식, 방향 표식 ∙ 표기 : 수신･발송자, 응급상황 시 연락처

5.2.4	표식 부착 (기본)

①	감염성물질 표식
감염성물질 위해 표식은 3차 포장 용기 외부에 부착한다. “감염성물질(Biologic	al substance, Category B)”은 글자 높이가 6mm이상 되도록 기재하며, ʻ포장이	손상되거나 감염성물질의 유출이 있는 경우 보건당국(국제수송) 또는 119(국내	수송)에 알려야 한다.ʼ는 문구를 포함해야 한다.

	∙ 감염성물질 (Class 6, Division 6.2) ∙ UN 번호 : UN 3373(카테고리 B)

②	방향 표식
1차 용기 마개와 화살표의 방향이 동일하도록 방향표식을 3차 포장 용기의 각	옆면에 부착한다.

	∙ 방향 표식 ∙ 반대편 면에 각 1개씩 부착

5.2.5	표기 사항

∙ 발송자 이름, 주소 및 전화번호

∙ 수신자 이름, 주소 및 전화번호

∙ 응급상황 시 24시간 연락이 가능한 책임자 이름 및 전화번호

∙ 사고 시 응급처리 연락처：119

6.	감염성물질 냉매 포장

6.1	감염성물질 냉매 포장

감염성물질 수송 중 저온환경을 유지하기 위해 냉매(얼음, 아이스 팩, 드라이아이스)를 사용하여 포장하는 경우에 해당한다. 감염성물질에 해당되는 카테고리 포장 기준을 준수하여 포장을 수행하며, 2차 안전 수송용기를 완전히 밀폐시킨 후, 냉매제는 2차 안전 수송용기 외부(3차 포장 용기 내부) 또는 3차 포장 용기 외부 (외곽포장 내부)에 두어 포장한다. 냉매제로 얼음 또는 드라이아이스를 사용 시 냉매제가 녹아도 2차 안전 수송용기는 제 위치에 고정되어 있어야 한다. 냉매제를 담는 용기는 수송 중에 냉매제로부터 발생하는 융해로부터 3차 포장 용기(최종 외곽 포장 용기) 상태가 손상되지 않도록 방수가 되는 포장재여야 한다.

①	1차 용기 및 2차 안전 수송용기는 냉매 소멸에 따른 온도와 압력 변화에서도	원래의 형태가 물리적으로 유지되어야 한다.

②	드라이아이스를 냉매제로 사용 시 기화된 이산화탄소가 배출되지 못하면 폭발의	위험성이 있으므로 가스가 밖으로 배출될 수 있도록 포장한다.

6.1.1	포장 용기 및 내용물

①	냉매제

감염성물질의 수송 환경을 저온으로 유지시킬 수 있는 물질로 수송시간과 환경을	고려하여 사용한다. (예：얼음, 아이스 팩, 액체 질소, 드라이아이스 등)

②	냉매제 용기

냉매제로부터 발생하는 융해로부터 수신･발송자가 기입된 최종 외곽 포장 용기의	상태를 보존할 수 있는 방수 가능한 재질로 수송 환경을 저온으로 유지할	수 있는	용기를 사용해야한다. (예：스티로폼 박스)

6.1.2	포장 방법

냉매제를 2차 안전 수송용기 외부(3차 포장 용기 내부)에 담는 경우

단계	냉매제를 2차 안전 수송용기 외부(3차 포장 용기 내부)에 담는 경우
1	냉매제로부터 감염성물질이 직접 닿지않도록 2차 안전 수송용기를 완전히 밀폐시킨다.
2	냉매제를 2차 안전 수송용기 외곽에 둘러싸며, 냉매제를 담는 용기 안에 2차 안전 수송용기가 수송 중에 흔들리지 않도록 고정한다.
3	냉매제 용기를 감염성물질 3차 포장 용기에 넣는다.
4	시험의뢰서 등 감염성물질 정보는 냉매제 용기 외부에 넣는다.
5	최종 외곽 포장 용기에 해당되는 표식을 부착하고, 표기 내용을 기입한다.

냉매제를 3차 포장 용기 외부(외곽포장 내부)에 담는 경우

단계	냉매제를 3차 포장 용기 외부(외곽포장 내부)에 담는 경우
1	냉매제를 3차 포장 용기의 외곽에 둘러싸며, 수송 중에 흔들리지 않도록 냉매제 용기 안에 3차 포장 용기를 고정시킨다.
2	냉매제용기를 감염성물질 표식부착 및 표기 가능한 최종 외곽 포장용기(4차)에 넣는다.
3	최종 외곽 포장 용기에 감염성물질이 해당하는 표식을 부착하고, 표기내용을 기입한다.

6.2	감염성물질 냉매 포장 표식 및 표기

감염성물질을 냉매 포장 한 경우, 별도의 표식이나 표기기입 내용이 추가되지는 않지만 위험물 Class 9에 해당되는 ʻ드라이아이스ʼ를 냉매제로 사용하는 경우, 적용되는 표기 및 표식 요건을 따라야 한다.

6.2.1	표식 부착

∙ 해당되는 감염성물질 카테고리에 맞는 기본 표식 부착

∙ Miscellaneous hazard (Class 9) 표식 (드라이아이스 사용 시)

	∙ 드라이아이스 ∙ UN 번호 : UN 1845

6.2.2	표기 사항

∙ 발송자 이름, 주소 및 전화번호

∙ 수신자 이름, 주소 및 전화번호

∙ 응급상황 시 24시간 연락 가능한 책임자 이름 및 전화번호

∙ 사고 시 응급처리 연락처：119

∙ 드라이아이스 중량(무게)

7.	감염성물질 다중 포장 및 다수포장

7.1	다중 포장 (Overpack)

다중 포장은 동일한 카테고리의 감염성물질이 개별로 3중 안전 포장된 경우, 하나의 포장단위로 재포장함을 의미한다.

7.1.1	포장 방법

단계	포장방법
1	동일한 카테고리의 3중 안전 포장된 감염성물질들을 최종 외곽 포장 용기에 넣은 후, 흔들리지 않고 올바른 방향으로 수송될 수 있도록 고정한다.
2	최종 외곽 포장 용기에 해당되는 표식을 부착하고, 표기 내용을 기입한다.

7.1.2	표기 및 표식 (Marking and Labelling)

①	표식 부착

⦁해당되는 감염성물질 카테고리에 맞는 기본 표식 부착

②	표기 사항

⦁발송자 이름, 주소 및 전화번호

⦁수신자 이름, 주소 및 전화번호

⦁응급상황 시 24시간 연락 가능한 책임자 이름 및 전화번호

⦁사고 시 응급처리 연락처：119

⦁“다중포장”임을 반드시 표기

7.2	다수 포장 (2차 안전 수송용기 내 다수 1차 용기 포장)

동일한 카테고리의 여러 1차용기들은 하나의 2차안전수송용기 내에 포장함을 의미한다.

1)	포장 방법

단계	포장방법
1	감염성물질은 방수 및 누수방지가 되는 유리, 금속, 플라스틱 재질의 1차 용기에 넣는다.
2	감염성물질을 담은 후 즉시 1차 용기의 외부는 반드시 적절한 소독제(의료용 소독제)를 사용하여 소독한다.
3	1차 용기를 충분한 양의 흡수제로 둘러 싼 후 내용물이 수송 중 유출되어 섞이지 않도록, 지퍼백(밀봉 가능한 봉지)등으로 개별 포장한다.
4	개별 포장된 1차 용기들을 마개 부위가 위쪽을 향하도록 2차 안전 수송용기에 넣고 흔들리지 않도록 고정한 후 방수 및 누수방지를 위해 O-링이 포함된 스크류 캡 등 견고한 마개로 닫는다.
5	3차 포장 용기 안에 수송 중 외부 충격을 감소시키기 위한 에어비닐등 충격완화제를 넣고, 2차 안전 수송용기는 흔들리지 않도록 고정시킨다.
6	시험의뢰서 등 감염성물질 정보는 2차 안전 수송용기와 3차 포장용기 사이에 넣는다. 필요할 경우 감염성물질의 내용 및 용량을 2차 안전수송용기 표면에 부착한다.
7	3차 포장 용기(외곽 포장 용기)는 각 단면이 최소 10㎝ 이상이어야 한다.

2)	표기 및 표식 (Marking and Labelling)

①	표식 부착

⦁해당되는 감염성물질 카테고리에 맞는 기본 표식 부착

②	표기 사항

⦁발송자 이름, 주소 및 전화번호

⦁수신자 이름, 주소 및 전화번호

⦁응급상황 시 24시간 연락 가능한 책임자 이름 및 전화번호

⦁사고 시 응급처리 연락처：119

8.	감염성물질의 수송

8.1	카데고리 A

카테고리 A 감염성물질은 우편 및 여객기, 일반적인 대중교통을 이용하여 수송할 수 없으며, 포장 및 수송 생물안전 수칙을 준수한 방안으로 수송되어야 한다.

화물실과 여객실이 분리되어 있지 않은 대중교통으로 정의하며, 화물실과 여객실이 명확히 분리되어있는 대중교통을 이용할 수밖에 없는 경우, 수송자가 직접 탑승을 전제로 수송 가능하나 해당 대중교통운송과 관련된 법률이 우선한다. (위험물선박운송 및 저장규칙, 여객자동차 운수사업법, 위험물철도운송규칙, 항공위험물운송기술기준 등 )

∙ 국내 우편을 통해 수송할 수 없다.

∙ 일반적인 대중교통을 이용하여 수송할 수 없다.

∙ 카테고리 A 감염성물질은 포장의 변경 없이 최종 목적지까지 수송한다.

8.1.1	자가운전 - 수송 절차

단계	자가운전 - 수송 절차
1	카테고리 A 감염성물질을 안전하게 수송하기 위해서는 안전성이 입증된 감염성 물질 수송용기를 사용하여 3중 안전 포장을 수행한다.
2	포장된 카테고리 A 감염성물질을 자가운전 차량 또는 지정차량 트렁크에 비치하여 흔들리지 않도록 고정한다. - 수송 차량 내에는 만일의 사태를 대비한 적절한 개인보호구(보호복, 마스크, 장갑 등)와 오염처리용품(생물학적 유출물 처리함)이나 흡습포(방포), 소독제, 의료폐기물 전용 용기 등의 처리 물품을 준비한다.
3	이동 경로 선정 최단거리 및 안전한 경로를 지정하여 기관 생물안전관리책임자에게 보고 후 출발한다.
4	이동 중 도로 교통 신호 및 규칙을 준수하여 안전하게 이동하며, 만일의 상황에서의 차량 내 필수 인원 잔류 및 시건 조치 등 유실, 도난, 방출 등을 방지하는 일련의 조치를 취한다.
5	목적지에 도착하면 수송자는 인수자에게 연락하여, 인수인계 절차를 수행한다.

8.1.2	위탁 수송 - 수송 절차

단계	위탁 수송 - 수송 절차
1	카테고리 A 감염성물질을 안전하게 수송하기 위해선, 안전성이 입증된 카테고리 A 감염성물질 수송용기를 사용하여 3중 안전 포장을 수행한다.
2	수송을 위탁할 기관의 내부규정을 확인한다. 위탁수송을 수행하는 기관은 감염성물질(위험물) 수송 가능 대상 기준, 자체규정 등을 별도로 가질 수 있으므로 해당 감염성물질 수송을 위한 세부 사항은 위탁하려는 자(발송자)가 세밀히 확인 후 위탁한다.
3	위탁기관이 카테고리 A 감염성물질을 수송할 경로, 수송자, 도착시간 등 (운반계획서)을 검토하여, 적합성 및 안전성을 판단한다.
4	안전성이 입증된 경로 및 위탁기관에 카테고리 A 감염성물질을 인계하며, 감염성물질 인수인계 확인절차를 면밀히 수행한다.
5	예정된 도착시간에 수신자에게 도착 여부를 확인한다.

8.1.3	수송 시 주의사항

①	수송 중 카테고리 A 감염성물질 보관은 사람과 분리된 공간(화물칸)에 적재한다.

②	자가운전·수송 및 위탁수송 등 감염성물질이 수송될 경우에는 시건 조치 및 철	저	한 인수인계절차를 수행한다.

8.2	고위험병원체

｢감염병의 예방 및 관리에 관한 법률｣로 지정된 고위험병원체는 카테고리 A에 준하며, 고위험병원체를 반입하거나 이동하고자 할 경우 질병관리본부에 사전 반입허가 신청 및 이동 신고를 해야 한다.

단계	자가운전 - 수송 절차
1	고위험병원체를 안전하게 수송하기 위해서는 안전성이 입증된 감염성물질 수송용기를 사용하여 카테고리 A 감염성물질 3중 안전 포장을 수행한다.
2	포장된 고위험병원체를 자가운전 차량 또는 지정차량 트렁크에 비치하여 흔들리지 않도록 고정한다. - 수송 차량 내에는 만일의 사태를 대비한 적절한 개인보호구(보호복, 마스크, 장갑 등)와 오염처리용품(생물학적 유출물 처리함)이나 흡습포(방포), 소독제, 의료폐기물 전용 용기 등의 처리 물품을 준비한다.
3	고위험병원체 이동에 신고한 운반계획서대로 고위험병원체를 수송한다. ⦁고위험병원체를 보내는·받는 기관이 직접(자가) 운전할 경우, 기관 내 지정된 고위 험병원체 관리자가 동행되어야한다. ⦁수송자와 고위험병원체 관리자는 만일의 발생할 수 있는 생물안전사고에 대비하여 처리대응방법 등을 준비해야 한다.
4	이동 중 도로 교통 신호 및 규칙을 준수하여 안전하게 이동하며, 만일의 상황에서의 차량 내 필수 인원 잔류 및 시건 조치 등 유실, 도난, 방출 등을 방지하는 일련의 조치를 취한다.
5	목적지에 도착하면 수송자는 인수자에게 연락하여, 인수인계 절차를 수행한다.

8.2.1	자가운전 - 수송 절차

8.2.2	위탁 수송 - 수송 절차

단계	위탁 수송 - 수송 절차
1	수송을 위탁할 기관의 내부규정을 확인한다. 위탁수송을 수행하는 기관은 감염성물질(위험물) 수송 가능 대상 기준, 자체 규정 등을 별도로 가질 수 있으므로 고위험병원체 수송을 위한 세부 사항은 위탁하려는 자(발송자)가 세밀히 확인 후 위탁해야 한다.
2	위탁기관이 고위험병원체를 수송할 경로, 수송자, 도착시간 등 (운반계획서)을 검토하여, 적합성 및 안전성을 판단한다.
3	고위험병원체 이동계획서 서류 ʻ이동대행계약서ʼ, ʻ운반계획서ʼ 등을 준비하여, 질병관리본부 생물안전평가과에 신고한다.
4	안전성을 인증받은 경로 및 위탁기관에 고위험병원체를 인계하며, 인수인계 확인절차를 면밀히 수행한다.
5	예정된 도착시간에 수신자에게 도착 여부를 확인한다.

8.2.3	수송 시 주의사항

①	수송 중 고위험병원체 보관은 사람과 분리된 공간(화물칸)에 적재한다.

②	자가운전·수송 및 위탁수송 등 감염성물질이 수송될 경우에는 시건 조치 및 철저한	인수인계절차를 수행해야 한다.

8.3	카데고리 B

카테고리 B 감염성물질은 여객실과 화물실이 분리된 대중교통과 우편으로 수송 가능하며, 포장 및 수송 생물안전 수칙을 준수한 방안으로 이루어져야 한다.

∙ 국내 등기우편을 통해 수송 가능하다.

∙ (여객실과 화물실이 분리된)대중교통을 통해 수송 가능하다.

∙ UN 포장 기준 PI650에 따른 3중 포장 및 “감염성물질”임을 표기한다.

8.3.1	자가운전 - 수송 절차

단계	자가운전 - 수송 절차
1	카테고리 B 감염성물질을 안전하게 수송하기 위해선, 3중 안전 포장을 수행한다.
2	포장된 카테고리 B 감염성물질을 자가운전 차량 또는 지정차량 트렁크에 비치하여 흔들리지 않도록 고정한다. - 수송 차량 내에는 만일의 사태를 대비한 적절한 개인보호구(보호복, 마스크, 장갑 등)와 오염처리용품(생물학적 유출물 처리함)이나 흡습포(방포), 소독제, 의료폐기물 전용 용기 등의 처리 물품을 준비한다.
3	이동 중 도로 교통 신호 및 규칙을 준수하여 안전하게 이동하며, 만일의 상황에서의 차량 내 필수 인원 잔류 및 시건 조치 등 유실, 도난, 방출 등을 방지하는 일련의 조치를 취한다.
4	목적지에 도착하면 수송자는 인수자에게 연락하며, 인수인계 절차를 수행한다.

8.3.2	위탁 수송 - 수송 절차

단계	위탁 수송 - 수송 절차
1	카테고리 B 감염성물질을 안전하게 수송하기 위해선, 3중 안전 포장을 수행한다.
2	수송을 위탁할 기관의 내부규정을 확인한다. 위탁수송을 수행하는 기관은 감염성물질(위험물) 수송 가능 대상 기준, 자체 규정 등을 별도로 가질 수 있으므로 해당 감염성물질 수송을 위한 세부 사항은 위탁하려는 자(발송자)가 세밀히 확인 후 위탁해야 한다.)
3	위탁기관이 감염성물질을 수송할 경로, 수송자, 도착시간 등 (운반계획서)을 검토하여, 적합성 및 안전성을 판단한다.
4	안전성이 입증된 경로 및 위탁기관에 감염성물질을 인계하며, 감염성물질 인수인계 확인절차를 면밀히 수행한다.

8.3.3	우편 수송 - 수송 절차

단계	위탁 수송 - 수송 절차
1	카테고리 B 감염성물질을 안전하게 수송하기 위해선, 3중 안전 포장을 수행한다. [우정사업본부 소포우편규칙 및 최종의정서(우정사업본부고시 제2013-61호)우편수송 포장기준*에 준수하여 카테고리 B 감염성물질을 포장한다.]
2	카테고리 B 감염성물질을 접수하며, 반드시 위험물을 표시한다.
3	수송조회 확인시스템 등 수송 현황을 확인하며, 도착 예정시간이 도래하면 수신자에게 도착유무를 확인한다.

우편수송 포장기준

∙ 반드시 3중 포장한다.

∙ 포장 최대용적은 가로·세로·높이 세변을 합하여 160㎝를 넘지 않는다.
다만 어느 한 변이 1ｍ를 초과할 수 없다.

∙ 포장 최소용적은 가로·세로·높이 세변을 합하여 35㎝(가로 17㎝ 이상, 세로 15㎝ 이상),

원통형은 지름의 2배와 길이를 합하여 35㎝(지름 3.5㎝ 이상, 길이 17㎝ 이상)이다.

∙ 3차 포장은 최대부피 4ℓ, 최대중량 4㎏을 넘지 않는다.

8.3.4	수송 시 주의사항

①	수송 중 감염성물질 보관은 사람과 분리된 공간(화물칸)에 적재한다.

②	우편으로 감염성물질 수송 시 표식 및 표기 내용을 가려서는 안 된다.

③	자가운전·수송 및 위탁수송 등 감염성물질이 수송될 경우에는 시건 조치 및 철저한	인수인계절차를 수행해야 한다.

④	대중교통을 이용하여 카테고리 B 감염성물질을 수송할 경우, 해당 교통수단의 법률	및 규정 등을 확인하여 적합하게 수행한다.

9.	감염성물질 포장 및 수송 생물안전수칙

①	감염성물질을 포장·수송하고자 하는 자는 ʻ감염성물질 안전수송 지침ʼ을 준수하여 포	장 및 수송한다.

②	감염성물질을 포장·수송하는 자는 병원체안전관리 및 감염성물질 안전수송 지침을 포	함한 생물안전교육을 받아야한다.

③	감염성물질을 취급(포장 작업 등)하는 자는 감염성물질의 위해도 등급에 적합한 개인	보호구(장갑, 마스크, 보호복 등)를 착용해야 한다.

④	발송자는 수송 시 감염성물질이 유출되지 않도록 안전하게 포장해야하며, 수신자가	감염성물질을 수령하였는지를 확인한다.

⑤	발송자는 적합한 감염성물질 수송수단을 선택해야하며, 선택한 수송 수단의 안전성을	확보한다.

⑥	병원체 및 감염성물질을 수송하는 자는 감염성물질의 위해 정보를 인지하고, 사고 등	의 응급상황 발생 시 비상연락처 및 대처요령 등을 숙지한다.

⑦	감염성물질의 수송 차량 내에는 만일의 사태를 대비한 적절한 개인보호구(보호복, 마	스크, 장갑 등)와 오염처리용품(생물학적 유출물 처리함)이나 흡습포(방포), 소독제, 의	료폐기물 전용 용기 등의 처리 물품을 비치한다.

⑧	수신자는 감염성물질 수령 시, 포장외곽의 표식 및 용기의 파손여부 등 안전성을 확	인하고 내부 관련 담당자에게 전달하기 전까지 감염성물질의 유실 및 도난을 방지하	기 위해 별도의 안전한 장소에 보관해야 한다.

⑨	기관 내부에서 감염성물질을 이동할 경우에는 최소 2차 안전 수송용기에 감염성물질	을 담아 이동해야 하며, 상세한 절차 및 방법은 기관이 별도로 정하는 바에 따른다.

10.	사고시 응급대응

감염성물질 사고는 발생 즉시 기관 내 안전 관리자 또는 수송책임자에게 수송용기 파손 및 내용물 유출여부를 보고한 후, 유출된 구역 격리 및 사고를 수습한다. 사고 조치가 완료되면 기관 내 안전 관리자, 수송책임자에게 사고 조치결과를 보고한다.

10.1	감염성물질 포장 중 유출 사고 대처 요령

①	유출구역에서 벗어나서 오염된 보호구를 제거하고, 주변 사람들에게 사고 현장 주	변 통제 및 접근 금지를 알린다.

②	기관 내 안전 관리자에게 감염성물질 유출 사항을 보고한다.

③	감염성물질 처리를 위하여 필요한 개인보호구를 추가로 착용한다.

④	오염처리용품(생물학적 유출물 처리함)을 활용하여 에어로졸이 발생되지 않도록 흡	습포(방포)로 유출부위를 먼저 덮고, 유출부위의 가장자리부터 소독제를 살포하여	중앙으로 침투할 수 있도록 처리한 후 20~30분간 둔다.

⑤ 	소독작업이 끝난 후 처리에 사용했던 기구와 폐기물은 전용 용기(autoclave bag	등)에 담아 의료폐기물 절차에 따라 폐기하거나 멸균한다.

⑥	유출 지역을 청소하고 소독한다.(필요 시, 유출구역에 소독 절차를 반복 수행한다.)

10.2	감염성물질 수송 중 사고 대처 요령

10.2.1	수송용기 파손으로 감염성물질이 유출되었을 경우

①	자체처리 :

취급자의 감염우려가 없으며, 감염성물질이 3차 포장 용기 외부 표면 및 차량 내부	의 국소적인 범위에 유출된 경우

단계	감염성물질 수송 중 수송용기 파손사고 : 자체처리가 가능할 경우
1	감염성물질 유출을 발견 즉시 수송자는 대중에 노출 위험이 없도록 안전한 곳으로 주차시키며, 수송책임자(응급상황 시 24시간 연락 가능한 책임자)에게 사고발생 및 파손여부를 보고하고, 감염성물질 처리를 위하여 차량에 보관된 개인보호구를 착용한다.
2	오염처리용품(생물학적 유출물 처리함)을 활용하여 에어로졸이 발생되지 않도록 흡습포(방포)로 유출부위를 먼저 덮고, 유출부위의 가장자리부터 소독제를 살포하여 중앙으로 침투할 수 있도록 처리한 후 20~30분간 둔다.
3	소독작업이 끝난 후 처리에 사용했던 기구와 폐기물은 전용 용기(autoclave bag 등)에 담아 의료폐기물 절차에 따라 폐기하거나 멸균한다.
4	유출 지역을 청소하고 소독한다.(필요 시, 유출구역에 소독 절차를 반복 수행한다.)

②	비상조치 :

차량 외부 및 환경에 다량 유출되어, 지역사회로 감염확산 가능성이 있는 경우로

자체처리가 불가능한 감염성물질 유출의 경우, 직접방제가 아닌 119를 통한 유출물	처리 및 방제가 이루어지도록 한다.

단계	감염성물질 수송 중 수송용기 파손사고 : 자체처리가 불가능 할 경우
1	119(또는 인근 소방서)에 연락하여, 감염성물질 수송 중에 사고 났음을 알리며, 사고 상황 및 병원체의 위해정보를 알리고 협조를 요청한다. [필요 시, 112(경찰청) 협조 요청]
2	필요한 개인보호구를 추가로 착용한 후 유출지역을 외부로부터 격리시키며, 외부 격리 작업이 완료되면 안전한 곳으로 이동한다.
3	119 특수구조대 도착 시 “감염성물질 수송 중”임을 다시 알리며, 적극 협조한다.

10.2.2	감염성물질 유출이 확인되지 않을 경우

수송용기가 파손되었으나, 감염성물질(내용물) 유출이 육안으로 확인되지 않을 경우에 해당하며, 만일의 사태를 대비하여 수송용기 및 사고발생 구역에 소독작업을 수행한다.

단계	감염성물질 수송 중 수송용기 파손사고 : 감염성물질 유출이 확인되지 않을 경우
1	수송용기 파손 발견 즉시 수송자는 대중에 노출 위험이 없도록 안전한 곳으로 주차 시키며, 수송책임자(응급상황 시 24시간 연락 가능한 책임자)에게 보고하며, 감염성물질 처리를 위하여 차량에 보관된 개인보호구를 착용한다.
2	만일의 사태를 대비하여 수송용기 외부에 소독액을 살포하며, 수송용기가 적재되어있던 공간에도 병원체를 불활성화하는 소독작업을 수행한다.
3	파손된 수송용기는 의료폐기물 전용용기에 담는다. ∙ 사고 처리에 사용되는 기구, 발생하는 폐기물 등은 의료폐기물절차에 따라 폐기한다. ∙ 포장물 내 드라이아이스로 하여 생긴 액체는 건드리지 않는다. ∙ 깨진 유리나 날카로운 물체에 베이거나 상처를 입지 않도록 주의한다. ∙ 유출물질 또는 손상된 용기를 만지거나 사고지역을 가로질러 걸어 다니지 않는다.

10.3	병원체에 직접 접촉 되었을 경우 대처 요령

10.3.1	포장 작업 중에 접촉되었을 경우

①	안면부에 접촉되었을 때

단계	병원체 직접 접촉 사고 : 포장작업 중 안면부 접촉
1	눈에 튀거나 들어간 경우, 즉시 eye washer 또는 흐르는 깨끗한 물, 눈 세척제를 사용하여 15분 이상 세척하고 눈을 비비거나 압박하지 않도록 주의한다.
2	필요한 경우 비상 샤워 장치를 이용하여 전신을 세척한다.
3	발생 사고에 대해 부서장 및 기관 안전 관리자에게 보고하고 필요한 조치를 받는다.

②	안면부를 제외한 신체에 접촉되었을 때

단계	병원체 직접 접촉 사고 : 포장작업 중 안면부 제외한 신체 접촉
1	장갑 또는 보호복 등 착용하고 있던 개인보호구를 신속히 벗는다.
2	즉시 흐르는 물로 세척 또는 샤워한다.
3	오염 부위를 소독한다.
4	발생 사고에 대해 부서장 및 기관 안전 관리자에게 보고하고 필요한 조치를 받는다.

10.3.2	유출사고 처리 중 병원체에 노출되었을 경우

단계	병원체 직접 접촉 사고 : 유출사고 처리 중 병원체 노출
1	오염 부위를 차량 내 준비된 소독제를 사용하여 즉시 소독한다.
2	개인보호구를 신속히 벗는다.
3	안전한 곳으로 이동하여 다른 사람과의 접촉을 피한다.
4	119와 기관 내 생물안전관리자 또는 수송책임자에게 사고발생을 알린다. (119 사고 신고 시 접촉된 병원체의 위해정보와 사고 발생 내용을 상세히 알린다.)
5	119 특수구조대 도착 시, “감염성물질 수송 중”임을 알리며, 병원체의 위해정보를 제공하고 의료기관으로 이동한다.

11.	생물안전 사고보고 및 사후 조치

감염성물질의 3중 안전 포장 작업과정 또는 수송과정 중 사고가 발생하여 처리 완료된 경우, 취급자 및 수송자는 기관생물안전책임관리자·수송책임자에게 사고 내용(사고 일시 및 장소, 원인, 피해상황, 조치내용 및 결과)을 보고 한다. 기관생물안전책임관리자·수송책임자는 해당 사고의 원인 및 사고 처리 결과의 적정성을 판단하여 재발 방지와 감염성물질 안전 수송을 위한 조치 등 사후 모니터링을 지속 수행한다.

특히, ｢감염병의 예방 및 관리에 관한 법률｣에서 지정한 고위험병원체의 유출 사고 시에는 “고위험병원체안전관리지침”(질병관리본부 공고 제2015-93호)에 따라 [붙임1] 생물안전사고보고서 (고위험병원체 안전관리지침 [별지 제3호서식])으로 질병관리본부장에게 보고해야 한다.

사고 보고 시 필수 내용

① 사고일시 및 장소

② 사고경위 및 원인

③ 사고 상황(피해자, 병원체 정보, 사고 내용)

④ 조치 내용 및 결과 (소독제, 처리절차 등)

12.	병원성 미생물 등의 수입․수출 및 분양(국내 이동)

병원성 미생물의 수입․수출․분양(국내 이동)을 할 경우 관련 법에 따라 관계 중앙 행정기관으로부터 사전에 승인 또는 허가를 받거나 신고를 하여야 한다.

12.1	병원성 미생물 등의 국가 관리

구분	국외		국내
업무	수입허가	수출허가	이동․분리․제조․보유 신고 및 LMO 개발․실험
법령	○『생화학무기법』* 제12조 ○『감염병예방법』** 제22조 ○『가축전염병 예방법』제32조 ○『유전자변형생물체법』 제9조	○『대외무역법』 제19조 ⇒ 「전략물자 수출입고시」 제 19조~27조	○『생화학무기법』제5조의2(제조신고) ○『감염병예방법』제21조(분리 및 이동신고) 및 23조(보존현황 신고) ○『가축전염병 예방법』 제14조(분리신고 및 보존․관리) ○『유전자변형생물체법』제22조의2(LMO의 개발․실험 승인)
관계 부처	산업통상자원부 질병관리본부 농림축산검역본부	산업통상자원부 (전략물자관리원)	산업통상자원부 (바이오협회) 질병관리본부 농림축산검역본부
지정 병원체	『생화학무기법』 ○ 생물작용제 - 인체․인수병원균 27종 - 동물병원균 14종 - 식물병원균 13종 『감염병예방법』 ○ 고위험병원체 36종 - 세균 및 진균：14종 - 바이러스 및 프리온：22종 『유전자변형생물체법』 ○ 국가관리가 필요한 병원성미생물 36종 『가축전염병 예방법』 ○ 가축전염병병원체 (「가축전염병 병원체 등 수의유전자원 관리규정」참조)	『대외무역법』 ○ 전략물자(이중용도품목) - 인체․인수공통병원균 및 독소 79종 ․바이러스 39종 ․리케치아 4종 ․박테리아 15종 ․진균 2종 ․독소 19종 - 동물병원균 19종 - 식물병원균 13종 (「전략물자수출입고시」별표2 이중용도품목 1C351~1C354 참조)	『생화학무기법』 ○ 생물작용제 - 인체․인수병원균 27종 - 동물병원균 14종 - 식물병원균 13종 『감염병예방법』 ○ 고위험병원체 36종 - 세균 및 진균：14종 - 바이러스 및 프리온：22종 ○ 국가관리가 필요한 병원성미생물 36종 - 세균 및 진균：14종 - 바이러스 및 프리온：22종 『가축전염병 예방법』 ○ 가축전염병병원체 (「가축전염병 병원체 등 수의유전자원 관리규정」참조)

*『생화학무기법』: 『화학․생물무기의 금지 및 특정화학물질․생물작용제 등의 제조․수출입규제 등에 관한 법률』

**『감염병예방법』: 『감염병의 예방 및 관리에 관한 법률』

***『유전자변형생물체법』: 『유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률』

12.2	법률에 따른 관리 대상 병원체 분류

12.2.1	세균 (15종)

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	탄저균(Bacillus anthracis)	○	○	○	BL3c
2	브루셀라 아보투스(Brucella abortus)	○	×	×
3	양 브루셀라균(Brucella melitensis)	○	○	○	BL3
4	브루셀라 수이스(Brucella suis)	○	○	×	BL3
5	클라미디아 프시타키(Chlamydia psittaci)	○	○	×	BL3
6	보툴리눔균(Clostridium botulinum)	○	○	○	BL2c
7	야토균(Francisella tularensis)	○	○	○	BL3c
8	비저균(Burkholderia mallei)	○	○	○	BL3
9	멜리오이도시스균(Burkholderia pseudomallei)	○	○	○	BL3
10	장티푸스균(Salmonella Typhi)	○	×	×
11	시가이질균(Shigella dysenteriae)	○	○ (Type 1)	×	BL2
12	콜레라균(Vibrio cholerae)	○	○ (O1, O139)	○	BL2
13	페스트균(Yersinia pestis)	○	○	○	BL3c
14	웰치균, 엡사일런 독소를 생산하는 2형 (Clostridium perfringens, epsilon toxin producing types)	○	×	×
15	장관 출혈성 대장균, 혈청형 O157과 기타 베로톡신 생산 균주 (Enterohaemorrhagic Escherichia coli, serotype O157 and other verotoxin producing serotypes)	○	×	×

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	안데스 바이러스(Andes virus)	○	×	×
2	차파레 바이러스(Chapare virus)	○	×	×
3	치쿤군야 바이러스(Chikungunya virus)	○	×	×
4	초클로 바이러스(Choclo virus)	○	×	×
5	크리미안-콩고 출혈열 바이러스(Crimean-Congo haemorrhagic fever virus)	○	○	○	BL4
6	뎅기열 바이러스(Dengue fever virus)	○	×	×
7	도브라바-베오그라드 바이러스(Dobrava-Belgrade virus)	○	×	×
8	서울바이러스(Seoul virus)	○	×	×
9	신 놈브레 바이러스(Sin nombre virus)	○	×	×
10	동부 마 뇌염 바이러스(Eastern equine encephalitis virus)	○	○	○	BL2
11	서부 마 뇌염 바이러스(Western equine encephalitis virus)	○	○	×	BL2
12	베네주엘라 마 뇌염 바이러스(Venezuelan equine encephalitis virus)	○	○	○	BL3
13	에볼라 바이러스(Ebola virus)	○	○	○	BL4c
14	한탄 바이러스(Hantaan virus)	○	×	×
15	헨드라 바이러스(Hendra virus (Equine morbillivirus))	○	○	○	BL4
16	일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus)	○	×	×
17	구아나리토 바이러스(Guanarito virus)_베네주엘라형 출혈열 바이러스	○	○	○	BL4
18	후닌 출혈열 바이러스(Junin virus)_아르헨티나형 출혈열 바이러스	○	○	○	BL4
19	마추포 바이러스(Machupo virus)_볼리비아형 출혈열 바이러스	○	○	○	BL4
20	사비아 바이러스(Sabia virus)_브라질형 출혈열 바이러스	○	○	○	BL4
21	플렉살 바이러스(Flexal virus)_남아메리카 출혈열 바이러스	×	○	○	BL4
22	라구나 네그라 바이러스(Laguna Negra virus)	○	×	×
23	라사(열) 바이러스(Lassa(fever) virus)	○	○	○	BL4c
24	루우핑 일 바이러스(Louping ill virus)	○	×	×
25	루요 바이러스(Lujo virus)	○	×	×
26	림프구성 맥락수막염 바이러스(Lymphocytic choriomeningitis virus)	○	×	×
27	마버그 바이러스(Marburg virus)	○	○	○	BL4c
28	원숭이 폭스 바이러스(Monkey pox virus)	○	○	○	BL3
29	머레이 계곡 뇌염 바이러스(Murray Valley encephalitis virus)	○	×	×
30	니파 바이러스(Nipah virus)	○	○	○	BL4
31	오로푸체 바이러스(Oropouche virus)	○	×	×
32	포와센 바이러스(Powassan virus)	○	×	×
33	리프트 계곡열 바이러스(Rift Valley fever virus)	○	○	○	BL3
34	라치오 바이러스(Rocio virus)	○	×	×
35	세인트 루이스 뇌염 바이러스(St Louis encephalitis virus)	○	×	×
36	참진드기 매개뇌염 바이러스(Tick-borne encephalitis virus)	○	○	○	BL3
37	캬사늘 숲 바이러스(Kyasanur Forest virus)	○	○	○	BL3
38	옴스크 출혈열 바이러스(Omsk haemorrhagic fever virus)	○	○	○	BL3
39	두창 바이러스(Variola virus)	○	○	○	BL4c
40	소두창 바이러스(Variola minor virus, Alastrim)	×	○	×	BL3
41	황열 바이러스(Yellow fever virus)	○	○	×	BL3
42	헤르페스 B 바이러스(Cercopitjecine herpesvirus 1, Herpes B virus)	×	○	×	BL3
43	조류 인플루엔자 인체감염증 바이러스(H5N1, H7N7, H7N9)	○	○ (인체유래)	○	BL3
44	고위험 인플루엔자 바이러스(1918 influenza virus의 8개 병원성 유전자 중 하나 이상의 유전자를 포함하는 influenza virus)	○	○	○	BL3
45	중증급성호흡기증후군 코로나 바이러스(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus, SARS)	○	○	○	BL3
46	중동 호흡기 증후군 코로나 바이러스(Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus, MERS-CoV)	×	○	×	BL3
47	전염성 해면상 뇌병증 병원체(Transmission of spongiform encephalopathy agent: BSE, vCJD prion)	○	○	○	BL3

12.2.2	바이러스 및 프리온(47종)

12.2.3	리케치아 (4종)

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	큐열균(Coxiella burnetii)	○	○	○	BL3
2	바토넬라 퀸타나(Bartonella quintana) : 로찰리마에 퀸타나(Rochalimaea quintana), 리케치아 퀸타나 (Rickettsia quintana)	○	×	×
3	발진티푸스균(Rickettsia prowazekii)	○	○	○	BL3
4	홍반열 리케치아균(Rickettsia rickettsii)	○	○	○	BL3

12.2.4	진균 (2종)

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	콕시디오이데스 이미티스(Coccidioides immitis)	○	○	×	BL3
2	콕시디오이데스 포사다시(Coccidioides posadasii)	○	○	×	BL3

12.2.5	독소 (19종)

번호	병 원 체 명	수출 통제a	고위험병원체	생물 작용제b	비고
1	보툴리눔 독소(Botulinum toxin)	○	×	○
2	웰치균 독소(Clostridium perfringens toxin)	○	×	○
3	코노 독소(Conotoxin)	○	×	○
4	리신(Ricin)	○	×	×
5	삭시 독소(Saxitoxin)	○	×	×
6	시가 독소(Shiga toxin)	○	×	○
7	포도상구균 장독소(Staphylococcus aureus toxin)	○	×	○
8	복어독(Tetrodotoxin)	○	×	○
9	베로톡신과 시가와 같은 리보솜 불활성 단백질 (Verotoxin and shiga-like ribosome inactivating protein)	○	×	○
10	마이크로시스틴(시안지노신)(Microcystin(Cyanginosin))	○	×	○
11	아플라톡신(Aflatoxin)	○	×	○
12	아브린(Abrin)	○	×	○
13	콜레라 독소(Cholera toxin)	○	×	×
14	Diacetoxyscirpenol toxin	○	×	○
15	T-2 toxin	○	×	○
16	H-2 toxin	○	×	×
17	모데신 독소(Modeccin)	○	×	×
18	볼켄신 독소(Volkensin)	○	×	○
19	Viscum album Lectin 1 (Viscumin)	○	×	×

a：「대외무역법」 제26조에 따른 「전략물자 수출입고시」(산업통상자원부고시 제2011-276호, ’11.12.23??) 제20조~23조에 의한 수출통제 대상 병원체 및 독소

b：「화학․생물무기의 금지 및 특정화학물질․생물작용제 등의 제조․수출입규제 등에 관한 법률」 제12조에 의한 수입통제 대상 병원체

c： 생물테러병원체

* BL：biosafety level(생물안전등급)

[붙임 1]

■ 고위험병원체 안전관리지침 [별지 제3호서식]				.		이 신고서는 「전자정부법」 제33조에 따라 전자문서로 제출할 수 있습니다
생물안전 사고 보고서
접수번호					접수일
신고자	기관(명칭)				사업자등록번호
	성명(대표자)				전화번호
	주소
	관리책임자	성명			직위
		소속			전화번호
사고 개요	일시: 년 월 일( 요일) 시 분
	장소:
	사고경위(6하 원칙에 의거 기술)
	사고원인:
	고위험 병원체	명칭			관리번호
		피해내용:
		조치내용:
	사고자 (피해자)	성명			직위
		소속			전화번호
		피해내용:
		조치내용:
종합 의견
년 월 일 신고자 (인) 질병관리본부장 귀하

[부록   ] 고위험병원체의 종류 및 위험군

「고위험병원체 안전관리지침」 질병관리본부 제2011-21호 [별표1]

※“고위험병원체의 종류 및 위험군”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

고위험병원체의 종류 및 위험군

1. 세균 및 진균	위험군
가. 페스트균(Yersinia pestis)	3
나. 탄저균(Bacillus anthracis)	3
다. 브루셀라균(Brucella melitensis, Brucella suis)	3
라. 비저균(Burkholderia mallei)	3
마. 멜리오이도시스균(Burkholderia pseudomallei)	3
바. 보툴리눔균(Clostridium botulinum)	2
사. 이질균 (Shigella dysenteriae Type 1); Nerotoxin 또는 Shigatoxin 생성	2
아. 클라미디아 프시타키(Chlamydia psittaci)	2
자. 큐열균(Coxiella burnetii)	3
차. 야토균(Francisella tularensis)	3
카. 발진티푸스균(Rickettsia prowazekii)	3
타. 홍반열 리케치아균(Rickettsia rickettsii)	3
파. 콕시디오이데스균(Coccidioides immitis, Coccidioides posadasii)	3
하. 콜레라균(Vibrio cholerae O1ㆍO139); Cholera toxin 생성	2

2. 바이러스 및 프리온	위험군
가. 헤르페스 B 바이러스 (Cercopithecine herpesvirus 1, Herpes B virus)	4
나. 크리미안 콩고 출혈열 바이러스 (Crimean-Congo haemorrhagic fever virus)	4
다. 이스턴 이콰인 뇌염 바이러스 (Eastern Equine Encephalitis virus)	2
라. 에볼라 바이러스 (Ebola virus)	4
마. 헨드라 바이러스 (Hendra viruses)	4
바. 라싸 바이러스 (Lassa virus)	4
사. 마버그 바이러스 (Marbug virus)	4
아. 원숭이폭스 바이러스 (Monkeypox virus)	3
자. 니파 바이러스 (Nipah viruse)	4

차. 리프트 벨리열 바이러스 (Rift Valley fever virus)	3
카. 남아메리카 출혈열 바이러스 (South American haemorrhagic fever; Flexal, Guanarito, Junin, machupo, Sabia)	4
타. 황열 바이러스 (Yellow fever virus)	3
파. 서부 마 뇌염 바이러스 (Western equine encephalitis virus)	2
하. 진드기 매개뇌염 바이러스 (Tick-borne encephalitis complex virus; Central European Tick-born encephalitis virus Far Eastern Tick-born encephalitis virus Siberian Tick-born encephalitis virus Kyasanur Forest disease virus Omsk haemorrhagic fever virus)	3-4 4 3 3 4 4
거. 두창 바이러스 (Variola virus)	4
너. 소두창 바이러스 (Variola minor virus, Alastrim)	4
더. 베네주엘라 이콰인 뇌염 바이러스 (Venezuelan Equine Encephalitis virus)	3
러. 중증 급성호흡기 증후군 코로나 바이러스	3
머. 고병원성 조류 인플루엔자 인체감염증 바이러스 (혈청형 H5N1, H7N7)	3
버. 고위험 인플루엔자 바이러스 (1918 influenza virus의 8개 병원성 유전자 중 하나 이상의 유전자를 포함하는 influenza virus)	3
서. 전염성 해면상 뇌병증 병원체 (Transmission of spongiform encephalopathy agent; Bovine spongiform encephalopathy prion variant Creutzfeldt-Jakob disease prion)	3

[부록   ] 기관생물안전위원회 운영규정 (고위험병원체 포함)

OOO 기관생물안전위원회 운영규정

[시행 0000. 00. 00] [기관명 예규 제00호]

※“기관생물안전위원회 운영규정”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

기관명(해당과), 000-000-0000

제1조 (목적)

이 규정은 ○○○기관에서 수행하는 위해가능 생물체 연구에 대한 생물안전 사항을 평가하여,  의･생명과학 연구가 안전하고 효율적으로 실시될 수 있도록 하기 위하여 ○○○ 기관생물안전위원회(이하 ʻ위원회ʼ)의 구성 및 운영 등에 관한 필요한 사항을 규정함을 목적으로 한다.

제2조(적용범위)

이 규정의 적용범위는 다음과 같다.

1.	위해가능 생물체의 위해성 평가 및 위원회 운영에 관하여 ｢유전자재조합실험지침｣, ｢유	전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률｣및 ｢동법통합고시｣, ｢고위험병원체안전	관리지침｣, ｢감염병의 예방 및 관리에 관한 법률｣, ｢화학무기 · 생물무기의 금지와 특정	화학물질 · 생물작용제 등의 제조 · 수출입 규제 등에 관한 법률｣에 특별한 규정이 있	는 경우를 제외하고는 이 규정이 정하는 바에 의한다.

제3조 (정의)

이 규정에서 사용하는 용어의 정의는 다음 각호와 같다.

1.	‘생물안전’이란 잠재적으로 인체 위해 가능성이 있는 생물체 또는 생물재해로부터 실험	자 및 국민의 건강을 보호하기 위한 지식과 기술, 그리고 장비 및 시설을 적절히 사용	하도록 하는 조치를 말한다.

2.	ʻ위해가능 생물체ʼ라 함은 유전자변형생물체 및 병원체로 알려진 생물학적 원인체(미생	물, 바이러스, 바이로이드 등)를 말한다.

3.	ʻ유전자변형생물체ʼ라 함은 다음 각목의 현대생명공학기술을 이용하여 얻어진 새롭게	조합된 유전물질을 포함하고 있는 생물체를 말한다.

가.	인위적으로 유전자를 재조합하거나 유전자를 구성하는 핵산을 세포 또는 세포내	소기관으로 직접 주입하는 기술

나.	분류학에 의한 과의 범위를 넘는 세포융합으로서 자연 상태의 생리적 증식이나 재	조합이 아니고 전통적인 교배나 선발에서 사용되지 아니하는 기술

4.	‘유전자재조합분자’란 어떤 세포 내에서 복제 가능한 DNA(벡터)와 이종의 DNA를 효소	등을 이용하여 시험관 안에서 결합시켜 제작한 DNA를 말한다.

가.	‘숙주‘란 유전자재조합실험에서 유전자재조합분자가 도입되는 세포를 말한다.

나.	‘벡터’란 유전자재조합실험에서 숙주에 이종의 DNA를 운반하는 DNA를 말한다.

다.	‘공여체’란 벡터에 삽입하려고 하는 DNA 또는 직접 주입하고자 하는 DNA가 유래	된 생물체를 말한다. RNA를 주형으로 합성된 DNA를 벡터에 삽입할 경우에는 RN	A를 제공하는 생물체를 포함한다.

라.	‘숙주-벡터계’란 숙주와 벡터의 조합을 말한다.

5.	‘유전자재조합실험’이란 유전자재조합분자를 세포에 도입하여 이종의 DNA를 복제하는	실험과 유전자재조합분자가 도입된 세포를 이용하는 실험, 또는 벡터를 이용하지 않으	면서 이종의 DNA를 직접 세포에 주입하여 복제하는 실험을 말한다.

가.	‘대량배양실험’이란 유전자재조합실험 중 10리터 이상의 배양용량 규모로 실시하는	실험을 말한다.

나.	‘동물을 이용하는 실험’이란 유전자변형동물을 개발하거나 이를 이용하는 실험 및	기타 유전자재조합분자 또는 유전자변형생물체를 동물에 도입하는 실험을 말한다.

다.	‘식물을 이용하는 실험’이란 유전자변형식물을 개발하거나 이를 이용하는 실험 및	기타 유전자재조합분자 또는 유전자변형생물체를 식물에 도입하는 실험을 말한다.

6.	‘고위험병원체’란 생물테러의 목적으로 이용되거나 사고 등에 의하여 외부에 유출될 경	우 국민 건강에 심각한 위험을 초래할 수 있는 감염병병원체를 말하며, 고위험병원체	의 종류 및 위험군은 「감염병의 예방 및 관리에 관한 법률」 시행규칙 제5조 별표 1을	따른다.

7.	‘생물작용제’란 자연적으로 존재하거나 유전자를 변형하여 만들어져 인간이나 동식물에	사망, 고사(枯死), 질병, 일시적 무능화나 영구적 상해를 일으키는 미생물 또는 바이러	스로서 「화학무기ㆍ생물무기의 금지와 특정화학물질ㆍ생물작용제 등의 제조ㆍ수출입	규제 등에 관한 법률」 시행령으로 정하는 물질을 말한다.

8.	‘독소‘란 생물체가 만드는 물질 중 인간이나 동식물에 사망, 고사, 질병, 일시적 무능화	나 영구적 상해를 일으키는 것으로서 「화학무기ㆍ생물무기의 금지와 특정화학물질ㆍ생	물작용제 등의 제조ㆍ수출입규제 등에 관한 법률」 시행령으로 정하는 물질을 말한다.

9.	ʻ위해성 평가ʼ라 함은 특정 조건에서 위험원에 노출 시 인간 및 환경에게 일어날 수 있	는 악영향 및 그 가능성 그리고 수반되는 불확실성을 과학적이고 객관적으로 규명하는	것을 말한다.

제4조 (위원회의 기능)

①	위원회는 다음 각 호의 사항을 심의 · 자문한다.

1.	기관 내에서 수행되는 유전자재조합실험, 2･3등급 이상 병원체, 고위험병원체, 생물작	용제, 독소 이용 실험에 대한 위해성평가 심의 및 승인에 관한 사항

2.	연구계획서 또는 실험계획서의 생물안전 적절성과 안전관리 확보에 관한 사항

3.	고위험병원체 등 병원체안전관리 및 생물작용제와 독소의 안전관리에 관한 제반사항	4.	기관 생물안전 교육･훈련 및 건강관리에 관한 사항

3.	생물안전관리규정 및 시설안전관리규정의 제･개정에 관한 사항

4.	연구시설의 운영, 변경, 폐쇄, 안전관리에 관한 사항

5.	위원장이 생물안전과 관련하여 부의하는 사항

6.	기타 연구기관 내 생물 안전 확보에 관한 사항

②	위원회는 시험· 연구책임자로 하여금 실험의 생물안전 확보에 관한 사항에 대하여 보고를	하게 할 수 있다.

제5조 (위원회의 구성 및 임기)

①	위원회는 5인 이상의 위원으로 구성하되, 내외부 전문가 중에서 ○○○기관장이 임명 또는	위촉하며, 임기는 2년으로 하고 연임할 수 있다.

②	위원장은 위원 중에서 호선하고, 부위원장은 위원 중에서 위원장이 지명한다.

(또는 위원장은 ○○○기관 ○○○부장(당연직)으로 한다.)

③	위원은 다음 각호에 해당하는 자가 포함되어야 한다. 단, 미생물 전공자를 1인 이상 포함하	여야한다.

1.	미생물학, 생물학, 농학 또는 생물안전 분야 관련 전문가

2.	의사･약사･수의사 면허가 있는 관련 전문가

3.	생물체 연구에 대한 지식을 가지고 있으며 공익을 대변할 수 있는 외부인사

④	위원회는 생물안전에 관련된 업무를 수행하기 위하여 위원 중에서 생물안전관리책임자를	두며, 생물안전관리책임자는 고위험병원체 전담관리자를 겸임할 수 있다.

제6조 (위원장 등의 직무)

①	위원장은 위원회를 대표하며, 위원회의 업무를 총괄한다.

②	부위원장은 위원장을 보좌하며, 위원장이 부득이한 사유로 업무를 수행할 수 없는 경우에	는 그 직무를 대행한다.

③	위원장은 위해가능 생물체 연구에 대한 안전성을 보장하기 위하여 추가적인 정보가 필요한	경우에는 책임연구자 등으로 하여금 정보 제공을 요구할 수 있다.

제7조 (회의)

①	위원장은 위원회의 회의를 소집하고 그 의장이 된다.

②	위원회의 회의는 정기회의와 임시회의로 구분하며, 연 1회 이상 정기회의 또는 임시회의를	개회하여야 한다. 위원장은 다음 각 호의 어느 하나에 해당하는 경우에는 위원회를 개최해	야 한다.

1.	위원장의 회의 소집요구가 있을 때

2.	정기회의

3.	임시회의는 위원 1/3 이상의 회의 소집 요구가 있을 때

③	위원장은 회의를 소집하고자 하는 경우에는 회의개최일 3일전까지 위원에게 통지하여야	한다.

④	위원회의 회의는 재적위원 과반수의 출석으로 개회하고, 의결이 필요한 경우 출석위원 과	반수의 찬성으로 의결한다.

⑤	위원회의 심의 대상인 연구에 관여하는 위원은 해당 연구 관련된 심의에 참여할 수 없다.

⑥	위원장은 승인한 연구 계획서가 기관 내 구성원의 건강 및 환경 안전에 심각한 위해가 된	다고 판단될 경우 위원회의 의결을 거쳐 승인을 취소하고, 이를 기관장에게 보고하여야 한	다.

⑦	위원회는 필요시 관련분야 전문가를 초빙하거나 위탁하여 관련 업무에 관한 자문을 구할	수 있다.

⑧	간사는 회의 시 마다 회의록[붙임1]을 작성하고 회의 결과를 서면으로 위원장에게 보고하	고, 회의록을 O년 이상 보관한다.

제8조 (서면심의)

위원장은 심의 안건이 경미하고, 서면 심의만으로도 충분하다고 인정할 때에는 서면으로 심의할 수 있다.

제9조 (행정사무)

○○○기관장은 위원회의 행정사무를 지원하는 행정 간사를 지정하여 행정 및 재정을 관리할 수 있다.

제10조 (비밀누설의 금지)

①	위원회의 위원·간사 등은 위원회의 심사사항· 진술내용 등 기타 위원회와 관련하여 알게 된	사항을 누설하여서는 아니 된다.

②	위원장을 비롯한 모든 위원들은 임명·위촉 시 서약서[붙임2]에 서명한다.

제11조 (위원의 수당 지급)

위원회는 위원 및 초청 전문가에 대하여는 「○○○기관의 ○○규정」에 따라 예산의 범위 내에서 회의수당, 자문료 및 심의에 필요한 경비 등을 지급할 수 있다.

제12조 (그 밖의 사항)

이 규정에서 정하지 않은 위원회의 운영에 필요한 사항은 위원회의 의결을 거쳐 위원장이 정할 수 있다.

부 칙

제1조(시행일) 이 규정은 0000. 00. 00부터 시행한다.

[붙임 1]

기관생물안전위원회 회의록

개최일시		개최장소
참석위원
1. 안 건 : 2. 주요내용 : 3. 심의결과 :

[붙임 2]

서 약 서

소 속			직 위
성 명			생년월일	. . .
한 자
주 요 경 력
주 소	사무실
	자 택
연락처	전화번호		핸드폰
	E-mail		FAX
	은행명		계좌번호

위 본인은 기관생물안전위원회 위원직(     년  월    일부터    년  월  일까지)을 수행함에 있어 관련 업무를 엄정하고  성실하게 추진함은 물론, 본인 소속 기관 또는 단체의 재직기간 및 이후에도 업무과정에서 지득한 사항을 외부에 누설하는 등 부당하게 활용치 않을 것을 서약합니다.

년    월    일

소속 :

성명 :                     (인)

OOO 기관장 귀하

[부록   ] 기관생물안전위원회 운영규정

※“기관생물안전위원회 운영규정”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

기관생물안전위원회 운영규정

제정 201○. ○. ○○. 예규 제○○호

제1조 (목적) 이 규정은 ○○○기관에서 수행하는 위해가능 생물체 연구에 대한 생물안전 사항	을 평가하여 의･생명과학 연구가 안전하고 효율적으로 실시될 수 있도록 하기 위하여 ○○	○ 기관생물안전위원회(이하 ʻ위원회ʼ)의 구성 및 운영 등에 관한 필요한 사항을 규정함을 목	적으로 한다.

제2조 (적용범위) 위해가능 생물체의 위해성 평가 및 위원회 운영에 관하여 ｢유전자재조합실험	지침｣｢유전자변형생물체의 국가간 이동 등에 관한 법률｣및 ｢동법통합고시｣에 특별한 규정이	있는 경우를 제외하고는 이 규정이 정하는 바에 의한다.

제3조 (정의) 이 규정에서 사용하는 용어의 정의는 다음과 같다.

1.	ʻ위해가능 생물체ʼ라 함은 유전자변형생물체 및 병원체로 알려진 생물학적원인체(미생물,	바이러스, 바이로이드 등)를 말한다.

2.	ʻ유전자변형생물체ʼ라 함은 다음 각목의 현대생명공학기술을 이용하여 얻어진 새롭게 조	합된 유전물질을 포함하고 있는 생물체를 말한다.

가.	인위적으로 유전자를 재조합하거나 유전자를 구성하는 핵산을 세포 또는 세포내 소	기관으로 직접 주입하는 기술

나.	분류학에 의한 과의 범위를 넘는 세포융합으로서 자연 상태의 생리적 증식이나 재조	합이 아니고 전통적인 교배나 선발에서 사용되지 아니하는 기술

3.	ʻ위해성 평가ʼ라 함은 특정 조건에서 위험원에 노출 시 인간 및 환경에게 일어날 수 있는	악영향 및 그 가능성 그리고 수반되는 불확실성을 과학적이고 객관적으로 규명하는 것을	말한다.

제4조 (기능) ①위원회는 다음 각 호의 사항을 심의･자문한다.

1.	기관 내에서 수행되는 유전자재조합실험 및 2･3등급 이상 병원체 이용 실험에 대한 위해	성평가 심의 및 승인에 관한 사항

2.	기관 생물안전 교육･훈련에 관한 사항

3.	생물안전관리규정의 제･개정에 관한 사항

4.	생물안전 3등급 연구시설의 운영 평가에 관한 사항

5.	기타 연구기관 내 생물 안전 확보에 관한 사항

제5조 (구성 등) ①위원회는 5인 이상의 위원으로 구성하되, 내외부 전문가 중에서 ○○○기관	장이 임명 또는 위촉하며, 임기는 2년으로 하고 연임할 수 있다.

②위원장은 위원 중에서 호선하고, 부위원장은 위원 중에서 위원장이 지명한다.

③위원은 다음 각호에 해당하는 자가 포함되어야 한다. 단, 미생물 전공자를 1인이상 포함하	여야한다.

1.	미생물학, 생물학, 농학 또는 생물안전 분야 관련 전문가

2.	의사･약사･수의사 면허가 있는 관련 전문가

3.	생물체 연구에 대한 지식을 가지고 있으며 공익을 대변할 수 있는 외부인사

④위원회는 생물안전에 관련된 업무를 수행하기 위하여 위원 중에서 생물안전관리책임자를	둘 수 있다.

제6조 (위원장 등의 직무) ①위원장은 위원회를 대표하며, 위원회의 업무를 총괄한다.

②부위원장은 위원장을 보좌하며, 위원장이 사고가 있을 때에 그 직무를 대행한다.

③위원장은 위해가능 생물체 연구에 대한 안전성을 보장하기 위하여 추가적인 정보가 필요	한 경우에는 책임연구자 등으로 하여금 정보 제공을 요구할 수 있다.

제7조 (회의) ①위원장은 위원회의 회의를 소집하고 그 의장이 된다.

②위원회의 회의는 정기회의와 임시 회의로 구분하며, 임시회의는 재적위원 3분의 1 이상의	요구 시 또는 위원장의 개회 요구에 의하여 소집한다.

③위원회의 회의는 재적위원 과반수의 출석으로 개회하고, 의결이 필요한 경우 출석위원 과	반수의 찬성으로 의결한다.

④위원회의 심의 대상인 연구에 관여하는 위원은 해당 연구 관련된 심의에 참여할 수 없다.

⑤위원장은 승인한 연구 계획서가 기관 내 구성원의 건강 및 환경 안전에 심각한 위해가 된	다고 판단될 경우 위원회의 의결을 거쳐 승인을 취소하고, 이를 기관장에게 보고하여야 한	다.

⑥위원회는 필요시 관련분야 전문가를 초빙하거나 위탁하여 관련 업무에 관한 자문을 구할	수 있다.

제8조 (행정사무) 연구기관장은 위원회의 행정사무를 지원하는 행정 간사를 지정하여 행정 및	재정을 관리할 수 있다.

제9조 (비밀유지) 위원회의 위원은 위원회 업무와 관련하여 취득한 정보 및 내용에 대하여 비	밀을 누설하여서는 아니 된다.

제10조 (위원회 수당 등) ①위원회는 위원 및 초청 전문가에 대하여는 예산의 범위 내에서 회	의수당, 자문료 및 심의에 필요한 경비 등을 지급할 수 있다.

제11조 (운영세칙) 이 규정의 운영에 관하여 필요한 세부사항은 위원회의 심의를 거쳐 세칙으	로 정한다.

[부록   ] 동물식별

1.	실험동물 개체식별의 원칙

※“동물식별”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	개체식별 방법

1)	검역∙순화기간의 개체식별법

실험동물 반입 후 실시하며, 비영구적인 개체식별법을 선택한다.

2)	본 실험 개시 전 실시하는 실험기간 개체식별법

동물실험을 위한 군 분리 시 실험기간을 고려하여 영구적 개체식별법을 선택한다.

1.2	비영구적 신체 표기

실험동물의 신체에 표기하는 비영구적인 개체식별법으로는 설치류에서는 tail marking	법, 토끼와 개에서는 ear marking 법, ear tagging 법을 사용한다.

1.3	영구적 신체 표기

실험동물의 신체에 표기하는 영구적인 개체식별법으로는 설치류에서는 색소도포법, 귀천	공법(ear punching),  토끼와 개에서는 ear tagging법을 사용한다.

1.4	어린태자 표기

실험동물 중 어린태자의 신체에 표기하는 개체식별법(절지법)은 무통기(출생후 10일 이	내)에 수행한다.

1.5	케이별 식별

실험동물의 신체에 표기하는 개체식별과 별도로 실험동물이 사육되는 케이지에 개체식별	카드법을 사용하여 케이지별 식별한다.

2.	개체식별카드 사용방법

2.1	개체식별카드법

사육 상자 당 1 마리씩 사육되는 비설치류(토끼,개)와 사육 상자 당 2~6마리를 사육하는	설치류(랫드, 마우스, 기니픽)에 적용한다. 토끼 및 개 등의 비설치류 중동물에서는 실험	동물의 신체에 개체표시가 어려우므로 개체식별카드법을 사용한다.

2.2	개체식별카드

설치류 동물실험 수행 시에는 사육 상자의 식별을 위한 개체식별카드  [서식  ]	“실험동	물 개체식별카드”	(또는 자체 기관양식)를 작성하여, 사육상자에 부착하여 사용한다.

3.	Tail marking(꼬리표식)법

3.1	꼬리표식법 원칙

꼬리 표식법은 비영구적인 개체식별법으로 랫드 및 마우스 등의 설치류 실험동물의 반	입, 검역·순화기간 및 실험기간의 설치류에 적용하며, 비설치류에서는 사용하지 않는다.

3.2	표시방법

1)	꼬리 표식법으로 개체를 식별하기 위해 꼬리에 이물질이 묻어있는 경우에는 꼬리	를 70% alcohol을 사용하여 깨끗이 닦고 완전히 말린 후 아래와 같이 유성펜(nam	e pen 또는 유성매직)으로 표시한다.

2)	잘못 표식한 경우에는 다른 동물과 중복되지 않는 표시로 다시 실시한다.

3)	검역∙순화기간에는 붉은색 유성펜을 사용하여 개체를 식별하며, 본 실험 시 적용할	때는 검은색 또는 파란색 유성펜을 사용하여 검역∙순화기간의 개체식별표시와 구분	하여 사용한다.

4)	유성펜을 이용한 꼬리표식의 경우 꼬리 각질의 탈락에 의해 표식이 지워지므로 1~	2회/1주로 재표식해야 한다.

[유성펜을 이용한 Tail marking(꼬리표식법)]

4.	색소도포법

4.1	포화 picric acid 수용액의 조제

증류수에 picric acid를 넣고 교반기로 교반하여 더 이상 녹지않는 포화상태가 될 때까지	실온에서 녹여 포화 picric acid 수용액을 조제한다.

4.2	표시방법

1)	설치류의 반영구적인 개체식별법으로 포화 picric acid 수용액으로 표	시한다.

2)	포화 picric acid 수용액의 도포부위에 따라 개체를 구분할 수 있으나 C57BL/6 마	우스 및 개와 같이 albino 이외의 모색을 가진 실험동물은 picric acid의 색 구분이	어려워 사용할 수 없다.

[포화 picric acid 수용액을 이용한 색소도포법]

5.	Ear Punch (귀 천공)법

5.1	적용대상 동물

설치류(마우스)에서 영구적인 개체식별법으로 많이 적용한다. 설치류에서 주로 사용하며,	중동물 이상에서 사용하고자 할 때에는 ear tagging 법을 적용한다.

5.2	귀 천공법 절차

1)	귀(이개)를 70% 알코올로 깨끗이 소독한다.

2)	동물의 머리가 움직이지 않도록 확실히 보정한다.

3)	아래 그림과 같이 개체번호에 맞게 멸균된 ear punch를 이용하여 천공을 실시한	후 거즈로 압박하여 지혈시킨다.

4)	적절한 위치에 천공하였는지 확인한다.

5)	귓바퀴에 2 곳 이상을 인접하여 표식할 경우에는 2 부위가 연결되지 않도록 간격	을 충분히 하고, 귀의 가장자리에 너무 가까이 표식한 원(구멍)은 치유될 때 V자형	절흔이 될 수 있기 때문에 귀의 가장자리와 적당한 간격을 둔다.

6)	동물의 표식이 각각의 동물번호와 일치하는가 확인하고 실수로 틀린 경우는 사육	상자에 첨부한 개체식별카드에 그림으로 표시한다.

[천공기를 이용한 귀천공법]

6.	Ear tagging (귀 태그부착)법

6.1	적용대상

설치류 및 비설치류의 영구적인 개체식별법으로 사용할 수 있으며, 별도의 ear tag가 필	요하다.

6.2	귀 태그부착 절차

1)	Ear tagging전에 ear punch를 autoclave 후 70%  alcohol로 소독하여 천공 후 염	증이나 감염에 유의하여야 한다.

2)	미리 tag에 시험군, 개체번호 등을 기입한 후 천공부위를 betadin iodine(povidon)	으로 술부를 소독 후 ear punch로 귀 안쪽 혈관이 지나가지 않는 곳을 찾아 천공	한다.

3)	천공을 실시한 후 거즈로 압박하여 지혈시킨다.

7.	Ear marking (귀표식)법

7.1	적용대상

비설치류에서 검역∙순화기간의 비영구적 개체식별법으로 많이 적용하며 귀 안쪽에 유성	펜을 이용하여 표식한다.

7.2	귀표식 절차

1)	비영구적인 방법으로 비설치류의 귀 피부의 피지선으로 인하여 쉽게 지워지므로 1	회/2~3일로 재표식해야 한다.

2)	검역∙순화기간 종료 후의 실험기간에는 장기간 적용이 어려우므로 개체식별카드 사	용법 및 Ear tagging 법을 주로 적용한다.

8.	닭 개체식별법

8.1	개체식별카드

신체에 개체표시가 어려울 경우, 개체식별카드법을 사용한다. 닭의 식별을 위한 개체식별	카드  [서식  ]	“실험동물 개체식별카드”	(또는 자체 기관양식)를 작성하여, Isolator에 부	착하여 사용한다.

8.2	날개띠

번호가 각인된 알루미늄제 날개띠를 사용한다. 갓 태어난 병아리는 날개띠를 다리에 감	고 2주령 정도에 날개로 옮긴다. 이때, 날개를 통과하여 환상으로 고정한다.

8.3	다리띠

90일령 이상의 닭의 경우, 다리띠를 사용한다.

9.	원숭이 개체식별법

9.1	문신법

1)	동물에게 마취를 하고 흉부와 대퇴부 내측의 피모를 제모기로 깎는다.

2)	그 부분의 피부를 알코올 소독 솜으로 잘 닦는다.

3)	전기문신기를 사용하여 피부에 번호(숫자)를 새긴다.

4)	문신기의 침에는 충분히 먹물을 묻혀 천천히 조작하고 먹물이 확실히 들어가도록	한다. 반드시 문신부위 및 침을 소독한다.

9.2	안면문신법

1)	얼굴의 각 부위에 점상의 문신을 하여 식별하는 방법으로 그룹사육에서 이용한다.

2)	얼굴의 어느 위치가 몇 번인지를 정하고 그 조합에 따라 번호를 만든다. 100번까지	는 식별이 가능하다.

9.3	단기사육에서의 식별법

1)	단기사육에서의 식별법으로 번호를 붙인 알루미늄 고리를 목걸이의 면 로프에 걸	어두는 방법, 목걸이에 번호를 붙여 놓는 방법 등도 있다. 단, 목걸이에 개체식별용	꼬리표를 붙이는 방법은 동물이 놀면서 떨어지는 경우가 있다.

2)	극히 단기의 실험의 경우에는 피모의 일부를 깎는 방법, 유성 펜으로 가슴 등에 번	호를 적는 방법도 있다.

[부록   ] 동물실험 기구류

1.	동물실험 기구류

1.1	주사기

※“동물실험 기구류”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1)	약물 등의 투여나 채혈 시 사용

2)	유리제품(반복 수회 사용)과 플라스틱 제품(1회용)

①	마이크로 단위의 주사관 : 미량의 약물을 정확히 투여

②	투베르쿨린 주사관 : 소량 투여의 경우 사용

3)	주사침 종류

굵기, 길이 및 침 끝의 각도에 따라 분류 : 피하침, 정맥침, 근육침

4)	주사침 선택 시 고려사항

①	투여부위 : 피하, 정맥내, 근육내 등

②	투여약물의 점성, 입자의 크기 : 현탁액의 경우

③	복강내 투여의 경우 : 정맥침 사용

[주사침의 종류와 용도  (게이지가 클수록 주사침이 작다)]

종류	규격	외경(㎜)	내경(㎜)	주사관 길이(㎜)	침끝의 각도(°)	게이지
피하침	1/1	0.7	0.38	30	12	22
	1/2	0.6	0.25	26	12	23
	1/3	0.5	0.22	23	12	25
	1/4	0.4	0.2	20	12	27
	1/5	0.35	0.18	18	12	21
정맥침	대	0.8	0.45	35	18~19	22
	중	0.7	0.38	33	18~19	23
	소	036	0.25	30	18~19	22
	1/1	0.7	0.38	30	18~19	23
	1/2	0.6	0.25	26	18~19	25
	1/3	0.5	0.22	23	18~19	27
	1/4	0.4	0.2	20	18~19	21
	1/5	0.35	0.18	18	18~19	22
근육침	대	0.8	0.45	50	14	23
	중	0.7	0.38	45	14	27
	소	0.6	0.25	40	14	⁃
투베르쿨린침	⁃	0.4	0.2	13	20	⁃

1.2	경구투여기구(위존데)

1)	위존데(sonde) 사용

2)	금속제 위존데 : 마우스, 랫드 및 기타 소동물

①	끝이 구상 : 식도 등의 조직 손상방지

②	존데 선단 1/4 정도 구부려 사용 : 위 내 삽입용이

③	위존데의 직경 및 길이

- 마우스용 : Φ0.9mm X 70mm

- 랫드용 : Φ1.2mm X 80mm

- 모르모트용 : Φ1.5mm X 120mm

3)	투여 약물이 점착성이 있는 것 : 내경이 큰 존데 사용

4)	고무제 튜브 : 토끼나 개의 경우 사용(주로 넬톤 튜브 사용)

①	넬톤튜브는 선단이 구상(球狀), 유출구 측면 부착 : 조직손상 방지

②	주로 사용하는 넬톤튜브 : No. 9～11(Φ5～6mm X 30～33.5mm)

2.	외과용 기구의 종류

2.1	소독 멸균법

동물실험 시 외과용 기구․기재는 처치 및 수술의 목적에 따라 여러 종류가 사용되고 있	으며 기구․기재의 소독․멸균에는 일반적으로 고압멸균기가 사용된다.

2.2	외과용 기구

2.2.1	핀셋

- 무구핀셋트, 선세(先細) 무구핀셋트, 유구핀셋트

2.2.2	가위

- 직전도 : 양둔(兩鈍), 편예편둔(片銳片鈍), 양예(兩銳)

-	소직전도 : 양둔(兩鈍), 양예(兩銳)

-	금관전도 : 소동물에서의 골절도(骨切刀)

-	골절도직형 :개, 원숭이 등의 중동물에 사용

-	제모가위

2.2.3	감자

- 유구지혈감자, 무구지혈감자

2.2.4	기타

- 지침기, 봉합침(强灣型), 봉합사, 수술칼

2.3	수술기구 구성

실험동물의 수술을 위해 사용되는 수술기구는 수술의 종류, 수술기구의 가격, 수술자의	선호도 등에 따라 달라진다. 일반적이면서 기본적으로 사용되는 수술기구는 다음과 같이	구성된다.

[실험동물의 수술 시 주로 사용하는 외과기구]

1)	길이 14 ㎝의 끝이 무딘 메요가위 1개(Blunt-ended Mayo's scissors)

2)	길이 12.7 ㎝의 예리한 포대가위 1개 (Pointed dressing scissors)

3)	중등도로 굽은 톱니가 있는 해부용 겸자 2개(Serrated dissecting forceps)와 피부와	근육을 잡는데 사용되는 유구겸자 1개(Curved toothed forceps)

4)	피부클립을 잡기위한 강한 유구겸자 1개(Strong toothed forceps)와 피부에 클립하	기 위한 겸자 1개(Skin clip application forceps)

5)	다양한 크기의 피부 클립(Skin clip) : 주로 12 ㎜ 크기를 사용

6)	봉합침(needle)

7)	봉합사(Suture material)

3.	고정기구

3.1	소동물용 고정판

[그소동물용 고정판과 고정핀]

1)	고정기의 기본형으로 마우스에서 기니픽까지 사용할 수 있다.

2)	전지, 우지 및 절치에 탄력성이 있는 끈을 걸치고 이것을 판에 고정시키거나 핀으	로 직접 고정한다.

3)	원칙적으로 고정판을 사용하는 경우에는 마취를 한다.

3.2	배위고정기

1)	동물의 전지 및 후지를 끈으로 고정하고 두부는 고정용 금속 기구를 사용하여 고	정한다. 각종 약리시험에 사용한다.

2)	위를 향할 수 있는 배위고정기 : 배위고정으로 헤드가 확실히 고정되기 때문에, 절	개를 하지 않아도 경정맥으로부터의 채혈, 약액의 주입이 용이

3)	옆드려 사용하는 배위고정기 : 배위고정이기 때문에 뇌‧귀‧눈을 이용한 실험, 또 등	의 피부를 이용한 패치 테스트에 용이

3.3	Holder 형

투명 아크릴 판으로 제작한 통에 동물을 넣어 고정한다. 이 고정기는 꼬리에 대한 처치	(투여, 채혈)에 사용한다.

① 머리쪽이 막힌 홀더 동물을 머리부터 넣고 아크릴판을 홈에 끼워 동물이 움직이지 않게 조절	② 꼬리쪽이 막힌 홀더 동물을 꼬리부터 넣고 마개를 끼워 동물이 움직이지 않게 조절
③ 양쪽 모두 개방되어 동물의 출납시 스트레스를 주지 않음	④ 양쪽 모두 개방 하부가 책상에 고정되어 안정적인 처치가 가능함
[소동물용 아크릴 홀더]

3.4	Ballmann cage

고정기의 적당한 위치의 구멍에 금속봉을 끼워 랫드를 고정하는 기구로서, 장시간의 고	정을 할 때에 사용한다. 특히, 림프액, 담즙, 췌액을 채취하는 경우나 채혈시에 사용한다.

3.5	기타 소동물 고정기구

① 셀로판지를 이용한 고정방법
② 원뿔형 고정틀	③ 뇌정위(定位) 고정장치
[소동물용 고정기구]

3.6	기타 중동물 고정기구

3.6.1	상자형 고정기

토끼에서는 원통형 또는 상자형 고정기(머리 부분만이 외부로 노출되도록 제작되어 있어	이개부 정맥의 처치를 행하는 실험에 사용된다).

3.6.2	칼 고정기

칼 고정기(목에 칼을 씌우는 것으로 동물을 자연의 체위로 고정하기 때문에 체온 측정이	나 피부반응의 관찰 실험에 사용한다)

① 천을 이용한 고정방법	② 토끼의 아크릴 상자형 고정기
③ 플라스틱 상자형 고정기	④ 원통형 고정기
[중동물용 고정기구]

[부록   ] 소독과 멸균

※“소독과 멸균”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

미생물 및 감염성물질을 취급하는 실험실에서 소독과 멸균에 대한 올바른 이해와 적절한 방법의 선택은 생물안전 확립을 위해 매우 중요하다. 감염력을 저하시키거나 세균의 오염 등을 제거하는 소독과 멸균은 취급하는 미생물, 감염성물질, 오염 정도 등에 따라 종류 및 방법이 달라질 수 있다. 따라서 생물요소의 특성에 따라 제조업체의 규격 문서를 바탕으로 소독 및 멸균제 사용 방법을 정한다. 소독과 멸균에 관한 용어는 다양한데, 가장 많이 이용되는 용어의 의미는 다음과 같다(Laboratory biosafety manual 3rd, WHO, 2004).

- 항미생물제(antimicrobial) : 미생물을 죽이거나 성장과 증식을 억제하는 물질

- 방부제(antiseptic) : 미생물의 성장과 증식을 저해하는 성분. 미생물을 반드시 사멸시키지는 않음

- 살생제(biocide) : 생물체를 죽이는 물질을 지칭하는 일반적인 용어

- 화학적 살균제(chemical germicide) : 미생물을 죽이는데 사용되는 화학물질 또는 혼합물

- 오염제거(decontamination) : 오염물질(미생물 등)을 죽이거나 제거하는 과정

- 소독제(disinfectant) : 미생물을 죽이지만 포자(Spore)는 죽이지 않는 화학물질 또는 혼합물

- 소독(disinfection) : 미생물을 죽이지만 포자는 죽이지 않는 물리/화학적 수단

- 살미생물제(microbiocide) : 미생물을 죽이는 화학물질 또는 혼합물. 살생제, 화학적 살균제 또는 항미생물제 대신 사용하는 용어

- 살포자제(sporoicide) : 미생물과 포자를 죽이는데 사용하는 화학물질 또는 혼합물

- 멸균(sterilization) : 모든 종류의 미생물과 포자를 죽이거나 제거하는 과정

1.	세척

소독․멸균을 하기 전, 대상 물품의 외부 표면 등에 부착된 유기물, 토양, 기타 이물질 등을 제거하여 효과적인 소독․멸균이 가능하게 한다. 소독․멸균 대상품에 부착되어 있는 물질들은 소독․멸균의 효과를 저하시킬 수 있기 때문에 기계적인 마찰, 세제, 효소 등을 사용하여 충분히 이물질 등을 제거 한 후에 소독․멸균 등을 실시한다.

2.	소독

2.1	소독방법

소독은 일반적으로 미생물의 생활력을 파괴시키거나 약화시켜 감염 및 증식력을 없애는 조작을 의미하며, 미생물의 영양세포를 사멸시킬 수 있으나 포자는 파괴하지 못한다. 방법에 따라 증기소독, 자비소독, 일광소독, 약물소독 등으로 구분되며 실험실에서는 주로 약물소독법을 사용하는데 소독제는 가격이 싸고 소독효과가 높지만 인간 및 환경 위해 가능성 때문에 저장, 취급 등에 주의하고 제조사의 사용설명서와 MSDS(material safety data sheets)을 숙지해야 한다.	물체의 표면에 있는 미생물 및 세균의 아포를 사멸하는데 있어 그 능력별로 수준을 다음과 같이 나눌 수 있다. 사용하는 기구의 종류와 요구되는 소독수준에 따라 필요로 되는 소독 방법을 요약하면 다음 표와 같으며, 요구되는 소독 수준에 따라 알맞은 소독방법을 선택하여 사용해야 한다.

1)	높은 수준의 소독(high level disinfection)：노출시간이 충분하면 세균 아포까지 죽	일 수 있으며 모든 미생물을 파괴할 수 있는(germicidal) 소독능이다.

2)	중간 수준의 소독(intermediate level disinfection)：결핵균, 진균을 불활성화 시키지	만, 세균 아포를 죽일 수 있는 능력은 없다.

3)	낮은 수준의 소독(low level disinfection)：세균, 바이러스, 일부 진균을 죽이지만,	결핵균이나 세균 아포 등과 같이 내성이 있는 미생물은 죽이지 못한다.

[요구되는 소독수준에 따른 알맞은 소독방법]

	멸 균	높은 수준의 소독	중간 수준의 소독	낮은 수준의 소독
대상	고위험기구	준위험기구	일부 준위험기구 및 비위험기구	비위험기구
노출 시간	각 방법 마다 ( )안에 표시	20℃ 이상에서 12-30분1,2	1분 이상3	1분 이상3
종류 및 방법	고열멸균: 증기 혹은 고열의 공기 (제조업자의 권고사항 준수, 증기멸균의 경우 3-30분)	글루타르알데히드 혼합제품 (1.12% 글루타르알데히드 + 1.93% 페놀, 3.4% 글루타르알데히드 +26% 이소프로판올 등)	에탄올 또는 이소프로판올 (70-90%)	에탄올 또는 이소프로판올(70-90%)
	에틸렌옥사이드 가스 멸균 (제조업자의 권고사항 준수, 1-6시간의 멸균시간과 8-12시간의 공기정화 시간 필요)	0.55% 이상의 올소-프탈알데하이드	차아염소산 나트륨 (1:500으로 희석하여 사용, 검사실이나 농축된 표본은 1:50으로 희석)	차아염소산 나트륨 (1:500으로 희석하여 사용)
	과산화수소 가스플라즈마 (제조업자의 권고사항 준수, 내관 구경에 따라 45-72분)	7.5% 과산화수소	페놀살균세정제 (제조회사 지침에 따라 희석)	페놀살균세정제 (제조회사 지침에 따라 희석)
	글루탈알데하이드 혼합제품 (1.12% 글루타르알데히드 + 1.93% 페놀, 3.4% 글루타르알데히드 + 26% 이소프로판올 등) (온도와 농도 유의, 20-25℃에서 10시간)	과산화수소/과초산 혼합제품 (7.35% 과산화수소 + 0.23% 과초산, 1% 과산화수소 + 0.08% 과초산)	아이오도퍼 살균세정제 (제조회사 지침에 따라 희석)	아이오도퍼 살균세정제 (제조회사 지침에 따라 희석)
	7.5% 과산화수소 (6시간)	세척 후 70℃에서 30분간 습식 저온살균	-	4급 암모늄세정제 (제조회사 지침에 따라 희석)
	0.2% 과초산 (50-56℃에서 12분)	차아염소산염(사용장소에서 전기분해로 제조된 것으로 활성유리염소가 650-675ppm 이상 함유)	-	-
	과산화수소/과초산 혼합제품 (7.35% 과산화수소 + 0.23% 과초산, 1% 과산화수소 + 0.08% 과초산) (3-8시간)	-	-	-

1. 소독제에 노출시간이 길수록 미생물 제거가 잘된다. 내관이 좁거나 유기물이나 박테리아가 많이 존재 하는 곳은    세척이 어렵기 때문에 10분간 노출이 불충분할 수 있다. 결핵균과 비정형성 마이코박테리아를 사멸하는데 필요한    최소 노출시간은 2% 글루타르알데히드는 20℃에서 20분, 2.5% 글루타르알데	히드는 35℃에서 5분, 0.55% 올소-    프탈알데하이드는 25℃에서 5분이다.

2. 튜브제품들은 소독제에 충분하게 잠겨야 하며, 공기로 인해 잠기지 않는 부분이 없도록 주의한다.

3. 제품회사에서 과학적 근거에 의해 제시된 시간을 준수한다.

(출처: 의료기관 사용 기구 및 물품 소독 지침(보건복지부고시 제2010-61호))

2.2	소독제의 소독효과 영향 요인

2.2.1	소독제의 농도

일반적으로 소독제의 농도가 높을수록 소독제의 효과도 높아지지만 기구의 손상을 초래할 가능성도 높아진다. 소독하고자 하는 물체에 부식, 착생, 기능의 이상을 주지 않으면서 살균에 적절한 농도를 유지할 수 있어야 한다.

2.2.2	미생물 오염의 종류와 농도

일반적으로 미생물의 수가 많을수록 소독의 효과는 감소된다. 또한 미생물의 종류에 따라서도 차이가 있다.

2.2.3	유기물의 존재

혈액, 단백질, 토양 등의 오염물질은 소독제 및 멸균제가 미생물과 접촉하는 것을 방해하거나 불활성화 시킨다. 유기물이 많을수록 소독에 필요한 접촉시간은 지연되므로, 소독을 실시하기 전에 세척 등의 유기물 제거과정이 필요하다.

2.2.4	접촉시간

소독제의 효과가 나타나기 위해서는 일정 시간동안 소독제와 접촉하고 있어야 한다. 필요한 접촉시간은 소독제의 종류와 기타 다른 영향요인들에 의해 결정된다. 일반적으로 노출시간이 길어질수록 미생물의 숫자는 감소한다.

2.2.5	물리적·화학적 요인

사용하는 희석용매의 물리적·화학적 요인이 영향을 미칠 수 있다. 물에 용해되어 있는 칼슘이나 마그네슘은 비누와 작용하여 침전물을 형성하거나 소독제를 중화시킬 수 있다. 물의 종류 즉, 지하수나 경수, 수돗물 혹은 정제수인지에 따라 영향을 받는다. 온도도 소독제의 효과에 영향을 미친다. 일반적으로 온도가 높을수록 소독력은 증가된다. 기구에 형성된 생막(biofilm)은 소독제로부터 생막 안쪽의 미생물들을 보호하는 역할을 하여 소독력을 저하시키기도 한다.

3.	미생물의 저항성

3.1	고유 저항성(instinct resistance, inherent feature)

미생물의 고유한 특성 즉, 미생물의 구조, 형태 등의 특성, 균 속, 균 종 등에 따라 갖게 되는 소독제에 대한 고유 저항성을 의미한다. 그람음성세균은 그람양성세균보다 소독제에 대한 저항성이 강하며, 포자의 경우 외막 등의 구조적 특성 때문에 영양세포보다 강한 저항성을 갖게 된다. 따라서 적합한 소독제를 선택하기 위해 취급 미생물과 소독제에 대한 이해가 필요하다.

3.2	획득 저항성(acquired resistance, develop over time)

미생물이 환경, 소독제 등에 노출되는 시간이 경과함에 따라 발생할 수 있는 미생물의 염색체 유전자 변이 또는 치사농도보다 낮은 농도의 소독제를 지속적으로 사용하는 과정에서 획득되는 내성을 의미한다.

3.3	소독제에 대한 미생물의 저항성

소독제에 대한 미생물의 저항성은 미생물의 종류에 따라 다양하다. 세균 아포가 가장 강력한 내성을 보이며, 지질 바이러스가 가장 쉽게 파괴된다. 영양형 세균, 진균, 지질 바이러스 등은 낮은 수준의 소독제에도 쉽게 사멸되며, 결핵균이나 세균의 아포는 높은 수준의 소독제에 장기간 노출되어야 사멸이 가능하다.

[소독과 멸균에 대한 미생물의 내성 수준]

미생물	내성	예	필요한 소독수준
프리온 세균 아포 Coccidia 항산균 비지질, 소형바이러스 진균 영양형 세균 지질, 중형 바이러스	높음 낮음	CJD Bacillus subtillis Cryptosporidium M. tuberculosis, M. terrae Poliovirus, Coxsackie virus Aspergillus spp., Candida spp. S. aureus, P. aeruginosa HIV, HSV, HBV	프리온 소독방법 멸균 높은 수준의 소독 중간 수준의 소독 낮은 수준의 소독

(출처: 병원감염예방관리지침(보건복지부, 질병관리본부, 2005))

4.	소독제 종류별 특성 및 사용방법

4.1	알코올(alcohol)

에탄올(에틸알코올, C2H5OH)과 2-프로판올(이소프로필알코올, (CH3)2CHOH)의 소독 특성은 유사하다. 영양형 세균, 진균, 지질 함유 바이러스에 작용하지만, 포자에는 효과가 없다. 비지질성 바이러스에 대한 작용 수준은 다양하다. 약 70%(v/v) 농도의 수용액으로 사용할 때 가장 효과가 좋다. 이보다 더 크거나 낮은 농도에서는 살균제로써 효과가 없을 수 있다. 알코올 수성 용액은 해당 표면에 잔류물을 남기지 않는다는 장점이 있다.

알코올만 사용할 때보다 다른 것과 혼합하여 사용하면 더 효과적이다(예, 70%(v/v) 알코올과 100 g/ℓ 포름알데히드, 2 g/ℓ 유효 염소를 함유한 알코올). 70%(v/v) 에탄올 수성 용액을 피부, 실험실 벤치의 작업 표면, 생물안전작업대의 작업 표면에 사용할 수 있다. 또한 작은 외과 기구를 담가서 처리할 때도 사용한다. 에탄올은 피부를 건조시킬 수 있으므로, 연화제와 혼합하여 사용하기도 한다. 손 씻기가 어렵거나 가능하지 않은 경우에 심하지 않게 오염된 손의 처리 시에 알코올성 손 소독제 사용을 권장한다. 하지만 에탄올은 포자에 효과가 없고 모든 종류의 비지질성 바이러스를 죽이지 못한다는 점을 주의해야 한다.

알코올은 휘발성과 인화성이 있으므로 화기 근처에서 사용해서는 안 된다. 상용 용액을 적절한 용기에 담아 보관하여 알코올이 증발되지 않게 한다. 알코올은 고무를 경화시키고 일부 접착제를 용해시키기도 한다. 에탄올을 적절하게 보관하고 재고 관리를 하는 것이 중요하다. 소독 이외의 다른 용도로 사용하지 않게 한다. 알코올 함유 용액이 담긴 병에 라벨을 명확히 부착하며 고압증기멸균을 피한다.

4.2	염소(차아염소산나트륨)

빠르게 작용하는 산화제인 염소(chlorine)는 널리 사용되는 광범위 화학적 살균제이다. 일반적으로 차아염소산나트륨(NaOCl) 용액 상태인 표백제로 판매되며, 이 용액을 물로 희석하여 유효 염소 농도를 다양하게 만들어 사용한다. 염소(특히 표백제로서)는 알칼리성이며 금속을 부식시킬 수 있다. 염소의 활성은 유기물(단백질)에 의해 크게 감소된다. 표백제 원액이나 상용 용액을 개봉 용기에 담아 보관하면(특히 고온에서), 염소 가스가 방출되어 살균 능력이 약화된다. 표백제 상용 용액의 교체 주기는 함량, 용기의 종류(예, 뚜껑이 있는 용기 또는 뚜껑이 없는 용기)와 크기, 사용 빈도와 특성, 외기 조건 등에 따라 다르다. 일반적으로 하루에도 몇 번씩 고농도의 유기물이 포함된 물품을 처리하는 용액은 적어도 매일 교체하고, 사용 빈도가 적은 경우에는 최대 1주일까지 사용할 수 있다.

[염소 방출 화합물의 권장 희석 농도]

위험군	깨끗한 경우	더러운 경우
유효염소수준	0.1%(1 g/ℓ)	0.5%(5 g/ℓ)
차아염소산나트륨 용액(5% 유효염소)	20 ㎖/ℓ	100 ㎖/ℓ
차아염소산칼륨(70% 유효 염소)	1.4 g/ℓ	7.0 g/ℓ
이염화이소사이아누르산나트륨 분말 (60% 유효 염소)	1.7 g/ℓ	8.5 g/ℓ
이염화이소사이아누르산나트륨 정 ( 1 tablet 당 1.5 g 유효 염소)	1 tablet/ℓ	4 tablet/ℓ
클로라민(25% 유효 염소)	20 g/ℓ	20 g/ℓ

(출처: Laboratory biosafety manual 3rd, WHO, 2004)

일반적인 범용 실험실 소독제는 1 g/ℓ의 유효 염소 농도여야 한다. 생물위해 물질의 유출 상황을 처리하는 경우와 다량의 유기물이 존재할 때는, 유효 염소 농도가 5 g/ℓ인 더 강한 소독제를 권장한다. 가정용 표백제와 같은 차아염소산나트륨 용액은 일반적으로 유효 염소 농도가 50 g/ℓ이므로, 1 g/ℓ와 5 g/ℓ의 유효 염소 농도 용액을 만들려면 1:50 또는 1:10으로 희석한다. 산업용 표백제는 차아염소산나트륨 농도가 120 g/ℓ이므로, 앞서 설명한 것을 감안하여 적절하게 희석한다. 차아염소산칼슘(Ca(ClO)2) 과립이나 정제의 유효 염소 함유량은 약 70%이다. 1.4 g/ℓ와 7.0 g/ℓ를 함유하는 과립이나 정제로 만든 용액의 유효 염소는 각기 1.0 g/ℓ와 5 g/ℓ이다. 표백제를 방부제로 사용하는 것은 권장하지 않지만, 표백제를 일반적인 목적의 소독제로 사용할 수 있다. 또한 금속 재질이 아닌 오염된 물건을 담가서 처리하는 용도로도 사용할 수 있다. 비상 상황에서는 유효 염소 농도를 1-2 ㎎/ℓ로 하여 음용수 소독에 사용할 수도 있다.	염소 가스는 독성이 강하다. 그러므로 환기가 잘되는 곳에서 표백제를 보관하고 사용한다. 또한 표백제를 산과 섞지 않는다. 염소 가스가 빠르게 방출될 수 있기 때문이다. 많은 염소 부산물은 인체와 환경에 유해하므로, 염소 기반 소독제(특히 표백제)를 아무렇게나 사용하는 것은 피한다.

4.3	이염화이소사이아누르산나트륨

분말 형태의 이염화이소사이아누르산나트륨(NaDCC)은 유효 염소 함량이 60%이다. NaDCC 분말로 조제한 1.7 g/ℓ와 8.5 g/ℓ 용액의 유효 염소 함량은 각기 1 g/ℓ와 5 g/ℓ이다. NaDCC 정제는 일반적으로 1 tablet 당 1.5 g의 유효 염소에 해당되는 양을 함유한다. 1 L의 물에 정제 1개나 4개를 용해하면 1 g/ℓ 또는 5 g/ℓ의 농도가 된다. 분말이나 정제 상태인 NaDCC는 보관이 용이하고 안전하다. 고형 NaDCC를 혈액이나 기타 생물 위해 액체 유출물에 가하고 최소 10분간 방치한 다음에 제거한다. 이후 해당 지역을 추가적으로 청소한다.

4.4	클로라민

클로라민(chloramine)은 약 25% 유효 염소를 함유한 분말 상태이다. 클로라민은 차아염소산보다 느리게 염소를 방출한다. 그러므로 차아염소산과 동일한 수준의 효과를 달성하기 위해서는 초기 농도가 더 높아야 한다. 반면 클로라민 용액은 차아염소산 용액과 같은 수준으로 유기물에 의해 불활화되지 않으므로, "깨끗한" 상황과 "더러운" 상황 모두에 20 g/ℓ의 농도가 권장된다.	클로라민 용액은 무취이다. 하지만 여기에 담근 물품은 충분하게 헹구어 클로라민-T(sodium tosylchloramide) 분말에 첨가한 희석제(bulking agents) 잔류물을 제거해야 한다.

4.5	이산화염소

이산화염소(ClO2)는 강력하고 빠르게 작용하는 살균제, 소독제이자 산화제이며, 표백제로써 염소가 필요로 하는 수준보다 낮은 농도에서도 활성을 나타내는 것으로 보고되었다. 이산화염소는 가스 상태로 안정하지 않으며, 염소 가스(Cl2)와 산소 가스(O2)로 분해되면서 열이 발생한다. 하지만 이산화염소는 물에 녹으며 액상에서 안정적이다. (1) 염산(HCl)과 아염소산나트륨(NaClO2)을 혼합하여 현장에서 생산하는 방법과 (2) 안정화된 형태를 주문하여 필요한 경우에 현장에서 활성화시켜 사용하는 방법 등 2가지 방법으로 이산화염소를 만들 수 있다.

산화성 살생제(biocide) 가운데 이산화염소가 가장 선택적인 산화제이다. 오존과 염소는 이산화염소보다 반응성이 훨씬 뛰어나며, 대다수 유기 화합물이 흡수한다. 하지만 이산화염소는 환원 황 화합물, 이차/삼차 아민, 그리고 고도로 환원된 반응성 유기 화합물 일부와 반응한다. 그러므로 염소나 오존을 사용할 때보다 훨씬 적은 용량의 이산화염소를 사용하여 보다 안정적인 잔류물이 생성될 수 있다. 이산화염소의 선택성 때문에 유기물 함유량이 많은 경우에는, 적절하게 생산한 이산화염소가 오존이나 염소보다 더 효과적이다.

4.6	글루타르알데히드

글루타르알데히드(OHC(CH2)3CHO)는 영양형 세균, 포자, 진균, 지질/비지질 함유 바이러스에 작용한다. 포름알데히드에 비하여 빠르게 작용하고 비부식성이다. 하지만 세균 포자를 죽이는데 몇 시간이 걸린다. 약 20 g/ℓ(2%) 농도의 글루타르알데히드 용액 상태로 판매되며, 일부 제품은 사용 하기 전에 제품과 함께 제공되는 중탄산염 화합물을 첨가하여 "활성화"(알칼리화)할 필요가 있다. 활성화 상태인 용액은 조성과 유형, 사용 빈도에 따라 1-4주 동안 사용할 수 있다. 글루타르알데히드 용액이 혼탁해지면 폐기한다.

글루타르알데히드는 독성을 띠고 피부와 점막에 자극을 유발하므로 접촉을 피해야 한다. 환기가 잘되는 곳이나 후드에서 사용한다. 환경 표면의 오염 제거를 위해 분무하여 사용하는 방식은 권장되지 않는다. □화학물질관리법』시행규칙 “별표1. 유해화학물질 취급기준”을 준수한다.

4.7	페놀 화합물

페놀 화합물은 초기에 나온 살균제이며 다양한 종류가 있다. 하지만 최근에는 안전 문제 때문에 페놀 화합물 사용을 제한하는 편이다. 영양형 세균과 지질 함유 바이러스에 작용하며, 적절하게 조제하여 사용하는 경우에는 마이코박테리아에 대해서도 활성을 나타낸다. 포자에 대해서는 효과가 없고, 비지질성 바이러스에 대한 활성도 상황에 따라 다양하다. 환경 표면의 오염 제거에 사용되는 페놀 제품이 많고, 일부(예, 트리클로산, 클로록실레놀) 제품은 방부제로 많이 사용된다.	트리클로산은 손 세척에 많이 사용된다. 주로 영양형 세균에 작용하며, 피부와 점막에도 자극을 주지 않는다. 하지만 실험실 조건에서 실시한 연구에 의하면, 저농도의 트리클로산에 내성을 나타내는 세균은 일부 항생제에도 내성을 보인다. 이 결과의 의미는 아직까지 확실하지 않다. 일부 페놀 화합물은 물의 경도에 민감하며 불활화될 수도 있으므로, 증류수나 탈이온화수로 희석해야 한다.	식품 접촉 표면이나 어린이가 있는 곳에는 페놀 화합물 사용을 권장하지 않는다. 고무가 페놀 화합물을 흡수할 가능성이 있고, 피부를 뚫고 침투할 수도 있으므로 □화학물질관리법』시행규칙 “별표1. 유해화학물질 취급기준”에 따라 보관해야 한다.

4.8	4급 암모늄 화합물

여러 종류의 4급 암모늄 화합물(quaternary ammonium compounds)이 혼합물로 사용되며, 때로는 알코올 같은 다른 살균제와 함께 사용된다. 일부 영양형 세균과 지질 함유 바이러스에 대해 우수한 활성을 나타낸다. 방부제로 사용되는 것도 있다(예, 염화벤잘코늄).

일부 4급 암모늄 화합물의 살균 작용은 유기물, 물의 경도, 음이온성 세제에 의해 크게 감소된다. 그러므로 4급 암모늄 화합물을 소독에 사용할 때는 예비 세척용 물질을 신중하게 선정할 필요가 있다. 4급 암모늄 화합물 용액에서 유해 세균이 자랄 수도 있다. 생분해성이 좋지 않으므로 4급 암모늄 화합물이 환경에 축적될 수 있다.

4.9	요오드와 요오드포

작용 방식은 염소와 비슷하지만, 유기물에 의한 억제 영향은 다소 적은 편이다. 요오드(iodine)가 섬유와 환경 표면을 오염시킬 수 있으며, 일반적으로 소독제로 사용하기에는 적합하지 않다. 반면 요오드포(iodophors)와 요오드 팅크(tinctures of iodine)는 방부제 효과가 우수하다. 요오드 기반 방부제는 일반적으로 의료용 기기와 치과 기기에 적합하지 않다. 알루미늄이나 구리 재질에는 요오드를 사용하지 않는다. 요오드는 독성을 나타낸다. 유해 세균의 증식을 피하기 위해, 유기 요오드 기반 제품을 4~10℃에서 보관한다.

4.10	과산화수소와 과산

염소와 마찬가지로 과산화수소(H2O2)와 과산(peracid)은 강력한 산화제이며 강력한 광범위의 살균제이다. 또한 염소에 비해 사람과 환경에 더 안전하다.

바로 사용할 수 있는 3% 용액이나 5~10배 희석하여 사용하는 30% 수성 용액(멸균한 물로 희석)이 있다. 하지만 3~6% 과산화수소 용액은 상대적으로 느리고 살균제로써 효과가 제한적이다. 현재 판매되는 제품은 과산화수소 함량을 안정화시키고 살균 작용을 가속화하며 부식성을 줄이기 위해 다른 성분을 함유한다. 과산화수소는 실험대와 생물안전작업대 작업 표면의 오염 제거에 사용할 수 있으며, 열에 민감한 의료용 기기와 치과 기기를 소독하는데 더 높은 농도의 용액이 적합할 수 있다. 열에 민감한 의료용 기기와 치과 기기의 오염 제거에 과산화수소나 과산화초산(CH3COOOH) 증기를 사용하려면 특수 설비가 필요하다.	과산화수소와 과산은 알루미늄, 구리, 황동, 아연 같은 금속을 부식시킬 수 있고, 섬유, 머리카락, 피부, 점막을 변색시키기도 한다. 과산화수소와 과산으로 처리한 물품은 충분히 헹군 다음에 눈이나 점막에 사용한다. 화기로부터 멀리 떨어진 곳에서 차광하여 보관한다.

[소독제 종류별 특성]

소독제	장점	단점	실험실 사용 범위
알코올 (alcohol)	낮은 독성, 부식성이 없음 잔류물 적고, 반응속도가 빠름	증발속도가 빨라 접촉시간 단축 가연성, 고무․플라스틱 손상가능	피부소독, 작업대 표면 clean bench 소독 등.
석탄산 화합물 (phenolics)	유기물에 비교적 안정적	자극성 냄새 부식성이 있음	실험장비 및 기구 소독 실험실 바닥, 기타 표면 등
염소계 화합물 liquid blench의 경우 (chlorine compounds)	넓은 소독범위, 저렴한 가격 저온에서도 살균효과가 있음	피부, 금속에 부식성, 빛 ․ 열에 약하며 유기물에 의해 불활성화 됨	폐수처리, 표면, 기기 소독 비상 유출사고 발생 시 등
요오드 (iodine)	넓은 소독범위 활성 pH 범위가 넓음	포자에 대한 가변적 소독효과 유기물에 의해 소독력 감소	표면소독, 기기 소독 등
제 4급 암모늄 (quaternary ammonium compounds)	계면활성제와 함께 소독효과를 나타내고 비교적 안정적임	포자에 효과가 없음 바이러스에 제한적 효과	표면소독, 벽 바닥소독 등
글루타알데히드 (glutaraldehyde)	넓은 소독범위 유기물에 안정적 금속 부식성이 없음	온도, pH에 영향을 받음 가격이 비싸고 자극성 냄새	표면소독, 기기, 장비 유리제품 소독 등
산화에틸렌 (ethylene oxide)	넓은 소독범위 열 또는 습기가 필요하지 않음	가연성, 돌연변이성 잠재적 암 유발 가능성	가스멸균
과산화수소 (hydrogen peroxide)	빠른 반응속도, 잔류물이 없음 독성이 낮고 친 환경적임	폭발 가능성(고농도) 일부 금속에 부식유발	표면소독 기기 및 장비 소독 등

[소독제 종류별 사용방법]

소독제	상용농도	반응시간	세균			바이러스	비고
			영양세균	결핵균	아포
알코올 (alcohol)	70~95%	10~30 min	+++	++++	-	++	Ethanol：70~80% Isopropanol：60~95%
석탄산 화합물 (phenolics)	3~8%	10~30 min	+++	++	+	++	아포, 바이러스에 대한 효과가 제한적임
염소계 화합물 liquid blench의 경우 (chlorine compounds)	4~5%	10~60 min	+++	++	++	++	유기물에 의해 중화되어 효과 감소
요오드 (iodine)	75~100 ppm	10~30 min	+++	++	- / +	+	아포에 효과가 없거나 약함
제 4급 암모늄 (quaternary ammonium compounds)	1：752 0.5~1.5%	10~30 min	+++	-	-	+	경수에 의해 효과감소 10~30분 반응
글루타알데히드 (glutaraldehyde)	2%		++++	+++	++++	++	반응속도가 느림(침투속도) 부식성이 없음
산화에틸렌 (ethylene oxide)	50~1200 ㎎/ℓ	1~12 hr (gas상)	++++	+++++	++++	++	가스멸균 시 사용 인체접촉：화학적 화상 유발
과산화수소 (hydrogen peroxide)	3~30%	10~60 min	++++	++++	++	++++	6%, 30분 처리：포자사멸가능

* 소독 효과： ++++  (Highly effective) >  +++  >  ++  >  +  >  －  (Ineffective)

5.	멸균

멸균이란 모든 형태의 생물, 특히 미생물을 파괴하거나 제거하는 물리적, 화학적 행위 또는 처리 과정으로 습식멸균, 건열멸균, 플라스마 및 가스멸균 등이 있다. 건열멸균은 160℃ 또는 그 이상의 온도에서 2∼4시간 동안 처리하는 것이고, 습식멸균법은 고압증기멸균기를 이용하여 121℃의 고온에서 15분간 처리하는 것으로 많은 실험실 및 연구시설에서 사용되고 있다.

5.1	멸균고려사항

일반적으로 소독 멸균 효과에 영향을 미치는 요소로써, 다음의 사항들을 고려할 수 있다.

1)	유기물의 량： 혈액, 우유, 사료, 동물 분비물 등은 소독․멸균 효과를 저하시킨다.	또한 많은 종류의 유기물은 소독제를 중화시킨다.

2)	표면 윤곽： 표면이 거칠거나 틈이 있으면 소독이 충분히 될 수 없다.

3)	소독제 농도： 모든 종류의 소독제가 고농도일 때 미생물을 빨리 죽이거나 소독	효과가 높은 것은 아니며, 대상물의 조직, 표면 등의 손상을 일으킬 수도 있다.

4)	시간 및 온도 : 적정 온도 및 시간은 소독제의 효과를 증대시킬 수 있으나, 고온	또는 장시간 처리할 경우, 소독제 증발 및 소독효과 감소의 원인이 된다.

5)	상대습도： 포름알데히드의 경우 70% 이상의 상대습도가 필요하다.

6)	물의 경도 및 세균의 부착능

5.2	멸균 주의 사항

멸균을 실시할 때에는 다음과 같은 사항에 주의해야 한다.

1)	멸균 전에 반드시 모든 재사용 물품을 철저히 세척해야 한다.

2)	멸균할 물품은 완전히 건조시켜야 한다.

3)	물품 포장지는 멸균제가 침투 및 제거가 용이해야 하며, 저장 시 미생물이나 먼지,	습기에 저항력이 있고, 유독성이 없어야 한다.

4)	멸균물품은 탱크 내 용적의 60~70%만 채우도록 하며, 가능한 같은 재료들을 함께	멸균한다.

5.3	멸균 확인 방법

멸균이 되었는지를 확인할 수 있는 방법은 일반적으로 다음의 3가지이다. 이 중 한 가지 만으로는 멸균여부를 판단하기 어려우므로, 적어도 두 가지 이상을 함께 사용하여야 한다.

5.3.1	기계적/물리적 확인(mechanical/physical indicator)

멸균 과정 동안의 진공, 압력, 시간, 온도를 측정하는 멸균기 소독 차트(chart)를 확인하는 방법이다. 멸균기 취급자는 멸균 과정 동안 멸균 사이클을 표시하고 기록계를 확인해야 한다. 이 방법은 멸균기 내부의 모든 부분에 대한 자료가 아니라 멸균기 내부의 한 시점에서의 상태를 나타내는 것이다.

5.3.2	화학적 확인

멸균 과정과 관련된 하나 혹은 두 가지 이상의 변수의 변화에 의해 시각적으로 반응하는 민감한 화학제(chemical indicator)를 이용하는 방법이다. 이 방법은 멸균 과정의 오류 발견이 비교적 쉽고 가격이 저렴하다. 그러나 멸균상태를 확인하는 것 보다는 포장 물품이 멸균 과정을 거쳤는지를 확인하는 수준이다.

5.3.3	생물학적 확인

멸균과정 동안 멸균이 잘 안 되는 곳에 Bacillus subtilis 혹은 Geobacillus stearothermophilus spore를 포함한 생물학적 표지자(biological indicator, BI)를 멸균기에 넣고 멸균을 한다. 멸균 후 BI 내의 세균을 배양하여 멸균 여부를 확인한다. 멸균기를 처음 설치하였을 때나 멸균기의 주요한 수리 후, 멸균기의 위치변경 및 환경적인 변화가 있을 때, 설명할 수 없는 멸균실패가 발생했을 때, 스팀 공급 및 공급라인의 변화, 물품의 적재방법 등의 변화가 있을 때에는 멸균기가 비어있는 상태에서 BI를 사용하여 연속 2회 검사를 시행한다. 2회 모두 멸균판정이 이루어졌을 때 멸균기를 가동시키도록 한다.

멸균 방법은 고온을 이용한 방법과 화학적 제제를 이용한 방법으로 분류할 수 있다. 멸균 여부를 확인할 수 있는지, 내부까지 멸균 될 수 있는지, 물품의 화학적, 물리적 변화가 있을지, 멸균 후 인체나 환경에 유해한 독성이 있는지, 경제성 등을 고려하여 선택하도록 한다.

[멸균방법의 종류와 장·단점]

멸균 방법	장 점	단 점
스팀(steam)	·환자, 직원 환경에 독성이 없음 ·전체과정의 관리 및 감시가 쉬움 ·무기물과 유기물에 의해 영향을 덜 받음 ·전체 cycle 시간이 빠름 ·포장이나 기구의 관을 통과	·열에 불안정한 기구에 해를 미침 ·연속적인 사용은 미세수술기구를 무디게 함 ·물기가 남아있을 경우 부식의 원인이 될 수 있음
과산화수소 가스플라즈마 (hydrogen-peroxide gas plasma)	·환경과 의료인에게 안정 ·잔류 독성이 없음 ·43-73분의 작용시간과 정화시간이 필요 없음 ·50℃이하에서 작용하므로 열과 습도에 민감한 물품에 사용가능 ·조작과 설비, 감시가 쉬움 ·대부분의 의료기구에 사용 가능 ·Electrical outlet만 필요	·섬유질(종이), 린넨, 액체는 사용할 수 없음 ·멸균용적이 작음(3.5-7.3 ft3) ·관의 길이가 40cm이상이거나 직경이 3mm이하인 경우는 부적합 ·합성팩(polypropylene포장지,polyolefin봉투)이나 특수한 포장 용기가 필요
에틸렌 옥사이드 가스 (100% EO)	·포장재질이나 기구의 관속으로 투과 1회용 cartridge를 음압인 챔버에서 가스의 누출이나 EO에 노출 없이 위험을 최소화 하면서 사용 가능	·잔재하는 EO의 제거를 위해 정화 필요 ·멸균 쳄버의 용량이 적음(4 ft3, 8.8ft3) ·EO는 독성이 있고 발암성과 가연성임 ·EO의 방출에 대한 규정은 국가마다 다름. 그러나 촉매세포는 EO의 99.9%를 CO2나 H2O의 형태로 결합하여 제거함 ·EO cartridge는 가연성 액체 보관 장에 저장 ·적용 주기와 정화시간이 김
에틸렌 옥사이드 혼합가스(EO mixture) ①12% EO 88% CFC ②8.6% EO 91.4% HCFC ③10% EO 90% HCFC ④8.5% EO 91.5% CO2	·의료포장, 플라스틱 포장을 통과 ·대부분의 의료기구들에 사용 가능 ·과정을 관리하고 감시하기가 용이	·일부 국가에서 EO의 사용을 90-99.9%로 줄이도록 요구하고 잇음 ·1995년 이후 CFC의 사용이 금지됨 ·직원과 환자에게 독성이 있음 ·적용 주기와 정화시간이 긺 ·EO는 독성이 있고 발암성과 가연성임
과초산 (peracetic acid)	·빠른 작용 시간(30-45분) ·잦은 온도(50-55℃에서 침습적인 멸균방법 ·최종산물이 환경 친화적임 ·염, 단백질, 미생물의 제거를 쉽게 하여 내시경속으로 소독제가 통과됨	·멸균 후 포장 및 보관이 어려움 ·미생물지표를 일반적인 검사방법으로 사용할 수 없음 ·침적할 수 있는 기계에만 사용 ·일부 재질에서는 사용 못함(알루미늄 피막 처리된 기구는 코팅이 벗겨짐) ·완전 침적방식으로 한 번에 멸균가능 용량이 적음.

(출처: 병원감염예방관리지침(보건복지부, 질병관리본부, 2005))

[부록   ] 실험동물 검체의 처리

1.	혈액검체의 처리

※“실험동물 검체의 처리”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

혈액에서 실험목적에 맞는 적절한 검체를 얻기 위해서는 그에 해당하는 적절한 tube의	선택을 필요로 한다. 혈청(serum)을 얻기 위한 tube로써는 plain tube, SST tube가 주로	사용되며 혈장(plasma)을 얻기 위한 tube로써는 항응고제(Anticoagulants)를 기준으로 크	게 EDTA tube, Sodium citrate tube, Heparin tube 등이 주로 사용되어진다. 항응고제의	종류에 따라 실험결과에 많은 영향을 미칠 수 있으므로 실험 전 필히 적절한 항응고제를	선정하여 준비하여야 한다.

1.1	혈청(serum)을 분리하는 방법

1.1.1	Plain tube

1)	아무런 처리도 되어있지 않은 tube로서 응고촉진제 또는 항응고제에 의한 미세한	영향까지도 완전히 배제하기를 원하는 경우에 사용한다.

2)	얻어진 전혈을 plain tube에 넣고 최대 2시간까지 방치하면서 전혈의 응고가 일어	나면서 상층부에 혈청이 나타나는 것을 확인한 후 원심분리기를 이용하여 1,000-1,	300ｇ로 원심 분리한다.

3)	분리된 혈청을 혈청분리관 또는 pipet을 이용하여 조심스럽게 취하여 microtube에	옮겨 담은 후, 분석할 때까지 -70℃에서 보관한다.

1.1.2	SST (Serum Separation Tube)

1)	튜브벽에 붙어 있는 silica particles은 응고를 촉진시키며 혈청내의 미세한 fibrin 형	성을 극소화시키는 작용을 하고, 튜브 밑에 있는 gel 성분은 혈청과 세포성분이 섞	이는 것을 방지하는 barrier 역할을 하므로, plain tube 보다 혈청을 빨리 분리할	수 있으며 혈청분리관도 필요 없다.

2)	Silica particle은 tube 내의 혈액 검체로 방출되면 혈소판과 달라붙고 응집된 혈소	판이 혈병을 형성한 후 thrombin이 생성되어 fibrin 형성을 촉진한다.

3)	Fibrin strands는 clot을 형성하게 된다. 이와 같은 작용이 원활히 이루어지기 위해	서는 혈액을 채취한 후 튜브를 5회 정도 위아래로 천천히 뒤집어 혈액과 silica	particles이 충분히 섞이도록 한 다음 응고가 형성되도록 30분 정도 방치한 후, 15	분간 1,000-1,300 xg로 원심 분리한다.

4)	원심분리 후, 하층의 혈구와 상층의 혈청 사이에 gel이 위치하여 혈청이 분리되면,	SST tube를 기울여 microtube에 옮겨 담은 후, 분석할 때까지 -70℃에서 보관한다.

1.2	혈장(plasma)을 분리하는 방법

1.2.1	EDTA (Ethylene diamine tetraacetic acid)

1)	기전 :

Calcium을 착화결합(chelated binding)으로 제거한다. EDTA는 인공산물의 형성을	막으므로 , 채혈 후 2시간 이내의 혈액으로 혈액도말표본을 제작할 수 있으며 CBC	검사는 냉장 24시간 까지 가능하다.

2)	사용법 :

혈액 5㎖, 5㎎의 분말 EDTA를 필요로 하며, 액상으로는 전혈 5㎖당 10%용액 (w/v)	0.05㎖이 필요하다. 채혈한 전혈을 EDTA tube (용량: 3㎖) 또는 micro EDTA tube	(용량: 0.5㎖)에 넣고, tube 벽의 EDTA 분말이 혈액과 잘 섞이도록 roll mixer에서 5	분 이상 섞어준다. 응고되지 않은 전혈은 24시간 내에 CBC 검사 또는 도말검사를	수행한다.

3)	참고사항 :

EDTA는 K₂ EDTA, K₃ EDTA와 Na₂ EDTA가 모두 사용되나 ICSH (International	Council for Standization in Hematology)에서는 1.5-2.2 ㎎/㎖의 농도의 K₂ EDTA를	권장하고 있다. EDTA 성상은 용액 또는 말린 것을 사용하며, 용액 성상의 EDTA는	혈액과 항응고제가 쉽게 섞이므로 응고 덩어리가 덜 생기는 장점이 있으나 희석으	로 일부 검사결과에 영향을 줄 수 있으며 적은 양의 혈액에서는 희석 현상이 더욱	심해진다. 과도한 EDTA는 도말표본의 세포 형태에 나쁜 영향을 미친다. Na₂ EDTA	는 칼륨염보다 용해가 덜되며, K₃ EDTA은 세포 수축을 일으켜 micro-hematocrit로	측정할 때 hematocrit이 낮아지는 결과를 초래한다.

1.2.2	구연산나트륨(Sodium Citrate)

1)	기전 :

주로 혈액 응고 검사에 사용되는 항응고제로서 용해 혼합액에서 혈액중의 calcium	과 결합하여 calcium citrate의 불용성 침전물을 만들어 응고를 방지하며 특히 혈액	응고인자들의 보존에 우수하다.

2)	사용법 :

0.109Ｍ 또는 3.8%농도의 용액으로 만들어 용액 1에 혈액 9의 비율로 섞어 사용하	며 hematocrit에 따라 그 비율은 변동이 있다. 이 항응고제는 Westergren법의 적혈	구 침강속도(ESR)을 측정할 때도 사용하는데 이때에는 용액 1에 혈액 4의 비율로	섞어 사용한다.

[혈액응고계 검사에서 hematocrit 수치에 따른 항응고제 비율의 조정]

Hematocrit (Hct)	항응고제 : 혈액
6%	1 : 5
20~30%	1 : 6
45%	1 : 9
55%	1 : 11
63%	1 : 13

1.2.3	헤파린(Heparin)

1)	기전 :

Heparin은 혈액 응고 과정 중 thrombin의 형성을 방해하는 anti-thrombin작용을	하여 대개 24시간 동안 응고를 방지하는 우수한 항응고제이다. Heparin은 세포	크기나 ESR에 영향을 주지 않고 용혈을 막아주므로 삼투압 취약성 검사에 가장 좋	다.(항응고제를 사용하는 경우에 한하여.) 그러나 heparinized 혈액으로 도말표본을	만들어 Wright's 염색을 하면 배경이 푸르게 염색이 되며 백혈구나 혈소판이	clumping되는 수가 있다.

1.2.4	사용법 :

혈액 5㎖당 1㎎의 건조 heparin이나 0.1㎖의 포화액이 필요하다.

1.2.5	포화액 :

포화액은 1g의 heparin을 증류수 100㎖에 녹인 것으로 이 용액을 CBC병에 0.1㎖씩 분주	하여 넣고 그대로 사용하거나 37℃에서 건조시켜 사용한다.

[항응고제의 종류 별 주요 적용분야]

항응고제	항응고기전	적용
Heparin	anti-thrombin	혈중 lactate dehydrogenase (LDH), creatine kinase (CK) 측정 pharmacokinetic (PK) HPLC (high performance liquid chromatography)
EDTA	Ca2+ chelating	CBC 검사 백혈구 감별계산
Sodium citrate	Ca2+ chelating	혈액응고시간(PT, aPTT)측정

blood tube (1㎖ 이상의 혈액처리용)	blood microtube (1㎖ 이하의 혈액처리용)

[사용목적에 따른 혈액처리용 tube의 종류]

2.	장기중량측정 및 조직고정

2.1	장기중량의 측정

1)	조직장기를 이루는 세포가 병리학적 영향을 받게 되면, 세포변성→세포종창→세포	괴사→염증반응→섬유화의 과정을 거쳐 장기중량이 증가하는 경향을 나타낸다. 따	라서 실험적 처치에 의해 영향을 받은 장기와 정도를 구분하기 위하여 실험동물의	상대장기중량(체중%=장기중량×100/체중)을 측정할 필요가 있다.

2)	적출한 장기는 멸균생리식염수에 헹구어 혈액성분을 제거하고, 핸드타올 위에서 부	가적인 지방조직을 깨끗이 떼어낸다.

3)	실험동물의 상대장기중량을 산출하기 위해 실험동물로부터 적출한 장기의 절대중	량을 실험동물용 저울을 이용하여 측정한다.

4)	장기조직의 중량측정이 종료된 후, 측정된 중량데이터의 옆에 개체번호 및 장기 이	름을 기입한다.

2.2	장기의 고정 및 보관

2.2.1	장기조직 고정의 목적

1)	자가융해의 방지 :

뇌(Brain), 신장(Kiney)등과 같이 특수하게 분화된 세포들로 구성된 복잡한 장기들이	탄력섬유나 교원섬유 등과 같은 비교적 단순한 구조물보다 훨씬 빠르게 진행되고	그 영향도 심하게 나타난다.

2)	화학물질의 용해 및 소실 방지 : 단백질, 효소(췌장) 등

3)	미생물에 의한 부패 방지

4)	조직손상의 방지

5)	염색의 매염작용 :

고정은 일반적으로 조직에 대한 염료의 작용을 촉진시키는 작용이 있다. 단, 일부	고정제는 염색제에 따라 염색을 촉진시키기도 하고 방해하기도 한다. 그 예를 보면	Masson trichrome 염색은 일반 포르말린 고정조직보다 피크르산을 함유한 Bouin	용액에 고정했을 때 염색강도가 더 강하며, 횡문근 염색시 사용하는	PTAH	(phosphotungstic acid hematoxylin) 염색에서는 포르말린 고정조직에 비해 승홍	(mercury salt)이 포함된 Zenker 액에 고정했을 때 더 강한 염색성을 나타낸다.

2.2.2	고정액의 특징

1)	고정액의 사용량 :

일반적으로 조직편 체적의 20배를 사용한다.

2)	고정액의 온도 :

일반적으로 실온에서 사용하며 전자현미경용 시료는 냉장에서 고정한다.

2.2.3	조직의 고정방법

1)	일반적으로 고정은 냉장에서 4~6시간, 실온에서 24시간이 소요된다.

2)	장기의 고정을 위해 고정병(마우스‧랫드 50㎖, 토끼이상의 중동물 1,000㎖)을 사용	한다.

3)	고정병에 장기조직 부피의 20배 이상의 고정액을 넣는다.

4)	고정을 하지 않고 동결보존하는 경우 1.5㎖ tube에 조직을 넣고, 액체질소에 완전	히 담가 동결시킨다. 동결된 tube는 동결박스에 넣어 초저온고에 보관한다.

5)	고정병에 장기조직을 넣고 잘 흔들어 폐를 제외한 모든 장기조직이 고정액 속에서	가라앉는 것을 확인한다.

6)	정액과 장기조직이 들어있는 고정병에 동물실험승인번호, 부검일, 개체번호 등의	정보가 기재된 고정병라벨(DBEC-LAL 양식 42-06)를 붙여 실온 또는 냉장에서 보관	한다.

7)	고정이 완료된 후, 고정내용을 기록한다.

[주요 고정액의 종류와 사용법]

	종류	조성	용량	고정시간	비고
포르말린계	10% Neutral buffered formalin(NBF)	37~40% formalin NaH2PO4․H2O Na2HPO4(anhydrous) 증류수	100 ㎖ 4.0g 6.5g 900 ㎖	3~4일	고정 1일후 고정액 교체 가능하면 4 ﾟC 고정
알콜계	Carnoy 용액	Absolute ethanol Chloroform 빙초산	60 ㎖ 30 ㎖ 10 ㎖	2~3시간	사용시간조정 고정후 무수에탄올 탈수
피크르산계	Bouin 용액	Picric acid 포화수용액 37~40% formalin 빙초산	75 ㎖ 25 ㎖ 5 ㎖	2~3시간	사용시간조정 고정후 수세없이 직접 70% ethanol에서 탈수로 옮김
승홍계	Zenker 용액	Potassium dichromate Sodium sulfate Mercuric chloride 빙초산 증류수	2.5g 1.0g 5.0g 5 ㎖ 100 ㎖	6~8시간	탈승홍과정을 수행함
전자현미경시료	4% paraform- aldehyde	paraformaldehyde 0.1M phosphate buffer(pH7.4)	4.0g 100 ㎖	24시간	고정할 조직의 크기는 가능한 작게 한다.
	2% glutar- adehyde	25% glutaradehyde 증류수 0.1M phosphate buffer(pH7.4)	2 ㎖ 10.5 ㎖ 100 ㎖	2시간	냉장고에 보관 4 ﾟC 에서 고정

※ 조직 두께 : 광학 0.4 ㎜, 전자현미경 0.05~0.1 ㎝ 기준

2.2.4	고정의 촉진 및 완료 후 처리

1)	고정의 촉진을 위하여 진탕, 감압, 가온 등의 방법을 사용할 수 있으나 가온의 경	우 60℃ 이상에서는 조직상에 영향을 미칠 가능성이 있으므로 주의가 필요하다.

2)	고정의 완료를 확인하기 위해서는 조직의 색상, 경도의 변화를 본다. 고정된 조직	은 회백색으로 불투명해지고 딱딱해진 것을 느낄 수 있다. 미고정 부분은 부드럽고	반투명하며 혈액의 적색이 남아있어 구별된다. (고정된 혈액은 암적색으로 변함)

3)	고정이 완료된 조직은 일반적으로 포르말린에서 보관된다. 포르말린은 고정 후 보	존액의 기능도 있으므로 당분간 그대로 보존해도 좋으나 용액의 pH등의 여건에 따	라 수개월이 지나면 염색성 장애 또는 색소침착이 있을 수 있다.

4)	고정이 완료된 조직은 수세하여 포르말린을 조직에서 제거 후 다음단계를 진행한	다.

3.	조직의 삭정 (Gross tissue trimming)

3.1	조직의 삭정방법

3.1.1	간(Liver)

간은 가능하면 넓은 범위를 관찰할 수 있도록 가장 큰 엽을 그림과 같이 횡단면으로 절	단하여 카세트에 넣은 후, 신선한 고정액에 넣고, 72시간 동안 다시 후 고정한다.

3.1.2	신장(Kidney)

신장은 대칭성 장기이므로 좌측신장은 횡단으로 절단하고, 우측신장은 종단으로 절단하	여 삭정한다.

3.1.3	고환(Testis) 및 부고환(Epididymis)

고환은 가운데 부위를 횡으로 1회만 절단한다. 부고환은 머리, 몸체 및 꼬리가 포함되도	록 삭정 않고 카세트에 그대로 넣는다. 편의상 머리와 꼬리부분을 절단하여도 무방하다.

3.1.4	난소(Ovary) 및 자궁(Uterus)

1)	난소는 별도의 삭정 없이 그대로 카세트에 넣고, 자궁은 양쪽의 자궁각을 횡으로	절단하여 삭정한다.

2)	전립샘은 방광 사이의 경계부를 절단한 후, 약 3~4 mm 뒤쪽으로 다시 절단하여	삭정한다.

3.1.5	비장(Spleen), 림프절(Lymph node), 흉선(Thymus), 부신(Adrenal gland) 및 췌장	(Pancreas)

1)	비장의 폭이 가장 넓은 부위에서 횡으로 절단하여 삭정한다. 결절이 형성된 경우	결절부가 포함되도록 삭정한다.

2)	부신은 별도의 삭정 없이 그대로 카세트에 넣고, 췌장은 가능한 넓은 부위를 관찰	할 수 있도록 삭정하지 않고 넓게 펴서 카세트에 넣는다.

3)	림프절은 작은 크기의 경우 별도의 삭정을 하지 않으며, 큰 림프절의 경우 횡단으	로 삭정한다.

4)	흉선은 삭정을 하지 않아도 무방하며, 필요한 경우 횡단으로 삭정한다.

3.1.6	폐(Lung), 기관(Trachia), 갑상선(Thyroid gland), 심장(Heart)

1)	기관은 횡으로 잘라 삭정하고, 폐는 주 기관기가 포함되도록 좌우측의 폐엽을 관상	으로 절단하여 삭정한다.

2)	갑상선 및 부갑상선은 기관으로부터 분리하지 않고 기관과 함께 절단하여 삭정한	다.

3)	심장은 심실과 심방 및 심방귀가 포함되도록 관상동맥을 따라 횡으로 삭정한다.

3.1.7	뇌(Brain) 및 뇌하수체(Pituitary)

뇌는 전두엽피질, 두정부피질, 소뇌부위의 3개부분에서 종으로 삭정하며, 뇌하수체는 별	도의 삭정을 하지 않는다.

3.1.8	위(Stomach) 및 소화기관

1)	위 및 소화기는 점막과 장막이 포함될 수 있도록 종으로 절단하여 삭정한다.

2)	위는 위 유문부와 분문부가 모두 포함될 수 있도록 그림과 같이 근육위 부분과 샘	위부분이 포함되도록 삭정한다.

3)	그 외 십이지장(duodenum), 공장(jejunum), 회장(ileum), 맹장(cecum) 및 결장	(colon)은 종으로 절단하여 삭정한다.

4.	조직처리, 파라핀 포매, 조직박절

4.1	고정액의 수세(Tapwater washing)

1)	고정액은 조직표본 염색 시에 염색액과 반응하여 시험처치에 의한 병변이 아닌 인	공병변(artifact)를 형성하기 때문에 조직 처리 전 수세과정을 거쳐 제거해야 한다.

2)	고정액을 수세하여 제거하기 위해 후고정된 조직이 들어있는 조직카세트를 수세용	기에 넣고, 물을 가득 채운다. 물이 가득 차면, 흘러나오는 물의 양이 너무 많지 않	도록 물의 양을 조절하여 24시간 동안 수세한다.

3)	싱크에서 더운물이 나올 경우 고정액과 반응하여 제거가 잘 안되므로, 반드시 찬물	을 이용하여 수세한다.

4)	수세 중 조직카세트가 공기 중에 노출되면 조직이 말라서 위축되므로 수면 위 노	출되지 않도록 주의한다.

4.2	조직처리(Tissue precessing)

1)	수세가 종료된 조직카세트는 파라핀 포매를 위해 조직처리과정을 거쳐야 한다.

2)	자동조직처리기를 이용하여 조직처리를 수행한다. 자동조직처리기를 이용하여 조직	처리를 개시하면, 다음과 같은 순서로 조직처리작업이 진행된다.

①	탈수(Dehyration)

수세 과정 동안 탈수(dehydration)된 조직으로 파라핀을 침투시키기 위해서는	EtOH를 이용하여 탈수시킨다. 탈수는 70%의 저농도부터 시작하여 100%의	absolute EtOH를 이용하여 점차적으로 농도를 높임으로써 완전히 탈수가 되	도록 한다(70% EtOH→80% EtOH→90% EtOH→95% EtOH→100% EtOH).

각 농도별 EtOH는 각각 1시간동안 담가둔다.

②	청명화(Clearing)

탈수가 완료된 조직카세트는 Xylene에 각각 30분간 담가 청명화 한다.	Xylene은 조직 내에 있는 불순물을 녹여 깨끗한 조직표본을 제작하는데 도움	을 준다. 탈수가 완전하지 못한 조직은 xylene과 반응하여 젖빛 혼탁을 일으	킨다.

③	파라핀침투(Paraffin infiltration)

청명화가 종료된 조직카세트를 60ﾟC로 가열되어 액체 상태인 파라핀에 2시	간 동안 담가 파라핀이 조직 안으로 침투될 수 있도록 한다. 파라핀이 조직	내에 잘 침투되도록 DMSO가 첨가된 파라핀을 사용해도 무방하다.

4.3	파라핀 포매(Paraffin embedding)

1)	조직처리가 종료된 조직카세트는 파라핀 포매기의 액체파라핀에 담가 파라핀이 응	고되지 않도록 한다.

2)	파라핀 포매기의 스테인레스 몰드 또는 플라스틱제의 1회용 몰드에 파라핀을 가득	채운다.

3)	조직카세트를 포셉으로 개방한 후, 조직절편을 꺼내어 파라핀이 채워진 몰드의 바	닥에 놓고, 파라핀 포매기의 cold plate에 올려놓아 조직절편을 몰드에 고정시킨다.

4)	조직카세트의 덮개를 버리고, 파라핀을 추가하여 몰드 위의 조직카세트까지 가득	채우고, 냉각판 위에서 완전히 굳힌다.

5)	파라핀이 완전히 굳으면 몰드에서 조직파라핀 블록을 쉽게 분리시킬 수 있다. 분리	된 조직파라핀 블록의 변연부는 파라핀이 불규칙하게 붙어 있으므로, 파라핀 제거	용 칼을 이용하여 주변의 파라핀을 완전히 제거해 준다.

6)	제작된 조직파라핀 블록은 냉동(-20ﾟC) 상태에서 깨끗하게 박절되므로, 박절 시까	지 냉동실에 보관한다.

4.4	조직박절(Histosection with microtome) 및 조직슬라이드글라스 표본제작

1)	냉동실에 보관된 조직파라핀 블록을 꺼내어 마이크로톰에 부착시킨다.

2)	마이크로톰 용 blade를 부착시킨 후, 관찰하고자 하는 조직이 노출될 때까지 박절	두께 10㎛로 박절 한다.

3)	관찰하고자 하는 조직이 노출되면 목적에 따라 3~4㎛(H&E stain) 또는 6~8㎛	(immunohistochemistry)의 두께로 박절한다. 박절된 조직편을 항온수조의 25ﾟC 이	상의 따뜻한 물위에 띄워 완전히 펴지도록 한다.

4)	조직편을 슬라이드글라스 위에 위치시킨 후, 핫플레이트 위에서 36ﾟC에서 한 시간	이상 건조시켜 수분을 완전히 제거한다.

5)	수분이 제거된 후, 핫플레이트의 온도를 56~58ﾟC로 맞추어 조직편 외의 파라핀을	완전히 녹이고, 슬라이드글라스에 조직을 단단히 고정시킨다.

6)	제작된 슬라이드글라스는 염색을 수행하기 전까지 슬라이드글라스 보관박스에 넣	어 실온에서 보관한다.

5.	조직병리학적 검사

5.1	조직슬라이드글라스의 염색(Staining of tissue slide glass)

1)	기 제작된 조직 슬라이드글라스의 잔여 파라핀을 완전히 제거하고, 조직이 슬라이	드글라스에 부착하기 위해 55ﾟC의 드라이오븐에 넣어 30분간 가열한 후, 실온에서	완전히 식힌다.

2)	이후의 염색과정은 다음의 순서대로 수행한다.

[조직슬라이드글라스의 H&E 염색순서]

순서	단계명	작용	적용 시간 (minutes)
1	Xylene	탈 파라핀화	05:00
2	Xylene		05:00
3	Xylene		05:00
4	100% Ethanol	함수	03:00
5	95% Ethanol		03:00
6	90% Ethanol		03:00
7	80% Ethanol		03:00
8	70% Ethanol		03:00
9	Tap water	함수 및 수세	10:00
10	Hematoxylin	Nucleus 염색	01:30~05:00
11	Tap water	염색 안정화	10:00~15:00
12	Eosin	Cytosol 염색	02:00~10:00
13	Tap water	잔여 염색액 수세	Tapping
14	70% Ethanol	탈수	Tapping
15	80% Ethanol		Tapping
16	90% Ethanol		Tapping
17	95% Ethanol		Tapping
18	100% Ethanol		03:00
19	100% Ethanol		03:00
20	100% Ethanol		03:00
21	Xylene	청명화	05:00
22	Xylene		05:00
23	Xylene		Overnight
24	커버글라스 봉입	염색상의 보존	-

5.2	조직병리학적 검사

H&E 염색이 완료된 슬라이드글라스를 광학현미경을 이용하여 다음과 같은 순서로 관찰	한다.

1)	슬라이드글라스는 저배율부터 고배율의 순서로 관찰한다.

2)	40배의 배율에서 조직의 전체적인 형태를 관찰하고, 이상 염색상을 나타내는 부	위를 배율을 높여 관찰한다.

3)	조직의 관찰순서는 외연면에서부터 결합조직을 거쳐 실질조직으로 관찰한다.

4)	주요 관찰항목은 세포의 형태, 크기, 혈관분포, 실질의 RBC 유출 여부, 염증세포의	침윤여부, 세포질의 염색상, 세포밀도를 중점적으로 관찰하여 병리조직 판독기록을	한다. 소견의 기술방법은 다음과 같다.

“병변의 심각성”-“병변의 분포”-“장기의 이름”-“병변의 발생 위치”-“병변의 이름”

[조직병리학적 검사결과 기술방법]

영문명	한글명
Severe diffuse liver granulomatous hepatitis	간의 심각한 미만성 육아종성 간세포염증
Mild multifocal kidney granulomatous glomerulitis	신장의 미약한 산재성 육아종성 사구체신염

[부록   ] 실험동물 마취

1.	마취 전 준비

※“실험동물 마취”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	일반사항

1.1.1	진통

진통(鎭痛)이란 신체의 일부나 국소부위의 감각 및 통증이 상실되는 것을 의미하며, 통증	을 완화시킬 수는 있으나, 외과적 수술을 수행하기에는 적합하지 않으므로, 비교적 간단	한 외과적 처치를 위해서 사용한다.

1.1.2	마취

마취는 신체의 일부나 전신의 감각의 완전한 소실을 의미하며, 개복술 또는 정형외과술	과 같은 수술적 처치를 위해서는 전신마취를 필요로 하며, 전신마취는 전신으로부터 통	각이 상실되어야 하며, 무의식 상태에 있어야 한다.

1.1.3	완전한 마취의 특징

무의식, 근육이완, 통증성 자극에 대한 무반응

1.1.4	완전한 마취의 부작용

호흡, 심혈관계 및 다른 주요 중추신경을 억제하여 심각한 부작용 또는 사망을 초래할	수 있으므로 주의해야 한다.

1.2	일반적인 마취 시 고려사항

1.2.1	동물실험계획서의 승인받은 실험방법 확인

1)	동물실험계획서의 동물실험형태의 시료채취 및 외과적 처치에 체크되어 있는지 확	인한다.

2)	동물실험계획서의 실험방법(프로토콜)개요, 마취하지 않은 상태에서 동물이 경험하	는 통증 및 스트레스의 정도의 고통분류 등급에서 Grade D에 체크되어 있는지 확	인한다.

3)	동물실험계획서의 진정제, 진통제, 마취제 등의 사용방법의 내용을 확인한다.

4)	이상의 동물실험계획을 확인하여 사용할 마취, 진정, 진통제의 종류와 수술방법을	파악한다.

1.2.2	보정과 마취

1)	적절한 보정과 마취는 동물복지를 위해서 뿐만 아니라, 재현성 있고 신뢰성 높은	실험결과의 도출을 위해 반드시 필요하다.

2)	마취를 위한 실험동물의 보정을 위해 실험동물에 고통과 불쾌감을 주지 않도록 보	정에 능숙한 동물실험 수행연구자가 실시해야 한다.

3)	마취제를 선택할 때는 마취의 목적(보정을 위한 가벼운 진정, 단시간의 수술, 장시	간의 수술 등)에 맞는 충분한 진통 및 진정작용이 유발되는지를 고려하여야 한다.

4)	수술을 위해 전신 마취를 할 때에는 의식소실(narcosis), 근이완(relaxation) 및 진통	(analgesia)작용이 적절히 유발되도록 마취제, 근이완제 및 진통제 등을 선택해야	한다.

5)	마취제의 선택 및 용량은 동물의 종, 계통, 나이, 성별, 체중, 건강상태 등에 따라	다르므로 과용량으로 사용되지 않도록 주의한다.

6)	Barbiturate 및 케타민 등의 향정신성의약품을 사용하기 위해서는 향정신성의약품	관리담당자의 요청사항을 준수해야 한다.

1.3	마취 전 사료 및 음수의 제한

1.3.1	연구자의 결정사항

동물실험 수행연구자는 다음의 이유로 사료 및 음수의 제한을 수행하며, 필요에 따라 시	험연구책임자의 결정으로 사료 및 음수의 제한 시간을 연장 또는 단축할 수 있다.

1)	정확한 마취용량을 결정하기 위함

2)	마취 및 수술 중 구토로 인한 기도폐쇄로 오는 호흡장애 또는 오인성 폐렴	(aspiration pneumonia) 발생 예방

3)	사료 및 음수의 제한은 동물의 특성을 고려하여 최소한의 시간으로 하여야 하며,	다음의 기준에 따라 수행한다.

[실험동물의 종별 사료의 권장 제한시간]

조건	사료의 제한시간 (권장사항)
고단백 사료급이 시험, 기타 질병상태	4~6 시간 이하
마우스	수술 전 16 시간 이하
랫드	수술 전 16~24 시간 이하
햄스터	수술 전 16 시간 이하
기니픽	수술 전 사료제한 금지
토끼	수술 전 24 시간 이하
페렛	수술 전 사료제한 금지
개	수술 전 24 시간 이하
영장류	수술 전 24시간 이하

1.3.2	사료 및 음수의 제한을 실시할 수 없는 경우

사료 급이의 제한을 받지 않는 동일한 연령 및 성의 대조군과 비교하여 체중이 15% 이	상 감소하거나, 체중증가율이 15% 이상 감소하는 경우

1.3.3	음수의 제한 시 주의사항

1)	수술이 실시되기 1시간 전까지는 모든 실험동물에게 물을 공급하여야 한다.

2)	수술 전에 음수량이 감소하였거나 구토, 설사 또는 출혈이 있는 경우 수술 전에 수	액요법을 실시하여야 한다.

3)	탈수와 저혈당증이 나타날 수도 있으므로 마취 후에 dextrose와 수액으로 보충 처	치를 해주는 것이 좋다.

1.3.4	다음의 경우 수술 후 급수량을 증가시켜야 한다.

1)	탈수증이 있는 경우

2)	질병의 치료를 하고 있는 경우

3)	체중의 감소가 인정될 경우

4)	동물이 어리거나, 성장기임에도 적합한 체중증가량이 나타나지 않는 경우

5)	다른 원인으로 인해 수의사가 인정한 경우

1.3.5	수술 후, 통증 또는 마취 회복의 지연

수술 후, 통증 또는 마취 회복의 지연으로 사료의 섭취가 제한되거나, 어두워지기 전까지	사료를 먹지 않을 수 있다. 이러한 상태가 24시간 이상 지속될 경우 실험동물의 대사에	영향을 미쳐 수술 후 예후가 좋지 않은 경우가 있으므로 수술 후 적합한 진통제, 항생제	및 수액요법을 수행해야 한다.

1.3.6	토끼, 기니픽 및 소형설치류의 경우

토끼, 기니픽 및 소형설치류의 경우 사료의 제한으로 합병증이 발생할 수 있으며, 마취	중 구토의 가능성이 적으므로 사료를 제한하지 않아도 무방하다

2.	마취방법

2.1	Tribromoethanol (AvertinⓇ)

2.1.1	마우스 생존실험

마우스에서는 생존실험에서 주로 사용하는 Phentobarbital sodium 및 Ketamine과 더불	어 비생존실험에서는 Avertin®을 주로 사용한다. 마우스에서 Avertin®에 의해 30~40분	정도의 마취유지가 가능하다.

2.1.2	제조법

1)	Avertin®의 제조 및 보관과정에서 빛에 노출되면 독성물질이 발생해 실험동물에 투	여 시 복막염 등의 위해를 가할 수 있으므로, 제조 및 보관의 전 과정은 빛이 차단	된 조건에서 수행해야 한다.

2)	2,2,2-tribromoethanol (Sigma-Aldrich catalog #T48402(5g))과 2-methyl-2-butanol,	tertiary amyl alcohol-99% grade (Sigma-Aldrich catalog #240486 (5㎖))을 준비한	다.

3)	2.5g의 tribromoethanol을 5 ㎖의 tertiary amyl alcohol에 넣은 후 55ﾟC에서 완전	히 녹을 때까지 교반한다(Avertin stock solution, 50% formulation).

4)	Tribromoethanol이 완전히 녹으면, Avertin stock solution에 200 ㎖ 의 생리식염수	(NaCl)을 넣고, 결정이 생기지 않도록 완전히 녹을 때까지 교반(Avetin Working	solution, 1.2% formulation)하고, 주사기필터(size: 0.22㎛)를 이용하여 여과한다.

5)	Avertin Working solution을 필요량만큼 소분하여 빛이 통과하지 못하도록 냉장보	관한다.

2.1.3	투여방법

1)	냉장보관된 Avertin을 사용하기 위해 실온에 꺼내어 온도를 실온과 일치시킨다.

2)	오염된 Avertin은 복막염을 유발할 수 있으므로, 주의해야 한다.

3)	Avertin Working solution을 마우스 체중 10g 당 0.23㎖ 씩 복강투여(IP)하여 마취	시킨다.

Avertin working solution (1.2% formulation)
Body weight (g)	Administration volume (㎖)
23	0.53
24	0.55
25	0.58
26	0.60
27	0.62
28	0.64
29	0.67
30	0.69
31	0.71
32	0.74
33	0.76
34	0.78
35	0.81

[마우스 체중에 따른 Avertin의 적정 투여량]

2.2	흡입마취(inhalated agent)

2.2.1	Isoflurane 또는 sevoflurane Evaporator를 이용한 흡입마취 방법

1)	Isoflurane 또는 sevoflurane Evaporator에 isoflurane 또는 sevoflurane을 넣고, CO2	gas : NO gas=70 : 30의 비율이 되도록 가스분배기를 조정한다.

2)	Isoflurane또는 sevoflurane Evaporator의 isoflurane또는 sevoflurane %를 3~4%로	조정하고, 가스튜브가 연결된 마취통에 실험동물을 넣어 유도마취가 될 때까지 기	다린다.

3)	실험동물이 마취통 안에서 의식을 잃으면, 동물을 꺼내 수술대 위에 보정하고, 흡	입마취관의 내부관에 실험동물의 코를 삽입하여, 수술 중 깨어나지 못하도록 보정	한다.

4)	흡입마취관의 내부관에서는 마취가스가 양압으로 분출되고, 외부관에서는 실험동물	의 호흡가스를 음압으로 흡입하는 것을 확인한다.

5)	Isoflurane 또는 sevoflurane %를 1~2%로 조정하여 마취를 유지시킨다. 마취의 유	도 및 유지가 완료되면, 외과적 처치를 진행한다.

6)	Isoflurane 또는 sevoflurane Evaporator를 이용한 흡입마취는 기기의 제약사항으로	인하여 마우스, 랫드, 햄스터 및 기니픽의 실험동물에서 사용한다.

2.3	주사마취

실험동물의 마취를 목적으로 사용할 수 있는 주사마취제는 여러 종류가 있으나, 가장 많	이 사용하는 약물은 Barbiturates 계통의 마취제(pentobarbital, thiopental sodium), 해리	성 마취제인 ketamine 및 Zoletil을 가장 많이 사용한다. 본 마취제의 용량을 감소시키기	위해 diazepam, atropine, acepromazine 등의 진정제 등을 병용할 수 있다.

마취제의 종류와 실험동물에 따라 투여용량과 마취유지시간에 차이가 있으며, 동물종	별 주사마취를 위한 마취제, 투여용량, 투여경로 및 마취유지시간을 고려해야 한다.

2.4	진정(sedation) 및 진통(analgesia)

1)	간단한 외과적 처치를 수행하거나, 실험동물에 마취제를 투여하기 위한 보정의 목	적으로 진정제를 사용할 수 있다. 진정제는 주로 흡입마취 시 기관 삽관을 위한 목	적으로 사용되는 경우가 많으며, 각 동물 종별 진정제의 종류, 투여용량, 투여경로	등을 주의해야 한다.

2)	흡입마취상태에서 장시간 수술을 실시하거나, 진정상태에서 통증을 수반하는 외과	적 처치를 수행해야 할 경우 및 외과적 처치 후 실험동물의 회복에 도움을 주기	위하여 진통제를 사용한다. 일반적으로 opioid 계열의 진통제는 마약류에 해당되어	사용이 어려우므로, 비스테로이드성(NSAID) 진통제를 주로 사용한다.

[마우스(mouse)에서 주로 사용되는 진통, 마취제와 용법, 용량]

흡입마취제(Inhaled anesthetic drugs)
Agent	Dosage	Route	Comment
Isoflurane	유도: 3-4% 유지: 1-2%	Inhalation	evaporizer를 사용 생존수술을 위해 진통요법을 병행해야 함.
Halothane
Sevoflurane
N2O	유도: 전마취 후 유도 유지: 60%까지 가능	Inhalation	단독으로는 수술목적으로 사용 불가
Ether	유효한 농도 측정불가	Inhalation	실험동물에 염증 또는 스트레스를 유발하므로 사용을 권장하지 않음.
CO2	유효한 농도 측정불가	Inhalation	안락사 목적으로만 사용가능함.
국소마취제(Local anesthetic agents)
Lidocaine (1-2%)	2-4㎎/㎏(max 7㎎/㎏)	S.C.	국소마취 목적으로만 사용가능
Bupivacaine(0.5%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
Ropivacaine(0.2%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
주사마취제(Injectable anesthetic agents)
Ketamine-Xylazine- Acepromazine	70-100㎎/㎏(K)+ 2.5-10㎎/㎏(X)+ 2-3㎎/㎏(A)	IP IM	추가마취시에는 Ketamine만 투여함.
Ketamine-Xylazine	100㎎/㎏(K)+10㎎/㎏(X)	IP, IM	추가마취시에는 Ketamine만 투여함.
Ketamine	100-200㎎/㎏	IP	비생존수술에서만 사용
Pentobarbital	40-50㎎/㎏	IP	호흡억제에 주의해야 함.
	7.5-45㎎/㎏	IP, IM
Zoletil®, Telazol® (Tiletamine+Zolazepam)	50-80㎎/㎏	IP, IM	마우스에서는 사용을 권장하지 않음.
Tribromoethanol	“2.1 Tribromoethanol (AvertinⓇ)” 참조
Reversal agents(Adrenergic alpha 2 antagonist)
Yohimbine	0.2㎎/㎏	IM, SC	Xylazine reversal
Atipamezole	Xylazine 10㎎ 당 1㎎	IM, SC
Analgesic agents-NSAID
Carprofen	5㎎/㎏	PO, SC, IP	12-24시간 진통효과
Ketoprofen	5㎎/㎏	SC, IP	12-24시간 진통효과
Meloxicam	1-2㎎/㎏	PO, IM, SC, IP	12-24시간 진통효과
Flunixin	1-2.5㎎/㎏	SC	12-24시간 진통효과

[랫드(rat)에서 주로 사용되는 진통, 마취제와 용법, 용량]

흡입마취제(Inhaled anesthetic drugs)
Agent	Dosage	Route	Comment
Isoflurane	유도: 3-4% 유지: 1-2%	Inhalation	evaporizer를 사용 생존수술을 위해 진통요법을 병행해야 함.
Halothane
Sevoflurane
N2O	유도: 전마취 후 유도 유지: 60%까지 가능	Inhalation	단독으로는 수술목적으로 사용 불가
Ether	유효한 농도 측정불가	Inhalation	실험동물에 염증 또는 스트레스를 유발하므로 사용을 권장하지 않음.
CO2	유효한 농도 측정불가	Inhalation	안락사 목적으로만 사용가능함.
국소마취제(Local anesthetic agents)
Lidocaine (1-2%)	2-4㎎/㎏(max 7㎎/㎏)	S.C.	국소마취 목적으로만 사용가능
Bupivacaine(0.5%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
Ropivacaine(0.2%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
주사마취제(Injectable anesthetic agents)
Ketamine-Xylazine- Acepromazine	75-100㎎/㎏(K)+ 2-6㎎/㎏(X)+ 1-2㎎/㎏(A)	IP IM	추가마취시에는 Ketamine만 투여함.
Ketamine-Xylazine	60-90㎎/㎏(K)+6-9㎎/㎏(X)	IP, IM	추가마취시에는 Ketamine만 투여함.
Ketamine	75-100㎎/㎏	IP	비생존수술에서만 사용
Pentobarbital	30-40㎎/㎏	IV	호흡억제에 주의
	40-60㎎/㎏	IP
Zoletil®, Telazol® (Tiletamine+Zolazepam)	50-80㎎/㎏	IP	랫드에서는 사용을 권장하지 않음.
Reversal agents(Adrenergic alpha 2 antagonist)
Yohimbine	0.2㎎/㎏	IM, SC	Xylazine reversal
Atipamezole	Xylazine 10㎎ 당 1㎎	IM, SC
Analgesic agents-NSAID
Carprofen	5㎎/㎏	PO, SC, IP	24시간 진통효과
Ketoprofen	5㎎/㎏	SC, IP	12-24시간 진통효과
Meloxicam	1-2㎎/㎏	PO, IM, SC, IP	24시간 진통효과
Flunixin	1-2.5㎎/㎏	SC	12-24시간 진통효과

[기니픽(guinea pig)에서 주로 사용되는 진통, 마취제와 용법, 용량]

흡입마취제(Inhaled anesthetic drugs)
Agent	Dosage	Route	Comment
Isoflurane	유도: 3-4% 유지: 1-2%	Inhalation	evaporizer를 사용 생존수술을 위해 진통요법을 병행해야 함.
Halothane
Sevoflurane
N2O	유도: 전마취 후 유도 유지: 60%까지 가능	Inhalation	단독으로는 수술목적으로 사용 불가
Ether	유효한 농도 측정불가	Inhalation	실험동물에 염증 또는 스트레스를 유발하므로 사용을 권장하지 않음.
CO2	유효한 농도 측정불가	Inhalation	안락사 목적으로만 사용가능함.
국소마취제(Local anesthetic agents)
Lidocaine (1-2%)	2-4㎎/㎏(max 7㎎/㎏)	S.C.	국소마취 목적으로만 사용가능
Bupivacaine(0.5%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
Ropivacaine(0.2%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
주사마취제(Injectable anesthetic agents)
Ketamine- Acepromazine	20-40㎎/㎏(K)+ 0.5㎎/㎏(A)	IM, IP	추가마취시에는 Ketamine만 투여함.
Ketamine-Xylazine	진정:20-40㎎/㎏(K)+2㎎/㎏(X) 마취:87㎎/㎏(K)+13㎎/㎏(X)	IM, IP	추가마취시에는 Ketamine만 투여함.
Ketamine	75-100㎎/㎏	IP	비생존수술에서만 사용
Pentobarbital	15-40㎎/㎏	IP	호흡억제에 주의
Zoletil®, Telazol® (Tiletamine+Zolazepam)	20-40㎎/㎏	IP
A-Chloralose(1%)+Urethane(40% in a 7:1 mixture	8㎖/㎏	IP	2시간 유지가능
Reversal agents(Adrenergic alpha 2 antagonist)
Yohimbine	0.2㎎/㎏	IM, SC	Xylazine reversal
Atipamezole	Xylazine 10㎎ 당 1㎎	IM, SC
Analgesic agents-NSAID
Carprofen	4㎎/㎏	PO, SC	24시간 진통효과
Ketoprofen	1㎎/㎏	SC, IM	12-24시간 진통효과
Meloxicam	0.5㎎/㎏	PO, SC	24시간 진통효과
Flunixin	2.5㎎/㎏	IM	12-24시간 진통효과
Sedative agents
Acepromazine	0.5-1㎎/㎏, 2.5-5㎎/㎏	IM, IP
Ketamine	22-44㎎/㎏	IM

[토끼(rabbit)에서 주로 사용되는 진통, 마취제와 용법, 용량]

흡입마취제(Inhaled anesthetic drugs)
Agent	Dosage	Route	Comment
Isoflurane	유도: 3-5% 유지: 1-2%	Inhalation	evaporizer를 사용 생존수술을 위해 진통요법을 병행해야 함.
Halothane
Sevoflurane
국소마취제(Local anesthetic agents)
Lidocaine (1-2%)	2-4㎎/㎏(max 7㎎/㎏)	S.C.	국소마취 목적으로만 사용가능
Bupivacaine(0.5%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
Ropivacaine(0.2%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
주사마취제(Injectable anesthetic agents)
Ketamine-Xylazine	25-35㎎/㎏(K)+5㎎/㎏(X)	IM	추가마취시에는 Ketamine만 투여함.
Pentobarbital	20-30㎎/㎏, very slowly	IV	호흡억제에 주의
Zoletil®, Telazol® (Tiletamine+Zolazepam)	토끼에서는 사용금지
Reversal agents(Adrenergic alpha 2 antagonist)
Yohimbine	0.2㎎/㎏	IM, SC	Xylazine reversal
Atipamezole	Xylazine 10㎎ 당 1㎎	IM, SC
Analgesic agents-NSAID
Carprofen	4㎎/㎏ 1-2.2㎎/㎏	SC PO	24시간 진통효과
Ketoprofen	1-3㎎/㎏	IM, SC	12-24시간 진통효과
Meloxicam	0.3㎎/㎏	PO, SC	24시간 진통효과
Flunixin	1㎎/㎏	IM, SC	12-24시간 진통효과
Ibuprofen	7.5㎎/㎏	PO(water dosing)	12-24시간 진통효과
Sedative agents
Xylazine	1-5㎎/㎏	SC, IM
Diazepam	1-5㎎/㎏	IM
Acepromazine	0.25-1㎎/㎏	IM

[개(beagle dog)에서 주로 사용되는 진통, 마취제와 용법, 용량]

흡입마취제(Inhaled anesthetic drugs)
Agent	Dosage	Route	Comment
Isoflurane	유도: 3-5% 유지: 1-2%	Inhalation	evaporizer를 사용 생존수술을 위해 진통요법을 병행해야 함.
Halothane
Sevoflurane
국소마취제(Local anesthetic agents)
Lidocaine (1-2%)	2-4㎎/㎏(max 7㎎/㎏)	S.C.	국소마취 목적으로만 사용가능
Bupivacaine(0.5%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
Ropivacaine(0.2%)	1-2㎎/㎏(max 8㎎/㎏)	S.C.
주사마취제(Injectable anesthetic agents)
Ketamine-Xylazine	10㎎/㎏(K)+2.5㎎/㎏(X)	IM	추가마취시에는 Ketamine만 투여함.
Pentobarbital	20-30㎎/㎏, very slowly	IV	호흡억제에 주의
Thiopental	8-12㎎/㎏	IV	15분이내의 지속작용
Chloralose	80-110㎎/㎏	IV	6-10시간 지속, 보조적 진통요법 필요함.
Zoletil®, Telazol® (Tiletamine+Zolazepam)	6-8㎎/㎏	IM	1시간 지속
Zoletil®, Telazol® (Tiletamine+Zolazepam)+Xylazine+Butorphanol	6-8㎎/㎏+0.5㎎/㎏+0.2㎎/㎏	IM	1시간 지속
Reversal agents(Adrenergic alpha 2 antagonist)
Yohimbine	0.2㎎/㎏	IM, SC	Xylazine reversal
Atipamezole	Xylazine 10㎎ 당 1㎎	IM, SC
Analgesic agents-NSAID
Carprofen	4㎎/㎏, once 2.2㎎/㎏	PO, IV PO, IV, IM, SC	24시간 진통효과
Ketoprofen	2㎎/㎏, once 1㎎/㎏	IV, IM, SC PO, IM	12-24시간 진통효과
Meloxicam	0.2㎎/㎏, leading 0.1㎎/㎏	PO, SC, IV PO, SC, IV	24시간 진통효과
Tramadol	1-4㎎/㎏	PO	6시간 진통효과
Sedative agents
Xylazine	1.1-2.2㎎/㎏	IV, IM
Diazepam	0.3-0.5㎎/㎏	IV
Acepromazine	0.05-1㎎/㎏ 0.1-0.25㎎/㎏	IV, SC IM	총 투여량이 3㎎을 넘어서는 안 됨

*Zoletil은 Ketamine+Xylazine과 거의 유사한 작용을 나타내나, 토끼에서는 폐사율이 높아 사용은 금기이며, 주로 고양이 또는 개 이상의 중동물에서 사용이 권장된다.

2.5	돼지의 마취

2.5.1	진정

1)	수술 전처리, 투쟁방지, 수송 시 등의 흥분을 억제하는 경우에 진정제를 이용한다.

2)	진정제에 의한 전처리는 마취의 도입을 쉽게 하고 마취제의 사용량을 줄임에 따라	약제에 의한 사고를 최소화할 수 있다. 사용법에 따라서는 치료 등 단시간의 수의	학적 처지를 용이하게 한다.

3)	진정제로는 아제페론, 아세틸프로마진, 클로로프로마진 등이 이용된다.

2.5.2	국소마취법

1)	말초신경계에 무통효과를 발현시키기 위해 이루어진다.

2)	염산프로카인, 노보카인, 리도카인 등을 이용한다.

2.5.3	전신마취법

1)	장시간에 걸치 수술을 하는 경우는 24~36시간 전부터 절식을 하고 타액과 기관분	비물을 억제하기 위해 시술 30~50분 전에 황산아트로핀을 투여한다.

2)	케타민이나 자일라진 등으로 마취 전처리를 하고 근육을 충분히 이완시킨다. 그런	다음, 후두경(직선브레이드)을 이용하여 기간 튜브를 삽입한다. 마취 중의 체액유지,	긴급 시에 대비하여 정맥(전대정맥이나 이정맥 등)을 확보한다.

3)	흡입마취제로서 할로세인, 엔풀루란, 세보풀루란, 이소풀루란 등이 이용된다. 흡입	마취제는 도입이 신속하고 마취의 심도조절이 용이하다. 단, 장시간 이용하면 간기	능장애나 심폐기능저하, 저혈압 등을 보이므로 질소가스와 병용하면서 마취를 유지	하는 방법도 종종 이용된다.

2.5.4	마취회복

마취 종료 후에도 생체기능을 잘 관찰하여 필요에 따라 충분한 구명처치를 할 수 있도록	준비한다. 보온, 체위변환, 각성시의 타박상 방지에도 노력한다.

2.6	원숭이 마취

2.6.1	마취약 및 마취방법

1)	원숭이류의 마취약으로 펜토바르비탈(정맥내주사용 25mg/kg, 작용시간 2~4시간)은	각종 흡입마취에도 사용된다. 특히 외과수술 등에 효과적이다.

2)	마카크속 및 소형 원숭이류는 모두 근육내주사용 마취제인 염산케타민(동물용 모노	페인)이 범용되고 있다. 좁은 공간 사이에 원숭이를 두고 케이지 밖에서 대퇴부 등	의 근육에 쉽게 주사할 수 있다. 10~15mg/kg의 투여에 20~30분, 20~40mg/kg에	60~90분의	마취효과가 있다. 안전성이 높기 때문에 추가투여에 의한 마취시간의	연장도 가능하다.

3)	원숭이류에서의 검체의 채취, 투여, 간단한 외과적 처치를 위해 전신마취를 하는	경우가	많다.

2.6.2	마취 후의 처치

마취 후의 각성은 반드시 확인해야 한다. 각성할 때까지 동물을 엎드린 상태로 하고, 얼	굴을 아래로 하여 구토를 방지해야 한다.

3.	마취 중 실험동물의 관리

3.1	체온조절

1)	전신마취 중에는 체온이 소실되므로 수술실의 온도는 23ﾟC 이상을 유지해야 하고,	동물 종별 평균 정상 직장온도를 기억하여 수술 중 반복적으로 직장체온을 측정해	야 한다.

2)	정맥주사용 수액은 반드시 따뜻하게 데워 사용해야 한다.

3)	실험동물은 수술 중 온도계가 장착된 따뜻한 패드 위에 놓아야 한다.

4)	수술 후 마취에서 깨어나는 동물은 체온이 유지될 수 있도록 따뜻하게 해 주어야	한다. 담요, 온열등, 온열패드, 순환 온수패드 등으로 실험동물의 주위온도는 40ﾟC	로 유지해준다. 과열일 경우 실험동물이 화상을 입거나 폐사할 수 있으므로 주의해	야 하며, 마우스 및 랫드와 같은 소형 설치류는 면솜으로 싸 두는 것이 좋다.

[실험동물의 종별 평균 정상 직장 체온]

랫드	38.0ﾟC(36.0~39.5)

마우스	37.4ﾟC(33.5~39.0)

햄스터	37.4ﾟC(36.1~38.9)

기니픽	38.6ﾟC(37.2~39.5)

토끼	38.3ﾟC(37.0~39.4)

개	38.3ﾟC(38.1~38.9)

영장류	38.9ﾟC(38.4~39.6)

3.2	체액손실

수술 부위와 피부로부터의 수분증발과 호흡기에서 습윤한 가스가 지속적으로 건조한 가	스로 교체되기 때문에 수분이 소실되어 마취 중 체액의 소실량이 매우 크다. 증발로 인	한 수분의 소실은 체온 소실과 관련이 있으므로 수액을 정맥 주사를 통해 투여해 주어야	한다.

3.3	심박동수

심박동수는 청진기를 심첨이 있는 가슴 부위에 대거나, 식도 내 청진기를 심장부위까지	삽입하거나, 또는 심전도를 측정할 수 있다. 쇼크 시에는 심박수가 빨라지는 경우가 있으	며, 이는 혈관 허탈 상태에 임박함을 나타내는 증상이다. 맥박이 느려지는 경우 호흡억제	가 예상되므로, doxapram HCl과 같은 중추신경흥분제를 처방할 수 있다.

3.4	반사

3.4.1	굴근반사(flexor reflex) :

실험동물의 마취심도를 관찰하기 위하여 발가락 사이를 눌러 통증을 유발해 볼 수 있다.	이때 실험동물의 반응이 있을 경우, 수술을 위해 추가 마취를 해야 한다.

3.4.2	각막반사(cornea reflex) :

발가락 반사와 마찬가지로 각막에 손가락을 대어 보았을 때, 반응이 보이면 수술을 위해	추가마취를 해야 하며, 장시간 각막이 공기 중에 노출될 경우 손상이 유발될 수 있으므	로, 안약 또는 멸균생리식염수를 이용하여 각막이 건조하지 않도록 유지해야 한다.

3.4.3	근육이완 :

1)	수술을 위해서는 근육이 이완되어야 하는데 ketamine과 같은 마취제는 완전한 근	육이완을 유발하지 못한다. 따라서 부교감신경차단제와 병용해 주거나 barbiturate	등의 마취제를 선택할 수 있다.

2)	마취의 회복 시에는 체온, 심박동수와 더불어 굴근반사, 각막반사 및 근육이완 정	도를 모니터링하여 실험동물의 의식회복을 주의 깊게 관찰해야 할 필요성이 있다.

3.4.5	항생제

1)	수술 진행 중에 항생제의 처치는 금지이다.

2)	수술 후, tetracycline을 55㎍/㎖로 음수에 타서 주거나, 바이트릴 (Baytril)을 25 mg	/kg으로 근육주사하여 외과적 처치 후 발생할 수 있는 염증을 예방할 수 있다.

3)	대부분의 실험동물에서 수술 후 항생제의 처치는 필수적이다.

[부록   ] 실험동물 안락사

1.	안락사 처치 시의 고려사항

※“실험동물 안락사”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	안락사 처치 시점의 결정

1)	실험동물의 검수·검역 및 순화기간 중 이상 동물의 확인으로 실험동물업체 반환 등	후속조치에서 제외되거나, 순화기간 중 체중이상 등의 이유로 군분리에서 제외되었	을 때

2)	실험동물이 본래의 이용목적에 따라 실험이 중지되거나 종료될 때

3)	실험동물이 실험처치, 부상 혹은 질병 등에 의해 정상적인 상태로 회복되기 어려운	체중감소, 쇠약 및 빈사의 임상증상을 나타낼 때

4)	실험동물이 극심한 고통을 겪고 있으나, 회복이 어렵고, 진통·마취제의 처치로 개선	이 어렵다고 판단될 때

5)	실험동물이 선발에 의해 실험에 사용되지 않을 때

6)	번식군에서 실험동물이 노령으로 인해 더 이상 번식에 사용할 수 없다고 판단된	때

7)	번식군에서 유전자 검사에 의해 더 이상 생존시킬 필요가 없어 계속 사육을 할 경	우에 경제적인 손실이 예측될 때

8)	실험동물 시설의 오염사고, 화재, 지진 등의 긴급사태가 발생했을 때

1.2	안락사 처치의 고려사항

1)	실험동물의 안락사는『AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals』에 의거하	여 가능한 실험동물에게 고통을 가하지 않는 방법을 선정하여 실시하여야 한다.

2)	실험동물의 안락사는 실험동물관리자의 자문을 통해 시험연구책임자의 책임 하에	실시되어야 하며, 실시 후 실험동물의 사체는 “제  장 실험실 표준작업절차, 4. 폐	기물 관리”와 “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차에 따른다.

3)	안락사는 외부인의 출입이 제한되는 지정된 부검실에서 실시되어야 하며, 관련 연	구부서 사용자를 제외한 외부인이나 실험동물이 안락사 현장을 직접 목격할 수 없	도록 별도의 공간에서 시행되어야 한다.

1.3	안락사 방법 선택의 원칙

1)	랫드, 마우스 및 기니픽과 같은 소형 설치류에 대하여 주사용 제제로 안락사를 처	치해야 하는 경우 정맥투여의 어려움으로 인해 복강투여를 선택할 수 있다.

2)	안락사 방법의 선택은 안락사 후 조직시료의 채취목적에 따라 달라지며, 안락사 방	법에 따라 실험결과의 대사적(metabolic) 및 조직학적(histologic) 변형(artifact)이 유	발될 수 있으므로 신중하게 선택해야 한다.

3)	Isoflurane을 이용하여 안락사를 유발하는 경우 혈중 glucose 농도가 증가하게 되	며, 이산화탄소 가스를 이용하는 경우에는 혈중 칼륨(potassium) 농도가 증가하게	된다. 또한 barbiturates를 복강투여하는 경우에는 장관조직(intestinal tissue) 과 생	식호르몬(reproductive hormons)의 분비에 영향을 줄 수 있으므로, 해당 시료를 채	취해야 하는 경우 참고해야 한다.

2.	안락사 방법

2.1	마우스의 경추탈골법

2.1.1	적용

마우스에 한정하여 숙련된 동물실험 수행자가 수행하는 것을 원칙으로 한다.

2.1.2	방법

1)	엄지손가락과 집게손가락을 두개골 아래쪽 목의 양쪽에 위치시킨다. 또는 막대를	손가락 대신 두개골 아래쪽에 위치시키고, 손가락으로 이를 잡는다.

2)	다른 손으로, 두개골로부터 경추를 분리시키기 위해 꼬리나 뒷다리를 잡고 빠르게	잡아당긴다.

3)	경추가 탈구된 후, 실험동물의 꼬리나 뒷다리를 잡고 들어 올려 신속히 경구가 완	전히 탈구되도록 한다.

4)	경추탈구 처치 후, 약 2~3분간 방치하여 실험동물이 완전히 호흡정지 및 심장정지	가 유발될 때까지 확인한다.

5)	실험동물의 호흡 및 심박동이 정지되면, 실험동물의 사체는 “제  장 실험실 표준작	업절차, 4. 폐기물 관리”와 “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차	에 따른다.

[경추탈골법을 이용한 안락사법의 장단점]

장점	잘 훈련된 연구자가 수행 시 실험동물에 있어서 충분히 인도적인 방법이다. 흡입법을 적용할 수 있는 랫드, 마우스 및 기니픽 등 소형 설치류에서 가스 및 흡입마취제 없이 적용할 수 있는 간단한 방법이다. 소요시간이 짧아 대량의 안락사에도 적용할 수 있다. 의식소실을 위해 신속한 방혈을 하지 않아도 무방하다.
단점	경추탈구를 위해 실험동물을 보정하고, 손가락으로 두개골의 경추 부위를 잡는 과정에서 실험동물이 두려움을 느낄 수 있으므로 필요한 경우 흡입마취 후 실시할 수 있다. 잘 훈련되지 않은 연구자가 수행 시 오히려 비인도적인 안락사 방법이 될 수 있으므로 반드시 훈련된 연구자에 의해 수행되어야 한다. 경추탈구 후 대뇌에서의 전기전도는 약 13초 동안 지속되므로, 처치 후에도 실험동물의 움직임이 있을 수 있으므로 빈 케이지에 넣어 완전히 죽음에 이를 때까지 확인해야 하며, 이 과정을 다른 실험동물이 인지할 수 없도록 해야 한다. 충분히 인도적인 방법으로 알려져 있으나 대량의 안락사를 수행할 경우 실험수행자의 정서에 영향을 미칠 수 있으므로 최근에는 사용빈도 및 횟수는 감소추세이다.

2.2	닭의 경추탈골법

2.2.1	방법

1)	환추골과 후두골사이를 탈골시키는 경추탈골법이다.

2)	경추탈구 처치 후, 약 2~3분간 방치하여 실험동물이 완전히 호흡정지 및 심장정지	가 유발될 때까지 확인한다.

3)	실험동물의 호흡 및 심박동이 정지되면, 실험동물의 사체는 “제  장 실험실 표준작	업절차, 4. 폐기물 관리”와 “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차	에 따른다.

2.2.2	주의사항

1)	경추탈골법으로 죽기 직전에 심한 날개짓과 몸부림을 하기 때문에 확실하게 보정	해야 하며, 보정을 잘못했을 경우 모이주머니에 들어 있는 사료가 기관으로 역류되	어 호흡기계 병변관찰 시 정확한 병변을 보지 못 할 수 있다.

2)	탈골에 의한 출혈이 근육이나 내장장기에 생길 수 있으므로, 이러한 출혈을 병변으	로 오인하지 말아야 한다.

2.3	흡입마취제를 이용한 안락사

2.3.1	적용

마우스, 랫드, 기니픽 등 소형 동물의 안락사에 주로 사용함.

2.3.2	방법

1)	Isoflurane, Isoflurane 또는 ethylether를 가스 마취통에 일정량(약 20mL)을 붓고 기	화가 이루어질 수 있도록 약 1분 이상 방치한다.

2)	흡입마취제의 기화가 이루어지면 실험동물을 마취통에 넣고 과마취시킨다.

3)	실험동물의 호흡정지 및 심박동 정지가 유발될 수 있도록 5분 이상 방치한다.

4)	실험동물의 호흡 및 심박동이 정지되면, 실험동물의 사체는 “제  장 실험실 표준작	업절차, 4. 폐기물 관리”와 “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차	에 따른다.

장점	Isoflurane과 ethylether와 같은 흡입마취제는 정맥카테터 시술이 어려운 랫드, 마우스 및 기니픽 등의 소형 설치류의 안락사를 위해 주로 사용된다. 간단히 수행할 수 있으며, 별도의 동물실험 기법이 필요치 않다. 소형 설치류의 안락사를 위해 가장 널리 이용되고 있다.
단점	액체상태에서는 사람과 실험동물 모두에게 치명적이므로 충분히 기화된 후 사용해야 한다. 마취증기의 냄새가 자극적이어서 흥분을 유발할 수 있으므로 마취유발을 위해 CO2 가스의 전처치가 필요한 경우도 있다. Ether는 인화성과 폭발성이 있으므로 사용과 관리에 있어 주의를 기해야 한다. 기화된 가스에 실험자가 노출될 경우 실험자의 건강에 위해를 가할 수 있으며, 자연유산 및 선천적 기형이 유발될 수 있으므로 개인보호장구를 반드시 착용해야 한다.

[흡입마취제를 이용한 안락사법의 장단점]

2.4	이산화탄소 가스(CO2 gas)

2.4.1	적용

마우스, 랫드 및 기니픽의 소형 설치류

2.4.2	방법

1)	CO2 튜브가 연결된 가스마취통이 보관된 fume hood(퓸후드)를 가동시켜 CO2 가	실험실내로 누출되지 않도록 조치한다.

2)	마취통의 뚜껑을 열고, 퓸후드를 10분간 가동하여 마취통 안의 CO2 가스를 모두	제거한다.

3)	실험동물을 마취통에 넣고 마취통의 뚜껑을 닫은 후, CO2 가스 분배기를 작동시켜	마취통에 CO2 가스를 채운다. 호흡정지와 심장정지가 유발 될 때까지 약 5분간 방	한다.

4)	실험동물의 호흡정지 및 심장정지가 유발되면 CO2 밸브를 잠그고 마취통의 뚜껑을	열어 CO2 gas가 소진 될 때까지 약 5분간 기다린다.

5)	모든 과정이 종료된 후, 실험동물의 사체는 “제  장 실험실 표준작업절차, 4. 폐기	물 관리”와 “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차에 따른다.

[이산화탄소를 이용한 안락사법의 장단점]

장점	Isoflurane, ethylether와 같은 별도의 마취제가 필요치 않으며, CO2 gas만 있으면 안락사 처치가 가능하다. 이산화탄소에 의한 진정, 진통 및 마취효과는 매우 안정적이다. 가격이 저렴하고, 인화성 및 폭발성이 없어 안전하다. 실험동물의 조직에 축적되지 않으며, 기타 이산화탄소에 의한 생리적 변화가 없다.
단점	이산화탄소로부터 회복되는 시간이 빠르기 때문에 완전한 안락사가 유발될 때까지 충분히 방치하여야 한다. 호흡수가 적은 동물에서는 사용이 어렵다. 너무 고농도로 안락사를 유발할 경우 폐와 상부 호흡기 손상을 유발하여 실험동물에게 괴로움을 줄 수 있어 윤리적으로 부적합하다. 따라서 이산화탄소의 농도에 주의하여야 한다.

2.5	염화칼륨(KCl)에 의한 심장정지

2.5.1	적용

조류, 토끼 및 개 등의 중동물

2.5.2	방법

1)	실험동물을 흡입제 또는 주사마취제를 이용하여 전신마취시킨다.

2)	마취된 실험동물에 포화염화칼륨용액(5%이상 용액을 10 ㎖/㎏)을 정맥 내로 주사	한다.

3)	실험동물의 호흡 및 심박동이 정지되면 실험동물의 사체는 “제  장 실험실 표준작	업절차, 4. 폐기물 관리”와 “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차	에 따른다.

장점	향정신성의약품의 사용이 어려운 경우, 흡입마취 실시 후, 수행할 수 있다.
단점	K+ 이온에 의한 심장독성에 의해 죽음이 유발되므로 심한 통증이 수반된다. 따라서 전신마취 되지 않은 실험동물에서는 사용해서는 안 된다. 정맥주사를 실시해야하므로 숙련된 연구자에 의해 수행되어야 한다. 최근에는 비인도적인 안락사 방법으로 인식되고 있어, 사용빈도 및 횟수는 감소추세이나, 조류 등에서는 아직 많이 사용 중이다.

[염화칼륨을 이용한 안락사법의 장단점]

2.6	Barbiturates 과마취에 의한 안락사

2.6.1	적용

마우스, 랫드, 기니픽, 토끼, 개, 페렛, Cotton rat, 비인간영장류 등 모든 실험동물 종에서	사용 가능하며, 투여 직후 빠르고 원활하게 실험동물을 무의식 상태로 유도하므로 안락	사의 목적에 가장 적합한 방법이다.

2.6.2	설치류에서의 안락사

1)	설치류의 안락사를 위해 pentobarbital sodium (60 ㎎/㎏)을 가장 널리 사용한다.

2)	시험연구종사자 또는 실험동물관리자는 부검실 또는 실험실에서 의약품 관리담당	자로부터 마약류를 인	계받아 필요량만큼 1회용 주사기에 충진한다.

3)	시험연구종사자 또는 실험동물관리자는 과량의 Barbiturate 마취제를 실험동물의	복강 내에 주사한다.

4)	충분한 호흡정지 및 심장정지가 유발되었는지 촉진을 통하여 확인한다.

5)	실험동물의 호흡 및 심박동이 정지되면 실험동물의 사체는 “제  장 실험실 표준작	업절차, 4. 폐기물 관리”와 “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차	에 따른다.

2.6.3	중동물에서의 실시방법

1)	중동물을 안락사 시키기 위해 소요되는 pentobarbital sodium의 양이 많으므로 중	동물은 실험동물관리자와 의약품 관리담당자가 직접 수행한다. 따라서 시험연구종	사자는 중동물의 안락사가 필요한 경우 마약류 사용신청서의 안락사 의뢰 부분에	체크하여 의약품 관리담당자에게 제출한다.

2)	중동물의 안락사를 위해 pentobarbital sodium (100 ㎎/㎏)을 가장 널리 사용한다.

3)	의약품 관리담당자는 부검실 또는 실험실로 마약류를 반입한다.

4)	중동물을 보정틀에 보정하거나 실험동물관리자가 보정한다.

5)	1회용 주사기에 pentobarbital sodium을 체중에 따라 100 mg/kg이 투여되도록 충	진한다.

6)	토끼의 이개정맥, 개의 요측피정맥, 비인간영장류의 대퇴정맥 또는 요측피정맥에	pentobarbital sodium을 투여한다.

7)	심장정지 및 호흡의 정지를 촉진을 통해 확인한다.

8)	실험동물의 호흡 및 심박동이 정지되면 실험동물의 사체는 “제  장 실험실 표준작	업절차, 4. 폐기물 관리”와 “[서식  ] 실험동물 폐기 확인요청서 및 확인서”의 절차	에 따른다.

장점	Barbiturate는 투여 직후 신속한 마취작용을 나타내고, 실험동물이 비교적 편안하게 안락사 될 수 있도록 한다. 경제적이고 즉시 주사할 수 있는 “Ready to use"형태로 판매되 사용이 편리하다.
단점	안락사 과정에서 정맥주사 또는 복강주사를 필요로 하고, 투여과정에서 실험동물이 공포심을 느끼거나 통증이 유발될 수 있으므로 숙련된 연구자가 수행해야 한다. Barbiturate는 마약류 의약품으로 엄격한 관리가 필요하므로 별도의 허가된 취급자에 의해 관리되어야 하며, barbiturate와 같은 마약류 의약품의 사용 및 관리 절차는 5,6항의 “마약류 의약품의 사용과 관리”에 따른다. 무의식 상태에서 호흡정지 직전에 헐떡거림과 고통이 수반될 수 있으므로 한번에 안락사를 유발할 수 있는 충분한 양을 투여해야한다.

[Barbiturate를 이용한 안락사법의 장단점]

2.7	안락사 방법으로서 사용금기

2.7.1	질소 또는 아르곤 가스 :

질소(N₂) 또는 아르곤(Ar) 가스는 포유류에서 2% 이하의 산소(O₂) 존재 하에서 마취목적	으로 사용가능한 물질이다. 그러나 랫드와 같은 일부 설치류에서 강한 저항성을 나타내	는 것으로 알려져 있으며, 극도로 진정(sedation)된 상태에서 안락사에 이르는 시간이 비	교적 길게 연장되는 것으로 알려져 있어 죽음에 이르게 하기 위해 통증이 따르는 이차적	인 처치가 필요하므로 마취목적 이외에는 사용하지 않는다.

2.7.2	신경절-근육 차단제(Neuromuscular blocking agents) :

Tubocurarine와 같은 신경절-근육 차단제는 근육의 신경절에서 신경전달물질의 작용을	차단하여 호흡근의 마비를 유발하고, 그로 인해 호흡정지로 죽음이 유도된다. 그러나 이	는 의식의 소실을 유발하지 않으며, 호흡곤란을 유발하므로 실험동물이 느끼는 통증 및	스트레스가 심하므로 안락사 목적으로 실험동물에 사용해서는 안 된다.

2.7.3	Barbiturates와 신경절-근육 차단제의 병용 :

barbiturates와 신경절-근육 차단제를 병용하여 실험동물의 안락사를 유발하기 위해 하나	의 일회용 주사기에 함께 충진하여 사용하는 경우 neuromuscular blocking agent가 bar	bi	turates에 의한 마취 유도과정을 방해하므로 각각의 주사기에 충진하여 사용해야 한다.

2.7.4	Opioids :

몰핀과 같은 opioids는 투여 후 작용개시 시간이 느리고, barbiturates와 비교하여 고용량	이 필요하므로 실험동물에 단독으로 마취 및 안락사의 목적으로 사용해서는 안 된다.

2.7.5	Urethane :

urethane은 실험자에 있어 발암물질(lung cancer carcinogen)로 알려져 있으며, 실험동물	에 안락사를 유발하기 위해서는 매우 고용량이 필요하고, 그로 인한 독성도 강하게 나타	나므로 안락사의 목적으로 실험동물에 사용해서는 안 된다.

[부록   ] 실험동물 채혈

1.	실험동물 채혈법의 원칙

※“실험동물 채혈”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

실험동물 채혈법은 동물에게 최소한의 고통범위 안에서 수행되고, 고통이 동반될 때에는	마취 상태에서 수행함을 원칙으로 한다.	사용자는 실험동물에게 애정을 가지고 접촉하	고 실험동물의 생리적인 특성을 배려하여, 실험동물에 대한 채혈은 최단 시간 내에 숙련	된 자세로 정확히 하여 실험결과의 변위범위를 최소화 하여야 한다. 채혈부위별 혈액학	적 가치, 필요 채혈량, 마취여부 등 여러 요인을 고려하여 적절한 채혈경로를 선택하고,	실험동물의 생리적인 특성을 고려한 동물실험계획서에 의거 채혈을 수행해야 하며 임의	적으로 실험동물을 채혈하거나 방치하여서는 안 된다.

적절한 채혈을 위한 주요 고려사항은 필요 채혈량의 고려, 적절한 실험동물의 보정 및	채혈기법의 선정, 마취여부, 실험동물의 성과 연령, 영양 및 건강상태 등이다.

[주요 실험동물에서 부위별 고려 가능한 채혈량]

채혈부위	마우스	랫 드	기니픽	토 끼	개
미정맥 (부분)	0.03 - 0.05	0.3 - 0.5
배종족정맥 (부분)		0.1 - 0.3
안와정맥얼기 (전체)	0.5 - 0.8	3 - 5
귀정맥 (부분)			< 0.5	2 - 5
단두 (전체)	0.5 - 1	5 - 10
목정맥 (전체)	0.5 - 1	3 - 5	3 - 5	80 - 120	10 - 30
심장 (전체)	0.5 - 0.8	3 - 5	5 - 10	80 - 100
배대정맥 (전체)	0.5 - 1	2 - 4	3 - 5
배대동맥 (전체)	0.5 - 1	5 - 8	5 - 10
대퇴정맥 (부분)					5 - 10
요측피정맥 (부분)					2 - 10
복재정맥 (부분)					2 - 10

채혈은 크게 실험동물을 희생시켜 전혈을 얻는 방법과 살아있는 실험동물에서의 채혈로	나눌 수 있으며 채혈 시 스트레스, 채혈부위에 따라 순환혈액의 glucose 수치,	corticosteroids, prolactin, epinephrine, growth hormon, insulin, plasma renin과 serum	enzyme, RBC, WBC,혈소판, PCV 등에 영향이 있을 수 있다.

실험동물의 전혈양의 10% 미만의 채혈에는 조혈 보상기전에 의해 큰 영향을 끼치지 못	하지만 15-20%의 채혈(loss of Blood) 에는 동맥압과 심박출양의 감소가 나타난다. 더 큰	혈액의 손실에서는 생명을 위협할 수 있는 pallor, skin에서의 냉감, 약한 맥박, 고도의 불	안, 운동성 저하, 과도한 환기, muscular weakness, 체온저하 등을 동반한 hemorrhagic	shock가 나타난다.

[실험동물의 종별 주요 채혈부위]

Animal	Bleeding sites
Cat	Heart, cephalic vein, jugular vein
Cattle	Jugular vein
Dog	Cephalic vein, saphenous vein, femoral vein, jugular vein
Fish	Heart, anterior vena cava
Frog	Heart, orbital sinus
Gerbil	Heart
Goat	Jugular vein
Guinea pig	Heart, saphenous vein, ear vein,
Hamster	Heart, saphenous vein, femoral vein, jugular vein
Monkey	Cephalic vein, saphenous vein, femoral vein, jugular vein
Pigeon, chicken	Heart, anterior vena cava, wing vein
Rabbit	Heart, ear vein, orbital sinus
Rat, mouse	Heart, saphanous vein, tail vein, penile vein, sublingual vein
Sheep	Jugular vein
Snake	Heart, orbital sinus
Swine	Anterior vena cava
Turtle	Heart, anterior vena cava

일반적으로 랫드의 전혈양은 50-70ml/kg정도로 실제 평균값은 전체 체중의 6.4% 정도로	계산한다. 보통의 건강한 마우스에서는 단회의 최대혈액 채혈 시에는 전혈의 10% 미만	만을 채혈해야하며 채혈 후 3주의 회복시간을 가져야 한다. 각각의 나이, 체중, 비만상태	등의 경우에는 더 낮아짐을 고려한다.

반복적으로 짧은 채혈간격의 경우에는 채혈량이 전혈의 1% 이상이 되어서는 안 된다.	즉 매일 채혈 시에는 채혈량 선택 시 최대 0.6ml/kg/day를 고려해야 한다.

채혈 시 사육관리담당자와 사용자 자신의 감염이나 상처를 방지하기 위하여 별도의 정해	진 복장과 마스크 등을 착용하여야 한다.

채혈 시 적절한 보정과 마취는 동물이나 실험자의 상해를 방지하거나 동물의 고통을 줄	이기 위하여 반드시 필요하다.

채혈 시 보조자가 없다면 적당한 보정기구를 이용하여 보정하여 투여한다.

2.	안와정맥얼기채혈(intraorbital blood collection)

마우스, 랫드, 기니픽 등의 소동물에 주로 응용되는 채혈법으로 Retro-orbital plexus를 통	한 채혈은 눈 뒤쪽에 큰 혈관이나 신경얼기를 가진 설치류에서 제한적으로 행해지는데,	동물의 희생 없이 연속채혈이 가능한 채혈법이다.

2.1	안와정맥총 채혈법의 선택 시 고려 및 주의사항

1)	안와정맥총 채혈법은 고통이 유발되며, 잘못된 처치 시 retro-orbital hematoma나	신경손상, 실명에도 이를 수 있다.

2)	랫드의 안와정맥총 채혈 시에는 약한 마취를 원칙으로 한다.

3)	안와정맥총 채혈에는 유리모세관(헤마토크리트관, Length : 75㎜, O.D : 1.47㎜, I.D	: 0.56㎜)을 주로 사용하여 채혈한다. 너무 관내경이 큰 경우에는 지혈 시 어려움이	있을 수 있다.

4)	채혈 후 반드시 지혈을 해야 하며, 지혈을 할 때 목부위를 압박하면 혈액이 계속	나오므로 주의한다.

5)	채혈하는 과정에서 시신경을 건드리지 않도록 숙련을 해야 한다.

6)	안와정맥총을 이용한 적정 채혈량은 랫드는 1 - 2 ㎖, 마우스는 200㎕ 정도이다.

2.2	준비물품

1)	에테르(Ether), 마취통, 유리모세관(헤마토크리트관), 탈지면, 마이크로튜브, 튜브 랙

2)	유리모세관사양 : Lnength : 75㎜, O.D : 1.47㎜, I.D : 0.56㎜

2.3	채혈방법

1)	마취통에 에테르를 넣는다.

2)	실험동물을 마취통에 넣고 마취를 시키는 도중 마취통을 흔들어서 실험동물이 균	형을 유지 못하고 눈을 깜빡거리지 않으면 적당한 상태로 보고 꺼낸다.

3)	검지는 하악 부분에 위치한 상태에서 엄지로 두개골의 피부를 끌어당겨 실험동물	의 안구가 돌출 되도록 보정한 후 나머지 손가락으로 몸통의 피부를 잡아 준다.

4)	유리모세관을 하안검 내측에 유리모세관을 삽입하여 안와정맥얼기을 파열시켜 혈	액이 유리모세관을 통하여 흘러나오게 한다.

5)	이물질이 혼입되므로 처음 1 - 2 방울은 버리고 다음 혈액부터 마이크로 튜브에	필요한 량의 혈액을 받는다.

6)	혈액을 채취한 후 유리모세관을 제거한 후 탈지면으로 지혈을 해준다.

7)	채혈량은 마우스에서는 0.5 - 0.8 ㎖, 랫드는 3 - 5 ㎖ 정도이다.

3.	꼬리정맥 채혈(Tail vein blood collection)

마우스, 랫드 등의 설치류에 주로 이용되는 채혈법으로 혈액학적 지표의 변화가 생기는	단점이 있으나 무마취로 연속채혈이 가능한 채혈법이다.

3.1	꼬리정맥 채혈법의 선택 시 고려사항

1)	꼬리의 혈관은 아래 그림과 같이 분포되어 있는데 이 중 right lateral tail vein과	left lateral tail vein을 사용하게 되며 혈관이 얇고 가늘어 기술적인 숙련도가 필요	하다.

2)	랫드의 경우 주로 보정틀과 heating system을 사용하여 채혈을 하게 되며 최대 채	혈량은 1㎖ 정도 가능하다. 마우스의 경우 보통 200-300㎕의 정맥혈을 채취할 수	있으며 최대 0.5-1.0㎖을 채혈할 경우에는 hypovolemic shock로 사망하게 된다.

3)	랫드의 꼬리정맥 채혈은 1㎖ 주사기 또는 카테터를 이용한 방법을 주로 사용한다.	주로 마우스 꼬리정맥 채혈은 18-21G needle을 이용하여 puncture하는 방법과	blade를 이용 절개를 하는 방법도 있다.

4)	5ml 정도의 많은 양의 혈액이 필요할 때는 dorsal vein을 22G needle로 puncture	후 채취하는 방법도 적용할 수 있다.

5)	heating이나 warming시에는 랫드가 heating stress에 의해 유연, 허탈 등의 임상증	상이 나타날 수 있다.

3.2	준비물품

1)	삽입관 끝부분이 절개된 카테터(22~24G) 또는 26G 1회용 주사기

2)	탈지면, 70% 알코올솜, 마이크로 튜브(헤파린처리), 튜브 랙, 보정틀

3.3	카테터를 이용한 채혈방법

1)	마우스 또는 랫드를 보정틀에 넣어 보정한 후 꼬리의 좌, 우측의 정맥을 확인한다.

2)	70% 알콜솜을 이용하여 꼬리의 위에서 아래로 잘 닦는다.

3)	꼬리의 채혈 위치를 선정한 후 카테터를 주사침과 같이 정맥에 삽입한다.

4)	정맥내에 카테터가 삽입되면 주사침을 제거한다.

5)	카테터에서 나오는 혈액을 마이크로 튜브로 필요한 양의 혈액을 받는다.

6)	혈액채취 후 카테터를 찌른 윗부분의 꼬리를 눌러 혈액이 나오지 않도록 한다.

7)	마이크로 튜브를 닫고 헤파린과 잘 혼합되도록 마이크로 튜브를 흔들어 주고, 마이	크로튜브 랙에 넣은 후 카테터를 제거한 후 채혈 부위를 압박하여 지혈한다.

8)	주의사항: 보정틀이 작을 경우 보정틀에 랫드를 넣을 때 너무 압박되지 않도록 주	의해야 한다(심하면 질식으로 죽을 수도 있음).

3.4	일반주사기를 이용한 꼬리정맥 채혈방법

1)	보정틀에 넣어 보정한 후 적당한 열을 가해 혈관이 확장되게 한다.

2)	70% 알콜솜을 이용하여 꼬리의 위에서 아래로 잘 닦는다.

3)	꼬리의 좌, 우측의 정맥을 확인하고. 꼬리의 채혈 위치를 선정한 후 꼬리를 약간	비틀어 사용혈관이 정중앙에 오게 한 후 needle이 거의 평행하게 하여 정맥에 삽	입한다.

4)	주사기 피스톤을 살짝 당겨 needle 끝에 혈액이 맺히는지 확인한다.

5)	주사기 끝에 혈액이 보이면 피스톤을 천천히 잡아당겨 채혈한다.

6)	혈액채취 후 needle을 찌른 윗부분의 꼬리를 눌러 혈액이 나오지 않도록 완전히	지혈한다.

4.	배대동․정맥 채혈(Abdominal aorta․vein blood collection)

4.1	배대동․정맥 채혈법의 선택 시 고려사항

일반적으로 배대동․정맥을 통한 채혈법은 마취를 원칙으로 최대 10㎖ 이상의 채혈이 가	능하다. 마취 후 개복하여 채혈하기 때문에 실험종료 시 최종 채혈방법으로 선택하여야	한다. 배대동․정맥 접근 시 마취 후 개복하여야 하므로 과마취에 의한 사망이나 미숙한	절개로 인한 다른 장기 손상을 조심하여야 한다. 배대동․정맥에 needle 삽입 시 끝의 단	면이 아래(동물의 등쪽)를 향하도록 함으로써 삽입 시 분출되는 혈액이 채혈자에게 튀지	않도록 주의하여야 한다.

4.2	배대정맥채혈(Abdominal vein blood collection)

4.2.1	준비물품

1)	마취통, 에테르(Ether), 일회용주사기, 혈액채취 시험관, 70% 알코올솜

2)	항응고제를 사용할 경우에는 roll-mixer를 준비

4.2.2	채혈 절차

1)	마취통에 에테르를 넣는다.

2)	동물을 마취통에 넣고 마취를 시키는 도중 마취통을 흔들어봐서 동물이 균형을 유	지 못하고 눈이 깜빡거리지 않으면 적당한 마취상태로 판단하고 꺼낸다.

3)	동물을 보정판에 배아위(Dorsal positio)로 하여 고정한 후 보조 마취기를 이용하여	채혈 시 마취가 유지되도록 한다.

4)	외요도구의 상부로부터 검상돌기까지의 피부와 복근을 동시에 절개하고 최후늑골	을 따라서 피부와 복근을 좌우로 자른다. 이때 혈관을 자르지 않도록 주의한다.

5)	장 전체를 우측으로 제쳐 놓고 몸의 중앙부에 보이는 지방조직을 탈지면이나	tissue를 양손 쥐고 좌우로 분리시키면 암적색의 배대정맥이 보인다.

6)	마우스에서는 23 - 24 G, 랫드나 기니픽에서는 22 G의 주사침을 장착한 주사기를	신정맥의 5-10 ㎜ 아래 대퇴부 분기점에서 상방을 향하여 채혈한다.

7)	주사기의 피스톤을 세게 당기면 정맥이 주사침의 입구를 막게 되므로 혈관내의 혈	액량과 주사침의 상태를 확인하면서 서서히 당긴다.

8)	필요한 혈액이 얻어지면 동물에서 주사바늘을 빼고 주사바늘을 떼어 혈액채취 시	험관에 혈액을 넣는다.

4.2.3	주의사항

1)	개복 시 과잉 출혈 및 장기가 손상되지 않도록 한다.

2)	보조마취 시 동물이 사망하지 않도록 동물의 상태를 확인하며 채혈을 실시한다.

4.3	배대동맥채혈(Abdominal aorta blood collection)

4.3.1	준비물품

1)	마취통, 에테르(Ether), 일회용주사기, 혈액채취 시험관, 70% 알코올솜

2)	핸드타올, 원심분리관, 원심분리기

4.3.2	채혈절차

1)	동물 마취, 고정, 개복까지는 배대정맥채혈과 동일하다.

2)	지방조직을 분리하여 정맥이 보이면 정맥의 좌측 (동물기준)으로 달리고 있는 백	색의 배대동맥을 볼 수 있다. 신동맥으로부터 골반부 쪽으로 주위의 지방조직과 조	심히 분리한다.

3)	주사기의 단면을 아래로 하고 신정맥의 5-10 ㎜ 아래 대퇴부 분기점에서 상방을	향하여 채혈한다.

4)	필요한 혈액이 얻어지면 동물에서 주사바늘을 빼고 주사바늘을 떼어 혈액채취 시	험관에 혈액을 넣는다.

5)	랫드나 기니픽에서는 실리콘 튜브를 연결한 18 - 19 G의 채혈침을 동맥에 삽입하	여 유출되는 혈액을 시험관 등에 받기도 한다.

6)	채혈량은 마우스에서 0.5-1 ㎖, 랫드에서는 5-8 ㎖ 정도이다.

4.4	심장채혈(Cardiac puncture)

4.4.1	심장채혈법 선택 시 고려사항

말초혈관에서의 채혈에 의한 cadiac tamponade(심낭압전)의 위험을 예방하기 위해 직접	적인 심장채혈법의 선택을 고려한다.

심장채혈은 마취 하에서 수행하여야 하며,  채혈 시 숙련된 기술이 필요하다. 마취제는	혈액학적인 영향을 미치지 않는 ether를 우선으로 선택하며 마취지속시간, 외과적 처치,	실험목적 등을 고려하여 선택한다.

4.4.2	심장채혈 시 고려사항

1)	좌심실에 채혈기의 needle을 삽입하여 채혈하는 방법으로 needle 삽입 후 흉강내	에서 좌	우로 움직이면 심장의 직접적인 손상을 야기할 수도 있다.

2)	랫드의 경우 주로 3㎖ 23G 보다 작은 needle을 사용하고, 마우스의 경우 주로 1㎖	21- 23G 보다 작은 needle(주로 26G 1/2)을 사용하여 myocardium의 손상을 최소	화 하여야 한다.

3)	심장채혈 시 채혈량은 약 2㎖/min 정도로 그 이상의 채혈속도로 채혈을 하게 되면	cardiovascular failure가 나타나게 된다.

4)	심장의 직접적인 채혈은 1-3회 이상 시도하면 심출혈 등 치명적인 손상이 야기될	수도 있다.

5)	숙련되지 않은 사람은 21G의 전용용기를 사용하여 천천히 thoracic inlet을 통해 흉	강에 needle을 삽입하여 채혈하는 방법도 있다. 이때는 3-5일령에서는 0.2㎖의 전	혈을 채혈가능하며, 14일령에서는 0.7㎖ 정도 채혈이 가능하다. 마우스의 경우에는	300-400㎕  정도 채혈이 가능하다.

6)	심장채혈법은 보정방법, needle 삽입위치에 따라 아래 그림과 같이 여러 종류가 있	다.

4.5	마우스와 랫드에서의 심장채혈 방법

4.5.1	준비물품

마취통, 에테르(ether), 일회용주사기, 혈액채취시험관, 70% 알콜솜

4.5.2	채혈절차

1)	마취통에 에테르를 넣는다.

2)	동물을 마취통에 넣고 마취를 시키는 도중 마취통을 흔들어서 동물이 균형을 유지	못하고 눈이 깜빡거리지 않으면 적당한 마취상태로 판단하고 꺼낸다.

3)	마취한 동물을 시험자의 몸으로부터 조금 떨어진 위치에 눕힌다.

4)	마우스에서는 24 - 25 G, 랫드에서는 22 - 23 G의 주사침의 공기를 모두 빼고 나	서 채혈할 동물의 심장을 촉진하여 예측한 심장의 위치에 대고 늑간골 사이로 찌	른다.

5)	심장의 좌심실을 겨냥하여 흉강에 손을 얹고 동시에 주사기 밑부분을 다른 쪽 손	으로 완전히 잡고 주사기의 내관을 천천히 잡아당긴다.

6)	혈액이 주사기 내로 수월하게 유입되어 와야 주사침이 정확히 심장에 삽입되었음	이 확인된다. 따라서 심장에 들어가지 않은 경우에는 주사침을 빼고 처음부터 같은	절차를 되풀이한다. 흉강 내에서는 주사침을 좌우로 움직이지 말고, 직선방향으로	만 삽입해야 한다.

7)	필요한 혈액이 얻어지면 동물에서 주사바늘을 빼고 혈액채취 시험관에 혈액을 넣	는다.

8)	주의사항

흉부를 확실히 촉진하여 한 번에 채혈을 하여야 한다(한 번에 채혈을 못할 경우 흉	강에 손상이 감). 채혈도중 마취에 깨어나지 않도록 한다.

4.6	토끼에서의 심장채혈 방법

4.6.1	준비물품

일회용주사기, 70%알코올솜, 탈지면, 혈액채취 시험관

4.6.2	채혈절차

1)	보정자는 토끼의 뒷다리를 단단하게 고정하여 한쪽 손으로 목덜미를 잡은 후 머리	를 뒤쪽으로 젖히고 목덜미를 누르면서 토끼의 앞다리를 펴서 양쪽 손으로 고정한	다.

2)	토끼의 네다리를 고정한 채 적당한 높이의 장소 즉, 실험테이블의 표면에 위를 보	게 하면 복부표면이 채혈자에게 드러나게 된다.

3)	채혈자는 한쪽 손의 손가락 끝으로 토끼의 상복부를 촉진하고 흉곽의 좌측에서 심	장의 박동이 가장 강한 위치를 확인한다.

4)	갈비뼈 부분을 만져 가장 박동이 강한 부분에서 갈비뼈의 간격을 찾는다.

5)	일회용주사기(19~21G)를 이용하여 갈비뼈 틈사이로부터 심장을 향하여 수직으로	바늘을 찔러 넣는다. 주사침은 대략 2~3cm정도까지 넣고 천천히 주의 깊게 실시하	며, 주사기의 피스톤은 약하게 당기는 정도로 하여 약간의 혈액의 유입되도록 한	다. 혈액이 용이하게 주사기내로 들어오는 경우는 주사침 끝이 심장 내에 잘 삽입	된 것이다.

6)	필요한 양의 혈액이 채취되면 탈지면으로 주사침이 들어간 부분을 지혈 해준다.

7)	채혈자는 혈액채취 시험관에 채취한 혈액을 넣고 뚜껑을 닫는다.

4.6.3	주의사항

심장채혈 중 토끼가 날뛰는 경우 곧 주사침을 빼고 동물을 진정시킨다(토끼가 쇼크로 사	망할 수도 있음).

5.	경정맥 채혈(Jugular vein blood collection)

목정맥 채혈법은 동물을 희생시키지 않고 연속채혈이 가능하며, 꼬리정맥채혈시의 혈액	학적 지표의 변화나 심장채혈시의 심장에 대한 영향 등을 배제할 수 있어 가장 좋은 채	혈법으로 알려져 있다.

5.1	경정맥 채혈법 선택 시 고려사항

1)	경정맥 채혈은 마취하 최소의 절개를 통한 경정맥 노출을 원칙으로 수행하며 숙련	되면 무마취하 경정맥 채혈도 가능하다.

2)	경정맥채혈은 pectoral muscle을 통해 혈관에 needle을 삽입하는 방법으로 근육에	의해 지혈이 용이하다.

3)	혈액학적 성상의 변화없이도 경정맥채혈을 통해 하루 약 0.9ml 정도 연속적인 채	혈이 가능하며 전혈채혈로도 1-2ml/100g 정도 가능하다.

3)	경정맥 채혈은 말초혈관(미정맥 등) 채혈보다 pharmacokinetic /pharmacodynamic	effect를 보기 위한 채혈법으로 권장된다.

5.2	마우스와 랫드의 경정맥 채혈

5.2.1	준비물품

일회용 주사기(23G), 70% 알코올솜, 혈액채취 시험관

5.2.2	채혈 절차

1)	검지는 경추부분에 위치한 상태에서 엄지를 랫드의 앞다리 사이로 넣어 쇄골 바로	윗 부분에 위치시킨 후 피부를 끌어당기고 나머지 손으로 등쪽 피부를 잡아당겨	동물이 움직이지 못하도록 보정하면 채혈 부위가 잘 노출된다.

2)	목정맥을 확인한 후 주사침이 삽입될 부위에 70% 알콜솜을 문지른다.

3)	주사침을 흉근 근육을 통하여 삽입한다.

4)	쇄골의 흉골 쪽 기시부로부터 0.5 - 1 cm 떨어진 부위의 쇄골 바로 밑부분으로 주	사침을 삽입하면 목정맥에 위치하게 된다.

5)	주사기 피스톤을 서서히 당겨 채혈한다.

6)	필요한 혈액량이 얻어지면 동물에서 주사바늘을 빼고 혈액채취 시험관에 혈액을	넣는다.

5.2.3	주의사항

주사침을 직접 정맥에 삽입 하면 혈종이 발생하므로 근육을 통해 삽입하는 것이 좋다.

5.3	개의 경정맥 채혈

5.3.1	준비물품

제모기, 일회용주사기, 혈액채취 시험관, 70% 알코올솜, 탈지면

5.3.2	채혈 절차

1)	보정자는 개를 서게 한 상태에서 오른손으로 입의 앞부분을 부드럽게 잡아 머리를	왼쪽으로 돌린 다음 개의 양다리를 왼손으로 잡아 고정 시킨다.

2)	경부의 우측 또는 좌측 중에 한 부분을 선택하여 제모기를 이용하여 길이 10㎝ 폭	5㎝ 넓이로 제모한다.

3)	채혈자는 흉부상단의 움푹 들어간 부분을 왼손의 검지로 밀어 경정맥을 두드러지	게 한다. 그러면 피하부분에서 경정맥이 보이게 된다.

4)	채혈부위를 70% 알코올솜으로 소독한 후 주사침을 이용하여 피부 및 경정맥을 찌	르고 정맥강에 삽입한다.

5)	바늘 끝의 위치를 확인하기 위하여 주사기의 내관을 당긴다. 주사기내에 혈액이 들	어오면 바늘 끝이 정맥강에 삽입 되었다고 판단하고 필요량의 혈액을 채취한다.

6)	왼손을 늦추어 정맥에 압박을 주던 것을 멈추고 주사침을 정맥에서 뺀다.

7)	보정자가 채혈 부위를 압박하여 지혈을 해준다.

8)	채혈자는 주사기에서 주사침을 빼고 혈액을 혈액채취 시험관에 담고 뚜껑을 닫는	다.

5.3.3	주의사항

주사침이 경정맥을 관통하였을 경우 경부가 부어오른다. 이때 즉시 주사기를 빼고 지혈	을 해야 한다.

6.	요골쪽 얕은정맥(Cephalic vein blood collection)

6.1	토끼와 개에서 요골쪽 얕은정맥 채혈

6.1.1	준비물품

제모기, 일회용주사기, 혈액채취 시험관, 70% 알코올솜, 탈지면

6.1.2	채혈 절차

1)	보정자는 동물의 하체를 바닥에 앉히고 동물의 등 뒤에서 동물의 몸체를 껴안은	상태로 왼손 또는 오른손으로 채혈할 전지 좌측 또는 우측 요측피정맥에 엄지중앙	부로 혈관을 잡고 외측으로 약간 돌리며 주관절(팔꿈치관절)을 펴듯 쥐면 혈관이	노출된다.

2)	채혈자는 채혈부위를 촉진하여 70% 알코올솜으로 소독한 후 주사기를 약15도 각	도로 찔러 정맥내강에 삽입한다.

3)	바늘 끝 위치를 확인하기 위하여 주사기의 내관을 당긴다. 주사기내에 혈액이 유입	되면 바늘 끝이 정맥내에 삽입 되었다고 판단하고 필요량의 혈액을 채취한다.

4)	채혈 부위를 보정자가 압박하여 지혈을 해준다.

5)	채혈자는 주사기에서 주사침을 빼고 혈액을 혈액채취 시험관에 담고 뚜껑을 닫는	다.

6.1.3	주의사항

주사침이 요측피정맥을 관통하였을 경우 정맥주변이 부어오른다. 이때 즉시 주사기를 빼	고 지혈을 해준다.

7.	이개정맥 채혈(Auricular vein blood collection)

7.1	채혈방법

7.1.1	준비물품

일회용주사기, 70% 알코올솜, 탈지면, 토끼용보정틀(보정틀사용 시), 혈액채취 시험관

7.1.2	채혈 절차

1)	보정자는 토끼용 보정틀에 토끼의 머리가 채혈자를 향하게 넣은 후 귀의 귀 주변	정맥을 혈관이 확장되도록 잡아준다.

2)	채혈자는 채혈부위를 70% 알코올솜으로 소독하고 마사지하여 혈관이 확장되도록	유도한다.

3)	경우에 따라서 램프 및 온수를 사용하여 따뜻하게 하고 채혈을 하는 경우도 있다.

4)	혈관이 확장되면 1회용 주사기의 주사침을 가능한 귀의 끝에서 가까운 혈관부분에	찔러 정맥내강에 삽입한다.

5)	주사침의 중심부분에 혈액이 맺히면 정맥내강에 바늘이 잘 삽입된 것이므로 주사	기의 피스톤을 뒤로 천천히 당겨 필요한 양의 혈액을 채취한다.

6)	혈액이 채취되면 탈지면으로 주사침 윗부분을 누르며 주사침을 빼고 보정자가 채	혈부위를 지혈해준다.

7)	채혈자는 혈액채취 시험관에 채취한 혈액을 넣고 뚜껑을 닫는다.

7.2	주의사항

보정자는 채혈도중 토끼가 움직이지 않도록 유지하여야 한다.

8.	닭의 채혈방법

8.1	심장채혈

1)	심장채혈의 가장 좋은 방법은 곧바로 안락사시킨 다음 채혈하는 것이다. 보정자는	한손의 손바닥을 아래로 향해 닭의 두부에서 배부에 넣는다.

2)	양날개 사이에 가운데 손가락을 넣고 엄지와 집게손가락, 그리고 약지와 새끼손가	락으로 한쪽 날개씩 가운데 손가락의 방향으로 집어넣어 들고, 손등을 바닥 위에	놓고 닭은 반듯하게 눕힌다.

3)	다른 손으로 양 대퇴부를 위에서 잡고, 뒤로 아래쪽으로 민다.

4)	이 보정방법은 바닥 모서리를 이용하면 채혈하기 쉽다.

5)	시술자는 쇄골오목을 알코올 솜으로 소독하고 이 부분의 피하에 있는 모이주머니	를 한손의 집게손가락 끝을 이용하여 아래쪽으로 밀어 내린다.

6)	모이주머니가 확실히 보이지 않을 때는 가슴상부에서 손끝을 약간 쇄골오목 내에	손톱을 세우는 느낌으로 내린다.

7)	다 내리면 손가락의 힘을 빼고 멈춘 채로 확실히 보이는 삼각형의 쇄골오목 중앙	부분에서 정중앙선을 따라 척수와 평행하게 닭의 후방을 향해 주사침을 조심스럽	게 찌른다.

8)	심장에 침이 닿으면 고동을 침 끝으로 느낄 수 있다.

8.2	상완정맥채혈

1)	닭에서 심장채혈은 실패할 가능성이 있으므로 가능한 한 상완정맥에서 채혈하는	것이 좋다. 상완정맥에서의 채혈량이 20㎖이면 매주 채혈해도 산란을 지속하는 것	이 가능하다.

2)	왼손으로 양쪽 날개를 붙잡고 양다리는 왼팔 겨드랑이 끼워 고정시켜 닭이 움직이	지 못하게 한다.

3)	그리고 주사기 바늘을 혈액이 심장쪽으로 흐르는 반대쪽으로 근육을 통하여 혈관	에 삽입시킨다. 주사바늘을 곧바로 혈관에 삽입시킬 경우 쉽게 지혈이 되지 않으므	로 꼭 근육을 경유하여 바늘을 삽입하는 것이 좋다.

8.3	경정맥채혈

한 손으로 보정 가능한 어린 병아리에서 채혈할 때 많이 적용되고 있다. 왼손 검지와 중	지사이에 병아리 목을 고정한 다음 왼손 엄지로 혈관을 노장시키고 주사바늘을 삽입한	다.

8.4	채혈시의 주의사항

채혈 후 혈액이 응고되지 않고 혈청이 생기지 않는 경우가 있는데, 이것을 막기 위해 혈	관을 약간 상처를 내어 채혈하는 것이 좋다.

9.	돼지의 채혈

9.1	정맥내 채혈

1)	정맥용 주사침을 이용한다. 소량의 채혈(1~2㎖)에는 이개정맥 또는 복측 정맥을 이	용한다. 이개정맥은 이외 측에 있고 익상침(23~24G)을 넣어 투여한다. 복측 정맥은	유두열에 약간 떨어져 평행하게 있는 혈관으로 익상침(21~22G)을 이용한다.

2)	다량(5~10㎖)에는 경정맥 또는 쇄골하정맥을 이용한다.

3)	모두 표면에서 보이지 않지만, 경정맥의 위치라 생각되는 부위를 특정하여 엄지손	가락으로 주사부위 근처를 눌러 혈관을 노장시켜 주사침(18~20G)을 45도 각도롤	넣는다. 그 후 혈관에 달하면 수평으로 하여 혈관에 삽입하여 채혈한다.

10.	원숭이 채혈법

1)	마취를 하는 경우는 혼자서도 채혈이 가능하다. 다수의 동물에서 확실하고 능률적	으로 채혈하기 위해서는 마취 하에 보조자가 동물을 보정하고 혈관의 압박과 지혈	을 담당하면 좋다.

2)	원숭이 의자를 이용한 무마취에서의 채혈은 2명이서 할 수 있다.

3)	케이지에서 꺼내지 않고 전용 용기를 문 앞에 설치하여 용기 내에 수용하면 혼자	서도 할 수 있다.

4)	채혈부위는 노측피부정맥, 하지의 대퇴정맥, 복재정맥이 주로 이용된다. 한번의 채	혈로 2~10㎖ 정도 채취할 수 있다. 그 외에는 미정맥, 심장, 귓불 절상에 의한 채	혈도 있다.

[부록   ] 실험동물의 부검

1.	마우스

※“실험동물의 부검”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	부검 전 준비 및 종료 후 폐기사항

1.1.1	부검 전 절식의 실시

마우스처럼 대사속도가 빠른 동물종에서는 보다 단시간의 절식이 좋다. 일반적으로 마우	스에서는 3 - 4시간의 절식으로 충분하다.

1.1.2	부검 전 외관검사

1)	실험동물을 부검하기 전에 동물외부의 상태를 정확히 관찰하여 병리학적 진단 및	동물실험 결과의 정확성을 확보하기 위하여 실시한다.

2)	일반적인 부검 전 외관검사는 다음과 같은 순서로 실시하며, 각 해당 항목의 관찰	결과를 기록한다.

①	일반상태 :

체중상태, 빈사, 사망, 쇠약, 야윔 등의 정도 등을 관찰하여 이상내용 또는 이상	소견 없음(No Gross Lesion, NGL)을 기록한다.

②	모발과 피부상태 :

피모의 거침·윤기정도, 피모의 역립상태, 오염상태 및 탈모의	정도를 관찰하고	피부색의 변화, 충·출혈, 부종, 상처, 결절성 변화 등을 관찰하여 기록한다.

③	눈 :

안검·결막·순막의 종창, 충·출혈여부 등을 관찰하고, 각막혼탁, 안구표면의 상태	를 관찰하여 기록한다.

④	구강과 입술 :

입술, 구토, 입 주위 오염 등의 상태를 관찰하여 기록한다.

⑤	코 :

분비물의 상태, 코 주위의 오염상태, 출혈 등을 관찰하여 기록한다.

⑥	항문 :

항문주위의 오염, 항문 또는 직장탈출증 등을 관찰하여 기록한다.

⑦	외부생식기 :

음경돌출, 분비물, 외음부 종창, 월경에 의한 출혈, 질탈, 회음부의 오염 등의	상태를 관찰하여 기록한다.

1.1.3	개인보호구 준비사항 및 폐기처리

1)	부검을 하는 경우 장갑, 마스크 등의 개인 보호 장구를 착용하고, 혈액 등이 생물	안전작업대 또는 부검대를 오염시키지 않도록 호일, 세이퍼매트 등으로 깔고 생물	재해 봉투, 부검도구, 시료보관용기를 준비한다.

2)	오염을 최소화하는 방안으로 부검을 실시하고 사용한 부검도구는 1차 스프레이 소	독 후 부검용기 보관통에 넣는다. 부검도구 및 부검용기 보관통은 고압증기멸균하	여 2차 소독 후 재사용한다. 오염된 장갑 등 일회용품은 생물재해 봉투에 버린다.  1.2	장기적출 및 육안적 검사

혈액을 채취한 사체를 부검판(부검대) 위에 앙와자세로 눕히고(필요시 사지를 고정시켜	움직이지 않도록 고정할 수 있다), 알코올로 사체의 경부부터 항문주위까지 소독한다.

1.2.1	피부박리 및 피하림프절 노출

턱에서부터 치골연까지 정중선을 따라 피부를 절개하고 피하조직으로부터 박리시킨다.

이때 정중선을 따라 경부에 위치한 악하선 및 주위 림프절이 절단되지 않도록 주의한다.

1.2.2	피부·유선적출 및 개복

복부 정중선 양쪽의 유선과 피부조직을 적출하고, 검상연골에서부터 치골연까지 정중선	을 따라 절개하여 개복한다. 늑골 양옆의 늑골사이연골을 절개하여 개흉하고, 턱 밑까지	근육조직을 한번에 절개하여 노출시킨다.

1.2.3	비뇨생식기

1)	수컷의 비뇨생식기 적출

음낭과 연결된 부고환주위지방을 포셉으로 잡아당겨 고환을 노출시킨 다음 고환과	부고환을 적출하여 주위의 지방조직을 제거한다.	고환과 부고환은 미세한 정세관으	로 이루어져있어, 적출과정에서 손상이 가해질 경	우 정세관들이 분리되므로 주의해	야 한다. 전립선의 아랫부분에 위치한 결합조직을 절단하고, 전립선, 방광 및 정낭	선을 잡아당겨 연결된 주위조직을 잘라내어 전립선, 방광 및 정낭선을 한 번에 적	출한다. 이때, 정낭선이 절개되어 내용물이 유출되지 않도록 주의한다.

2)	암컷의 비뇨생식기 적출

방광을 적출하여 조직보관접시에 넣는다. 신장과 지방조직으로 결합되어 있는 자궁	뿔과 난소를 잡아당겨 절단하고, 자궁경부까지 주위의 지방조직을 제거하면서 적출	한다.

1.2.4	하더리안샘의 적출

설치류 눈 밑의 하더리안샘을 적출하여 카세트에 넣어 분실되지 않도록 한다.

1.2.5	비장의 적출

위의 대만에 결합조직으로 붙어있는 비장을 적출한다.

1.2.6	간의 적출

사체의 허리부분을 잡아 올려 간이 중력에 의해 하수될 수 있도록 하여 주위의 결합조직	을 절단하여 적출한다.

1.2.7	소화기계의 적출

1)	횡격막 아래의 위 분문부(들문)부터 항문까지 잡아 올리면서 복벽의 지방조직 및	결합조직을 절단하여 한 번에 적출한다.

2)	적출 후, 십이지장 주위의 췌장을 적출하고, 위 분문부와 항문을 명주실을 이용하	여 결찰하고, 고정액을 주사기를 이용하여 팽팽해질 때까지 주입한다.

3)	고정액을 주입하고 30분 후에, 필요시 위-십이지장-공장-회장-맹장-결장-직장을 절	개하여 점막의 궤양·충혈·출혈 등의 병변을 관찰한다.

1.2.8	흉선 및 심장의 적출

1)	노출된 흉강의 심장 바로 위의 흉선을 포셉으로 잡고, 아래의 결합조직을 절단하여	흉선을 적출한다.

2)	적출 후에 흉선의 나비모양을 확인하고 주위의 지방조직을 제거한다.

3)	흉선 적출 후, 심장의 주요 큰 혈관을 절단하여 심장을 적출한다. 심장은 적출 후	생리식염수에 담가 혈액을 완전히 제거한다.

1.2.9	부갑상선·갑상선·기관·폐의 적출

1)	갑상선 및 부갑상선을 포함하여 기관 및 폐를 포함하여 경부 및 흉벽으로부터 적	출한다.

2)	적출 후, 기관 옆의 식도를 제거하고, 기관을 명주실로 결찰하고, 주사기를 이용하	여 폐에 고정액을 주입한다.

1.2.10	중추신경계의 적출

1)	두개골 기저부와 경부 배면으로부터 골격근을 제거한 후 관절구와 환추가 노출되	게 한다.

2)	두부를 손가락으로 구부려서 대공과 환추 접합부에서 척추를 자른다.

3)	두개골을 조심스럽게 잘라내어 뇌척수막을 노출시키고, 포셉을 이용하여 뇌척수막	을 제거하면 뇌가 노출된다.

4)	실험동물의 머리를 잡고 연수를 젖혀서 뇌신경을 노출시키고 후각망울에서 연수쪽	으로 뇌신경을 차례로 절단하여 손으로 뇌를 받는다.

2.	랫트

2.1	부검 전 준비 및 종료 후 폐기사항

2.1.1	부검 전 절식의 실시

랫드에서는 하룻밤, 즉 12-16시간의 절식이 적당하다.

2.1.2	부검 전 외관검사

1)	실험동물을 부검하기 전에 동물외부의 상태를 정확히 관찰하여 병리학적 진단 및	동물실험 결과의 정확성을 확보하기 위하여 실시한다.

2)	일반적인 부검 전 외관검사는 다음과 같은 순서로 실시하며, 각 해당 항목의 관찰	결과를 기록한다.

①	일반상태 :

체중상태, 빈사, 사망, 쇠약, 야윔 등의 정도 등을 관찰하여 이상내용 또는 이상	소견 없음(No Gross Lesion, NGL)을 기록한다.

②	모발과 피부상태 :

피모의 거침·윤기정도, 피모의 역립상태, 오염상태 및 탈모의	정도를 관찰하고	피부색의 변화, 충·출혈, 부종, 상처, 결절성 변화 등을 관찰하여 기록한다.

③	눈 :

안검·결막·순막의 종창, 충·출혈여부 등을 관찰하고, 각막혼탁, 안구표면의 상태	를 관찰하여 기록한다.

④	구강과 입술 :

입술, 구토, 입 주위 오염 등의 상태를 관찰하여 기록한다.

⑤	코 :

분비물의 상태, 코 주위의 오염상태, 출혈 등을 관찰하여 기록한다.

⑥	항문 :

항문주위의 오염, 항문 또는 직장탈출증 등을 관찰하여 기록한다.

⑦	외부생식기 :

음경돌출, 분비물, 외음부 종창, 월경에 의한 출혈, 질탈, 회음부의 오염 등의	상태를 관찰하여 기록한다.

2.1.3	개인보호구 준비사항 및 폐기처리

1)	부검을 하는 경우 장갑, 마스크 등의 개인 보호 장구를 착용하고, 혈액 등이 생물	안전작업대 또는 부검대를 오염시키지 않도록 호일, 세이퍼매트 등으로 깔고 생물	재해 봉투, 부검도구, 시료보관용기를 준비한다.

2)	오염을 최소화하는 방안으로 부검을 실시하고 사용한 부검도구는 1차 스프레이 소	독 후 부검용기 보관통에 넣는다. 부검도구 및 부검용기 보관통은 고압증기멸균하	여 2차 소독 후 재사용한다. 오염된 장갑 등 일회용품은 생물재해 봉투에 버린다.  2.2	장기적출 및 육안적 검사

혈액을 채취한 사체를 부검판(부검대) 위에 앙와자세로 눕히고(필요시 사지를 고정시켜	움직이지 않도록 고정할 수 있다), 알코올로 사체의 경부부터 항문주위까지 소독한다.

2.2.1	피부박리 및 피하림프절 노출

턱에서부터 치골연까지 정중선을 따라 피부를 절개하고 피하조직으로부터 박리시킨다.

이때 정중선을 따라 경부에 위치한 악하선 및 주위 림프절이 절단되지 않도록 주의한다.

2.2.2	피부·유선적출 및 개복

복부 정중선 양쪽의 유선과 피부조직을 적출하고, 검상연골에서부터 치골연까지 정중선	을 따라 절개하여 개복한다. 늑골 양옆의 늑골사이연골을 절개하여 개흉하고, 턱 밑까지	근육조직을 한번에 절개하여 노출시킨다.

2.2.3	비뇨생식기

1)	수컷의 비뇨생식기 적출

음낭과 연결된 부고환주위지방을 포셉으로 잡아당겨 고환을 노출시킨 다음 고환과	부고환을 적출하여 주위의 지방조직을 제거한다.	고환과 부고환은 미세한 정세관으	로 이루어져있어, 적출과정에서 손상이 가해질 경	우 정세관들이 분리되므로 주의해	야 한다. 전립선의 아랫부분에 위치한 결합조직을 절단하고, 전립선, 방광 및 정낭	선을 잡아당겨 연결된 주위조직을 잘라내어 전립선, 방광 및 정낭선을 한 번에 적	출한다. 이때, 정낭선이 절개되어 내용물이 유출되지 않도록 주의한다.

2)	암컷의 비뇨생식기 적출

방광을 적출하여 조직보관접시에 넣는다. 신장과 지방조직으로 결합되어 있는 자궁	뿔과 난소를 잡아당겨 절단하고, 자궁경부까지 주위의 지방조직을 제거하면서 적출	한다.

2.2.4	하더리안샘의 적출

설치류 눈 밑의 하더리안샘을 적출하여 카세트에 넣어 분실되지 않도록 한다.

2.2.5	비장의 적출

위의 대만에 결합조직으로 붙어있는 비장을 적출한다.

2.2.6	간의 적출

사체의 허리부분을 잡아 올려 간이 중력에 의해 하수될 수 있도록 하여 주위의 결합조직	을 절단하여 적출한다.

2.2.7	소화기계의 적출

1)	횡격막 아래의 위 분문부(들문)부터 항문까지 잡아 올리면서 복벽의 지방조직 및	결합조직을 절단하여 한 번에 적출한다.

2)	적출 후, 십이지장 주위의 췌장을 적출하고, 위 분문부와 항문을 명주실을 이용하	여 결찰하고, 고정액을 주사기를 이용하여 팽팽해질 때까지 주입한다.

3)	고정액을 주입하고 30분 후에, 필요시 위-십이지장-공장-회장-맹장-결장-직장을 절	개하여 점막의 궤양·충혈·출혈 등의 병변을 관찰한다.

2.2.8	흉선 및 심장의 적출

1)	노출된 흉강의 심장 바로 위의 흉선을 포셉으로 잡고, 아래의 결합조직을 절단하여	흉선을 적출한다.

2)	적출 후에 흉선의 나비모양을 확인하고 주위의 지방조직을 제거한다.

3)	흉선 적출 후, 심장의 주요 큰 혈관을 절단하여 심장을 적출한다. 심장은 적출 후	생리식염수에 담가 혈액을 완전히 제거한다.

2.2.9	부갑상선·갑상선·기관·폐의 적출

1)	갑상선 및 부갑상선을 포함하여 기관 및 폐를 포함하여 경부 및 흉벽으로부터 적	출한다.

2)	적출 후, 기관 옆의 식도를 제거하고, 기관을 명주실로 결찰하고, 주사기를 이용하	여 폐에 고정액을 주입한다.

2.2.10	중추신경계의 적출

1)	두개골 기저부와 경부 배면으로부터 골격근을 제거한 후 관절구와 환추가 노출되	게 한다.

2)	두부를 손가락으로 구부려서 대공과 환추 접합부에서 척추를 자른다.

3)	두개골을 조심스럽게 잘라내어 뇌척수막을 노출시키고, 포셉을 이용하여 뇌척수막	을 제거하면 뇌가 노출된다.

4)	실험동물의 머리를 잡고 연수를 젖혀서 뇌신경을 노출시키고 후각망울에서 연수쪽	으로 뇌신경을 차례로 절단하여 손으로 뇌를 받는다.

3.	닭

3.1	부검 유의사항

1)	부검시술자는 항상 같은 순서로 부검을 하여 관찰하지 못한 장기가 없도록 한다.	2)	가능한 오염되지 않은 장기를 먼저 검사하여 미생물 등에 의해 병변이 생긴 장기	로부터 이러한 미생물이 정상적인 장기에 오염되어 오진단이 나오는 경우를 방지	하여야 한다.

3)	가능한 호흡기 장기를 먼저 검사하고 소화기장기를 나중에 검사하여 위나 장내용	물이 가검계 전체에 오염되지 않도록 주의하여야 한다.

3.2	일반적인 부검순서

1)	부검할 닭을 물에 담궈 깃털이나 먼지의 날림을 방지한다.

2)	부검가위로 악관절 측면을 따라 절개하며서 구강을 검사한 다음 계속 절개하여 흉	골이 시작되는 부위까지 횡단으로 절개하고 미주신경이나 흉선 등의 병변을 본다.

3)	식도와 모이주머니를 절개해서 내용물의 종류를 관찰한 다음 후두와 기관을 절개	해서 삼출물 등의 병변을 관찰한다.

4)	비강과 안화하동의 병변을 보기 위해서는 먼저 부리를 종단으로 자른 다음 비강	내 병변을 확인하고 멸균된 가위 한쪽면을 안와하동에 삽입시켜 눈 밑으로 절개하	면서 점막을 검사하고 필요시에는 세균배양을 시도한다.

5)	몸통의 내장의 병변을 관찰하기 위해 다리와 몸통을 연결해 주는 고관절에서 대퇴	골두를 노출시키고 복부를 덮고 있는 피부를 머리쪽으로 박피한다.

6)	흉골의 끝부분(용골, keel)에서 양쪽측면으로 늑연골연결부위를 따라 절개하고 오탁	돌기와 쇄골을 절단하여 가슴을 완전히 도려낸다. 그리고 펼쳐 놓은 상태 그대로	내장과 기낭을 관찰한다.

7)	이때 멸균된 부검기구를 이용해 병원성 세균이나 바이러스를 분리하기 위한 각종	시도를 수행한다. 그리고 근위 왼쪽 밑부분에 비장이 숨어 있으므로 이때 무균적으	로 비장을 노출시켜 필요한 샘플을 채취한다. 미생물의 배양을 하기전에 모든 불필	요한 조작이나 지체 등은 오염의 가능성을 높여주기 때문에 가급적 신중하고 신속	하게 처리하여야 하며 장관내에서의 미생물 분리는 오염 때문에 가장 마지막에 실	시한다.

8)	십이지장 사이에 있는 췌장을 검사한다. 그리고 선위와 식도가 연결되는 부위를 종	단하고 근위를 잡고 천천히 잡아당기면서 장간막 연결조직을 제거해가면서 전체	위장관을 분리해 낸다.

9)	간과 비장을 분리 제거하고 병변을 검사한다.

10)	생식기를 검사한다. 암컷인 경우, 난포와 난관을 제거하여 발달상황를 확인하고 난	관은 횡단하여 난관점막에 병변을 관찰한다.

11)	그런 다음 있는 상태 그대로 신장과 요도를 관찰한다. 좀더 세밀한 관찰이 필요할	때는 신장을 오려내어 검사한다.

12)	심장을	분리하여 검사하고, 폐를 몸통 중심선쪽으로 젖혀 관찰한다.

13)	위장관 검사를 선위, 근위 소장, 맹장, 결장 및 총배설강 순으로 실시하면서 병변이	나 기생충 등의 존재여부를 관찰한다.

14)	상완신경총과 좌골신경총을 검사한다. 상완신경총은 제1늑골의 앞쪽에 위치해 있	고, 좌골신경총은 신장을 제거하면 복벽에서 관찰되며 좌골신경은 2가닥의 내 전근	을 분리하면 볼 수 있다.

15)	대퇴골 및 경골의 성장판이나 골수 등을 관찰한다.

16)	뇌를 검사하기 위해 머리와 피부를 절개하고 강한 가위로 두개골을 오려낸 다음	뇌막을 제거하고 뇌를 분리한다.

3.3	개인보호구 준비사항 및 폐기처리

1)	부검을 하는 경우 장갑, 마스크 등의 개인 보호 장구를 착용하고, 혈액 등이 생물	안전작업대 또는 부검대를 오염시키지 않도록 호일, 세이퍼매트 등으로 깔고 생물	재해 봉투, 부검도구, 시료보관용기를 준비한다.

2)	오염을 최소화하는 방안으로 부검을 실시하고 사용한 부검도구는 1차 스프레이 소	독 후 부검용기 보관통에 넣는다. 부검도구 및 부검용기 보관통은 고압증기멸균하	여 2차 소독 후 재사용한다. 오염된 장갑 등 일회용품은 생물재해 봉투에 버린다.

4.	원숭이

4.1	부검 유의사항

1)	부검실, 부검복, 부검도구 등은 항상 청결하게 소독을 철저하게 하여야 한다.

2)	안락사를 시킬 경우에는 무통, 무창상, 무출혈, 체내의 무변화를 원칙으로 하여야	한다.

3)	장기 검사는 세밀히 관찰하여 병변에 대한 소견을 토대로 귀납적으로 결정한다. 따	라서 각 내부장기는 위치, 모양, 크기, 색깔, 경도 및 단면의 상태 등 6가지 검사원	칙을 준수하여 관찰한다.

4.2	개인보호구 준비사항 및 폐기처리

1)	부검을 하는 경우 장갑, 마스크 등의 개인 보호 장구를 착용하고, 혈액 등이 부검	대를 오염시키지 않도록 호일, 세이퍼매트 등으로 깔고 생물재해 봉투, 부검도구,	시료보관용기를 준비한다.

2)	오염을 최소화하는 방안으로 부검을 실시하고 사용한 부검도구는 1차 스프레이 소	독 후 부검용기 보관통에 넣는다. 부검도구 및 부검용기 보관통은 고압증기멸균하	여 2차 소독 후 재사용한다. 오염된 장갑 등 일회용품은 생물재해 봉투에 버린다.

5.	돼지

5.1	부검 유의사항

1)	부검실, 부검복, 부검도구 등은 항상 청결하게 소독을 철저하게 하여야 한다.

2)	안락사를 시킬 경우에는 무통, 무창상, 무출혈, 체내의 무변화를 원칙으로 하여야	한다.

3)	장기 검사는 세밀히 관찰하여 병변에 대한 소견을 토대로 귀납적으로 결정한다. 따	라서 각 내부장기는 위치, 모양, 크기, 색깔, 경도 및 단면의 상태 등 6가지 검사원	칙을 준수하여 관찰한다.

5.2	일반적인 부검순서

1)	실험동물 등이 바닥에 닫도록 하고, 좌우 전지부위는 하악부에서 액와부를 향해 좌	우 후지부위는 대퇴관절을 절개하여 대퇴골두가 노출되도록 탈구시켜 사체를 고정	시킨다.

2)	좌우 하악부 피부를 잡고 경부를 거쳐 액와부 위치까지 절개하여 하악부 및 인후	두부 림프절을 관찰한다. 악하 림프절은 돼지콜레라, 오제스키병, 돈단독, 돼지 생	식기 호흡기 증후군 (PRRS), 써코 바이러스 감염 및 급성 흉막폐렴 등의 전신성 패	혈증을 동반하는 질병에서는 발적과 종창 등의 뚜렷한 변화를 보인다.

3)	절개한 하악부 피부를 잡고 흉골병에서 좌우 늑골연을 따라 절단하여 흉강을 연다.	흉강에 수양성 내지 혈액성 내용물의 유무 및 융모상 막편이나 장기의 유착여부를	관찰한다.

4)	계속하여 복벽의 좌우 양쪽으로 절개선을 넣어 복강을 연다. 복강 내용물의 유무,	장기 위치의 이상 유무, 장기의 장막면에서 실 같은 내용물이나 융모상 막편의 유	무나 장기의 유착여부, 바이러스 등의 병원체를 검사하기 위하여 재료를 채취할 경	우에는 무균적으로 개복을 하여야 한다.

5)	흉강장기의 적출은 하악부를 절개하여 혀를 잡고 좌우 설골을 절단하여 편도선, 식	도, 기관, 폐장 및 심장을 함께 적출한다. 이때 위와 식도 경계부위를 결찰하여 위	내용물이 밖으로 유출되지 않도록 절단한다. 폐장의 흉막면에 실같은 융모상 막편	의 유무 및 늑막면이나 횡경막과의 유착엽를 관찰한다.

6)	흉강장기 검사는 구강, 혀 및 식도의 점막에 수포 및 궤양 여부, 편도선의 괴사소,	후두개 점막의 점상출혈 여부를 관찰한다. 폐장검사는 기관에서 기관지까지 절개하	여 기관점막, 삼출물 및 주위 림프절을 주의 깊게 관찰하고 폐는 경화소, 경결 또	는 무기폐의 경우는 단면을 검사한다.

7)	심장은 심낭을 절개하여 내용물 여부를 관찰한 후 심외막, 심관부 지방 및 좌우 심	실의 크기 등을 검사한 후 관상동맥구를 경계로 좌우 심실을 장축으로 절개한다.	심근, 심내막 및 판막상태를 검사한다.

8)	소장의 분리는 회장 말단부와 십이지장 기시부에서 이중 결찰을 하여 절단한 후에	회장 말단부에서 장간막연을 따라 절개한다. 이때 장간막 림프절과 장절간에 분포	된 혈관과 림프관의 상태를 관찰한다.

9)	대장은 직장말단부에서 결찰을 한 후 분리한다. 나선형의 결장은 중앙부의 중심곡	부를 잡고 분리하는 것이 용이하다.

10)	췌장과 비장을 적출한다.

11)	위와 간장을 함께 적출한다. 위는 대만부를 절개하여 내용물과 점막상태를 점검한	다. 특히 성돈의 경우는 식도구 점막부위를 자세히 검사한다. 간장은 색깔, 변연, 할	단면 및 장막면의 괴사소 등을 세심히 관찰한다. 또한 담낭을 절개하여 검사한다.

12)	부신, 신장 및 방광 등의 비뇨기계 장기를 적출한다. 신장은 장축으로 피질부에서	신우부를 향하여 넓은 할단면을 만든다. 피막은 핀셋이나 거즈를 이용하여 벗겨서	유착의 여부, 출혈반점 및 피막하와 할단면의 상태를 검사한다.

13)	자궁, 난소 및 고환 등의 생식기계 장기를 적출한다.

14)	뇌의 적출은 두부를 박피하고 두개골에 절개선을 넣어 두개골을 절단하고 경뇌막	을 가위로 절개한 다음 대뇌, 소뇌 및 뇌줄기를 함께 적출한다. 때때로 척추를 절	단하여 척수를 분리한다.

15)	코의 위축상태를 관찰하기 위하여 톱을 사용하여 제2전구치에서 상부 전구치와 비	갑개를 볼 수 있도록 하거나, 두부와 비중격을 장축으로 절개하여 관찰한다.

16)	사지의 관절을 절개하여 활액과 활막의 상태를 점검한다.

5.3	개인보호구 준비사항 및 폐기처리

1)	부검을 하는 경우 장갑, 마스크 등의 개인 보호 장구를 착용하고, 혈액 등이 부검	대를 오염시키지 않도록 호일, 세이퍼매트 등으로 깔고 생물재해 봉투, 부검도구,	시료보관용기를 준비한다.

2)	오염을 최소화하는 방안으로 부검을 실시하고 사용한 부검도구는 1차 스프레이 소	독 후 부검용기 보관통에 넣는다. 부검도구 및 부검용기 보관통은 고압증기멸균하	여 2차 소독 후 재사용한다. 오염된 장갑 등 일회용품은 생물재해 봉투에 버린다.

[부록   ] 실험동물의 빈사 사망 및 이상동물 취급방법

1.	동물상태

※“실험동물의 빈사 사망 및 이상동물 취급방법”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1.1	이상동물

빈사, 사망 및 기타 원인으로 인하여 더 이상 정상적인 조건에서 사육이 불가능하거나 타 동물과의 격리가 필요한 동물을 말한다.

1.2	빈사동물

허약하고 의식이 혼미한 상태의 동물을 말하며, 빈사동물의 경우 다음과 같은 기준으로 판단하여 시험연구책임자의 지시에 따라 격리 수용하거나 안락사를 실시한다.

1)	체중의 감소가 심하여 전회 측정치에 비해 30% 줄어든 경우

2)	복와 또는 횡와 상태가 관찰되고 혼수상태가 1 일 이상 지속된 동물

3)	자발운동의 감소, 심한 호흡저하, 반응성의 소실, 체온하강, 창백함 및 보행이 곤란	한 동물

4)	체공으로의 출혈, 체온상승, 설사, 기침 등의 증상이 2일 이상 지속되는 경우

5)	체표의 결절크기가 성장하여 체중의 1/2 정도가 되었다고 판단되는 동물

1.3	사망동물

1.4	기타

위에 속하지 않는 증상을 나타내는 동물로써, 시험연구책임자 및 실험동물관리자	의 판단에 따라 조치한다.

2.	빈사 사망 및 이상동물 발견

빈사 사망 및 이상동물을 발견한 시험연구종사자는 시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자에게 보고를 한다.

3.	빈사 사망 및 이상동물 처리

시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 빈사 사망 및 이상동물에 대한 처리사항을 결정한다.

1)	안락사

2)	부검

3)	사체폐기처리

4.	사육실의 청소 및 소독

시험연구책임자와 기관생물안전관리책임자는 빈사 사망 및 이상동물의 사육실에 대한 청소 및 소독에 대한 사항을 결정한다.

[부록   ] 실험동물의 시료채취방법

1.	병리조직 검사용 시료채취

※“실험동물의 시료채취방법”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

대부분의 경우 염색을 통한 조직검사가 필요하다. 좋은 조직을 얻기 위해서는 고정액의	종류나 고정방법이 중요하다. 또한 신장과 뇌는 자가융해가 빨리 진행되므로 죽은 직후	에 바로 조직을 채취하는 것이 좋다. 고정액은 보통 중성의 10% 포르말린을 많이 쓰고	있으며 고정액은 고정할 조직의 10배 이상이 필요하다. 부검을 수행하면서 필요한 조직	은 그때 그때 채취해야 하며 병변과 정상부위가 함께 포함되도록 채취해야 한다. 또한	고정액이 빨리 침투할 수 있도록 가능한 조직이나 장기는 작게 채취하여야 한다.

2.	미생물 검사용 시료채취

검사할 장기를 무균적으로 채취하여 무균사레나 가검채취용 용기에 잘 담아서 실험실에	서 검사를 실시하거나 검사를 의뢰하고자 하는 경우는 영하 20℃ 냉동고에 보관 후 검사	를 의뢰한다.

3.	혈액 및 혈청채취

혈액응고 방지제 (헤파린 등)가 들어있는 용기에 혈액을 2cc 정도 담은 후 8자로 흔들어	응고 방지제가 골고룰 퍼져서 혈액이 응고되지 않도록 한 후 건사하고 5.0 ℃ 냉장고에	보관한다. 혈청을 채취하기 위해서는 혈액응고 방지제가 없는 용기에 혈액 10cc 내외를	용기에 비스듬히 세워놓고 응고되기를 기다린 후 응고되면 37℃ 부란기에 넣어 잘 유리	되도록 한다.

4.	미량물질 분석용 시료채취

시료를 채취한 후 가급적 빨리 영하 20℃이하의 냉동고에 동결시켜야 조직내의 미량 성	분이 분해되지 않도록 유지시킬 수 있다. 이러한 시료를 다른 실험실로 분석의뢰할 때에	는 가급적 신서한 재료를 상기 방법으로 채취한 후 의뢰한다.

[부록   ] 실험동물의 이송 및 보정방법

1.	마우스

1.1	마우스의 이송

※“실험동물의 이송 및 보정방법”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

마우스의 케이지로부터 다른 케이지로 이송 등 단기간 이송은 주로 꼬리를 잡고 이송할	수 있다. 관찰 시에는 한 손으로 들고 관찰하는 경우도 있다. 어린 동물은 두 손바닥에	놓고 관찰하는 경우도 있다. 경우에 따라서는 동물은 핀셋을 이용하여 꼬리를 잡고 이송	하는 경우도 있으며, 어린 동물은 경부를 잡아 이송할 수도 있다.

1.1.1	마우스의 꼬리를 잡고 이동시키는 방법 :

마우스를 근거리로 이동시키기 위해 가장 널리 사용되는 방법으로 마우스 꼬리 원위부	(뒤쪽 2/3 부분)를 잡고 들어 올려 마우스를 이동시킨다. 마우스의 꼬리를 잡고 보정하는	시간이 길어지면 스트레스를 받아 발버둥을 치므로 짧은 시간 동안 보정할 때 주로 사용	한다.

1.1.2	목덜미를 잡아서 보정하는 방법 :

귀 뒷부분의 목덜미를 잡아서 보정하는 방법으로 근거리의 이동에 유용하며, 너무 세게	잡으면 호흡곤란이나 스트레스를 받게 되므로 주의해야 한다.

1.1.3	유리비커에 넣어서 이동하는 방법 :

마우스를 원거리로 이동시키기 위해 100 ㎖ 용량의 유리비커 안에 마우스가 들어가도록	하여 이동시킨다. 마우스가 스트레스를 덜 받는 방법으로 원거리 이동에 주로 사용할 수	있다.

1.1.4	양손바닥에 마우스를 올려 보정하는 방법 :

원거리 이동 시 유리비커를 이용할 수 없는 경우 양손바닥 위에 마우스를 올려놓은 후	이동할 수 있다. 손바닥 위에서 마우스가 뛰어내리는 경우가 많으므로 뛰어내리지 못하	게 꼬리를 손가락으로 잡아 주는 것이 좋다.

1.1.5	마취하여 이송하는 방법 :

취급 병원체와 실험에 따라 마우스를 이동시키기 위해 마취통 안에 마우스가 들어가도록	하고 마취를 시킨 후 이동시킨다.

1.2	실험동물 보정 유의사항

1.2.1	보정방법

마우스에 약물을 투여하거나 혈액을 채취하고자 할 때는 마우스가 움직이지 않도록 보정	을 잘 해야 한다. 먼저 케이지 뚜껑위에 마우스를 올려놓고 한 손으로 꼬리를 잡아당긴	다음 다른 손으로 목과 어깨 부위의 피부를 엄지손가락과 집게손가락을 이용하여 움켜잡	는다. 마우스를 움켜잡은 다음 꼬리를 마우스를 잡고 있는 쪽의 새끼손가락 사이에 끼운	다. 마우스 경부가 좌우로 움직이지 않도록 하는 것이 중요하다.

1.3	마취보정

취급 병원체와 실험에 따라 실험동물을 마취하여 보정한다.

2.	랫트

2.1	손을 이용한 랫트 보정

2.1.1	꼬리를 잡는 보정법 :

랫드를 근거리로 이동시키기 위해 가장 널리 사용되는 방법으로 랫드 꼬리 원위부(뒤쪽	2/3 부분)를 잡고 들어 올려 이동시킨다. 랫드의 꼬리를 잡고 보정하는 시간이 길어지면	꼬리의 피부가 벗겨지고 스트레스를 받아 발버둥을 치므로 케이지에서 케이지로의 이동	등 짧은 시간 동안 보정할 때 주로 사용한다.

2.1.2	몸통을 잡는 보정법 : 장시간 잡고 있어야 할 경우

1)	랫드의 꼬리를 잡고 랫드가 발로 잡을 수 있는 것이 존재하는 표면(케이지뚜껑) 위	에 놓는다.

2)	시험연구종사자는 꼬리를 잡고 있지 않은 손으로 랫드의 뒤쪽에서 접근하여 엄지	손가락과 집게손가락으로 경부주위를 감싼다.

3)	엄지손가락은 앞다리의 뒤쪽에서 전방으로 겨드랑이 사이에 넣어 손가락 끝이 아	래턱 하부에 오도록하여 물리거나 랫드의 머리가 움직이는 것을 방지한다.

4)	나머지 손가락은 편안하게 랫드의 몸통을 감싸는데, 검지와 장지 사이에 반대편 앞	다리가 오도록 하고 가능하면 랫드의 몸이 하부로 신장되게 하는 것이 좋다.

5)	랫드가 뒷다리를 이용하여 실험자의 손을 해치지 않도록 약지 사이에 꼬리를 감아	올린다. 이 방법의 단점은 실험자의 손이 랫드의 흉부를 압박하거나 기관지를 압박	하여 죽음을 초래하기도 하는데 약간의 주의를 기울이면 이러한 문제는 피할 수	있다. 이 방법에 의해서는 복강내 투여는 자유롭게 실시할 수 있지만 피하주사나	근육내주사는 약간의 제한이 있다.

6)	랫드가 강하게 저항하거나 복강주사, 근육주사 및 경구투여를 하고자 할 때는 보정	시 랫드의 등과 경부의 피부를 강하게 잡고, 특히 엄지와 검지로 귀주위의 피부를	강하게 잡아야 한다. 이 방법이 정확하게 실시되었다면 랫드의 움직임은 거의 없을	것이다. 하지만 많은 수의 랫드를 실험하거나 대형의 랫드를 다루기에는 손에 무리	를 줄 수 있다.

2.2	보정틀을 이용한 랫트 보정

2.2.1	작은 수건 이용 :

수건 주위를 겸자나 클립으로 감아주면 주머니 모양이 되는데 이를 랫드의 머리부분에	씌어주어 꼬리나 뒷다리 부분에 주사할 수 있다.

2.2.2	플라스틱 파이프나 투명플라스틱 보정틀 이용 :

플라스틱 파이프 내부 직경은 랫드의 크기를 감안하여 약 4~5.5cm가 적당하며 길이는	조절이 가능하도록 칸막이 식으로 하는 것이 좋다.

2.3	마취하여 이송 및 보정하는 방법

취급 병원체와 실험에 따라 랫트를 이동시키기 위해 마취통 안에 랫트가 들어가도록 하	고 마취를 시킨 후 이송 및 보정시킨다.

3.	닭

3.1	4주령 이하

4주령까지는 날개를 몸에 붙이고 등쪽에서 움켜잡는다.

3.2	5주령 이상

1)	오른손을 닭의 앞쪽에서 배쪽에 넣어 첫째손가락과 둘째손가락 사이, 둘째손가락과	셋째손가락 사이에 각각 다리 하나씩을 넣어 왼팔로 닭을 가슴에 품는다.

2)	오른손은 뒤쪽에서 뻗어 가볍게 닭의 등에 놓고 양 날개를 고정한다.

3)	여러 마리의 닭을 동시에 잡을 때는 오른손으로 닭의 한쪽 다리를 잡은 다음 왼손	으로 옮긴다. 왼손에 잡을 수 있을 만큼 잡고 오른손으로 닭을 받쳐서 운반한다.

4)	양 날개를 겹치도록 잡는 것은 날개뼈가 부러질 수 있으므로 피한다.

3.3	마취하여 이송 및 보정하는 방법

취급 병원체와 실험에 따라 닭을 이동시키기 위해, Isolator에 마취가스 등을 주입하여,	마취를 시킨 후 이송 및 보정시킨다.

4.	원숭이

4.1	손에 의한 보정법

1)	보조자는 원숭이의 두 팔을 배부에 돌려 꼬리와 함께 한손으로 잡고 다른 손으로	두 발을 잡는다.

2)	경구투여나 안검에의 투베르쿨린 주사 등이 경우는 한손으로 발을 잡는 대신 후경	부를 잡는다.

3)	채혈이나 정맥내주사를 하기 위한 보정은 보조자가 원숭이의 두 팔을 잡은 채 시	술대 위에 눕힌다.

4)	대퇴부에서 채혈할 때는 위를 보도록 눕히고, 발의 복재정맥에서 채혈할 때는 엎드	려 놓고 다른 보조자가 두 발을 잡는다.

5)	큰 동물의 경우는 안전을 위해 2명이 보정한다.

6)	장시간 보정하는 경우는 곧바로 교대할 수 있도록 미리 인원을 조정할 필요가 있	다.

4.2	기구에 의한 보정법

기구를 이용한 보정에는 원숭이 의자이외에도 전용 고정대 위에 눕혀 체인으로 묶는 방	법이나 V자형 수술대에 올려놓고 손발을 끈으로 묶는 방법이 있다. 어는 경우에도 보정	조작 중의 동물의 도망이나 사고를 일의키지 않도록 충분한 주의가 필요히다. 또는 체인	이나 끝을 사용하는 방법은 동물의 자유를 제약하므로 실험목적을 충분히 검토하여 최소	화할 필요가 있다.

1)	앉힌 상태로 원숭이의 목과 허리를 기구로 고정한다.

2)	손발과 머리는 자유롭게 움직일 수 있는 방식의 원숭이 의자가 주로 이용된다. 원	숭이 의자로 원숭이를 고정하는 경우는 동물의 크기를 고려한다.

3)	목을 고정할 때는 너무 조이거나 느슨하지 않도록 하고, 발을 얹는 부분의 높이도	동물의 크기를 고려하여 조정해야 한다.

4)	보정된 동물에게는 자유가 제한되어 있어 자신의 의지대로 움직일 수 없으므로 항	상 신경을 써주어야 한다. 특히 목과 엉덩이 같은 찰과상을 고려하여 보정 중에는	항상 감시하거나 정기적인 관찰이 필요하다.

4.3	마취하여 이송 및 보정하는 방법

취급 병원체와 실험에 따라 원숭이를 이동시키기 위해, 마취를 시킨 후 이송 및 보정시	킨다.

5.	돼지

5.1	돼지의 이송

돼지는 목걸이와 줄을 매서 이동할 수 있지만, 앞으로 끌어당기면 뒷걸음질을 친	다. 이동	할 때는 지시봉을 이용하여 전진할 때는 둔부를 뒤에서 가볍게 두드리고,	후진할 때는	코를 앞쪽으로 가볍게 두드린다. 우회전은 왼쪽 볼이나 어깨를 가볍게	두드리고, 좌회전	은 오른쪽 볼이나 어깨를 가볍게 두드리는 등의 지시를 한다.

5.2	코올가미

표본을 채취하거나 다름 임상적 처치를 위해 돼지를 보정하기위해 코올가미를 사용한다.

1)	왼쪽이나 오른쪽의 뒤쪽에서 앞쪽으로 돼지에게 접근한다.

2)	밧줄을 코에 걸고, 입안의 밧줄이 송곳니의 뒤편에 걸릴 때까지 뒤로 당긴다. 너무	앞쪽에 코가 위치해 있으면, 비연골에 걸리는 압력 때문에 통증이 유발될 수 있으	므로 주의한다.

3)	코 올가미를 조여 돼지 앞쪽으로 당긴다. 돼지들이 후진하면서 뒤로 당기고, 크게	비명을 지를 수 있다.

4)	꽉 죄어진 코 올가미가 지혈대로 작용할 수 있으므로 20분 간격 이상 코를 보정하	고 있으면 안된다.

5)	코 올가미를 풀기 위해서는 돼지를 앞쪽으로 걷게 하고, 코 올가미를 풀고, 주둥이	로부터 제거한다.

5.3	마취하여 이송 및 보정하는 방법

취급 병원체와 실험에 따라 돼지를 이동시키기 위해, 마취를 시킨 후 이송 및 보정시킨	다.

[부록   ] 실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법

1.	체중, 음수 및 사료섭취량의 측정 원칙

※“실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정방법”은 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1)	실험동물의 체중, 사료 및 음수 섭취량 측정은 동물실험기간 중 동물의 건강상태를	가늠하고 마취약이나 시험물질 등의 투여량을 결정하는데 중요한 요인이다.

2)	실험목적, 사용 동물 종 등을 고려하여 횟수/기간을 정하는 것을 원칙으로 하고 별	도의 사항은 해당 동물실험계획서에 따른다.

3)	체중은 실험동물을 저울에 올려놓은 후, 측정값이 안정화되었을 때의 수치를 체중	측정치로 한다.

4)	사료 및 음수 섭취량은 공급량을 측정하고, 익일의 잔량을 측정하여 그 차이값을	섭취량으로 한다.

5)	음수 및 사료 섭취량 측정 시에는 음수 사료 공급 후 24시간 후 매회 일정시각, 같	은 시험연구종사자가 측정하는 것을 원칙으로 하며, 사료섭취량(g)/일(daily)/head,	음수섭취량(㎖)/일(daily)/head 단위를 사용한다. 단 해당 동물실험계획서에 따라 주	간 음수 섭취량 및 cage별 섭취량을 구할 수도 있다.

6)	공급하는 사료 및 음수의 양은  실험동물의 종별 일일 섭취량을 고려하여 부족하	지 않게 충분히 공급하는 것을 원칙으로 한다.

7)	사료 및 음수섭취량은 계절, 온도, 습도, 스트레스 등 여러 요인이 상호 연관된 수	치가 나타남을 고려하여야 한다.

8)	취급하는 병원체의 종류와 실험에 따라서 실험동물을 마취하고, 실험동물의 종과	체중에 따라서 생물안전작업대 또는 시험계획서에서 정하는 방법으로 무게를 측정	한다.

2.	측정방법

1)	실험동물의 체중, 음수 및 사료섭취량 측정 시에는 개체번호와 cage에 부착된 개체	식별카드를 확인하고, 사료 및 음수 측정용용기인 빈 케이지를 저울에 올려 놓거나	시험계획서에서 정하는 방법을 시행한다.

2)	체중, 음수 및 사료섭취량 측정용 용기의 무게가 저울의 액정화면에 표시되면

"Tar	e"(또는 "Zero") 버튼을 눌러 액정화면에 “0.00g”이 표시되도록 영점을 맞춘다.

3)	실험동물, 음수 및 사료를 측정용용기에 넣거나 시험계획서에서 정하는 방법으로	무게를 측정한다.

[부록   ] 실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리

1.	경구투여 (Oral administration, per os, PO)

1.1	경구투여 시 고려사항

※“실험물질의 투여방법 및 투여 후 실험동물관리”는 예시용으로 해당기관의 상황에 따라서 적용범위가 설정되어야 한다.

1)	일반적인 경구투여 방법으로 투여물질을 사료나 음수에 시료를 혼합하여 투여하는	경우도 많으나, 이 경우에는 아래의 표와 같이 사료의 양을 고려하지 않으면 실험	동물이 포만감에 투여물질을 제대로 섭취하지 않을 수도 있다.

[실험동물의 체중대비 위의 용량]

체중 (g)	식도의 직경 (㎜)	위의 용량 (㎖)
30	1.0	1.0
50	1.0	2.0
100	1.5	3.0
200	2.0	4.0
300	2.0	5.0

2)	정확하게 일정량을 위장 안으로 투여하기 위해서는 일반적으로 존데(sonde)를 사용	한 경구 투여방법을 사용한다. 이때에도 자유 식이를 시키는 실험동물에서는 위가	항상 채워져 있음을 고려해야 한다.

3)	실험목적, 투여횟수, 투여량, 투여자의 숙련도등을 고려하여 맞는 재질의 존데와 주	사기를 선택한다. 보통 존데는 18~15 G, 길이 6~11 ㎝의 것을 사용한다.

4)	경구투여 시 후두덮개를 기준으로 기도와 식도의 해부학적인 구조와 위까지의 거	리 등을 미리 인지하고 있어야 한다.

5)	존데의 삽입 시 저항은 구강뒤쪽벽과 유문조임근에 의한 것으로 잘못된 존데 삽입	시 식도점막의 손상, 위 천공, 기도손상, 기도를 통한 폐의 오염성물질 유입으로 폐	렴, 호흡장애 등 여러 증상과 더불어 폐사까지 이르게 되는 것을 인지하고 있어야	한다.

6)	존데가 식도로 삽입되었는지를 판단하기 위해 주사기의 피스톤을 후진시켜 음압이	걸리는지 확인해야 한다. 이때, 주사기 내에 기포가 있을 경우 구분이 어려우므로	주의해야 한다.

7)	투여 중 심한 구역질을 하는 경우에는 존데가 폐로 들어갔을 가능성이 크고, 시험	물질이 코로 유출된 경우에는 즉시 존데를 빼낸 후 다시 수행해야 한다. 1 ㎖ 이상	이 폐로 들어가게 되면 경련을 일으키거나 즉시 폐사할 수 있다.

8)	구토 등으로 소량의 물질이 폐로 들어간 경우에는 바로 사망에는 이르지 않으나	너구리 울음소리나 쌕쌕거리는 소리가 나게 되며 부검 후 폐를 살펴보면 이물성	폐렴이 확인된다.

9)	경구투여 전 시험연구종사자는 충분히 숙련되게 연습을 해야 한다.

10)	잘못된 존데 삽입이라고 추측될 경우에는 무리하게 힘을 가하거나 시험물질을 투	여해선 안 된다. 이런 경우에는 반드시 동물을 케이지에 다시 넣어 안정을 취하게	한 후 재시도 해야 한다.

1.2	마우스와 랫드에서의 경구투여 방법

1)	준비물 : 1 ㎖ 일회용 주사기, 금속제 또는 플라스틱 존데(sonde)

2)	주사기의 주사침을 제거하고 존데를 끼워 넣는다.

3)	투여할 용액을 정해진 양만큼 존데를 끼운 주사기에 넣어 준비한다.

4)	왼손의 검지로 경추부분을 고정하고 엄지로 오른쪽 귀밑부분의 피부를 잡아당기면	서 손바닥으로 마우스 또는 랫드의 몸을 지탱해준다.

5)	보정하였을 때 몸이 길게 펴지고 머리가 고정되었을 때 투여가 가능하다.

6)	목 부분의 피부를 심하게 잡았을 경우 질식하여 사망하는 경우가 있으므로 주의한	다.

7)	오른쪽 손으로 용액을 넣은 주사기를 잡는다.

8)	존데의 선단을 보정한 마우스 또는 랫드의 구강 내에 넣는다. 존데가 동물의 이빨	에 물리지 않게 이빨의 오른쪽으로 존데를 넣는다.

9)	존데를 동물의 몸과 평행이 되도록 하면 식도에 들어가므로 그대로 존데를 밀어	넣는다. 이때 미끄러지듯이 들어가지 않고 걸림이 느껴진다면 기관으로 들어간 것	이므로 존데를 빼낸 후 다시 시작해야 한다.

10)	보통 입에서부터 위까지의 길이는 존데의 길이 2/3정도이므로 존데의 2/3이 들어	간다. 식도에 들어간 후에도 저항이 느껴지는 경우에는 존데를 빼어 다시 시작해야	한다.

11)	음압이 걸리는지 확인하고 주사기의 내관을 밀어 투여한다. 이때 용액이 입이나 코	에서 액체가 나오면 식도에 유착이 된 것이므로 존데를 빼고 물질을 탈지면으로	제거한 후 처음부터 다시 한다.

12)	투여가 끝난 후에는 존데를 신속하고 부드럽게 빼고 동물을 케이지에 넣는다.

1.3	토끼에서의 경구투여 방법

1)	준비물 : 3~10 ㎖ 일회용 주사기, 카테터

2)	토끼에서 정확한 경구투여를 위해서는 2명의 투여자가 필요하다. 보정자는 케이지	에서 토끼를 꺼내어 투여장소로 이동한다. 이때 동물이 불안함을 느끼지 않도록 주	의한다.

3)	토끼의 목덜미를 잡고 미끄러지지 않는 재질의 콜크나 표면이 고무로 된 작업대	위에 올려놓는다.

4)	보정자는 토끼의 앞발과 뒷발을 몸과 팔로 움직이지 않도록 보정한다.

5)	투여자는 주사기의 주사침을 제거하고 카테터를 주사기에 연결한다.

6)	투여자는 투여할 용액을 주사기에 정해진 양만큼 넣어 준비한다.

7)	카테터의 선단을 토끼의 구강으로 약 25-30㎝ 밀어 넣는다.

8)	음압이 걸리는지 확인하고 주사기의 내관을 밀어 투여한다. 이때 용액이 입이나 코	에서 액체가 나오면 식도에 유착이 된 것이므로 카테터를 빼고 물질을 탈지면으로	제거한 후 처음부터 다시 한다.

9)	투여가 끝난 후에는 카테터를 신속하고 부드럽게 빼고 동물을 케이지에 넣는다.

1.4	개에서의 경구투여 방법

1)	준비물 : 3~10 ㎖ 일회용 주사기, 카테터

2)	개에서 정확한 경구투여를 위해서는 2명의 투여자가 필요하다. 보정자는 케이지에	서 개를 꺼내어 투여장소로 이동한다. 이때 동물이 불안함을 느끼지 않도록 주의한	다.

3)	보정자는 개를 실험대 위에 놓고, 양쪽 앞다리를 머리의 앞으로 쭉 뻗은 채 웅크려	엎드리도록 보정한다.

4)	투여자는 주사기의 주사침을 제거하고 카테터를 주사기에 연결한다.

5)	투여자는 투여할 용액을 주사기에 정해진 양만큼 넣어 준비한다.

6)	투여자는 한 쪽 손으로 개의 입 양쪽의 피부를 들어 올려 양옆의 치아가 드러나도	록 한 후, 치아를 잡고 개의 입을 약 2 ㎝ 들어올린다. 반대쪽 손으로 카테터의 선	단을 잡고, 개의 혀 위에서 입안의 정가운데로 밀어 넣는다.

7)	조심스럽게 카테터를 개의 목안에 놓고 식도내로 밀어 넣는다. 카테터 삽입 시 저	항감이 있는 때는 기관으로 삽입된 경우이므로 카테터를 빼낸 후 다시 삽입해야	한다.

8)	카테터가 정확하게 삽입되면 주사기의 피스톤을 당겨 음압이 걸리는지 확인한 후	주사기 피스톤을 밀어 용액을 투여한다.

9)	투여 후 잠시 동안 구토 유ㆍ무 등의 동물 상태를 확인하고 케이지에 다시 넣는다.

2.	피하투여 (subcutaneous, S.C.)

2.1	피하투여 시 고려사항

1)	피하투여는 진피와 근육사이에 있는 피하조직에 시험물질을 주입하는 투여하는 방	법으로 주로 피하조직이 풍부한 등쪽 목덜미, 옆구리 등을 선택한다.

2)	피하부위투여는 시험물질이 장시간에 걸쳐 흡수되어 다른 투여경로보다 유리하다.

근육투여나 정맥투여보다 더 시험물질의 ph 및 화학적 자극성 등을 고려해야 하며	일반적으로 유기용매(oil)등은 피하염증을 쉽게 유발하므로 투여경로 선택 시 고려	해야 한다.

3)	피하부위는 모세혈관이 풍부하나 부위별로 차이가 있어 시험물질의 침착 등을 야	기할 수도 있다.

4)	피하투여는 다른 투여방법에 비해 상대적으로 고통이 적어 민감한 동물에게 투여	시 좋은 경로 이다.

5)	랫드의 경우 2 ㎖를 넘지 않도록 조절해야 하며, 피하투여 시 주사침 삽입 후 주사	침을 움직이지 않는 것이 원칙이나, 투여량이 1.5 ㎖ 이상의 대량인 경우 절반을	주입한 후 바늘의 방향을 약 45° 정도 바꾸어 나머지 약물을 위치가 다르게 주입	하거나, 아예 바늘을 뽑은 다음 절반을 다른 부위에 주사하여, 염증반응이 발생하	지 않도록 해야 한다.

6)	주사침을 피하에 넣은 후에 좌우로 움직이면 혈관 또는 다른 조직을 상하게 하므	로 주의해야한다.

7)	투여물질 용매가 수용성이 아닌 경우에는 주사침을 뽑을 때 쉽게 유출되기 때문에	작은 게이지의 주사침을 사용한다.

8)	피하투여 시 hyaluronidase를 같이 투여하면 흡수율을 증대 시킬 수 있다.

9)	투여 용량은 100 g 당 1 ㎖을 넘겨서는 안 된다.

2.2	피하투여 방법

1)	준비물: 1 ㎖ 또는 3 ㎖ 일회용주사기 1개, 70% 알코올 솜

2)	투여할 용액을 주사기에 정해진 양만큼 넣어 준비한다.

3)	케이지 뚜껑 위에 동물을 놓고 왼손의 엄지와 검지를 이용하여 양 뒤쪽 뒷목의 피	부를 삼각형의 텐트 모양으로 보정한다.

4)	알코올 솜으로 소독한 후 삼각형 중앙에 등과 평행하게 주사침을 꽂는다.

5)	보정된 왼손의 엄지와 검지 사이의 피하에 주사침이 꽂아 졌는지 감지한다.

6)	약물의 양은 마우스의 경우 0.3 ml, 랫드의 경우 2 ml를 넘지 않도록 조절해야 하	며, 1.5 ml 이상의 약물을 주입하고자 할 때는 절반을 주입한 후 바늘의 방향을 약	45° 정도 바꾸어 나머지 약물을 위치가 다르게 주입하거나, 아예 바늘을 뽑은 다음	절반을 다른 부위에 주사한다.

7)	주사기 내관을 당겨 혈액이 주사기내로 들어오지 않는 것을 확인한 후 용액을 투	여한다. 만약 주사기 내에 혈액이 들어오면 바늘을 빼서 다시 시작한다.

8)	투여한 용액이 새지 않게 왼손의 엄지와 검지로 주사침으로 난 피하조직의 구멍을	잡아주면서 주사기를 뺀다. 이때 투여 부위로 물질이 나오지 않도록 3~5초간 피하	조직을 잡아준다.

3.	복강투여 (Intraperitoneal, IP)

3.1	복강투여 시 고려사항

1)	복강의 면적이 넓고 혈류량이 많아 흡수가 용이하여 피하 또는 근육투여 보다 많	은 양의 시험물질을 투여 할 수 있다.

2)	복강투여의 흡수 속도는 정맥투여속도의 1/4정도이며 장기간 반복적인 투여 시에	는 복강 내 조직의 유착 등을 고려해야 한다.

3)	복강투여 시 시험물질의 대사는 주로 간을 통해 이루어진다.

4)	주사침에 의해 장은 표면이 미끄러워 쉽게 손상되지 않지만 다른 실질장기는 쉽게	관통되므로 하복부 복부중앙선(백선)에서 양옆으로 1-2 cm 정도의 부위를 선택한	다.

5)	주사침에 의한 내부 장기의 손상을 막아줌은 물론 주사액의 유출을 방지하기 위해	2단계 주사법을 사용한다. 2단계 주사법은 복벽의 피부를 주사침이 자입 할 때에는	복부 아래쪽에서 자입하고, 복막을 자입할 때에는 복부의 가운데 부분에서 자입하	여 투여 후 유출된 물질이 복벽피부의 피하에 머물도록 하는 방법이다.

6)	자극적인 시험물질을 투여 시에는 희석하여 투여해야 한다.

3.2	복강투여 방법

1)	준비물 : 1 ㎖ 또는 3 ㎖ 일회용주사기 1개, 70% 알코올 솜

2)	왼손의 엄지와 검지는 양 귀쪽 뒷목의 피부를 잡고 나머지 손가락은 몸통의 피부	를 잡아 보정한다.

3)	투여할 용액을 주사기에 정해진 양만큼 넣어 준비한다.

4)	알코올 솜을 이용해 복부를 소독한다.

5)	투여부위는 복부 정중선을 중심으로 대퇴부분에 있는 복부 좌우에 투여한다.

6)	주사침을 삽입할 때에는 먼저 주사침을 피부와 수평이 되도록 피하로 약 1 ㎝ 정	도 삽입한 후 주사기를 45°로 들어 복막을 관통시킨다. 이는 주사침에 의한 내부	장기의 손상을 막아줌은 물론 주사액이 투여부위에서 유출되는 것을 방지해 준다.

7)	주사기에 혈액이나 장관내용물이 빨리지 않는 것을 확인한 후 용액을 투여한다.

8)	투여 후 투여부위에서 출혈이 있는 지 확인하여 출혈이 있는 경우 70% 알코올을	묻힌 솜으로 투여부위를 눌러 확실하게 지혈한 후 동물을 케이지에 넣는다.

4.	근육투여 (Intramuculus, IM)

4.1	근육투여 시 고려사항

1)	마우스와 랫드에서는 투여부위로 대퇴사두근(대퇴직근, 외측광근. 내측광근, 중간광	근으로 구성)이 자주 이용된다. 이외에 대퇴부에 있는 대퇴이두근, 반건양근, 하퇴	부의 비복근, 둔부의 천둔근 등이 이용 가능하다.

2)	주사바늘은 27-30 G, 주사기는 0.5 ㎖ 정도가 적당하다. 정확한 근육내 주사를 하	기 위해서는 2명의 보정자와 투여자가 필요하다.

4.2	근육투여 방법

1)	준비물 : 1 ㎖ 일회용주사기, 70% 알코올 솜

2)	정확한 근육투여를 위해서는 2명의 시험연구종사자가 필요하다. 보정자는 케이지에	서 마우스 또는 랫드를 투여장소로 이동한다. 이때 동물이 불안함을 느끼지 않도록	주의한다.

3)	보정자가 왼손을 이용하여 복강투여와 같은 방법으로 보정한다.

4)	투여자는 투여할 용액을 주사기에 정해진 양만큼 넣어 준비한다.

5)	근육 내 주사는 뒷다리 대퇴부에 실시한다.

6)	투여자는 왼쪽과 오른쪽 중 원하는 대퇴부분의 동물의 발목을 잡아당겨 다리를 편	다.

7)	알코올 솜으로 소독한 후 주사침은 피부표면에 수직으로 약 1 ㎜정도 깊게 찌른다.

8)	피스톤을 잡아 당겨 바늘이 혈관 내에 들어있지 않은 것을 확인하고, 주사기의 피	스톤을 천천히 밀어서 용액을 투여한다.

9)	투여 후 투여부위를 약 5초간 문질러 투여액이 잘 퍼지도록 하여 투여액에 의한	염증반응이 발생하지 않도록 주의한다.

10)	투여부위의 출혈이 있는 지 확인하여 출혈이 있는 경우 70% 알코올을 묻힌 솜으	로 투여부위를 눌러 확실하게 지혈한 후 동물을 케이지에 넣는다.

5.	정맥투여 (Intravenous, I.V.)

5.1	설치류 정맥투여 시 고려사항

1)	일반적으로 정맥투여는 전신순화에 의해 시험물질의 대사, 분포가 조절되며 빠른	반응성을 보인다.

2)	경구투여나 다른 경로 투여 시 시험물질의 안정성이 떨어지는 시험물질의 투여에	용이하다.

3)	시험물질의 pH, 분자량 등의 성상, 투여량을 신중히 고려하여 투여해야 한다.

4)	약물의 투여가 1회성인지 아니면 연속적인지를 숙지하고 있어야 한다. 1회성인 경	우는 문제가 되지 않지만 장기간에 걸쳐 수차례 약물을 투여한다면 처음에는 심장	으로부터 먼 부위에서 실시하고 그 다음은 좀 더 가까운 부위에서 진행성으로 실	시하면 된다. 만약 처음 약물을 투여할 때 심장과 가장 가까운 부위에서 실시하여	정맥에 문제가 발생했다면 정맥혈은 심장을 향해 흐르기 때문에 문제가 되는 삽입	부위 이후의 혈관은 사용할 수 없게 된다.

5)	정맥투여 시 사용되는 주사기와 needle은 1회 사용을 원칙으로 하며 시험물질을	주사기에 채울 때는 공기방울이 생기지 않도록 해야 한다.

6)	투여가 끝난 후에는 항상 알콜솜을 이용하여 투여부위를 잘 소독하여 2차적인 감	염을 예방하여야 한다.

7)	계속적인 정맥투여로 정맥혈전이 생기는 경우에는 즉시 투여경로를 바꿔야 한다.

8)	꼬리정맥 투여 시 꼬리에는 4개의 혈관이 위치해 있는데 그 중 측면에 있는 2개의	정맥을 이용한다.

9)	정맥투여 시 동물이 움직임을 예방하기 위해 보정틀을 사용하는 경우도 있다.

10)	수컷에서는 음경정맥투여가 가능하며. 보통 마취를 시키고 투여하지만, 마취를 하	지 않고 보정자가 보정을 해서 투여도 가능하다.

11)	혀 양옆의 설하정맥도 정맥투여가 가능하며 투여 시 주사침이 정맥을 관통했거나	한쪽 면을 통과한 경우 다시 주사하기 위해서 needle을 빼지 말고 재차 정맥 내로	주사침이 들어갈 때까지 시도하는 것이 좋다. needle을 제거하면 일시적으로 혀가	부은 형상이 일어나 재차 시도하는 데에는 상당한 어려움이 따른다. 한 쪽 정맥이	손상당한 경우는 반대 측 정맥을 사용하도록 한다. 혈종의 형성은 드물며 설하정맥	의 주사는 매일 사용할 수 있으며 심지어는 하루에 여러 차례 주사할 수도 있다.

12)	마취와 외과적인 처치가 필요하지만 많은 양의 물질을 투여하고, 정맥 내관 삽입술	같은 용도 등으로 대퇴정맥투여 및 경정맥 투여도 선택가능하다.

5.2	설치류 꼬리정맥 투여방법

1)	준비물 : 1 ㎖ 일회용주사기, 70% 알코올 솜, 보정틀, 탈지면

2)	꼬리정맥주사는 상당히 어려운 기술이기 때문에 보정틀을 이용하여 보정한다.

3)	꼬리정맥을 확장(가장 중요)시키기 위해서 투여할 동물을 따뜻하게 해준다. (적외선	램프나 따뜻한 물을 사용할 수 있다.)

4)	투여할 용액을 주사기에 넣어 준비하고 꼬리를 알코올 솜으로 소독한다. 꼬리의 표	면은 꼬리끝 부분을 향해서 비닐상으로 되어 있기 때문에 이것을 역행하여 문지르	지 않도록 한다.

5)	투여부위는 꼬리 끝에서 1/3~1/4 위치에서 좌우의 한쪽의 정맥에 주사침을 넣어	주사기의 피스톤을 당겨 혈액이 들어오는 것을 확인한 후 용액을 투여한다.

6)	투여 후 주사기를 신속하게 빼고 탈지면을 이용하여 눌러 압박 지혈시킨다.

5.3	토끼 이정맥 투여 방법

1)	준비물 : 1~3 ㎖ 일회용주사기, 토끼 보정틀, 70% 알코올 솜

2)	케이지에서 토끼를 꺼내 보정틀에 보정한다.

3)	투여자는 투여할 용액을 주사기에 정해진 양만큼 넣어 준비한다.

4)	왼손으로 검지, 중지 손가락으로 귀를 수평으로 뻗쳐 가볍게 고정하고, 투여부위를	알코올 솜으로 소독한다.

5)	투여부위를 소독 한 후 주사침의 사면을 위로하여 혈관 내로 찌르고, 주사기를 뒤	로 당겨 혈관을 확인한 다음 주사침과 투여부위를 함께 고정한다.

6)	투여속도는 1~2 ㎖/min으로 하며, 동물이 움직일 때는 투여를 중지하고 주사침이	혈관에서 빠지지 않도록 주의한다.

7)	주사할 때 투여부위가 팽창되거나 저항감이 있을 때에는 즉시 주사침을 빼어 잠시	지혈을 시킨 후 다시 시작한다.

8)	투여 후 바로 주사침을 빼고 투여부위를 지혈시킨 후 동물을 보정틀에서 꺼낸다.

9)	동물의 상태를 잠시 관찰한 후 케이지에 넣는다.

5.4	개 요측피하정맥 투여 방법

1)	준비물 : 3 ㎖ 일회용주사기, 70% 알코올솜

2)	개 정맥 투여에는 보통 앞다리의 요측피하정맥을 이용하는데 요측피하정맥을 사용	할 수 없는 경우 뒷다리의 복재정맥 또는 경정맥을 이용한다. 복재정맥을 찾는 데	는 대퇴하부의 근육을 잡는다. 개를 옆으로 눕힐 때 뒷다리를 심장보다 높게 하면	복재정맥을 허혈상태로 만들기 때문에 주의해야 한다.

3)	개에게 정확한 투여를 위해서는 1명의 보정자와 1명의 투여자가 필요하다. 보정자	는 케이지에서 개를 꺼내어 투여장소로 이동한다. 이때 동물이 불안함을 느끼지 않	도록 주의한다.

4)	보정자는 개의 하체를 바닥에 앉히고 개의 등 뒤에서 몸체를 껴안은 상태로 왼손	또는 오른손으로 채혈할 전지 좌측 또는 우측 요측피정맥에 엄지중앙부로 혈관을	잡고 외측으로 약간 돌리며 주관절(팔꿈치관절)을 펴듯 쥐면 혈관이 노출된다.

5)	투여자는 오른손으로 개의 오른쪽 앞다리를 잡고 피모를 깎는다.

6)	난폭한 어린 개의 경우 부드러우면서도 단단하게 보정하지만 필요하면 주사침을	정맥에 찌르기 전에 보정하는 동안 목덜미를 부드럽게 흔들어 준다.

7)	투여자는 투여할 용액을 주사기에 정해진 양만큼 넣어 준비한다.

8)	한손으로 주사기를 들고 다른 한손으로 투여할 혈관 위치를 만져서 확인하고 엄지	손가락을 정맥 위에 댄다.

9)	투여부위에 70% 알코올솜으로 소독 후 주사기를 정맥 바로 위에 평행하게 갖다	댄다.

10)	주사침이 정확하게 정맥 내에 삽입되면 주사기 내관을 당겼을 때 혈액이 주사기에	맺힌다. 투여는 천천히 그리고 정확하게 행한다.

11)	투여가 끝나면 바늘을 빼고 투여부위의 출혈이 멈출 때까지 탈지면으로 지혈해준	다.

12)	만약 투여 중에 개가 움직여 바늘 끝이 정맥에서 벗어나면 투여물질은 피하에 투	여되어 정맥부근의 피부가 팽창한다. 이런 경우에는 즉시 바늘을 빼고 부위를 바꾸	어 투여한다.

6.	뇌내투여 (Intracerebral, IC)

6.1	투여방법

1)	준비물:

뇌고정장치(stereotaxic instrument), 뇌해부도(sterotaxic map), 해밀턴 주사	기(25-2	7G), 수술용 블레이드, 치과용 드릴, 피부봉합용 봉합실, 의료용 시멘트, 마취제

2)	투여하고자 하는 대상 실험동물을 Zoletil, Ketamin-Rumpun 혼합액 또는 Phentoba	rbital을 이용하여 마취시킨다.

3)	마취된 실험동물을 Stereotaxic instrument의 앞니, 양쪽 귀 부분을 보정하여 움직	이지 않도록 보정한다.

4)	투여부위의 피부를 의료용 블레이드로 절개하고, 피부를 두개골과 분리한다.

5)	치과용 드릴에 1㎜ 날을 장착하여 두개골에 투여공을 뚫는다. 뇌내투여는 주로 관	상봉합선, 시상봉합선 또는 가로봉합선에 대하여 이루어진다. 마우스의 경우 치과	용 드릴이 없는 경우 2단 주사침(주사침 끝에서부터 2~3㎜ 위치에 테잎을 감아서	주사침이 뇌내로 더 이상 들어가지 않도록 제작)을 제작하여 투여할 수 있다.

6)	투여할 물질이 충진된 해밀턴 주사기를 Stereotaxic instrument에 장착하고, 미리	정해진 전후, 좌우, 깊이를 맞추어 이동시키고 뇌내에 투여한다. 마우스의 제3뇌실	에 주사하고자 할 경우 bregma에서 2.4㎜ 깊이로 주사침을 삽입하여 약물을 주입	한다. 마우스의 뇌에는 약 5~10㎕의 약물 주입이 가능하다(랫드는 약 30㎕까지 가	능). 약물 주입 후, 약물이 뇌 바깥으로 역류할 수 있으므로, 약 5초 동안 기다린	후에 주사침을 제거한다. 뇌의 특정부위가 아닌 경우에는 두정골에서 뇌막하에 투	여할 수도 있다.

7)	뇌내 투여 후, 투여를 위해 뚫었던 투여공을 의료용 시멘트를 이용하여 잘 메워 준	다.

8)	두개골을 덮는 피부를 비흡수성 봉합실를 이용하여 단순결절봉합한다.

9)	피부를 봉합한 후, 마우스를 케이지로 원위치 시키고, 마취에서 의식이 회복될 때	까지 따뜻한 곳(37°C)에 두고, 일반증상을 관찰한다.

10)	마취로부터 의식을 회복하면, 동물이 들어있는 케이지를 원래 사육하던 사육실로	이동시켜 수용한다.

7.	돼지의 투여법

7.1	경구투여

보정자가 안아서 보정하고 시술자는 개구기로 입을 벌려 개구기의 중앙의 구멍으로 위	존데를 삽입한다. 체중 20kg 이상의 돼지는 보정대에 앙와자세로 보정하고 개구기를 입	에 끼워, 위 존데를 삽입한다.

7.2	정맥내주사

1)	정맥용 주사침을 이용한다. 약제투여에는 이개정맥 또는 복측 정맥을 이용한다. 이	개정맥은 이외 측에 있고 익상침(23~24G)을 넣어 투여한다. 복측 정맥은 유두열에	약간 떨어져 평행하게 있는 혈관으로 익상침(21~22G)을	이용한다.

2)	다량(5~10㎖)에는 경정맥 또는 쇄골하정맥을 이용한다.

3)	모두 표면에서 보이지 않지만, 경정맥의 위치라 생각되는 부위를 특정하여 엄지손	가락으로 주사부위 근처를 눌러 혈관을 노장시켜 주사침(18~20G)을 45도 각도롤	넣는다. 그 후 혈관에 달하면 수평으로 하여 혈관에 삽입한다.

7.3	피하주사

귀 뒤의 움푹한 곳이나 견배부에서 하면 비교적 용이하다. 길들여진 돼지가 있으면 특별	히 보정을 필요하지 않다. 주사에 익숙하지 않은 시술자가 하는 경우는 익상침을 이용하	면 편리하다.

7.4	근육내주사

돼지의 피부는 두껍고 단단하기 때문에 외측 대둔근, 배경근 등의 근육에 수직으로 한	번에 찔러 넣는다. 주사통의 내통을 당겨 침 끝이 혈관 내에 들어 있지 않은 것을 확인	한 뒤 투여한다.

7.5	복강내투여법

좌우의 장골 골단에서 약간 측복부 쪽으로 치우친 후배복부의 움푹한 곳에 주사한다. 그	후 주사기의 내관을 약간 당겨 방광에 들어 있지 않은 것을 확인한다.

8.	원숭이의 투여법

8.1	경구투여법

마취하거나 원숭이 의자 등에 원숭이를 고정한다. 투여에는 고무제로 만든 카테터를 이	용한다. 투여순서는 다음과 같다.

1)	원숭이의 뒷머리를 잡고 입을 상향으로 하여 보정한다. 두 빰을 강하게 눌러 입을	크게 벌리고 개용 목걸이를 입에 물린다.

2)	그런 다음, 카테터를 목 깊숙이 천천히 삽입한다. 15~20cm 넣고 나서 카테터에 빈	주사통을 끼워 흡인한다. 강하게 흡인해도 공기가 들어오지 않는 것을 확인한 뒤,	카테터에 약액 등이 들어 있는 주사통을 끼워 천천히 주입한다. 카테터 내에 남아	있는 주사액 등을 물이나 공기로 밀어 넣은 뒤, 카테터를 조심스럽게 뺀다.

3)	캡슐이나 정제를 투여하는 경우는 긴 겸자나 전용기구를 이용하여 목에 넣고 물과	함께 삼키도록 한다.

4)	경구투여시의 주의사항 :

경구투여 시 기관에 공기가 흡인될 가능성이 있으므로 다시 카테터를 삽입한 뒤,	흡인해 본다. 투여 후 카테터를 뺄 때, 세게 당기면 구토가 유발되어 투여한 주사	액 등이 나오거나 카테터에 붙은 위액 등의 부착물이 날아 갈 우려가 있으므로 주	의해야 한다.

8.2	정맥내투여법

1)	노측피부정맥(cephalic V.), 하지의 복재정맥(saphenous V.) 또는 대퇴정맥에서 한	다.

2)	정맥 내에 주사침이 확실히 들어 있는 것을 확인하기 위해 주사통의 내통을 당겨	혈액의 역류를 확인한 뒤, 천천히 주입한다.

8.3	복강내투여법

원숭이를 배가 위쪽으로 가게 보정하고 하복부를 소독한 뒤, 정중앙선 및 표층혈관을 피	하여 주사침을 천천히 찔러 넣는다.

8.4	피하투여법

통상, 등쪽의 피하를 들어올려 침을 삽입하고 천천히 약액 등을 주입한다.

8.5	피내투여법

투베르쿨린반응검사를 할 때 피내투여법을 이용하여, 상안검에 한다. 투여 시에는 침 끝	에서 상안검의 피부를 뜨는 것처럼 투여한다.

8.6	근육내투여

대퇴부, 둔부 또는 상완부 근육 내에 한다. 한 부위의 주입량은 1㎖정도로 한다.

8.7	경비투여법

경구투여와 같은 방법으로 코에서 투여하는 방법을 이용할 수 있다. 투여에 사용하는 튜	브는 영양 카테터를 사용한다.

9.	투여 후 실험동물관리

9.1	임상증상의 관찰

1)	투여자는 실험동물에 투여한 후, 발생하는 임상증상을 면밀히 관찰한 후, 기록해야	한다.

2)	투여부위의 변화 :

투여한 후 투여물질의 외부누출 여부, 투여부위의 발적, 부어오름, 동통의 발생 등	을 투여부위를 촉진해가면서 관찰해야 한다.

3)	행동의 변화 :

물질을 투여한 후 통증에 의해 나타날 수 있는 반응, 즉 웅크림, 생기소실, 자발운	동량의 증가 또는 감소여부를 관찰해야 한다.

9.2	이상동물 발생 시 처리

1)	이상증상을 나타내는 동물이 발생했을 때에는 이상증상을 기록한 후, 1주일간 면밀	히 관찰하여 증상의 회복여부를 판단해야 한다.

2)	경미한 임상증상을 나타낸 후, 회복되는 경우에는 동물실험 종료시까지 동물실험을	진행한다.

3)	투여 후 1주일 이상 이상증상이 회복되지 않거나, 투여 후 즉각적으로 쇼크 또는	경련 등의 임상증상이 나타나거나, 극심한 통증으로 심한 웅크림 등의 자세가 나타	날 경우, 실험동물의 윤리적 사용을 위하여 동물실험의 종료시점으로 설정하고 안	락사 한다.